實(shí)驗(yàn)三心臟的起搏點(diǎn)和心動(dòng)周期的觀察第1頁(yè)，共13頁(yè)，2023年，2月20日，星期六【目的要求】1、學(xué)習(xí)暴露蛙類心臟的方法，熟悉心臟的結(jié)構(gòu)。2、觀察心臟各部分自動(dòng)節(jié)律性活動(dòng)的時(shí)相及頻率。3、用結(jié)扎法觀察兩棲類動(dòng)物心臟的起搏點(diǎn)和心臟不同部位傳導(dǎo)系統(tǒng)的自動(dòng)節(jié)律性高低。4、學(xué)習(xí)在體蛙類心臟活動(dòng)的描記方法。5、觀察心室在收縮活動(dòng)的不同時(shí)期對(duì)額外刺激的反應(yīng)。6、了解心肌興奮性的變化及代償間歇的發(fā)生機(jī)理。第2頁(yè)，共13頁(yè)，2023年，2月20日，星期六【基本原理】心臟的特殊傳導(dǎo)系統(tǒng)具有自動(dòng)節(jié)律性，但各部分的自動(dòng)節(jié)律性高低不同。兩棲類動(dòng)物的心臟起搏點(diǎn)是靜脈竇(哺乳動(dòng)物的是竇房結(jié))。正常情況下，靜脈竇（竇房結(jié)）的自律性最高，能自動(dòng)產(chǎn)生節(jié)律性興奮，并依次傳到心房、房室交界區(qū)、心室，引起整個(gè)心臟興奮和收縮，這種有節(jié)律的活動(dòng)可以用機(jī)械方法或通過換能器記錄下來(lái)，稱為心搏曲線。在心臟的收縮期和舒張?jiān)缙?，任何刺激均不能引起心肌興奮與收縮，而在心肌舒張?jiān)缙谝院?，正常?jié)律性興奮到達(dá)之前，給心臟施加一個(gè)閾上刺激就能引起一次提前出現(xiàn)的心肌收縮，稱為期前收縮。期前收縮也有一個(gè)較長(zhǎng)的不應(yīng)期，因此下一次正常的竇性節(jié)律性興奮到達(dá)時(shí)，正好落在期前收縮的有效不應(yīng)期內(nèi)，不能引起心肌收縮。這樣出現(xiàn)一個(gè)較長(zhǎng)時(shí)間的間歇期，稱為代償間歇。第3頁(yè)，共13頁(yè)，2023年，2月20日，星期六【動(dòng)物、器材與試劑】（以下是每組所需的種類和數(shù)量）蛙或蟾蜍1只、紗布1塊、毀髓針1支、眼科鑷1把、手術(shù)剪1把、眼科剪1把、蛙板1塊、蛙釘4只、玻璃分針1支、滴管1支、細(xì)棉線30cm、解剖盤1只、任氏液至少100mL、秒表1塊、蛙心夾1只、雙極刺激電極1個(gè)、橡皮泥或電極支架1個(gè)、張力換能器（50g）1個(gè)、二道生理紀(jì)錄儀1臺(tái)、生理多用儀1臺(tái)、鐵支架1個(gè)、雙凹夾1個(gè)。第4頁(yè)，共13頁(yè)，2023年，2月20日，星期六【方法與步驟】1、取蛙或蟾蜍一只，雙毀髓，腹面朝上固定于蛙板上，左手持鑷子提起胸骨后端的皮膚剪一小口，然后向左、右兩側(cè)鎖骨外側(cè)剪開皮膚。把游離的皮膚掀向頭端。再用鑷子,提起胸骨后方的腹肌，剪開一小口后,剪刀伸入胸腔(勿傷及心臟和血管)，沿皮膚切口剪開胸壁，剪斷左右烏喙骨和鎖骨，使創(chuàng)口呈一倒三角形，充分暴露心臟部位。持眼科鑷提起心包膜并用眼科剪剪開心包膜，暴露心臟。第5頁(yè)，共13頁(yè)，2023年，2月20日，星期六2、從心臟的腹面可看到一個(gè)心室，其上方有兩個(gè)心房，房室之間有房室溝。心室右上方有一動(dòng)脈圓錐，是動(dòng)脈根部的膨大，動(dòng)脈干向上分成左右兩分支。用系線的蛙心夾在心臟收縮到最小時(shí)夾住少許心尖部肌肉，輕輕提起蛙心夾，將心臟倒吊，可以看到心臟背面有節(jié)律搏動(dòng)的靜脈竇，在心房與靜脈竇之間有一條白色半月形界線，稱為竇房溝。前、后腔靜脈與左、右肝靜脈的血液流入靜脈竇。（圖8）第6頁(yè)，共13頁(yè)，2023年，2月20日，星期六3、仔細(xì)觀察靜脈竇、心房及心室收縮的順序和頻率。4、將刺激電極（雙電極）安放在心室外壁，使之既不影響心搏又能同心室緊密接觸（可用橡皮泥或電極支架固定電極柄），刺激電極與多用儀的刺激輸出端相連。將蛙心夾的系線與張力傳感器的應(yīng)變梁孔連接，調(diào)節(jié)系線的拉力，使心臟的收縮活動(dòng)在二道生理記錄儀上出現(xiàn)。調(diào)整掃描速度，使心搏曲線的幅度與寬度適中。5、描記正常心搏曲線，觀察曲線的收縮相和舒張相。第7頁(yè)，共13頁(yè)，2023年，2月20日，星期六6、用中等強(qiáng)度的單個(gè)閾上刺激分別在心室收縮期或舒張?jiān)缙诖碳ば氖?，觀察能否引起期前收縮。7、用同等強(qiáng)度的單個(gè)閾上刺激在心室舒張?jiān)缙谥蟮牟煌瑫r(shí)段刺激心室，觀察有無(wú)期前收縮出現(xiàn)。8、以上刺激若能引起期前收縮，觀察其后有無(wú)代償間歇出現(xiàn)。9、用閾上刺激連續(xù)刺激心室肌，觀察臟臟是否會(huì)出現(xiàn)強(qiáng)直收縮。10、分離主動(dòng)脈兩分支的基部，用眼科鑷在主動(dòng)脈干下穿一細(xì)線。將蛙心心尖翻向頭端，暴露心臟背面,在靜脈竇和心房交界處的半月形白線（即竇房溝）處將預(yù)先穿入的線作一結(jié)扎，即斯氏第一結(jié)扎（圖9），以阻斷靜脈竇和心房之間的傳導(dǎo)。觀察蛙心各部分的搏動(dòng)節(jié)律變化，并記錄各自的跳動(dòng)頻率(次·min-1)。待心房、心室復(fù)跳后，再分別記錄心房心室的復(fù)跳時(shí)間和蛙心各部分的搏動(dòng)頻率(次·min-1)，比較結(jié)扎前后的變化。第8頁(yè)，共13頁(yè)，2023年，2月20日，星期六第9頁(yè)，共13頁(yè)，2023年，2月20日，星期六11、第一結(jié)扎實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目完成后，再在心房與心室之間即房室溝用線作第二結(jié)扎，即斯氏第二結(jié)扎（圖9）。結(jié)扎后，心室停止跳動(dòng)，而靜脈竇和心房繼續(xù)跳動(dòng)，記錄其各自的跳動(dòng)頻率(次·min-1)。經(jīng)過較長(zhǎng)時(shí)間的間歇后，心室又開始跳動(dòng)，記錄心室復(fù)跳時(shí)間，及蛙心各部分的跳動(dòng)頻率(次/·min-1)。將記錄結(jié)果記入下表：第10頁(yè)，共13頁(yè)，2023年，2月20日，星期六第11頁(yè)，共13頁(yè)，2023年，2月20日，星期六【注意事項(xiàng)】1、經(jīng)常給心臟滴加任氏液，以保持心臟適宜的環(huán)境。2、采用二道生理記錄儀時(shí)，注意儀器接地。3、張力傳感器與蛙心夾之間的細(xì)線應(yīng)保持適宜的緊張度。4、雙極刺激電極與心室接觸良好的同時(shí)，還應(yīng)盡量不讓其阻礙心臟的自發(fā)收縮。5、要嚴(yán)格掌握刺激時(shí)間和時(shí)段。6、結(jié)扎前要認(rèn)真識(shí)別心臟的結(jié)構(gòu)。7、結(jié)扎部位要準(zhǔn)確地落在相鄰部位的交界處，結(jié)扎時(shí)用力逐漸增加，直到心房或心室搏動(dòng)停止。8、斯氏第一結(jié)扎后，若心室長(zhǎng)時(shí)間不恢復(fù)跳動(dòng)，施實(shí)斯氏第二結(jié)扎則可能使心室恢復(fù)跳動(dòng)。第12頁(yè)，共13頁(yè)，2023年，2月20日，星期六【思考題】1.正常情況下，兩棲類動(dòng)物（或哺乳類動(dòng)物）的心臟起搏點(diǎn)是心臟的哪一部分？它為什么能控制潛在起搏點(diǎn)的活動(dòng)？2.斯氏第一結(jié)扎后，房室搏動(dòng)發(fā)生什么變化，為什么?3.斯氏第二結(jié)扎后