動物細(xì)胞融合與單克隆抗體太空婚禮神舟四號動物細(xì)胞融合試驗使用的小白鼠正在融合的細(xì)胞熒光標(biāo)記的小鼠細(xì)胞和人細(xì)胞融合實驗示意圖

課題動物細(xì)胞融合和單克隆抗體的制備教學(xué)目標(biāo)及重難點1、動物細(xì)胞融合的過程2、單克隆抗體制備的過程【學(xué)習(xí)重點和難點】1、學(xué)習(xí)重點（1）動物細(xì)胞融合（2）單克隆抗體的制備過程2、學(xué)習(xí)難點單克隆抗體的制備過程

自主學(xué)習(xí)1、動物細(xì)胞融合的概念2、動物細(xì)胞融合的原理3、誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的方法4、動物細(xì)胞融合的意義和應(yīng)用

動物細(xì)胞融合概念：動物細(xì)胞融合，也叫細(xì)胞雜交，是指兩個或多個動物細(xì)胞結(jié)合形成一個細(xì)胞的過程原理：細(xì)胞膜的流動性誘導(dǎo)融合的方法:

-

物理法,化學(xué)法,生物法（滅活的病毒）.對比意義：

應(yīng)用:

突破有性雜交的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育的重要手段最重要的是：制備單克隆抗體

思考與討論動物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交原理細(xì)胞膜的流動性細(xì)胞膜的流動性植物細(xì)胞全能性融合前使細(xì)胞分散后進(jìn)行融合去除細(xì)胞壁誘導(dǎo)融合物理法、化學(xué)法、生物法物理法,化學(xué)法用途制備單克隆抗體克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙,獲得雜種植株

動物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的區(qū)別？讀下面一段文字資料，思考以下問題：長期以來，為了獲得抗體，采用的是把某種抗原反復(fù)注射到動物體內(nèi)，然后從動物血清中分離出所需抗體的方法。用這種方法獲得的抗體，不僅產(chǎn)量低，而且抗體的特異性差，純度低，反應(yīng)不夠靈敏。人們發(fā)現(xiàn)，在動物發(fā)生免疫反應(yīng)的過程中，體內(nèi)的B細(xì)胞可以產(chǎn)生多達(dá)百萬種以上的特異性抗體，但是每個B細(xì)胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。要想獲得大量的單一抗體，必須用單個B細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖，即克隆。

1、請從以上文字資料中找出單克隆抗體的概念2、怎樣才能獲得單克隆抗體？提示1：僅用B淋巴細(xì)胞培養(yǎng)可行嗎？提示2：我們所學(xué)的哪種細(xì)胞是可以無限增殖的？提示3：有什么方法能使一個細(xì)胞同時具備產(chǎn)生抗體的能力和無限增殖能力呢？用單個效應(yīng)B細(xì)胞進(jìn)行克隆，得到的細(xì)胞群能夠分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體，這種抗體就叫做單克隆抗體。B淋巴細(xì)胞單克隆抗體的制備過程

單克隆抗體與常規(guī)抗體的比較..單克隆抗體常規(guī)抗體分泌雜交瘤細(xì)胞各B淋巴細(xì)胞特點特異性強(qiáng),靈敏度高特異性差，靈敏度低生產(chǎn)產(chǎn)量高,易純化分離產(chǎn)量低,分離困難某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計了一個生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌抗體的實驗方案。據(jù)圖回答：（１）該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎？為什么？（２）圖中②為

過程，常用

作為誘導(dǎo)劑。該細(xì)胞繼承了

因此不僅能分泌

，還有

的本領(lǐng)。細(xì)胞融合特異性抗體在體外培養(yǎng)條件下大量增殖滅活的病毒（或PEG）試試身手雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì)不能1、動物細(xì)胞融合過程2、單克隆抗體制備過程（1）細(xì)胞融合（2）兩次篩選（3）細(xì)胞培養(yǎng)（4）分離提純單克隆抗體總結(jié)1、關(guān)于滅活病毒的表述中正確的是（）

A.保留抗原性，可誘導(dǎo)細(xì)胞融合

B.不能感染細(xì)胞，免疫系統(tǒng)不能再識別

C.可用DNA探針檢測病毒是否被滅活

D.因不再具備完整的基因結(jié)構(gòu)，不能再復(fù)制2、用動物細(xì)胞工程技術(shù)獲取單克隆抗體，下列實驗步驟中錯誤的是（）A.將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞B.用纖維素酶處理B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞C.用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑，促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合D.篩選雜交瘤細(xì)胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體隨堂訓(xùn)練AB3、下面是單克隆抗體的制備示意圖，請分析回答：小白鼠細(xì)胞A+瘤細(xì)胞B雜交瘤細(xì)胞單克隆抗體（1）細(xì)胞融合在生物工程中屬于

工程的范圍，用這種方法所得的雜交瘤細(xì)胞具有的主要特征是①

；②

。（2）雜交瘤細(xì)胞通過

過程合成大量的單克隆抗體。（3）過程②進(jìn)行的誘導(dǎo)方式與植物原生質(zhì)體的融合相比特有的方法是（）

A．滅活的仙臺病毒B．骨髓瘤細(xì)胞C．離心D．聚乙二醇（4）在動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，要不停的使用的一種工具酶是

，目的是使細(xì)胞分散開。（5）瘤細(xì)胞B具有

的特點，細(xì)胞A確切的說應(yīng)該是一種

細(xì)胞。①②③能產(chǎn)生特定的抗體能無限增殖細(xì)胞培養(yǎng)A胰蛋白酶癌變漿動物細(xì)胞