吩噻嗪類藥物的分析氯丙嗪異丙嗪2020/11/32奮乃靜奮乃靜鹽酸氟奮乃靜2020/11/33鹽酸三氟拉嗪鹽酸硫利達(dá)嗪2020/11/341.弱堿性:具有弱堿性，極弱脂肪烴氨基、呱嗪及呱啶等衍生物所含氮原子堿性較強(qiáng)，可用于鑒別和含量測定二、主要性質(zhì)：2020/11/35硫氮雜蒽環(huán)上硫原子為2價(jià)，易氧化呈色。母核易被氧化成等不同的產(chǎn)物，隨取代基的不同，呈現(xiàn)不同的顏色。2.氧化呈色：易被硫酸、硝酸、過氧化氫、三氯化鐵氧化，可用于鑒別和含量測定，過程與產(chǎn)物比較復(fù)雜2020/11/363.與金屬離子配合呈色：硫氮雜蒽環(huán)上硫原子有兩對孤對電子，易與金屬離子絡(luò)合呈色。其氧化產(chǎn)物砜和亞砜無此反應(yīng)。2020/11/37

4.紫外和紅外吸收：含S、N的三環(huán)共軛的大體系。S、N與苯環(huán)形成p-共軛。紫外吸收主要由母核三環(huán)的π系統(tǒng)所產(chǎn)生，一般具三個(gè)峰值。204～209nm（205nm附近）、250～265nm（254nm附近）和300～325nm（300nm附近）。最強(qiáng)峰多在250～265nm。

2位上取代基（R′）不同，會引起吸收峰發(fā)生位移。結(jié)構(gòu)中2價(jià)硫，易氧化，產(chǎn)物砜及亞砜有四個(gè)吸收峰。2020/11/382020/11/395.紅外吸收光譜特性:由于取代基R和R’的不同，具有不同的紅外光譜，已被藥典用于不同品種鑒別。2020/11/310第二節(jié)鑒別試驗(yàn)一、化學(xué)法（一）與生物堿沉淀試劑反應(yīng)吩噻嗪類藥物10位的含氮取代基有堿性，可與生物堿沉淀試劑反應(yīng)2020/11/311（二）氧化顯色反應(yīng)：

氧化劑氧化顯色：H2SO4、溴水、FeCl3、H2O2

吩噻嗪環(huán)為一良好電子給予體。相繼失去電子形成幾個(gè)不同的氧化階，而形成自由基型產(chǎn)物（自由基、半醌自由基）和非離子型氧化產(chǎn)物（亞砜、砜、3-羥基吩噻嗪、吩噻酮等）故可被多種氧化劑氧化而呈色。2020/11/312

顯色反應(yīng)

藥物名稱硫酸硝酸過氧化氫

鹽酸氯丙嗪顯紅色,漸變淡黃色—

鹽酸異丙嗪顯櫻桃紅色,放置生成紅色沉淀,加熱即溶解,

后顏色漸變深溶液由紅色轉(zhuǎn)變?yōu)槌赛S色奮乃靜——顯深紅色;放置后紅色漸褪去鹽酸氟奮乃靜顯淡紅色,溫?zé)帷?/p>

后變成紅褐色鹽酸三氟拉嗪—生成微帶紅色的白色沉淀;放—

置后,紅色變深,加熱后變黃色

鹽酸硫利達(dá)嗪顯藍(lán)色

—

—

2020/11/313例：鹽酸氯丙嗪ChP（2010）[鑒別]（1）取本品10mg，加水1ml溶解后，加硝酸5滴，即顯紅色，漸變成行色。例：鹽酸氯丙嗪（糖衣）片ChP（2010）[鑒別]（1）取本品，除去糖衣，研細(xì)，稱取細(xì)粉適量，加水1ml,振搖使鹽酸氯丙嗪溶解，濾過；濾液照鹽酸氯丙嗪項(xiàng)下的鑒別試驗(yàn)，顯相同反應(yīng)。2020/11/314（三）與鈀離子絡(luò)合顯色利用分子結(jié)構(gòu)中未被氧化的硫與金屬鈀離子絡(luò)合形成有色絡(luò)合物，如與癸氟奮乃靜形成紅色絡(luò)合物。該反應(yīng)被ChP（2010）用于吩噻嗪類藥物及其制劑的鑒別。不受氧化產(chǎn)物亞砜和砜的干擾2020/11/315（四）含鹵素取代基的反應(yīng)1.焰色反應(yīng)2.顯色反應(yīng)吩噻嗪類藥物2位的含氟取代基，可經(jīng)有機(jī)破壞后，分解后的氟化物，在酸性條件下，與茜草鋯試液反應(yīng)呈色。2020/11/316（五）氯化物的鑒別反應(yīng)1.硝酸銀的沉淀反應(yīng)2.氧化還原反應(yīng)2020/11/3171、特征的紫外吸收：

藥物溶劑濃度(μg/ml)λmax

(nm)A鹽酸氯丙嗪鹽酸(9→1000)52540.46915306－－鹽酸異丙嗪鹽酸(0.1mol/L)6249－883~937奮乃靜無水乙醇72580.65－癸氟奮乃靜乙醇10260－－鹽酸氟奮乃靜鹽酸(9→1000)10255－553~593鹽酸三氟拉嗪鹽酸(1→20)10256－630鹽酸硫利達(dá)嗪乙醇8264與315－－二、光譜法

2020/11/318鹽酸氯丙嗪及其制劑的有關(guān)物質(zhì)檢查第三節(jié)有關(guān)物質(zhì)的檢查合成工藝2020/11/3192020/11/3202020/11/321其他烷基化吩噻嗪類化合物2020/11/322貯藏不當(dāng)產(chǎn)生的氧化物2020/11/323LOGO有關(guān)物質(zhì)的檢查方法:(ChP2010)

HPLC法供試品：0.4mg/ｍl對照品：供試品稀釋至2μg/ｍl色譜柱：辛烷基硅烷鍵和硅膠流動(dòng)相：乙腈-0.5%三氟乙酸（50：50）檢測波長：254nm

判定：供試品溶液如有雜質(zhì)峰，單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于主峰面積（0.5%），各雜質(zhì)峰面積和不得大于對照溶液主峰面積的2倍（1.0%）。注：避光操作；溶液臨用新配。主成分自身對照法離子對試劑，增加氯丙嗪的保留同時(shí)檢查多個(gè)有關(guān)物質(zhì)2020/11/324第四節(jié)含量測定酸堿滴定法非水溶液滴定法乙醇-水溶液中的氫氧化鈉滴定法紫外分光光度法高效液相色譜法2020/11/325

吩噻嗪類原料藥物含量測定大多利用其側(cè)鏈脂肪胺堿性，國內(nèi)外藥典多采用非水滴定法測定本類藥物及其鹽酸鹽原料藥的含量。非水溶液滴定法一、酸堿滴定法2020/11/326【ChP鹽酸氯丙嗪含量測定】

取本品約0.2g．精密稱定．加冰醋酸10ml與醋酐30ml溶解后，照電位滴定法，用高氯酸(0.1mol/L)滴定液滴定，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。

每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于35.53mg鹽酸氯丙嗪。氯丙嗪的堿性較弱，醋酐解離生成醋酐合乙酰氧離子比醋酸合質(zhì)子的酸性強(qiáng)，更利于增加氯丙嗪的堿性2020/11/327注意：滴定劑的穩(wěn)定性非水溶液滴定法所用的溶劑為醋酸，具有揮發(fā)性，膨脹系數(shù)較大，故高氯酸滴定液的濃度受溫度的影響。若滴定樣品與標(biāo)定HClO4溶液時(shí)的溫度不一致，溫差超過10℃時(shí),應(yīng)重新標(biāo)定；溫差未超過10℃時(shí)，應(yīng)將高氯酸滴定液的濃度用下列公式加以校正：N測=N標(biāo)/[1+0.0011（t測-t標(biāo)）]2020/11/328乙醇-水溶液中的氫氧化鈉滴定法

吩噻嗪類藥物的鹽酸鹽的水溶液顯酸性，在乙醇-水溶液中，可采用氫氧化鈉滴定液測定其含量。ChP鹽酸異丙嗪含量測定采用此法2020/11/329操作：取10片，除去糖衣后，精稱，研細(xì)→稱取粉末適量→加水、鹽酸溶解→過濾，取濾液于249nm處測定。已知：鹽酸異丙嗪E=910，即可計(jì)算優(yōu)點(diǎn)：不需標(biāo)準(zhǔn)品缺點(diǎn)：儀器精密度要求高測定中注意問題：避光、防止氧化。1.直接分光光度法：鹽酸異丙嗪片的測定二、紫外分光光度法2020/11/330

鹽酸異丙嗪：片劑測定波長為249nm（為910）；注射液為了消除抗氧劑維生素C（max243nm）對測定的干擾，測定波長改為299nm（為108）。

同理，鹽酸氯丙嗪片劑測定波長為254nm（為915）；注射液測定波長改為306nm（為115）。鹽酸異丙嗪注射劑的測定波長的選擇2020/11/3311、鹽酸氯丙嗪注射液的含量測定，選擇在299nm波長處測定，其原因是（C）A、299nm處是它的最大吸收波長B、為了排除其氧化產(chǎn)物的影響C、為了排除抗氧劑的干擾D、在299nm處，它的吸收值最穩(wěn)定E、在299nm處測定誤差最小2020/11/3322.提取后分光光度法鹽酸氯丙嗪注射液2020/11/3333.提取后雙波長分光光度法：用于校正樣品中氧化產(chǎn)物對測定影響（1）原理在待測組分（a）的最大吸收波長（測定波長，1）處測定待測組分和干擾組分（b）吸收度的總和；另選一適當(dāng)波長（參比波長，2）測定吸收度，并使干擾組分在測定波長和參比波長處的吸收度相等，即，而待測組分在這兩個(gè)波長處吸收度的差值足夠大。2020/11/334（2）定量依據(jù)

樣品在二波長下吸收度差值（A）：即，吸收度差值（A）僅與待測組分的濃度有關(guān)，而與干擾組分無關(guān)，干擾組分的干擾被消除。2020/11/335雙波長分光光度法波長選擇：測定波長測，參比波長參⊿A標(biāo)測參⊿A樣⊿A樣=A測’-A參’

⊿A標(biāo)=A測-A參C樣=C標(biāo)⊿A樣⊿A標(biāo)2020/11/336①干擾組分在兩個(gè)波長處吸收度相等②待測組分在兩個(gè)波長處吸收度相差足夠大（3）必要條件（4）應(yīng)用氯丙嗪的最大吸收波長為254nm,其氧化產(chǎn)物在此波長也有吸收,同時(shí)在277nm處氧化產(chǎn)物也有吸收,且其吸收度與在254nm處吸收度相等,而氯丙嗪在此波長處無吸收。A=A254-A2772020/11/337①萃?。撼タ寡鮿┑母蓴_例：鹽酸氯丙嗪注射液的含量測定（USP32-NF27)2020/11/338

②雙波長分光光度法測定：排除氧化產(chǎn)物的干擾測定波長254nm

參比波長277nm

對照法定量(A254-A277)樣(A254-A277)標(biāo)×C標(biāo)×

12.5/V2020/11/339抗氧劑維生素C的二階導(dǎo)數(shù)光譜近似為接近基線的一條直線，不干擾鹽酸氯丙嗪的測定。4.二階導(dǎo)數(shù)分光光度法鹽酸氯丙嗪注射液

因此鹽酸氯丙嗪可從其二階導(dǎo)數(shù)光譜量取峰266nm～谷254nm距離，標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量。2020/11/340

原理：吩噻嗪類藥物可與一些金屬離子（如Pd2+）在適當(dāng)pH值的溶液中形成有色的絡(luò)合物，借以進(jìn)行比色測定。5.鈀離子比色法2020/11/341優(yōu)點(diǎn)：鈀離子比色法可選擇性地用于未被氧化的吩噻嗪類藥物的測定反應(yīng)在pH2±0.1的緩沖液中進(jìn)行2020/11/342（1）鈀離子試劑：PdCl2和十二烷基硫酸酯鈀鹽。用PdCl2時(shí)，形成的有色絡(luò)合物水中溶解度小,樣品量大時(shí),產(chǎn)生沉淀。十二烷基硫酸酯鈀鹽,其絡(luò)合物溶解度大,吸收強(qiáng)度增大（約2倍）。討論：2020/11/343三、高效液相色譜法：（一）反相高效液相色譜法固定相：十八烷基鍵合硅膠流動(dòng)相：水-甲醇，水-乙腈中加入含氮堿性試劑（掃尾劑）如二乙胺、三乙胺等。采用反相HPLC法測定本類藥物含量時(shí)，常常會產(chǎn)生拖尾現(xiàn)象，這是因?yàn)镺DS固定相表面未被硅烷化的硅醇基與堿性藥物發(fā)生了吸附或離子交換作用。2020/11/344解決的方法有：調(diào)整流動(dòng)相pH，使呈弱堿性（pH7-8）加含氮堿性試劑（掃尾劑），最常用的掃尾劑為醋酸銨、三乙胺、二乙胺、乙腈等更換固定相，用硅膠柱或金剛烷基硅烷化硅膠固定相離子對HPLC法(常用反離子為烷基磺酸鹽)抑制或掩蔽固定相表面的游離硅醇基的活性2020/11/345離子型化合物或能解離的化合物用常規(guī)HPLC分離時(shí)，常會出現(xiàn)色譜峰拖尾和保留值不穩(wěn)定等問題，用離子對色譜則能解決以上問題。（二）離子對色譜法離子對色譜是將離子對提取與色譜技術(shù)相結(jié)合，適用于pKa在2-8的弱酸和弱堿性化合物的分離。通常使用反相ion-pair色譜，因離子對試劑在極性流動(dòng)相中易于溶解，并易于調(diào)整控制反離子的濃度和流動(dòng)相的pH值。2020/11/3461.原理：在流動(dòng)相中加入與成解離狀態(tài)的待測組分離子電荷相反的離子對試劑，使之與待測組分離子形成離子對，增加待測組分在非極性固定相中的分配，從而改善其色譜保留與分離行為。2020/11/347對于酸類樣品（RCOOH），用四丁基銨鹽（TBA+X-）RCOOHRCOO-+H+TBA+X-TBA++X-RCOO-+TBA+RCOO-TBA++++---2020/11/348離子對試劑因其烷基的疏水性，為C18或C8固定相所吸附，生成動(dòng)態(tài)覆蓋的離子交換劑，通過離子交換，保留樣品離子對于堿性樣品B，用烷基磺酸鹽（R-SO3Na）做離子對試劑。B+HBH+R-SO3NaR-SO3-

+

Na+BH++R-SO3-

BH+R-SO3-

2020/11/349（1）離子對試劑的性質(zhì)和濃度：在一定范圍內(nèi)，離子對試劑濃度增加，保留增加，通常所用濃度為0.003mol/ml～0.01mol/ml。（2）流動(dòng)相PH：是IPC分離的重要條件，酸性樣品PH應(yīng)大于Pka兩個(gè)單位，使其解離成RCOO-，堿性樣品，PH應(yīng)小于Pka兩個(gè)單位，使其解離成BH+。（3）流動(dòng)相的組成：（4）離子強(qiáng)度：2.影響離子對形成的條件2020/11/350①樣品中含有-COOH,-SO3H基團(tuán)時(shí),選用的離子對試劑應(yīng)是帶正電荷的有機(jī)銨鹽，以此增加樣品陰離子在反相色譜中的保留值，選用的流動(dòng)相一般都為甲醇/水；②除了加入離子對試劑外，還要加入磷酸鹽或其他緩沖液，以控制流動(dòng)相的酸度，從而使這些酸性或堿性官能團(tuán)能完全解離，最大程度形成離子對；3.離子對試劑和其他添加劑的一般選用規(guī)則2020/11/351③樣品中含有-NH2，-NH-基團(tuán)或其他陽離子時(shí)，選用的離子對試劑應(yīng)是烷基磺酸鹽（如戊烷磺酸鈉、庚烷磺酸鈉）其他鹽類；④樣品中同時(shí)含有-NH2，-COOH，-SO3H等不同性質(zhì)的基團(tuán)時(shí)，則規(guī)則①②或③都適用。2020/