動物學實驗指導（中南民族大學生命科學學院）2011年5月10日動物學實驗指導說明實驗一顯微鏡的使用及動物細胞和組織的觀察（4學時）實驗二華枝睪吸蟲及豬帶絳蟲的形態(tài)和結構觀察（4學時）實驗三蛙的系列實驗（4學時）實驗四哺乳動物（兔及小鼠）的形態(tài)與結構觀察（6學時）動物學實驗指導說明一、動物學實驗課的目的通過相關主要代表動物的外形觀察和內部解剖及一系列實驗，加深學生對課堂教學內容的理解，培養(yǎng)學生嚴謹的科學態(tài)度，正確的觀察和表達方法，學習動物學實驗的基本方法和技巧，為后續(xù)課程的學習打下良好的實驗基礎。二、基本要求通過本課程的學習，要求學生掌握動物學實驗的基本理論和方法，熟練掌握各類動物的解剖方法，基本的動物學繪畫方法與技能，培養(yǎng)其獨立動手能力，從而使學生的實驗技能得到系統(tǒng)的訓練；同時，幫助學生理解和掌握理論教學的內容，使動物學知識系統(tǒng)化。要求學生做好實驗前的預習，根據實驗的要求，每一至三人一組，在規(guī)定時間內獨立完成實驗和實驗報告。三、實驗內容及學時分配實驗一顯微鏡的使用及動物細胞和組織的觀察（4學時）實驗二華枝睪吸蟲及豬帶絳蟲的形態(tài)和結構觀察（4學時）實驗三蛙的系列實驗（4學時）實驗四哺乳動物（兔及小鼠）的形態(tài)與結構比較（6學時）實驗一顯微鏡的使用及動物細胞和組織的觀察一、顯微鏡構造和使用方法（一）目的了解顯微鏡的基本構造，初步掌握顯微鏡的使用方法。（二）實驗材料和用具學生用顯微鏡、載玻片、蓋玻片、50%酒精、眼蟲、草履蟲、平滑肌細胞和組織、骨骼肌細胞和組織。（三）實驗操作及觀察1、顯微鏡的基本結構顯微鏡的中部有一彎曲的柄，稱鏡臂，基部為鏡座。用右手握緊鏡臂，將其從鏡箱中取出，左手托住鏡座，保持鏡體直立，輕放于桌上，觀察各部分構造。在鏡臂基部有一個方形或圓形的平臺，是載物臺（或稱鏡臺）。臺的中央有一圓孔，可通過光線；兩側有壓片夾，用以固定玻片標本。在圓孔的下面，有由一片或數片透鏡組成的聚光器，有集射光線于物體的作用。聚光器附有一組由金屬片組成的可變光闌，其側面伸出一杠桿，可前后移動使光闌開閉。光闌開大則光線較強，適于觀察色深的物體；光闌縮小則光線較弱，適于觀察透明（或無色）的物體。在載物臺的圓孔上方，有一附于鏡臂上端的圓筒稱為鏡筒，其上下兩端附有鏡頭。現代的顯微鏡一般有兩個鏡筒，兩鏡筒之間的距離，可按觀察者雙目的距離調節(jié)。鏡筒上端裝有目鏡，可從鏡筒內抽出，目鏡有低倍和高倍之分。在鏡筒下端有可旋轉的圓盤叫旋轉器，下面附有2-4個物鏡以螺旋旋入旋轉器內。物鏡也有低倍和高倍之分，轉動旋轉器可更換物鏡。在鏡臂上有兩組螺旋，大的叫粗調焦器，小的叫細調焦器。現代的顯微鏡粗、細調焦器常組合在一起，外周粗的為粗調焦器，中間細的為細調焦器。用調焦器調焦點，粗調焦器升降鏡筒較快，用于低倍鏡調焦；細調焦器升降鏡筒較慢，用于高倍鏡調焦。顯微鏡的總放大倍數是目鏡與物鏡放大倍數的乘積。例如，使用10X目鏡與20X物鏡，則總放大倍數為200倍。2、使用方法學習調光線和調焦點，注意嚴格按照從低倍到高倍依次觀察，高倍鏡下只能用細調焦器。3、標準實驗室顯微鏡（四）示范顯微鏡有許多類型和型號，各有其不同的用途。根據生科院條件，可示范或演示幾種常用的新型顯微鏡。（五）作業(yè)1、使用顯微鏡時如何調光線、調焦點？2、總結自己第一次使用顯微鏡的優(yōu)缺點。3、由低倍物鏡轉高倍物鏡時應特別注意哪幾點？二、動物的細胞和組織（一）目的1、了解細胞的基本結構及有絲分裂各期的特點。2、了解動物的4類基本組織的結構和功能。（二）內容1、細胞：人口腔上皮細胞2、上皮組織：單層柱狀上皮、復層扁平上皮、復層柱狀上皮、假復層纖毛柱狀上皮3、結締組織：疏松結締組織、致密結締組織、血液裝片4、肌肉組織：橫紋肌、平滑肌、心肌5、神經組織：脊髓（兔或蛙的脊神經，坐骨神經、可以在以后的實驗中補學）（三）實驗材料和用具1、材料：同上2、用具：載玻片、蓋玻片、解剖器、吸管、吸水紙、牙簽、0.1%及10%的亞甲藍、0.7%及0.9%的NaCl蒸餾水（四）實驗操作及觀察口腔上皮細胞（自己口腔頰部上皮）：①牙簽取材（口腔頰部）——②涂抹（薄而均勻）——③加一滴生理鹽水——④加蓋玻片——⑤從低倍到高倍觀察（光線稍暗點），需要時再染色觀察（胞核染色較深）。要求識別細胞類型并觀察到細胞膜、細胞質、細胞核。疏松結締組織（蛙或蟾蜍）：觀察膠原纖維和彈性纖維。結締組織細胞不規(guī)則，核著色深而清楚，細胞質色淺能辨認出細胞界限。血液組織（蛙心取血）骨骼肌（蛙或蝗蟲）（五）示范1、上皮組織2、肌肉組織（六）作業(yè)1、人口腔上皮細胞。2、橫紋肌細胞并表示其結構。3、細胞的基本結構及其機能。4、4類基本組織的結構特點與主要功能。實驗二華枝睪吸蟲及豬帶絳蟲的形態(tài)和結構觀察一、目的：通過觀察，了解吸蟲綱和絳蟲綱的基本特征以及由于寄生生活方式，在形態(tài)結構上引起的變化。二、內容1、華枝睪吸蟲整體裝片標本的觀察。2、豬帶絳蟲頭節(jié)、成熱節(jié)片和孕卵節(jié)片玻片標本的觀察。三、實驗材料和用具1、材料：華枝睪吸蟲的成蟲裝片標本；豬帶絳蟲頭節(jié)和不同節(jié)片的裝片標本。2、用具：顯微鏡、解剖鏡。四、實驗操作及觀察華枝睪吸蟲整體裝片的觀察：1、外形：體扁平，呈柳葉狀，活時體半透明，淡紅色。體后端寬于前端，通常大小為10?25mmX3?5mm?？谖挥谇岸思∪赓|的口吸盤上，距身體前端約1/5處有腹吸盤。2、內部結構：消化系統(tǒng)：口位于吸盤之中央；口吸盤后的球形肌肉部分為咽；咽后的短管為食管；食管后分出的2條腸管，位于體兩側，通往體后端，無側支，未端封閉。排泄系統(tǒng)：排泄管為2條略彎曲而有多分支的管子；2條排泄管會合而成1條微曲的粗管，位于體后端中央，稱排泄囊；排泄囊開口于身體的未端。生殖系統(tǒng)：雌雄同體雄性：精巢位于體后端，2個，分支狀，前后排列；從每個精巢的中央部，向前各通出1根細管，為輸精小管(或稱輸出管)；在中部匯合成輸精管；輸精管前方的大部分為儲精囊，生殖孔開口于腹吸盤前。雌性：卵巢呈三葉狀，位于精巢之前、體中線處；從卵巢通出的短管為輸卵管；位于卵巢之后的長圓形囊為受精囊，卵黃腺為位于身體兩側的泡狀腺體；在身體1/2稍后的地方，借卵黃總管通入輸卵管；輸卵管之后段有梅氏腺圍繞的部分叫做成卵腔；梅氏腺是圍于成卵腔四周的單細胞腺體；在受精囊之前，由輸卵管通出的管子稱勞氏管；子宮迂曲于卵巢與腹吸盤之間，內藏卵；開口于腹吸盤之前方的雌性生殖孔。豬帶絳蟲裝片的觀察1、頭節(jié)：球形，有4個大而圓的吸盤；頂部中央有短而圓的頂突，突上有兩圈小鉤，約25?50枚。頭節(jié)后為頸部。2、未成熟節(jié)片：頸部以后的節(jié)片，生殖器官未發(fā)育成熟，僅可見到兩側的縱排泄管。3、成熟節(jié)片：寬大于長至近方形，每一節(jié)片內有縱橫排泄管及雌雄性生殖器各一套。縱排泄管外側各有1條神經索。雄性生殖器官：精巢多個，小球形，分布于體內實質中，每個精巢與一輸精小管連接，輸精小管匯合為輸精管。輸精管稍膨大為儲精囊，其后為陰莖通入節(jié)片一側的肉質膨大部分陰莖囊內。雄性生殖孔開口于陰莖外側的生殖腔中。雌性生殖器官：卵巢位于節(jié)片的后部中央，分左右兩大葉和中間的一小葉，卵巢下端有腺體狀的卵黃腺；節(jié)片中央還有一盲管狀的子宮。卵巢、卵黃腺及子宮均以管道匯入成卵腔。成卵腔為顆粒狀的梅氏腺包圍，并向側面通入管道狀的陰道，雌性生殖孔亦開口于生殖腔內。4、孕卵節(jié)片：長大于寬約2倍以上，整個節(jié)片幾乎為子宮占據。子宮分支狀，每側約7?13支，內充滿卵。還可見排泄管和神經索，其他器官均消失。5、豬囊尾蝴：圓形或卵圓泡狀囊，內充滿乳白色液體，見于豬肉中，大小為5mmX(8-10)mm。頭節(jié)與鉤均已發(fā)生，縮陷于囊內。五、作業(yè)1、列表比較豬帶絳蟲和牛帶絳蟲的主要區(qū)別。2、繪華枝睪吸蟲全形圖，并注各部名稱。3、豬帶絳蟲成熟節(jié)片圖，并注各部名稱。實驗三蛙的系列實驗一、目的1、通過對蛙外形、皮膚、骨骼和肌肉系統(tǒng)的觀察，了解脊椎動物由水生到陸生的過渡中，兩棲類在結構和功能上所表現出的初步適應陸生的特征；2、學習蛙的雙毀髓處死方法或氣栓處死方法；3、通過蛙的內部解剖和觀察，了解兩棲動物消化、呼吸、泄殖系統(tǒng)和神經系統(tǒng)的形態(tài)構造及特點；4、學習一般解剖技術；5、通過蛙心血管系統(tǒng)解剖和觀察，了解兩棲動物心臟的構造，血液循環(huán)的途徑及其特點；6、了解目及重要科的特征，學習使用檢索表進行分類鑒定的方法。二、內容將動物形態(tài)結構、基礎生理、行為、分類檢索等實驗內容組合起來，并進行多種基本實驗技能的綜合訓練。要求學生自己組合實驗內容、合理安排實驗程序，在一個單元實驗的時間內，用有限的實驗材料完成多個實驗項目。1、蛙的外形、皮膚、骨骼和肌肉系統(tǒng)的觀察2、蛙的解剖及其消化、呼吸和泄殖系統(tǒng)形態(tài)結構的觀察3、蛙心血管系統(tǒng)解剖和觀察三、實驗材料和用具材料：活蛙用具：解剖盤、解剖器、顯微鏡、放大鏡、蠟盤、大頭針、棉花、乙醚（或氯仿）、鬃毛、鑷子、直尺、卡尺。四、實驗操作及觀察1、外形：將蛙靜伏于解剖盤內，觀察其身體，可分為頭、軀干和四肢3部分。頭部：蛙頭部扁平，略呈三角形，吻端稍尖?？趯挻?、橫裂，由上、下頜組成。上頜背側前端有1對外鼻孔，其外緣具鼻瓣。眼大而突出，位于頭的左右兩側，具上、下眼瞼；下眼瞼內側有透明的瞬膜。兩眼后各有一圓形鼓膜。雄蛙口角內后方各有一淺褐色膜壁為聲囊，鳴叫時鼓成泡狀。軀干部：鼓膜之后為軀干部。短而寬，軀干后端兩腿之間，偏背側有一小孔，為泄殖腔孔。四肢：前肢短小，4指，指間無蹼。后肢長而發(fā)達，5趾，趾間有蹼。2、皮膚：背面皮膚粗糙，背中央常有一條窄而色淺的縱紋，兩側各有一條色淺的背側褶。腹面皮膚光滑、白色。3、骨骼系統(tǒng)：由中軸骨骼（包括頭骨和脊柱）和附肢骨骼組成。頭骨：扁而寬，可分為腦顱和咽顱兩部分。腦顱為容納腦髓的地方，其兩側各有一大空隙，眼球著生于此。腦顱后端有枕骨大孔，腦由此與脊髓相通。咽顱包括構成上下頜的骨骼及舌骨。觀察構成腦顱和咽顱的各骨片。脊柱：由1枚頸椎，7枚軀干椎，1枚薦椎和1個尾桿骨組成。觀察椎骨的構造及各部分結構。附肢骨骼：包括肩帶、胸骨、前肢骨、腰帶和后肢骨。觀察各部分的結構。4、肌肉系統(tǒng)：用雙毀髓法處死活蛙。左手握蛙，使其背部向上。用食指按壓其頭部前端，拇指按其背部，使頭前俯。右手持解剖針自兩眼之間沿中線向后端觸劃，當觸到一凹陷處即枕骨大孔所在部位，將針垂直刺入枕骨大孔；然后將針尖向前刺入顱腔，在顱腔內攪動毀腦；如針確在顱腔內，則可感到針觸及顱骨。再將針退全枕骨大孔，針尖轉向后方，與脊柱平行刺入椎管，一邊伸入，一邊旋轉毀髓，直到蛙后肢及腹部肌肉完全松弛。將處死的蛙腹面向上置于解剖盤內，展開四肢。左手持鑷，夾起腹面后腿基部之間泄殖腔稍前方的皮膚，右手持剪剪開一切口，由此處沿腹中線向前剪開皮膚，直至下頜前端。然后在肩帶處向兩側剪開并剝離前肢皮膚，在股部作一環(huán)形切口，剝去皮膚全足部。然后觀察下頜，腹壁和四肢的主要肌肉。5、口咽腔：為消化和呼吸系統(tǒng)共同的通道。包括舌、內鼻孔、齒、耳咽管孔、聲囊孔、喉門和食管口，觀察各部分的位置及結構。6、消化系統(tǒng)：包括肝臟、食管、胃、腸、胰臟和脾。肝臟紅褐色，位于體腔前端，心臟的后方，由較大的左右兩葉和較小的中葉組成；在中葉背面，左右兩葉之間有一綠色圓形小體，為膽囊。心臟背方有一乳白色短管與胃相連，此管即為食管。食管下端所連的一個彎曲的膨大囊狀體為胃，部分被肝臟遮蓋；胃與食管相連處稱賁門，與小腸交接處稱幽門。腸可分為小腸和大腸兩部分，小腸自幽門后開始，向右前方伸出的一段為十二指腸；其后為回腸；大腸接于回腸，膨大而陡直，又稱直腸。胰臟為一條淡紅色或黃白色的腺體，位于胃和十二指腸間的彎曲處。脾位于直腸前端的腸系膜上，為紅褐色球狀物。7、呼吸系統(tǒng)：蛙為肺皮呼吸。皮膚適應于呼吸的形態(tài)結構特點已在2中有所了解，肺呼吸的器官有鼻腔、口腔、喉氣管室和肺，其中鼻腔和口腔已于口咽腔處觀察過。在此觀察喉氣管室和肺的結構。8、泄殖系統(tǒng)：將消化管移向一側，仔細觀察以下結構。蛙為雌雄異體，觀察時可互換不同性別的標本。泌尿器官：腎臟為1對紅褐色長而扁平的器官，位于體腔后部，緊貼背壁脊柱的兩側。由兩腎的外緣近后端發(fā)出的1對壁很薄的細管，即為輸尿管。膀胱是位于體腔后端腹面中央，連附于泄殖腔腹壁的1個兩葉狀薄壁囊。泄殖腔為糞、尿和生殖細胞共同排出的通道，以單一的泄殖腔孔開口于體外。生殖器官：雄性包括精巢、輸精小管和輸精管、脂肪體。雌性包括卵巢、輸卵管和脂肪體。9、心臟及其周圍血管：心臟位于體腔前端胸骨背面，被包在圍心腔內，其后是紅褐色的肝臟。在心臟腹面用鑷子夾起半透明的圍心膜并剪開，心臟便暴露出來。從腹面觀察心臟的外形及周圍血管。10、動脈系統(tǒng):用鑷子仔細剝離心臟前方左右動脈十周圍的肌肉和結締組織，可見左右動脈干穿出圍心腔后，每支又分成3支，即頸動脈弓、體動脈弓和肺皮動脈弓。頸動脈弓及其分支：外頸動脈、內頸動脈。肺皮動脈弓：肺動脈、皮動脈。體動脈弓及其分支：喉動脈、枕椎動脈、鎖骨下動脈、腹腔腸系膜動脈、泄殖動脈、腰動脈、后腸系膜動脈、總骼動脈。11、靜脈系統(tǒng)：可分為肺靜脈、體靜脈和門靜脈3組。體靜脈包括左右對稱的1對前大靜脈和1條后大靜脈；前大靜脈由外頸靜脈、無名靜脈和鎖骨下靜脈匯合而成；后大靜脈由生殖腺靜脈、腎靜脈和肝靜脈匯合而成；門靜脈包括腎門靜脈和肝門靜脈。12、心臟的內部結構五、作業(yè)1、按照實物繪蛙后肢骨簡圖，注明后肢各部骨塊的名稱。2、根據解剖觀察，繪制蛙泌殖系統(tǒng)的結構圖，注明各器官的名稱。3、繪出蛙循環(huán)系統(tǒng)的簡圖并注明各部名稱。4、兩棲動物的消化、呼吸系統(tǒng)及感覺器官的哪些方面表現出陸生脊椎動物的特征？5、為什么說兩棲動物的血液循環(huán)屬于不完全雙循環(huán)？實驗四哺乳動物（兔及小鼠）的形態(tài)與結構觀察比較通過對哺乳動物兔及小白鼠的外形與內部解剖，掌握哺乳動物的主要特征以及不同哺乳動物的外形與內部結構比較。一兔的解剖（一）目的1、通過對兔消化、呼吸和泄殖系統(tǒng)的觀察，了解哺乳類有關系統(tǒng)的主要特征；2、掌握解剖哺乳類的基本技術；3、通過對兔循環(huán)系統(tǒng)的解剖，進一步掌握哺乳類的基本解剖技術；4、了解哺乳類循環(huán)系統(tǒng)的主要特征。（二）內容1、實驗用兔的處死方法。2、兔的消化，呼吸和泄殖系統(tǒng)的解剖和觀察。3、兔循環(huán)系統(tǒng)解剖。（三）實驗材料與用具材料：活的家兔用具：解剖器、解剖盤、骨剪、10ml注射器及針頭、棉花、其他解剖器具等。（四）實驗操作及觀察1、處死實驗動物：將兔置于解剖盤內或實驗室的地面上，在耳緣靜脈處插入針頭，注射進10mL空氣，幾分鐘內兔即可死亡。注意從耳緣靜脈的遠端開始注射。2、外形觀察：兔的身體分為頭、頸、軀干和尾4部分。仔細辨別各個部分的有關結構。3、內部解剖：將處死的兔仰置于解剖盤中，固定四肢，用棉花蘸清水濕潤腹部正中線的毛，然后自生殖器開口稍前方處，提起皮膚，沿腹中線自后向前把皮膚縱行剪開，直達下頜底為止。然后再從頸部將皮膚向左、右橫向剪至耳廓基部。以左手持鑷子夾起頸部剪開的皮膚邊緣，右手用解剖刀小心地清除皮下結締組織。依次觀察以下結構：唾液腺（包括腮腺、頜下腺、舌下腺、眶下腺），口腔，咽部，喉頭、氣管和肺，消化管（包括食管、胃和腸）和消化腺（包括肝臟和胰臟），泄殖系統(tǒng)（排泄系統(tǒng)：腎臟；生殖系統(tǒng)：卵巢或睪丸）。4、靜脈系統(tǒng)：主要有1對前大靜脈和1條后大靜脈，匯集全身的靜脈血返回右心房。前大靜脈主要由鎖骨下靜脈、總頸靜脈（包括外頸靜脈和內頸靜脈）和奇靜脈匯合而成。后大靜脈的主要分支有肝靜脈、腎靜脈、腰靜脈、生殖靜脈、骼腰靜脈和總骼靜脈。除外還有肝門靜脈，匯合內臟各器官的靜脈進入肝臟。5、動脈系統(tǒng)：哺乳動物僅有左體動脈弓。用鑷子將家兔的心臟拉向右側，可見大動脈弓由左心室發(fā)出，稍前伸即向左彎折走向后方。在貼近背壁中線，經過胸部至腹部后端的動脈，稱為背大動脈。一般情況下大動脈弓分出3支大動脈，最右側的為無名動脈，中間的為左總頸動脈，最左側的為左鎖骨下動脈。背大動脈沿途分出肋間動脈、腹腔動脈、前腸系膜動脈、腎動脈、后腸系膜動脈、生殖動脈、腰動脈、總骼動脈和尾動脈。6、心臟及其附近的大血管。二小白鼠的解剖（一）目的1、通過對小白鼠的解剖，掌握哺乳類的基本解剖技術2、認識哺乳綱以及嚙齒目的一般特征（二）內容1、小白鼠的麻醉2、小白鼠內部各系統(tǒng)的解剖及觀察（三）實驗材料與用具材料：麻醉的小白鼠用具：蠟盤，大頭針，解剖器，骨剪，細玻璃管，脫脂棉，乙醚等（四）實驗操作及觀察1、麻醉：將蘸有乙醚的棉花放入扣有小白鼠大燒杯里，麻醉3—5分鐘后，注意觀察小白鼠的呼吸狀況，呼吸較深時可拿出，迅速將已麻醉的小白鼠仰放在蠟盤上，用大頭針釘住它的四肢的掌部，固定于蠟盤中。2、解剖：棉花蘸清水潤濕腹中線上的毛，然后左手用鑷子提起生殖器前方的皮膚，右手拿剪子剪一小口，沿腹中線剪到頜下。用解剖刀把皮膚向兩邊分離，再用鑷子夾起腹部的肌肉，用剪子尖自身體后端向前挑起，也沿腹中線剪開肌肉到胸骨下緣，向左側剪斷肋骨下端后，向前上方剪，直到斷開左邊鎖骨，右側也