什么是克隆和植物的克隆修改emma演示文稿現(xiàn)在是1頁\一共有25頁\編輯于星期六什么是克隆和植物的克隆修改emma現(xiàn)在是2頁\一共有25頁\編輯于星期六第二章克隆技術現(xiàn)在是3頁\一共有25頁\編輯于星期六

只要不通過兩個分子、兩個細胞或兩個個體的結(jié)合，只由一個模板分子、母細胞或母體直接形成新一代分子、細胞或個體，就是克隆，實質(zhì)即無性繁殖。什么是克?。?/p>

克隆是一種實現(xiàn)無性繁殖的操作，是一種顯微操作或分子生物學操作，區(qū)別于一般意義上的無性繁殖。

無性繁殖與克隆克隆類型：

基因克隆（分子水平）

細胞克?。毎剑?/p>

個體克?。▊€體水平）現(xiàn)在是4頁\一共有25頁\編輯于星期六克隆類型

細胞水平---細胞克?。杭醇毎?/p>

細胞群體

分子水平---基因克?。篋NA克隆或基因克隆，如PCR

個體水平---個體克隆:不通過兩性細胞的結(jié)合，從一個單一的細胞繁殖出生物個體。即細胞——

個體現(xiàn)在是5頁\一共有25頁\編輯于星期六條件：克隆的條件

基本條件：細胞具有的發(fā)育全能性。具有包含物種完整基因組的細胞核的活細胞能有效調(diào)控細胞核發(fā)育的細胞質(zhì)物質(zhì)完成胚胎發(fā)育的必要的環(huán)境條件第二節(jié)植物的克隆現(xiàn)在是6頁\一共有25頁\編輯于星期六第二節(jié)植物的克隆植物克隆的理論依據(jù)：植物細胞的全能性

植物體的每個生活細胞都具有發(fā)育成完整植株的潛能。

生物體的每一個細胞都包含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì)，都有發(fā)育成為完整個體所必需的全部基因。

為什么?1、概念：2、原因：現(xiàn)在是7頁\一共有25頁\編輯于星期六3、全能性大小(1)受精卵的全能性最高

(2)

植物細胞的全能性﹥動物細胞(3)不同植物或同一植物的不同基因型的個體，細胞的全能性表達程度不同。P23

受精卵生殖細胞體細胞＞＞(4)植物細胞在多次繼代培養(yǎng)后，會喪失細胞全能性的表達能力遺傳物質(zhì)變化生長發(fā)育條件變化染色體畸變細胞核變異非整倍體產(chǎn)生激素平衡被打破對外源生長物質(zhì)敏感性發(fā)生改變其他原因產(chǎn)生了缺乏成胚性的細胞系

4、全能性的表達條件：離體狀態(tài)（必要）、營養(yǎng)物質(zhì)、激素、其它外界條件（溫度、光照）現(xiàn)在是8頁\一共有25頁\編輯于星期六植物克隆的技術基礎：植物組織培養(yǎng)離體、消毒的植物器官、組織或細胞植物體根、芽愈傷組織胚狀體（外植體）誘導出芽和根1、植物組織培養(yǎng)的一般程序現(xiàn)在是9頁\一共有25頁\編輯于星期六切取接種1、獲得外植體（已分化）獲得離體、消毒的植物器官、組織或細胞愈傷組織脫分化2、形成愈傷組織愈傷組織：一種相對沒有分化的活的薄壁細胞團組成的新生組織。（細胞排列疏松、無規(guī)則）脫分化：已經(jīng)高度分化的植物細胞，經(jīng)過誘導重新恢復了分裂能力，產(chǎn)生愈傷組織的過程，又稱去分化。愈傷組織形成條件;①適宜溫度、遮光、pH和無菌環(huán)境。②無機物、有機物和植物激素（生長素，細胞分裂素）現(xiàn)在是10頁\一共有25頁\編輯于星期六植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基無機營養(yǎng)物質(zhì)：水和礦質(zhì)元素有機營養(yǎng)物質(zhì)①含N物質(zhì)：包括維生素和氨基酸②碳源：2%—5%的蔗糖③瓊脂：起凝固支持作用植物生長調(diào)節(jié)劑：（生長素，細胞分裂素）

PH值：5.0－6.0條件

含有全部營養(yǎng)、成分的培養(yǎng)基、無菌環(huán)境、適合的PH、一定的溫度、空氣、適時光照等?，F(xiàn)在是11頁\一共有25頁\編輯于星期六再分化：脫分化產(chǎn)生的愈傷組織經(jīng)培養(yǎng)，重新分化根或芽等器官的過程。(光照條件下，葉綠體利用光能合成有機物供試管苗生長發(fā)育)3、形成植株方式一：（愈傷組織胚狀體幼苗植株）再分化方式二：（愈傷組織單細胞（胚性細胞）搖床懸浮培養(yǎng)胚狀體植株胚性細胞特征：細胞質(zhì)豐富、液泡小而細胞核大。胚性細胞胚狀體試管苗植物組織培養(yǎng)懸浮細胞培養(yǎng)細胞團、球形胚、心形胚現(xiàn)在是12頁\一共有25頁\編輯于星期六目的聯(lián)系植物組織培養(yǎng)植物（懸?。┘毎囵B(yǎng)獲得更多植物體獲得人類所需的細胞次生代謝產(chǎn)物植物細胞培養(yǎng)是在植物組織培養(yǎng)技術的基礎上發(fā)展起來的，兩者統(tǒng)稱為植物組織培養(yǎng)紅豆杉紫杉醇是從紅豆杉的干燥樹皮、樹葉、根提取出的抑癌物質(zhì)現(xiàn)在是13頁\一共有25頁\編輯于星期六3、形成植株原生質(zhì)體：去除細胞壁后的植物細胞。用適當方法進行原生質(zhì)體培養(yǎng)，也可以獲得新植株。原生質(zhì)體培養(yǎng)原生質(zhì)體：包括質(zhì)膜、細胞質(zhì)和細胞核（除去細胞壁）現(xiàn)在是14頁\一共有25頁\編輯于星期六原生質(zhì)體培養(yǎng)問題一：要想讓兩個來自不同植物的體細胞融合在一起，遇到的第一個障礙時什么？如何溫和地消除這個障礙？細胞壁纖維素酶、果膠酶、0.5~0.6mol/L的甘露醇(較高滲透壓)防止原生質(zhì)體吸水脹破現(xiàn)在是15頁\一共有25頁\編輯于星期六原生質(zhì)體培養(yǎng)問題二：兩個原生質(zhì)體發(fā)生融合，首先是什么融合？利用了什么原理？什么方法？細胞膜細胞膜的流動性物理：離心、振動、點刺激化學：聚乙二醇（PEG）現(xiàn)在是16頁\一共有25頁\編輯于星期六原生質(zhì)體培養(yǎng)問題三：植物細胞融合成功的標志是什么？如何檢驗？雜種細胞產(chǎn)生新的細胞壁原生質(zhì)體特點：比較容易攝取外來的遺傳物質(zhì)；便于進行細胞融合，形成雜交細胞；與完整細胞一樣具有全能性，仍可產(chǎn)生細胞壁，經(jīng)誘導分化成完整植株利用25%蔗糖溶液以及其他用具，通過植物細胞的質(zhì)壁分離與復原現(xiàn)在是17頁\一共有25頁\編輯于星期六植物細胞A（番茄）植物細胞B（土豆）原生質(zhì)體A原生質(zhì)體B方法？促融方法？類型？雜種植株(番茄土豆)愈傷組織雜種細胞為什么可融合？去除細胞壁脫分化人工誘導原生質(zhì)體融合再生出細胞壁融合的原生質(zhì)體再分化融合完成的標志？酶解法物理：離心、振動、電刺激化學：聚乙二醇（PEG）細胞膜的流動性AA、BB、AB植物細胞融合技術植物組織培養(yǎng)現(xiàn)在是18頁\一共有25頁\編輯于星期六

雜交株同時具有馬鈴薯和番茄的一些形態(tài)特征，但沒有產(chǎn)生可結(jié)實的花、果實和真正意義上的塊莖，不能產(chǎn)生經(jīng)濟效益。主要原因：生物的基因表達不是孤立的，它們之間是相互調(diào)控、相互影響的，雜交株具有兩個物種的遺傳物質(zhì)，但表達互相干擾。泡馬豆（pomato）成果：克服不同生物遠緣雜交的障礙，出現(xiàn)自然界沒有的新品種。白菜—甘藍現(xiàn)在是19頁\一共有25頁\編輯于星期六發(fā)光基因發(fā)光樹如何培育發(fā)光樹呢？原生質(zhì)體培養(yǎng)技術的應用現(xiàn)在是20頁\一共有25頁\編輯于星期六提取目的基因（發(fā)光基因）目的基因與運載體結(jié)合導入受體細胞（原生質(zhì)體）檢測發(fā)光與否原生質(zhì)體培養(yǎng)植物細胞工程現(xiàn)在是21頁\一共有25頁\編輯于星期六單倍體克隆用花藥離體培養(yǎng)方法獲得單倍體植株。3、形成植株注意：單倍體克隆屬于植物克隆，但是不屬于無性繁殖，而屬于有性繁殖，但有性繁殖的過程中利用了植物組織培養(yǎng)技術

植物組織培養(yǎng)的應用人造種皮胚狀體人工胚乳1、人工種子現(xiàn)在是22頁\一共有25頁\編輯于星期六人造種子優(yōu)點：①保持優(yōu)良品種的遺傳特性②生產(chǎn)上不受季節(jié)限制，且可工廠化生產(chǎn)③克服了試管苗大量貯存和運輸?shù)睦щy④人工胚乳中除含有胚狀體發(fā)育所需的營養(yǎng)物質(zhì)外，還可以添加各種附加成分，如固氮細菌、防病蟲農(nóng)藥、除草劑和植物激素類似物等，有利于幼苗茁壯成長，提高作物產(chǎn)量種皮：透氣、透水、能被微生物降解現(xiàn)在是23頁\一共有25頁\編輯于星期六

植物組織培養(yǎng)的應用香蕉原產(chǎn)熱帶地區(qū)，是我國南方重要的經(jīng)濟作物之一。廣東省冬季常受強寒潮和霜凍影響，對香蕉生長發(fā)育影響很大。由香蕉束頂病毒（BBTV，單鏈環(huán)狀DNA病毒）引起的香蕉束頂病，對香蕉生產(chǎn)的危害十分嚴重。當前香蕉栽培品種多為三倍體，由于無性繁殖是香蕉繁育的主要方式，缺少遺傳變異性，因此利用基因工程等現(xiàn)代科技手段提高其種質(zhì)水平，具有重要意義。請根據(jù)上述材料，回答下列問題：（1)簡述香蕉大規(guī)?？焖俜敝臣夹g的過程。

選取香蕉外植體，通過誘導脫分化產(chǎn)生愈傷組織·，然后通過調(diào)整植物激素比例，再分化形成芽和根，獲得大量試管苗（或通過誘導大量形成胚狀體，制成人工種子，適宜條件下萌發(fā)長成幼苗）。2、脫毒苗現(xiàn)在是24頁\一共有25頁\編輯于星期六（2）脫毒香蕉苗的獲得，可采用＿的方法，此方法的依據(jù)是＿和＿。

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