儀器分析第講色譜法引論2023/4/2第1頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三色譜法的基本原理

CommonConceptsandPrinciplesofChromatography第一節(jié)概述色譜法的發(fā)展簡(jiǎn)史

Sample:PlantpigmentsChromat(o)+graph(y)Chromatography俄國(guó)植物學(xué)家茨維特在1901年使用的裝置：色譜原型裝置，如圖。2023/4/2第2頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三But,uptill1930sthemethodofTswettfinallyreceivedrecognition,andbecameanimportanttoolinbothorganicchemistryandbiochemistrylaboratories.Anmanualtechniquerequiringconsiderableskill,manipulationandtime.From

JanAkeJonssonEd.,ChromatographicTheoryandBasicprinciples,1987,MarcelDekker,Inc.,NewYorkJamesM.Miller,Chromatography:ConceptandContrasts,1988,Wiley,NewYorkLeslieS.Ettre,1941-1951:TheGoldenDecadeofChromatography,Analyst,1991,116,1231第一節(jié)概述色譜法的發(fā)展簡(jiǎn)史

2023/4/2第3頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三1952,A.J.P.MartinandR.L.M.SyngewereawardedtheNobelPrizeinChemistry第一節(jié)概述色譜法的發(fā)展簡(jiǎn)史

在色譜發(fā)展史上占有重要地位的英國(guó)科學(xué)家A.J.P.Martin(馬丁)和R.L.M.Synge(辛格)，他們提出色譜塔板理論；發(fā)明液-液分配色譜；預(yù)言了氣體可作為流動(dòng)相（即氣相色譜）。1952年，因?yàn)樗麄儗?duì)分配色譜理論的貢獻(xiàn)獲諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。2023/4/2第4頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三1956,Ratetheory,theDutchscientist,VanDeemter

動(dòng)力學(xué)理論——范第姆特方程1963,HPLCwasborn

HighPerformanceLiquidChromatography

HighPressureLiquidChromatography---------------Today,……第一節(jié)概述色譜法的發(fā)展簡(jiǎn)史

2023/4/2第5頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三DevelopingofChromatographicTechnique1948,8daysseparationfor16aminoacids2023/4/2第6頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三DevelopingofChromatographicTechnique1958,22hoursseparationfor19ofaminoacids2023/4/2第7頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三DevelopingofChromatographicTechnique1982,lessthan30minutesseparationfor18ofaminoacids2023/4/2第8頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三一、色譜法的基礎(chǔ)、分類和特點(diǎn)

◆色譜法首先是一種分離技術(shù)，同時(shí)也是一種分析技術(shù)。

試樣混合物的分離過(guò)程也就是試樣中各組分在色譜分離柱中兩相間不斷進(jìn)行著的分配過(guò)程其中的一相固定不動(dòng)，稱為固定相；另一相是攜帶試樣混合物流過(guò)此固定相的流體（氣體或液體），稱為流動(dòng)相。1.基礎(chǔ)

分離、分析混合物最有效的方法。2023/4/2第9頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三

當(dāng)流動(dòng)相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時(shí)，其與固定相發(fā)生相互作用。由于混合物中各組分在性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異，與固定相之間產(chǎn)生的作用力的大小、強(qiáng)弱不同，隨著流動(dòng)相的移動(dòng)，混合物在兩相間經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的分配平衡，使得各組分被固定相保留的時(shí)間不同，從而按一定次序由固定相中流出。再與適當(dāng)?shù)臋z測(cè)方法結(jié)合，實(shí)現(xiàn)混合物中各組分的分離與檢測(cè)。

兩相及兩相的相對(duì)運(yùn)動(dòng)構(gòu)成了色譜法的基礎(chǔ)2023/4/2第10頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三2.色譜法分類

(1)氣相色譜：流動(dòng)相為氣體（稱為載氣）。按分離柱不同可分為：填充柱色譜和毛細(xì)管柱色譜；按固定相的不同又分為：氣固色譜和氣液色譜2023/4/2第11頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三(2)液相色譜：流動(dòng)相為液體（也稱為淋洗液）。按固定相的不同分為：液固色譜和液液色譜。

離子色譜：液相色譜的一種，以特制的離子交換樹(shù)脂為固定相，不同pH值的水溶液為流動(dòng)相。2023/4/2第12頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三(3)其他色譜方法薄層色譜和紙色譜：比較簡(jiǎn)單的色譜方法凝膠色譜法：

測(cè)聚合物分子量分布。超臨界色譜:CO2流動(dòng)相。高效毛細(xì)管電泳:九十年代快速發(fā)展、特別適合生物試樣分析分離的高效分析儀器。2023/4/2第13頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三3.色譜法的特點(diǎn)（1）分離效率高

復(fù)雜混合物，有機(jī)同系物、異構(gòu)體。手性異構(gòu)體。（2）靈敏度高

可以檢測(cè)出μg.g-1(10-6)級(jí)甚至ng.g-1(10-9)級(jí)的物質(zhì)量。（3）分析速度快

一般在幾分鐘或幾十分鐘內(nèi)可以完成一個(gè)試樣的分析。（4）應(yīng)用范圍廣

氣相色譜：沸點(diǎn)低于400℃的各種有機(jī)或無(wú)機(jī)試樣的分析液相色譜：高沸點(diǎn)、熱不穩(wěn)定、生物試樣的分離分析。

不足之處：

被分離組分的定性較為困難。2023/4/2第14頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三氣固色譜的固定相:多孔性的固體吸附劑顆粒。

固體吸附劑對(duì)試樣中各組分的吸附能力的不同。氣液色譜的固定相:由擔(dān)體和固定液所組成。

固定液對(duì)試樣中各組分的溶解能力的不同。氣固色譜的分離機(jī)理:

吸附與脫附的不斷重復(fù)過(guò)程；氣液色譜的分離機(jī)理：

氣液兩相間的反復(fù)多次分配過(guò)程。二、色譜分離過(guò)程

色譜分離過(guò)程是在色譜柱內(nèi)完成的。以氣相色譜為例，氣固色譜和氣液色譜，兩者的分離機(jī)理不同。2023/4/2第15頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三1.氣相色譜分離過(guò)程當(dāng)試樣由載氣攜帶進(jìn)入色譜柱與固定相接觸時(shí)，被固定相溶解或吸附;隨著載氣的不斷通入，被溶解或吸附的組分又從固定相中揮發(fā)或脫附;揮發(fā)或脫附下的組分隨著載氣向前移動(dòng)時(shí)又再次被固定相溶解或吸附;隨著載氣的流動(dòng)，溶解、揮發(fā)，或吸附、脫附的過(guò)程反復(fù)地進(jìn)行。2023/4/2第16頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三2.分配系數(shù)（partionfactor）K

組分在固定相和流動(dòng)相間發(fā)生的吸附、脫附，或溶解、揮發(fā)的過(guò)程叫做分配過(guò)程。分配系數(shù)是色譜分離的依據(jù)。在一定溫度下，組分在兩相間分配達(dá)到平衡時(shí)的濃度（單位：g/mL）比，稱為分配系數(shù)，用K表示，即：2023/4/2第17頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三分配系數(shù)K的討論

一定溫度下，組分的分配系數(shù)K越大，出峰越慢；試樣一定時(shí)，K主要取決于固定相性質(zhì)；每個(gè)組份在各種固定相上的分配系數(shù)K不同；選擇適宜的固定相可改善分離效果；試樣中的各組分具有不同的K值是分離的基礎(chǔ)；某組分的K=0時(shí)，即不被固定相保留，最先流出。2023/4/2第18頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三3.分配比（partionratio）k

在實(shí)際工作中，也常用分配比來(lái)表征色譜分配平衡過(guò)程。分配比是指，在一定溫度下，組分在兩相間分配達(dá)到平衡時(shí)的質(zhì)量比：

1.分配系數(shù)與分配比都是與組分及固定相的熱力學(xué)性質(zhì)有關(guān)的常數(shù)，隨分離柱溫度、柱壓的改變而變化。2.分配系數(shù)與分配比都是衡量色譜柱對(duì)組分保留能力的參數(shù)，數(shù)值越大，該組分的保留時(shí)間越長(zhǎng)。3.分配比可以由實(shí)驗(yàn)測(cè)得。分配比也稱：容量因子(capacityfactor)；容量比(capacityfactor)；2023/4/2第19頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三4.分配系數(shù)與分配比的關(guān)系

式中β為相比率，β＝Vm/

VS。

Vm為流動(dòng)相體積，即柱內(nèi)固定相顆粒間的空隙體積；

VS為固定相體積。是反映各種色譜柱柱型特點(diǎn)的又一個(gè)參數(shù)。填充柱β：6～35；毛細(xì)管柱β：50～1500。K=k.2023/4/2第20頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三5.分配比k與保留時(shí)間的關(guān)系

分配比k可直接從色譜圖測(cè)得。若組分和流動(dòng)相通過(guò)長(zhǎng)度為L(zhǎng)的分離柱，需要的時(shí)間分別為tr和t0（或tM)，則：2023/4/2第21頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三三、色譜流出曲線與術(shù)語(yǔ)1.基線

無(wú)試樣通過(guò)檢測(cè)器時(shí)，檢測(cè)到的信號(hào)即為基線。2.保留值

（1）時(shí)間表示的保留值

保留時(shí)間（tr）：組分從進(jìn)樣到柱后出現(xiàn)濃度極大值時(shí)所需的時(shí)間；死時(shí)間（tM或t0）：不與固定相作用的物質(zhì)（如空氣）的保留時(shí)間；

調(diào)整保留時(shí)間（tr

＇）：tr＇=tr－t0

2023/4/2第22頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三（2）用體積表示的保留值

保留體積（VR）：

Vr=tr×F0F0為柱出口處的載氣流速，單位：mL/min。

死體積（V0）：

V0=t0×F0

調(diào)整保留體積(VR＇)：

V

r＇=Vr－V0

2023/4/2第23頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三3.相對(duì)保留值r21（選擇因子）組分2與組分1調(diào)整保留值之比：

r21=t′r2

/t′r1=V′r2/V′r1相對(duì)保留值只與柱溫和固定相性質(zhì)有關(guān)，與其他色譜操作條件無(wú)關(guān)，它表示了固定相對(duì)這兩種組分的選擇性，又稱選擇因子α，廣泛用作色譜定性的依據(jù)！2023/4/2第24頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三4.分配系數(shù)K及分配比k與選擇因子α的關(guān)系對(duì)A、B兩組分的選擇因子，用下式表示：α=tr(B)/tr(A)=k(B)/k(A)

=K(B)/K(A)

通過(guò)選擇因子α把實(shí)驗(yàn)測(cè)量值k與熱力學(xué)性質(zhì)的分配系數(shù)K直接聯(lián)系起來(lái)，α對(duì)固定相的選擇具有實(shí)際意義。如果兩組分的K或k值相等，則α=1，兩個(gè)組分的色譜峰必將重合，說(shuō)明分不開(kāi)。兩組分的K或k值相差越大，則分離得越好。

兩組分具有不同的分配系數(shù)是色譜分離的先決條件。2023/4/2第25頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三5.區(qū)域?qū)挾?/p>

用來(lái)衡量色譜峰寬度的參數(shù)，有三種表示方法：（1）標(biāo)準(zhǔn)偏差()：即0.607倍峰高處色譜峰寬度的一半。（2）半峰寬(Y1/2或W1/2)：色譜峰高一半處的寬度Y1/2=2.354（3）峰底寬(Y)：即色譜峰兩側(cè)拐點(diǎn)上的切線在基線上的截距，它與標(biāo)準(zhǔn)偏差的關(guān)系是:Y=42023/4/2第26頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三6.色譜流出曲線的數(shù)學(xué)描述

色譜峰為高斯正態(tài)分布時(shí)，色譜流出曲線上的濃度與時(shí)間的關(guān)系為：

式中：C—不同時(shí)間t時(shí)某物質(zhì)的濃度，C0—進(jìn)樣濃度，tR—保留時(shí)間，σ—標(biāo)準(zhǔn)偏差。2023/4/2第27頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三

從色譜流出曲線上，得到信息是：

（l）根據(jù)色譜峰的個(gè)數(shù)，可以判斷樣品中所含組份的最少個(gè)數(shù)．（2）根據(jù)色譜峰的保留值(或位置），可以進(jìn)行定性分析．

(3)根據(jù)色譜峰下的面積或峰高，可以進(jìn)行定量分析．（4）色譜峰的保留值及其區(qū)域?qū)挾龋窃u(píng)價(jià)色譜柱分離效能的依據(jù)．（5）色譜峰兩峰間的距離，是評(píng)價(jià)固定相(和流動(dòng)相)選擇是否合適的依據(jù)．2023/4/2第28頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三

色譜分離的基本理論小結(jié)

色譜分析的目的是將樣品中各組分彼此分離，組分要達(dá)到完全分離，兩峰間的距離必須足夠遠(yuǎn)，兩峰間的距離是由組分在兩相間的分配系數(shù)決定的，即與色譜過(guò)程的熱力學(xué)性質(zhì)有關(guān)。但是兩峰間雖有一定距離，如果每個(gè)峰都很寬，以致彼此重疊，還是不能分開(kāi)。這些峰的寬或窄是由組分在色譜柱中傳質(zhì)和擴(kuò)散行為決定的，即與色譜過(guò)程的動(dòng)力學(xué)性質(zhì)有關(guān)。因此，要從熱力學(xué)和動(dòng)力學(xué)兩方面來(lái)研究色譜行為。2023/4/2第29頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三第二節(jié)色譜理論基礎(chǔ)一、塔板理論platetheory二、速率理論ratetheory三、分離度resolution

Fundamentalofchromatographtheory

2023/4/2第30頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三色譜理論

色譜理論需要解決的問(wèn)題：色譜分離過(guò)程的熱力學(xué)和動(dòng)力學(xué)問(wèn)題。影響分離及柱效的因素與提高柱效的途徑，柱效與分離度的評(píng)價(jià)指標(biāo)及其關(guān)系。組分保留時(shí)間為何不同？色譜峰為何變寬？組分保留時(shí)間：色譜過(guò)程的熱力學(xué)因素控制；（組分和固定液的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)）色譜峰變寬：色譜過(guò)程的動(dòng)力學(xué)因素控制；（兩相中的運(yùn)動(dòng)阻力，擴(kuò)散）兩種色譜理論：塔板理論和速率理論；2023/4/2第31頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三一、塔板理論-柱分離效能指標(biāo)

1.塔板理論（platetheory）半經(jīng)驗(yàn)理論；將色譜分離過(guò)程比擬作精餾過(guò)程，將連續(xù)的色譜分離過(guò)程分割成多次的平衡過(guò)程的重復(fù)（類似于分餾塔塔板上的平衡過(guò)程）。2023/4/2第32頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三塔板理論的假設(shè)1.在柱內(nèi)一小段長(zhǎng)度H內(nèi)，組分可以在兩相間迅速達(dá)到平衡。這一小段柱長(zhǎng)稱為理論塔板高度H。2.以氣相色譜為例，載氣進(jìn)入色譜柱不是連續(xù)進(jìn)行的，而是脈動(dòng)式，每次進(jìn)氣為一個(gè)塔板體積（ΔVm）。3.所有組分開(kāi)始時(shí)存在于第0號(hào)塔板上，而且試樣沿軸（縱）向擴(kuò)散可忽略。4.分配系數(shù)在所有塔板上是常數(shù)，與組分在某一塔板上的量無(wú)關(guān)。2023/4/2第33頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三色譜柱長(zhǎng)：L，虛擬的塔板間距離：H色譜柱的理論塔板數(shù)：n則三者的關(guān)系為：

n=L/H由塔板理論導(dǎo)出，理論塔板數(shù)與色譜參數(shù)之間的關(guān)系（重要公式）：2023/4/2第34頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三2.有效塔板數(shù)和有效塔板高度

單位柱長(zhǎng)的塔板數(shù)越多，表明柱效越高。用不同物質(zhì)計(jì)算可得到不同的理論塔板數(shù)。組分在t0時(shí)間內(nèi)不參與柱內(nèi)分配。需引入有效塔板數(shù)和有效塔板高度：（重要公式）2023/4/2第35頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三3.塔板理論的特點(diǎn)和不足(1)當(dāng)色譜柱長(zhǎng)度一定時(shí)，塔板數(shù)n

越大(塔板高度H越小)，被測(cè)組分在柱內(nèi)被分配的次數(shù)越多，柱效能則越高，所得色譜峰越窄。

(2)不同物質(zhì)在同一色譜柱上的分配系數(shù)不同，用有效塔板數(shù)和有效塔板高度作為衡量柱效能的指標(biāo)時(shí)，應(yīng)指明測(cè)定物質(zhì)。2023/4/2第36頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三3.塔板理論的特點(diǎn)和不足(3)柱效不能表示被分離組分的實(shí)際分離效果，當(dāng)兩組分的分配系數(shù)K相同時(shí)，無(wú)論該色譜柱的塔板數(shù)多大，都無(wú)法分離。(4)塔板理論無(wú)法解釋同一色譜柱在不同的載氣流速下柱效不同的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，也無(wú)法指出影響柱效的因素及提高柱效的途徑。2023/4/2第37頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三二、速率理論-影響柱效的因素1.速率方程（也稱范第姆特方程式）

H=A+B/u+C·u

H：理論塔板高度，u：載氣的線速度(cm/s)減小A、B、C三項(xiàng)可提高柱效；存在著最佳流速；

A、B、C三項(xiàng)各與哪些因素有關(guān)？

1956年荷蘭學(xué)者vanDeemter等在研究氣液色譜時(shí)，提出了色譜過(guò)程動(dòng)力學(xué)理論——速率理論。2023/4/2第38頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三A─渦流擴(kuò)散項(xiàng)

A=2λdp

dp：固定相的平均顆粒直徑λ：固定相的填充不均勻因子固定相顆粒直徑dp↓，填充的越均勻，則A↓，H↓，柱效n↑。表現(xiàn)在渦流擴(kuò)散所引起的色譜峰變寬現(xiàn)象減輕，色譜峰較窄。為了減少渦流擴(kuò)散，提高柱效，使用細(xì)而均勻的顆粒，并且填充均勻是十分必要的。2023/4/2第39頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三B/u—分子擴(kuò)散項(xiàng)

B=2

γDg

γ：彎曲因子，反映了固定相顆粒的幾何形狀對(duì)自由分子擴(kuò)散的阻礙情況。Dg：試樣組分分子在氣相中的擴(kuò)散系數(shù)（cm2·s-1）

(1)存在著濃度差，產(chǎn)生縱向擴(kuò)散;(2)擴(kuò)散導(dǎo)致色譜峰變寬，H↑(n↓)，分離變差;(3)分子擴(kuò)散項(xiàng)與流速有關(guān)，流速↓，滯留時(shí)間↑，擴(kuò)散↑;(4)擴(kuò)散系數(shù)：Dg

∝(M載氣)-1/2；M載氣↑，B值↓。2023/4/2第40頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三

k為容量因子；Dg、DL為擴(kuò)散系數(shù)。

減小擔(dān)體粒度，選擇小分子量的氣體作載氣，可降低傳質(zhì)阻力。C·u—傳質(zhì)阻力項(xiàng)對(duì)GC，傳質(zhì)阻力包括氣相傳質(zhì)阻力Cg和液相傳質(zhì)阻力CL即：

C=（Cg+CL）2023/4/2第41頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三將上面式總結(jié)，即可得范第姆特方程

這一方程對(duì)選擇色譜分離條件具有實(shí)際指導(dǎo)意義，它指出了色譜柱填充的均勻程度，填料顆粒的大小，流動(dòng)相的種類及流速，固定相的液膜厚度等對(duì)柱效的影響。

2023/4/2第42頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三2.載氣流速與柱效——最佳流速載氣流速高時(shí)：

傳質(zhì)阻力項(xiàng)是影響柱效的主要因素，流速，柱效。載氣流速低時(shí)：

分子擴(kuò)散項(xiàng)成為影響柱效的主要因素，流速,柱效。H-u曲線與最佳流速：

由于流速對(duì)這兩項(xiàng)完全相反的作用，流速對(duì)柱效的總影響使得存在著一個(gè)最佳流速值，即速率方程式中塔板高度對(duì)流速的一階導(dǎo)數(shù)有一極小值。以塔板高度H對(duì)應(yīng)載氣流速u作圖，曲線最低點(diǎn)的流速即為最佳流速。2023/4/2第43頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三分離操作條件的選擇2023/4/2第44頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三

(1)組分分子在柱內(nèi)運(yùn)行的多路徑與渦流擴(kuò)散、濃度梯度所造成的分子擴(kuò)散及傳質(zhì)阻力使氣液兩相間的分配平衡不能瞬間達(dá)到等因素是造成色譜峰擴(kuò)展柱效下降的主要原因。

(2)通過(guò)選擇適當(dāng)?shù)墓潭ㄏ嗔６?、載氣種類、液膜厚度及載氣流速可提高柱效。

(3)速率理論為色譜分離和操作條件選擇提供了理論指導(dǎo)。闡明了流速和柱溫對(duì)柱效及分離的影響。

(4)各種因素相互制約，如載氣流速增大，分子擴(kuò)散項(xiàng)的影響減小，使柱效提高，但同時(shí)傳質(zhì)阻力項(xiàng)的影響增大，又使柱效下降；柱溫升高，有利于傳質(zhì)，但又加劇了分子擴(kuò)散的影響，選擇最佳條件，才能使柱效達(dá)到最高。3.速率理論的要點(diǎn)2023/4/2第45頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三三、分離度R

（分辨率）

塔板理論和速率理論都難以描述難分離物質(zhì)對(duì)的實(shí)際分離程度。即柱效為多大時(shí)，相鄰兩組份能夠被完全分離。難分離物質(zhì)對(duì)的分離度大小受色譜過(guò)程中兩種因素的綜合影響：保留值之差──色譜過(guò)程的熱力學(xué)因素；

區(qū)域?qū)挾醛ぉどV過(guò)程的動(dòng)力學(xué)因素。色譜分離中的四種情況如圖所示：2023/4/2第46頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三討論：色譜分離中的四種情況的討論：①柱效較高，△K(分配系數(shù))較大,完全分離；②△K不是很大，柱效較高，峰較窄，基本上完全分離；③柱效較低，△K較大,但分離的不好；④△K小，柱效低，分離效果更差。2023/4/2第47頁(yè)，共56頁(yè)，2023年，2月20日，星期三圖中（a）兩色譜峰距離