克隆豬的重要事件以及產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用前景Situationworldwide–forpigcloningUSAEnglandJPNCHNDKITAGERSouthKoreaAUS普通體細(xì)胞克?。?）1999年，美國(guó)密蘇里哥倫比亞大學(xué)Prather教授課題組報(bào)道了利用豬胎兒成纖維細(xì)胞與體外成熟卵開展體細(xì)胞克隆的研究結(jié)果，但是效率很低，所獲囊胚質(zhì)量也差，沒有獲得克隆豬{TaoTetal.cloning,1:55-62;AnimReprodSci,56:133-141};Prather教授甚至一度想放棄體細(xì)胞克隆豬的研究！2000年，英國(guó)PPL公司{Polejevaetal.Nature,407:86-90}，日本NIAI動(dòng)物遺傳育種系{Onishetal.Science,289:1188-1190}相繼利用體內(nèi)成熟卵開展體細(xì)胞克隆獲得成功，但是操作復(fù)雜，效率低。2000年，美國(guó)Infigen公司{Betthauseretal.NatureBiotechnol,18:1055-59}的報(bào)道利用體外成熟卵、胎兒成纖維細(xì)胞成功獲得克隆豬，才奠定了今天流行的利用體細(xì)胞核移植生產(chǎn)克隆豬的方案?。?！普通體細(xì)胞克?。?）此后，類似的研究如雨后春筍，雖然成功的國(guó)家不多，也還是吸引了幾十家課題組不斷嘗試結(jié)合轉(zhuǎn)基因、基因敲除等技術(shù)為新品種培育、異種器官移植、人類疾病模型研制等工作打基礎(chǔ)。

2006年，Prather課題組LiRF等將克隆胚胎進(jìn)行玻璃化冷凍，獲得克隆豬{Lietal.,BioReprod.75:226-230}

2007年，丹麥奧胡斯大學(xué)成功獲得國(guó)際首例手工克隆豬{Duetal.,Theriogenology,68:1104-1110}；同年，還得到了玻璃化冷凍手工克隆胚胎的后代{Duetal.,cloningandstemcells,9(4):469-176}。轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞克隆（1）2001年，Prather課題組報(bào)道首例轉(zhuǎn)GFP基因體細(xì)胞克隆豬誕生{Parketal.AnimalBiotechnol,12(2)173-181};2002年，Lai等在“Science”和Dai等在“Naturebiotechnology”上幾乎同時(shí)發(fā)表了敲除α-1,3半乳糖苷轉(zhuǎn)移酶基因的體細(xì)胞克隆豬的文章;2003年，PPL公司的Phelps等在“Science”上報(bào)道了世界首例完全敲除α-1,3半乳糖苷轉(zhuǎn)移酶基因的體細(xì)胞克隆豬誕生;2005年，Kolber-Simonds等在“PNAS”上才獲得無(wú)α-1,3半乳糖苷轉(zhuǎn)移酶基因的體細(xì)胞克隆豬…TheJournalofClinicalInvestigationApril2008SEPTEMBER26，

20082005年，中國(guó)農(nóng)大報(bào)道國(guó)內(nèi)首例普通克隆豬2006年，東北農(nóng)大獲得國(guó)內(nèi)首例轉(zhuǎn)GFP基因克隆豬2007年，上海得到普通克隆豬2007年，廣西大學(xué)相繼得到普通克隆豬2007年，中國(guó)農(nóng)大先后獲得世界首例轉(zhuǎn)溶菌酶基因克隆豬、敲除抑肌素基因克隆豬我國(guó)大陸體細(xì)胞克隆豬概況克隆豬技術(shù)本身的發(fā)展卵母細(xì)胞：體外成熟（在美國(guó)已經(jīng)有商業(yè)化的公司專門提供體外成熟的卵母細(xì)胞）。胚胎重構(gòu)：傳統(tǒng)的顯微操作法Vs.手工克隆法，二者效率相當(dāng)，但手工克隆法前期投入少，無(wú)需貴重儀器。重構(gòu)胚培養(yǎng)：較為成熟，體外發(fā)育囊胚率甚至高于IVF。1531/1562clonedembryos12/12recipients9/1termpregnancies47(3.1%)/1(0.05%)piglets9/2pregnanciesOvulationapprox.24/6hrsPost-transfer!克隆豬的商業(yè)化現(xiàn)狀和前景農(nóng)業(yè)動(dòng)物育種：美國(guó)Viagen公司醫(yī)學(xué)美國(guó)Infigen公司丹麥Pixgene公司其他

華大方舟克隆豬商業(yè)化突破口尤其是克隆高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)種豬，可能還會(huì)提前；……mostlikely,thefirstclonesutilizedintheswineindustrywillbeboarswithhighgeneticmeritforproductiontraits......{Pratetal.2006,Reproductionsuppl.303-}在美國(guó)，克隆豬商業(yè)化的主要障礙還是人們的接受程度！有望商業(yè)化的不單純是克隆豬、豬肉，伴隨著豬人工授精技術(shù)的不斷成熟、大面積推廣，良種公豬的精液需求必將增加。頂級(jí)公豬的克隆成功將有助于這項(xiàng)工作。即使在目前的效率下，克隆頂級(jí)公豬也能給飼養(yǎng)者帶來(lái)較好的經(jīng)濟(jì)效益。而且體細(xì)胞克隆技術(shù)在環(huán)保、降低飼料消耗上也能發(fā)揮應(yīng)有的作用！Ourfuture?Purpose: Commercialproduction ofcloned/transgenicpigs forhumandiseasemodels我國(guó)每年約有150萬(wàn)人因終末期器官功能衰竭需要進(jìn)行器官移植