電刺激迷走神經(jīng)對(duì)缺血再灌注的影響第1頁(yè)/共13頁(yè)迷走神經(jīng)電刺激對(duì)大白鼠腸缺血-再灌注后血壓的影響第2頁(yè)/共13頁(yè)目的:

觀察迷走神經(jīng)電刺激對(duì)大鼠腸缺血再灌注(I/R)后血壓的影響。方法:2只雄性大白鼠隨機(jī)分為2組:(1)A鼠組:暴露腹腔后夾閉腸系膜上動(dòng)脈(SMA)1h，開(kāi)放再灌注2h;(2)B鼠組:在夾閉前及再灌注開(kāi)始均以5V、2ms和1Hz強(qiáng)度的電能持續(xù)刺激左頸部迷走神經(jīng)遠(yuǎn)端20min;頸動(dòng)脈插管監(jiān)測(cè)平均動(dòng)脈壓(MAP)。結(jié)果:

各組大鼠MAP在缺血期基本保持平穩(wěn)。而在再灌注期，B鼠的MAP隨時(shí)間延長(zhǎng)明顯高于A鼠。結(jié)論:

電刺激迷走神經(jīng)能能改善A鼠腸再灌注期的循環(huán)血壓。摘要第3頁(yè)/共13頁(yè)

腸缺血再灌注(intestinalischemia-reperfusion，I/R)損傷是外科臨床中常見(jiàn)的器官損傷之一，I/R不僅可引起消化道局部組織的結(jié)構(gòu)和功能的損害，而且因腸粘膜屏障功能的損害可引發(fā)腸道菌群移位和內(nèi)毒素血癥，產(chǎn)生全身炎性反應(yīng)綜合征，還可能對(duì)其它臟器造成繼發(fā)性損傷，甚至多器官功能衰竭，導(dǎo)致并發(fā)癥和死亡率增加[1]。然而，在臨床上對(duì)I/R損傷目前仍無(wú)有效的防治手段，因而進(jìn)一步展開(kāi)對(duì)其機(jī)制及防治的研究無(wú)疑是具有臨床意義。近年來(lái)實(shí)驗(yàn)研究表明，通過(guò)傳出迷走神經(jīng)電刺激而釋放乙酰膽堿(acetylcholine，ACh)并特異性結(jié)合于組織巨噬細(xì)胞表面的α7亞基煙堿受體，抑制致炎性細(xì)胞因子釋放，具有保護(hù)臟器功能，維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定作用[2]。但迷走神經(jīng)電刺激對(duì)I/R后腸粘膜損傷是否也有影響未見(jiàn)研究報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)擬對(duì)此進(jìn)行驗(yàn)證。第4頁(yè)/共13頁(yè)1.試劑與儀器

1%戊巴比妥鈉，肝素鈉注射液，生理鹽水，大白鼠手術(shù)臺(tái)，大白鼠器械，大鼠氣管插管，麻醉用藥注射器（5ml），BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)（簡(jiǎn)稱BL系統(tǒng)），壓力換能器，紗布，線，動(dòng)脈插管，動(dòng)脈夾。一、材料與方法第5頁(yè)/共13頁(yè)2.動(dòng)物模型的建立

清潔及健康的雄性大鼠2只，體重250~350g，手術(shù)前禁食12h，自由飲水。腹腔注射1%戊巴比妥鈉(0.5ml/100mg)麻醉后，行氣管切開(kāi)插管以保持自主呼吸通暢。鈍性分離雙側(cè)頸總動(dòng)脈和迷走神經(jīng)，用絲線靠頭端結(jié)扎左側(cè)迷走神經(jīng)，遠(yuǎn)端與雙鉑電極連接;右側(cè)頸總動(dòng)脈置管，連接壓力傳感器。雙鉑電極導(dǎo)線、壓力傳感器導(dǎo)線連接于BL系統(tǒng)，連續(xù)監(jiān)測(cè)平均動(dòng)脈壓并提供持續(xù)電刺激迷走神經(jīng)。盡量按無(wú)菌操作開(kāi)腹，分離暴露腸系膜上動(dòng)脈，自腹主動(dòng)脈分出的根部用無(wú)損傷小動(dòng)脈夾夾閉之，避免鉗夾腸系膜上靜脈。缺血1h后重新打開(kāi)腹腔，去除動(dòng)脈夾再灌注2h。第6頁(yè)/共13頁(yè)3.動(dòng)物分組

上述大鼠隨機(jī)分為2組:A鼠組:夾閉SMA1h后松夾再灌注2h，不刺激迷走神經(jīng);迷走神經(jīng)刺激B鼠組:在夾閉前及再灌注開(kāi)始均以5V、2ms和1Hz強(qiáng)度的電能持續(xù)刺激左側(cè)迷走神經(jīng)遠(yuǎn)端20min。第7頁(yè)/共13頁(yè)4.動(dòng)脈血壓監(jiān)測(cè)

記錄時(shí)點(diǎn):①迷走神經(jīng)刺激前(基礎(chǔ)值T0)、②夾閉0min(T1)、③夾閉30min(T2)、④再灌注0min(T3)、⑤再灌注30min(T4)、⑥再灌注60min(T5)、⑦再灌注90min(T6)、⑧再灌注120min(T7)。每次記錄監(jiān)測(cè)波形持續(xù)30s，取其平均值作為該時(shí)點(diǎn)的測(cè)量值。動(dòng)脈血壓以平均動(dòng)脈壓(MAP)表示。第8頁(yè)/共13頁(yè)1.一般情況

各組大鼠體重及實(shí)驗(yàn)室溫度均無(wú)顯著差異。術(shù)中均存活，麻醉效果滿意。2.MAP的變化

各組大鼠MAP在缺血期基本保持平穩(wěn)。而在再灌注期(T3-T7)，A鼠的MAP隨時(shí)間延長(zhǎng)而明顯下降，與B鼠同時(shí)點(diǎn)相比有顯著差異;A鼠不能改善MAP。

表1各組大白鼠腸缺血再灌注不同時(shí)期MAP的變化(mmHg)組T0T1T2T3T4T5T6T7A7643.358.7843.7643.0945.8433.6620.11B797977.1174.1174.5268.7952.0338.15二、結(jié)果第9頁(yè)/共13頁(yè)

本研究通過(guò)阻斷腸系膜上動(dòng)脈1h再灌注2h復(fù)制了I/R腸損傷模型，表明，A鼠組的病變程度最重，顯著高于B鼠組。提示迷走神經(jīng)電刺激預(yù)處理能在一定程度上減輕I/R后腸組織病理變化。同時(shí)本實(shí)驗(yàn)也表明，與A鼠組相比，VNS能明顯改善再灌注期MAP下降趨勢(shì)，防止低血壓發(fā)生。目前對(duì)VNS這種保護(hù)作用的機(jī)制還不是太清楚，可能與迷走神經(jīng)興奮后釋放的ACh作用有關(guān)[2，4-6]。小腸粘膜對(duì)缺血非常敏感，在遭受30min缺血后，發(fā)生脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，缺血-再灌注損傷時(shí)氧自由基生成，對(duì)細(xì)胞膜產(chǎn)生損傷。迷走神經(jīng)電刺激預(yù)處理能明顯降低I/R后血漿MDA含量，這提示迷走神經(jīng)電刺激能一定程度上減少M(fèi)DA的生成，具有抗氧化應(yīng)激損傷作用，這與石德光等[7]報(bào)道的電刺激迷走神經(jīng)減少內(nèi)毒素血癥動(dòng)物肺MDA生成的研究結(jié)果有相似之處。三、討論第10頁(yè)/共13頁(yè)TNFα具有多種生物學(xué)效應(yīng)，是啟動(dòng)和加速各種炎性連鎖反應(yīng)的關(guān)鍵因子[8]。在I/R損傷中，TNF通過(guò)刺激使自身和其它致炎性介質(zhì)合成增加，使免疫反應(yīng)被放大;另外，TNFα作為致炎細(xì)胞因子可致白細(xì)胞的趨化、聚積并釋放化學(xué)物質(zhì)引起組織損傷[9]。文獻(xiàn)報(bào)道迷走神經(jīng)電刺激能降低內(nèi)毒素血癥、嚴(yán)重低血量失血性休克、主動(dòng)脈鉗夾缺血再灌注大鼠血漿TNFα的研究結(jié)果[4-6，7]。另外，必須強(qiáng)調(diào)的是組織與血漿中的TNFα濃度變化并不完全一致，血中TNFα濃度不能完全反映不同組織TNFα的含量，而組織中的水平似乎更具有臨床和生物學(xué)意義[10]。綜上所述，大鼠腸缺血1h后再灌注2h導(dǎo)致腸粘膜結(jié)構(gòu)明顯損傷，電刺激迷走神經(jīng)能顯著減輕I/R腸粘膜結(jié)構(gòu)的病理改變并使再灌注期的循環(huán)血壓得到一定改善，其保護(hù)效應(yīng)可能與減少脂質(zhì)過(guò)氧化、下調(diào)TNFα生成有關(guān)，其確切機(jī)制有待進(jìn)一步研究。第11頁(yè)/共13頁(yè)[1]

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