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槐花米中蘆丁的提取與鑒定背景知識(shí)1.來(lái)源蘆?。≧utin)又稱蕓香苷,廣泛存在于植物界中,現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)含蘆丁的植物至少在70種以上,如煙葉、槐花、蕎麥和蒲公英中均含有。尤以槐花米(為植物SophorajaponicaL的未開(kāi)放的花蕾)和蕎麥中含量最高,可作為大量提取蘆丁的原料。(含量為12%—16%.)2.結(jié)構(gòu)組成蘆丁是由槲皮素(Quercetin)3位上的羥基與蕓香糖(Rutinose)〔葡萄糖(Glucose)與鼠李糖(Rhamnose)組成的雙糖〕脫水形成的苷。分子式:C27H30O16結(jié)構(gòu)組成蘆丁分子中具有較多酚羥基,顯弱酸性,易溶于堿液,酸化后又可析出,因此,本實(shí)驗(yàn)采用堿提取酸沉淀法提取蘆丁。斛皮素蕓香糖4.藥理作用蘆丁具有維生素P樣作用。能維持血管的正常通透性,減低血管的脆性,縮短流血時(shí)間,可作為高血壓病的輔助治療劑。亦可用于防治因缺乏蘆丁所致的其他出血癥。一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^(guò)蘆丁的提取與精制掌握堿-酸法提取黃酮類化合物的原理及操作。掌握黃酮類成分的主要性質(zhì)及黃酮苷,苷元和糖部分的鑒定方法。
二、實(shí)驗(yàn)要求獨(dú)立完成實(shí)驗(yàn),從槐花米中提取出蘆丁并進(jìn)行鑒定。三、實(shí)驗(yàn)原理蘆丁屬黃酮類化合物,分子中有較多酚羥基,具弱酸性,易溶于熱堿中,酸化后又析出,因此可以用堿溶酸沉的方法提取蘆丁,又利用蘆丁在冷水和熱水中溶解度相差較大的特性進(jìn)行重結(jié)晶精制。五、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容流程圖:蘆丁的提取與分離流程圖操作步驟:
稱取20g槐花米于研缽中研成粉狀物,置于500mL燒杯中,加水300ml,在攪拌下加入石灰乳(150ml水和1gCa(OH)2),調(diào)節(jié)ph8-9,加熱至沸,并不斷攪拌,煮沸30分鐘后,趁熱抽濾。然后用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值為4-5。放置1-2h,使沉淀完全,抽濾,沉淀用水洗滌2-3次,得到蘆丁的粗產(chǎn)物。然后將粗產(chǎn)物(連同抽濾用濾紙)放置在適宜大小的培養(yǎng)皿上,于70℃條件下干燥30-40min,最后收集干燥產(chǎn)物,進(jìn)行下一步操作。六、實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵及注意事項(xiàng)1.加入飽和石灰水溶液既可達(dá)到堿溶液提取蘆丁的目的,又可除去槐花米中大量多糖粘液質(zhì),更容易過(guò)濾。也可直接加入150mL水和1g氫氧化鈣粉末,而不必配成飽和溶液。2.pH值過(guò)低會(huì)使蘆丁形成烊鹽而增加了水溶性,降低收率。
B.Molish反應(yīng):糖在濃硫酸或濃鹽酸的作用下脫水形成糠醛及其衍生物,再與α-萘酚作用形成紫紅色復(fù)合物,在糖液和濃硫酸的液面間形成紫環(huán),因此又稱紫環(huán)反應(yīng)。
Molish反應(yīng)可以鑒定單糖的存在。取上述溶液1-2ml,先加入幾滴濃鹽酸(硫酸),再加入等體積的10%α-萘酚乙醇溶液,注意觀察兩液面產(chǎn)生的顏色變化(紫紅色)。
八、思考題1、在一開(kāi)始用酸調(diào)節(jié)pH值時(shí),如果加入的鹽酸過(guò)量,pH值
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