（優(yōu)選）巴比妥及苯并二氮雜卓類鎮(zhèn)靜催眠藥物的分析現(xiàn)在是1頁\一共有60頁\編輯于星期五一、巴比妥類藥物的結(jié)構(gòu)分析基本結(jié)構(gòu)：1.環(huán)狀丙二酰脲類2.R1=R2=H時(shí)，為巴比妥酸。3.多為巴比妥酸的5,5-二取代物，少數(shù)為1,5,5-三取代物或C2為硫取代。第一節(jié)巴比妥類藥物的分析現(xiàn)在是2頁\一共有60頁\編輯于星期五代表藥物：5,5-二取代R1R2巴比妥苯巴比妥戊巴比妥

異戊巴比妥司可巴比妥(速可眠)

現(xiàn)在是3頁\一共有60頁\編輯于星期五1,5,5-三取代甲苯巴比妥現(xiàn)在是4頁\一共有60頁\編輯于星期五己瑣巴比妥

1,5,5-三取代現(xiàn)在是5頁\一共有60頁\編輯于星期五硫噴妥鈉C2上S取代現(xiàn)在是6頁\一共有60頁\編輯于星期五二、理化性質(zhì)白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末；具有一定的熔點(diǎn)；微溶或極微溶于水，易溶于有機(jī)溶劑，鈉鹽則易溶于水，難溶于有機(jī)溶劑；六元環(huán)結(jié)構(gòu)比較穩(wěn)定，一般不開環(huán)，與堿液共沸則水解開環(huán)，產(chǎn)生氨氣?，F(xiàn)在是7頁\一共有60頁\編輯于星期五（一）弱酸性現(xiàn)在是8頁\一共有60頁\編輯于星期五二級(jí)電離：++#19.（五）紫外吸收光譜現(xiàn)在是9頁\一共有60頁\編輯于星期五（二）水解反應(yīng)紅色石蕊試紙變藍(lán)應(yīng)用：鑒別巴比妥類藥物

JP（15）采用此反應(yīng)鑒別異戊巴比妥和巴比妥1、巴比妥類藥物2、巴比妥類藥物鈉鹽+H2O現(xiàn)在是10頁\一共有60頁\編輯于星期五（三）與重金屬離子的反應(yīng)1.與銀鹽的反應(yīng)白色沉淀應(yīng)用：鑒別、含量測定（Ch.P）巴比妥及苯并二氮雜卓類鎮(zhèn)靜催眠藥物的分析.ppt#23.幻燈片23現(xiàn)在是11頁\一共有60頁\編輯于星期五2.與銅鹽的反應(yīng)(Zwikker試驗(yàn))

現(xiàn)在是12頁\一共有60頁\編輯于星期五注意：a.巴比妥類藥物呈紫堇色或生成紫色沉淀－－鑒別試驗(yàn)（Ch.P）

b.含S巴比妥類藥物顯綠色硫噴妥—特征反應(yīng)

d.吡啶作用：1)吸收H+使巴比妥類易解離2)孤對電子生成配位體

c.可區(qū)別巴比妥類與硫代巴比妥類藥物；5，5-二取代基不同的巴比妥類藥物生成的化合物在氯仿中的溶解度不同，可用于本類藥物的鑒別。現(xiàn)在是13頁\一共有60頁\編輯于星期五3.與鈷鹽反應(yīng)(Parri試驗(yàn))

紫堇色應(yīng)用：鑒別、含量測定現(xiàn)在是14頁\一共有60頁\編輯于星期五注意：反應(yīng)在無水條件下；溶劑：無水乙(甲)醇

b.

鈷鹽：醋酸鈷、硝酸鈷或氧化鈷

c.堿：以有機(jī)堿為好——異丙胺

現(xiàn)在是15頁\一共有60頁\編輯于星期五4.與汞鹽反應(yīng)現(xiàn)在是16頁\一共有60頁\編輯于星期五（四）與香草醛反應(yīng)－－－丙二酰脲基團(tuán)中的H巴比妥類＋香草醛縮和棕紅色化合物濃H2SO4現(xiàn)在是17頁\一共有60頁\編輯于星期五（五）紫外吸收光譜#10.幻燈片10現(xiàn)在是18頁\一共有60頁\編輯于星期五現(xiàn)在是19頁\一共有60頁\編輯于星期五（六）色譜行為1.TLC2.HPLC（七）顯微結(jié)晶－－－－生物樣品中微量巴比妥類藥物的檢驗(yàn)巴比妥：長方形苯巴比妥：球形花瓣?duì)畎捅韧足~吡啶：十字形紫色苯巴比妥銅吡啶：淺紫色細(xì)小不規(guī)則或類菱形現(xiàn)在是20頁\一共有60頁\編輯于星期五三、鑒別試驗(yàn)?zāi)负说姆磻?yīng)－－－本類藥物共有的反應(yīng)取代基的反應(yīng)－－－類內(nèi)區(qū)別現(xiàn)在是21頁\一共有60頁\編輯于星期五（一）丙二酰脲類鑒別反應(yīng)－－母核反應(yīng)（ChP）1.銀鹽反應(yīng)

取供試品約0.1g，加碳酸鈉試液1ml與水10ml，振搖2min，濾過，濾液中逐滴加入硝酸銀試液，即生成白色沉淀，振搖，沉淀即溶解；繼續(xù)滴加過量的硝酸銀試液，沉淀不再溶解。

取供試品約50mg，加吡啶溶液（110）5ml，溶解后加銅吡啶試液1ml，即顯紫色或生成紫色沉淀。2.銅鹽反應(yīng)巴比妥及苯并二氮雜卓類鎮(zhèn)靜催眠藥物的分析.ppt#12.幻燈片12現(xiàn)在是22頁\一共有60頁\編輯于星期五（二）特殊取代基或元素的鑒別反應(yīng)1.芳環(huán)反應(yīng)－－－苯巴比妥及鈉鹽（1）硝化反應(yīng)黃色（2）硫酸－亞硝酸鈉反應(yīng)（苯巴比妥及鈉鹽Ch.P）苯巴比妥＋H2SO4-NaNO2橙黃色

橙紅色現(xiàn)在是23頁\一共有60頁\編輯于星期五（3）與甲醛－硫酸反應(yīng)（苯巴比妥及鈉鹽ChP）2.不飽和取代基的鑒別反應(yīng)－－司可巴比妥鈉加成加成氧化現(xiàn)在是24頁\一共有60頁\編輯于星期五3.硫元素的反應(yīng)－－硫噴妥鈉（Ch.P）硫噴妥鈉應(yīng)用：區(qū)別硫代巴比妥與巴比妥類（四）IR巴比妥及苯并二氮雜卓類鎮(zhèn)靜催眠藥物的分析.ppt#43.幻燈片43（三）測定熔點(diǎn)現(xiàn)在是25頁\一共有60頁\編輯于星期五四、特殊雜質(zhì)檢查（一）苯巴比妥的特殊雜質(zhì)檢查1.酸度－－－副產(chǎn)物苯基丙二酰脲2.溶液澄清度－－－乙醇不溶性雜質(zhì)3.中性或堿性物質(zhì)－－－副產(chǎn)物、分解產(chǎn)物4.有關(guān)物質(zhì)---HPLC主成分自身對照（二）司可巴比妥鈉的特殊雜質(zhì)檢查1.溶液澄清度－－－水不溶性雜質(zhì)2.中性或堿性物質(zhì)－－－副產(chǎn)物、分解產(chǎn)物現(xiàn)在是26頁\一共有60頁\編輯于星期五五、含量測定（一）銀量法1.原理白色現(xiàn)在是27頁\一共有60頁\編輯于星期五2.測定方法

取供試品用甲醇溶解，加入碳酸鈉，照電位法，用硝酸銀滴定液滴定。3.終點(diǎn)指示

稍過量的Ag+與巴比妥類藥物生成白色渾濁銀－玻璃電極電位法

現(xiàn)在是28頁\一共有60頁\編輯于星期五4.舉例異戊巴比妥的測定方法（ChP）取本品約0.2g，精密稱定，加甲醇40ml使溶解，再加新鮮配制的3%無水碳酸鈉溶液15ml，照電位滴定法，用硝酸銀滴定液（0.1mol/L）滴定，即得。每1ml硝酸銀滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于22.63mg的C11H18N2O3?，F(xiàn)在是29頁\一共有60頁\編輯于星期五5.討論（1）化學(xué)計(jì)量關(guān)系：1:1（2）優(yōu)點(diǎn):操作簡便、專屬性強(qiáng)（3）缺點(diǎn):a.以渾濁指示終點(diǎn)難于觀察

b.溫度影響大

c.解決方法:以甲醇為溶劑電位法指示終點(diǎn)（4）Na2CO3的作用現(xiàn)在是30頁\一共有60頁\編輯于星期五(二)溴量法1.原理＋Br2

(定量過量)1C12H17N2NaO3～1Br2現(xiàn)在是31頁\一共有60頁\編輯于星期五

司可巴比妥鈉（ChP）取本品約0.1g，精密稱定，置250ml碘瓶中，加水l0ml，振搖使溶解，精密加溴滴定液(0.05mol/L)25m1，再加鹽酸5m1，立即密塞并振搖1min，在暗處靜置15min后，注意微開瓶塞，加碘化鉀試液l0ml，立即密塞，搖勻后用硫代硫酸鈉滴定液(0.1mol/L)滴定，至近終點(diǎn)時(shí)，加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每lml溴滴定液(0.05mol/L)相當(dāng)于13.01mg的C12H17N2NaO3。2.測定方法現(xiàn)在是32頁\一共有60頁\編輯于星期五3.討論

（1）化學(xué)計(jì)量關(guān)系：1:1（2）密塞目的（3）為何在近終點(diǎn)時(shí)加指示劑（4）空白試驗(yàn)校正現(xiàn)在是33頁\一共有60頁\編輯于星期五（三）酸堿滴定法1.原理++2.測定方法（1）水－乙醇混合溶劑滴定劑：氫氧化鈉指示劑：麝香草酚酞終點(diǎn)顏色：淡藍(lán)色電位法指示終點(diǎn)現(xiàn)在是34頁\一共有60頁\編輯于星期五（2）膠束水溶液－－－表面活性劑使巴比妥類藥物的酸性增強(qiáng)滴定劑：氫氧化鈉溶劑：有機(jī)表面活性劑：溴化十六烷基三甲基芐銨指示劑：麝香草酚酞電位法指示終點(diǎn)（3）非水溶液－－－巴比妥類藥物的酸性增強(qiáng)有機(jī)溶劑：二甲基甲酰銨、甲醇、丙酮等滴定劑：甲醇鉀（鈉）、氫氧化四丁基銨指示劑：麝香草酚藍(lán)電位法指示終點(diǎn)現(xiàn)在是35頁\一共有60頁\編輯于星期五（四）紫外分光光度法1.原理巴比妥類藥物在堿性介質(zhì)中電離為具有紫外吸收的結(jié)構(gòu)2.特點(diǎn)（1）專屬性強(qiáng)，靈敏度高（2）用于巴比妥類藥物原料及制劑的含量測定（3）體內(nèi)藥物的檢測現(xiàn)在是36頁\一共有60頁\編輯于星期五3.測定方法（1）直接紫外分光光度法a.根據(jù)樣品溶液的pH值，選用對應(yīng)的max

b.采用對照品法，計(jì)算藥物含量現(xiàn)在是37頁\一共有60頁\編輯于星期五

取裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，混合均勻，精密稱取適量（約相當(dāng)于硫噴妥鈉0.25g），置500ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，量取此溶液用0.4%氫氧化鈉溶液定量稀釋制成每1ml中約含5μg的溶液；另取硫噴妥對照品，加0.4%氫氧化鈉溶液溶解并定量稀釋制成每1ml中約含5μg的溶液。照分光光度法，在304nm波長處測定吸收度，根據(jù)每支的平均裝量計(jì)算。每1mg硫噴妥相當(dāng)于1.091mg的C11H17N2NaS。c.舉例：現(xiàn)在是38頁\一共有60頁\編輯于星期五(2)提取分離后紫外分光光度法－－－苯巴比妥鈉【USP(24)】可消除干擾物質(zhì)對測定的影響現(xiàn)在是39頁\一共有60頁\編輯于星期五（五）HPLCRP-HPLCHPLC測定苯巴比妥片的含量（ChP）現(xiàn)在是40頁\一共有60頁\編輯于星期五六、體內(nèi)藥物分析RP-HPLC同時(shí)測定血清中巴比妥類的濃度GC-MS同時(shí)測定人體液中巴比妥藥物HPCE法測定體內(nèi)尿液中巴比妥和苯巴比妥兩種藥物L(fēng)C-MS聯(lián)用技術(shù)監(jiān)測巴比妥類藥物現(xiàn)在是41頁\一共有60頁\編輯于星期五巴比妥及苯并二氮雜卓類鎮(zhèn)靜催眠藥物的分析.ppt#26.幻燈片26苯巴比妥現(xiàn)在是42頁\一共有60頁\編輯于星期五

第二節(jié)苯并二氮卓類藥物的分析一、基本結(jié)構(gòu)與主要化學(xué)性質(zhì)1.結(jié)構(gòu)與典型藥物：苯并二氮雜卓類藥物為含氮雜原子、六元和七元環(huán)雙并合而成的有機(jī)化合物。其中1,4-苯并二氮雜卓類藥物是目前臨床應(yīng)用最廣泛的鎮(zhèn)靜劑?，F(xiàn)在是43頁\一共有60頁\編輯于星期五

地西泮（1959年合成）氯氮卓（1955年合成）現(xiàn)在是44頁\一共有60頁\編輯于星期五奧沙西泮現(xiàn)在是45頁\一共有60頁\編輯于星期五2.主要化學(xué)性質(zhì)（1）二氮雜卓環(huán)為七元環(huán)，環(huán)上氮原子具有堿性，苯基的取代使堿性降低，可進(jìn)行非水滴定法測定；（2）環(huán)一般比較穩(wěn)定，可在強(qiáng)酸性下水解，形成相應(yīng)的二苯甲酮衍生物，可用于鑒別和比色測定。（地西泮水解生成芳仲胺基和甘氨酸）（3）UV吸收，用于含量測定；（4）本品多為游離堿，不溶于水，而溶于甲醇、乙醇和氯仿中?，F(xiàn)在是46頁\一共有60頁\編輯于星期五二、鑒別試驗(yàn)（一）化學(xué)鑒別1.沉淀反應(yīng)－生物堿性質(zhì)

a.氯氮卓和阿普唑侖的鹽酸液(9→1000)，遇碘化鉍鉀試液，生成橙紅色沉淀。b.鹽酸氟西泮的水溶液和氯硝西泮的稀鹽酸溶液遇碘化鉍鉀試液，也生成橙紅色沉淀。c.阿普唑侖的鹽酸溶液(9→1000)，遇硅鎢酸試液，生成白色沉淀?，F(xiàn)在是47頁\一共有60頁\編輯于星期五2.硫酸－熒光反應(yīng)苯并二氯雜卓類藥物溶于硫酸后，在紫外光(365nm)下，呈現(xiàn)不同顏色的熒光。

地西泮

黃綠色黃色氯氮卓黃色紫色艾司唑侖+H2SO4亮綠色+稀硫酸天藍(lán)色硝西泮淡藍(lán)色藍(lán)綠色奧沙西泮

淡黃綠色現(xiàn)在是48頁\一共有60頁\編輯于星期五3.水解后呈芳伯胺反應(yīng)氯氮卓、艾司唑侖和奧沙西泮的鹽酸溶液(1→2)，緩緩加熱煮沸，放冷，加亞硝酸鈉和堿性β-萘酚試液，生成橙紅色沉淀，而后者放置色漸變暗?，F(xiàn)在是49頁\一共有60頁\編輯于星期五4.分解產(chǎn)物的反應(yīng)有機(jī)氯化合物，用氧瓶燃燒法破壞，生成氯化氫，以5％氫氧化鈉溶液吸收，加硝酸酸化，顯氯化物反應(yīng)。5.氯化銅焰色反應(yīng)含氯的藥物，在銅網(wǎng)上燃燒發(fā)出氯化銅的綠色火焰。此反應(yīng)藥典未用于本類藥物鑒別。

現(xiàn)在是50頁\一共有60頁\編輯于星期五（二）紫外特征吸收和紅外吸收光譜現(xiàn)在是51頁\一共有60頁\編輯于星期五（三）色譜法TLCHPLC現(xiàn)在是52頁\一共有60頁\編輯于星期五三、特殊雜質(zhì)的檢查（一）有關(guān)物質(zhì)檢查

1.氯氮卓中有關(guān)物質(zhì)的檢查USP(24):薄層色譜法（雜質(zhì)對照品法）BP（2003）:薄層色譜法（高低濃度對比法、雜質(zhì)對照品法）ChP：HPLC法（雜質(zhì)對照品法、主成分自身對照法）溶液的澄清度控制中間體等水不溶性雜質(zhì)2.三唑侖中有關(guān)物質(zhì)的GC法（USP）現(xiàn)在是53頁\一共有60頁\編輯于星期五（一）非水溶液滴定法是國內(nèi)外藥典采用較多的含量測定方法。對于：a.在水溶液中不能滴定的化合物，一些很弱的酸、堿以及某些鹽類，在水溶液中進(jìn)行滴定時(shí)，沒有明顯的滴定突躍，終點(diǎn)難于掌握；b.在水溶液中不溶的化合物，有些有機(jī)化合物在水中溶解度很小，以水作為滴定介質(zhì)受到一定的限制。

四、含量測定現(xiàn)在是54頁\一共有60頁\編輯于星期五1.定義非水滴定：在水以外的溶劑中進(jìn)行的酸堿滴定分析方法。（1）酸性溶劑：有機(jī)弱堿在酸性溶劑中可顯著地增強(qiáng)相對堿度。（2）堿性溶劑：有機(jī)弱酸在堿性溶劑中可顯著地增強(qiáng)相對酸度。（3）兩性溶劑：具有酸、堿性能，如methanol。（4）惰性溶劑：沒有酸、堿性的溶劑，丙酮、氯仿?，F(xiàn)在是55頁\一共有60頁\編輯于星期五2.應(yīng)用討論（1）適用范圍

pKb為8～13的弱堿性藥物可用本法滴定。一般來說，當(dāng)Kb為10－8～10－10時(shí)，宜選冰醋酸作溶劑；Kb為10－10～10－12時(shí)，宜選用冰醋酸與醋酐的混合溶劑作溶劑；Kb＜10－12時(shí)，應(yīng)用醋酐作溶劑。另外，