肝癌的發(fā)病機(jī)制第1頁/共28頁

肝癌的發(fā)病機(jī)制

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一總述肝癌是我國(guó)常見惡性腫瘤之一，其死亡率在惡性腫瘤中僅次于胃、食道而居第三位。在我國(guó)每年約有11萬人死于肝癌，占全世界肝癌死亡人數(shù)的45%。研究表明原發(fā)性肝癌的預(yù)后比較差的主要原因是缺乏特異的早期診斷指標(biāo)和治療手段，而研究肝癌的發(fā)病機(jī)理有助于提高肝癌的早期診斷率，指導(dǎo)肝癌的正確治療。第3頁/共28頁

綜合國(guó)內(nèi)外研究結(jié)果，原發(fā)性肝癌的主要危險(xiǎn)因素是乙型肝炎、丙型肝炎、食物被黃曲霉素（AFB）污染、家族遺傳因素、飲水污染、吸煙、飲酒等因素有關(guān)。原發(fā)性肝癌是多因素長(zhǎng)期暴露的綜合結(jié)果，肝炎病史、乙肝病毒感染、丙肝病毒感染、肝癌家族史等因素起強(qiáng)烈作用。第4頁/共28頁

二分述

肝癌的發(fā)病的原因：1癌癥發(fā)生的分子機(jī)理2引起肝癌發(fā)生的多種因素

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1分子機(jī)理第6頁/共28頁2引起肝癌發(fā)生的多種因素

（1）黃曲霉毒素（AFB）的作用（2）調(diào)節(jié)性T細(xì)胞與CD8T細(xì)胞與肝癌的發(fā)生（3）HCV與肝癌發(fā)病的關(guān)系（4）HBVx及COX-2的作用（5）抑癌基因p53的作用（6）抑癌基因Tg737的作用（7）TGFB1/Smads信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路（8）胞嘧啶脫氨酶ApOBEC3s在肝細(xì)胞肝癌發(fā)病機(jī)制中的作用第7頁/共28頁（1）黃曲霉毒素（AFB）的作用

第8頁/共28頁（2）調(diào)節(jié)性T細(xì)胞與CD8T細(xì)胞調(diào)節(jié)性T細(xì)胞廣泛存在于人體血液和組織器官中，是一類發(fā)揮免疫抑制功能的免疫細(xì)胞，在維持人體自身免疫穩(wěn)定和調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答過程中起著關(guān)鍵作用；而人體中CD8T淋巴細(xì)胞能夠發(fā)揮有效的抗癌功能，在控制癌癥發(fā)生過程中起著關(guān)鍵的作用。臨床實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)病人體內(nèi)異常增加的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞可以與自身的CD8T淋巴細(xì)胞直接接觸，從而破壞CD8T淋巴細(xì)胞，使之失去有效的抗腫瘤效應(yīng)，從而促進(jìn)了肝癌細(xì)胞的惡性增殖。該成果還為肝癌的免疫細(xì)胞治療開辟了新的途徑。第9頁/共28頁

（3）HCV與肝癌發(fā)病的關(guān)系隨著分子生物學(xué)與流行病學(xué)的發(fā)展，國(guó)內(nèi)外研究已證實(shí)丙型肝炎是肝細(xì)胞肝癌(HapatitisCcarcinoma，HCC)的重要病因。目前研究HCV感染后，首先造成肝細(xì)胞損傷，引起病程慢性化，最后導(dǎo)致肝組織纖維化、肝硬化，甚至肝癌。第10頁/共28頁

肝細(xì)胞損傷包括:①HCV直接殺傷作用②宿主免疫因素③自身免疫④細(xì)胞調(diào)亡第11頁/共28頁

最近有研究發(fā)現(xiàn)HCVNS3蛋白與肝癌的發(fā)生密切相關(guān)，HCVNS3蛋白抑制活性caspase3的表達(dá)從而抑制細(xì)胞調(diào)亡，提示HCVNS3可能通過抑制細(xì)胞調(diào)亡促使腫瘤形成。第12頁/共28頁

（4）HBVx及COX-2的作用乙型肝炎病毒X蛋白(hepatitisBvirusXprotein，HBVx)是一個(gè)重要的誘癌因素，環(huán)氧化物酶-2(COX-2)在結(jié)腸癌、胰腺癌、食管癌、胃癌和相應(yīng)癌前病變中均有較高表達(dá)。HBVx可以通過信號(hào)傳導(dǎo)激活下游COX-2表達(dá)，而COX-2高表達(dá)又可以促進(jìn)癌變的發(fā)生?？梢哉J(rèn)COX-2與HCC病情進(jìn)展有關(guān)，隨著HCC的發(fā)展，腫瘤基因在突變過程中可能將整合于HCC腫瘤細(xì)胞基因中的HBVx基因部分或全部丟失而喪失表達(dá)。實(shí)驗(yàn)初步發(fā)現(xiàn)HBVx可以通過下游因子調(diào)節(jié)COX-2的表達(dá)參與HCC發(fā)病過程。第13頁/共28頁

（5）抑癌基因p53

肝癌的發(fā)病機(jī)制非常復(fù)雜，涉及了一系列基因和細(xì)胞因子。同時(shí)表明肝癌的發(fā)病是一個(gè)多步驟的過程，在此過程中，HBV和AFB1是兩個(gè)非常重要的致癌因子，他們可通過激活癌基因或使抑癌基因失活而發(fā)揮作用，其中發(fā)揮重要作用的基因?yàn)閜53，p53249編碼子的突變?cè)诟伟┌l(fā)病中起著非常重要的作用。第14頁/共28頁

p53249編碼子的突變可使p53功能喪失，同時(shí)也可使與p53相關(guān)的信號(hào)傳導(dǎo)路徑發(fā)生改變，并與其他因子共同作用，進(jìn)而導(dǎo)致肝癌的發(fā)生。第15頁/共28頁

（6）抑癌基因Tg737①采用RT-PCR和Westernbloting方法檢測(cè)人肝癌組織和肝癌細(xì)胞系中Tg737mRNA和蛋白的表達(dá)情況。人正常肝細(xì)胞Tg737的mRNA及蛋白表達(dá)水平較肝癌細(xì)胞HepG2、MHCC97中高；肝癌組織中Tg737的mRNA及蛋白表達(dá)水平較相應(yīng)癌旁組織低，證實(shí)Tg737基因在肝癌中的表達(dá)是下調(diào)的，并且該基因的蛋白表達(dá)下調(diào)與肝癌的臨床分期密切相關(guān)。第16頁/共28頁

②研究Tg737基因?qū)Ω伟┘?xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用及其初步的作用機(jī)理，結(jié)果表明Tg737基因?qū)Ω伟┘?xì)胞周期有重要影響，Tg737基因的過表達(dá)對(duì)肝癌細(xì)胞的增殖有明顯的抑制作用。

③應(yīng)用PCR-SSCP技術(shù)對(duì)肝癌中Tg737基因的五個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)雜合性缺失情況進(jìn)行檢測(cè)，推測(cè)Tg737基因的雜合性缺失可能是該基因在肝癌中表達(dá)下調(diào)的主要原因，并且在肝癌發(fā)生過程中發(fā)揮著重的作用。第17頁/共28頁

通過以上的研究，初步證實(shí)了Tg737基因在肝癌發(fā)生的過程中發(fā)揮著抑癌基因的作用，對(duì)肝癌細(xì)胞的增殖有明顯的抑制作用。而且Tg737基因在肝癌中存在雜合性缺失，其微衛(wèi)星位點(diǎn)表現(xiàn)出較高的不穩(wěn)定性進(jìn)而影響基因的表達(dá)。因此，Tg737基因有可能作為肝癌的基因治療靶點(diǎn)，為肝癌的基因治療提供新思路。第18頁/共28頁（7）TGFB1/Smads信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路

TGFB1/Smads信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的改變?cè)谠S多腫瘤的發(fā)生和發(fā)展中起著非常重要的作用。TGFB1/smads信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路被抑制，使TGFB1介導(dǎo)的抗增殖信號(hào)不能正常下傳，可能是肝癌發(fā)生的機(jī)制之一。TGFB1是一個(gè)有效的上皮細(xì)胞生長(zhǎng)抑制因子，通過調(diào)節(jié)CyclinD1和周期依賴激酶抑制因子(CKI)水平，導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)停滯在細(xì)胞周期G1期的中后期。第19頁/共28頁

Smads蛋白是TGFB受體Ⅰ的直接底物，是將TGFB1的信號(hào)由胞漿傳遞到胞核的中介分子，TGFB1/Smads信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路通過調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄，使細(xì)胞生長(zhǎng)抑制、分化或凋亡，這一通路中的任一環(huán)節(jié)異常都會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)分化失去控制。第20頁/共28頁圖

肝癌、癌旁及正常肝組織TGFBRⅠ、TGFBRⅡ、Smad2、Smad4和Smad7mRNA表達(dá)(N:正常肝組織;Ca:肝癌組織;C:癌旁組織)第21頁/共28頁統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示肝癌組織TGFB受體Ⅱ表達(dá)減少較TGFB受體Ⅰ明顯，由于TGFB受體Ⅱ在細(xì)胞膜上的表達(dá)減少，使可以有效結(jié)合并發(fā)揮作用的TGFB1數(shù)量減少，導(dǎo)致TGFB1的負(fù)性生長(zhǎng)調(diào)控障礙，可能是肝細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)變和生長(zhǎng)失控的原因之一。Smad7基因是TGFB1信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的抑制元件，肝癌患者存在Smad7過高表達(dá)，使TGFB1/Smads通路持續(xù)受到抑制，TGFB1對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制信號(hào)不能下傳，這就使TGFB1對(duì)細(xì)胞的負(fù)性調(diào)控作用降低，細(xì)胞增殖能力增強(qiáng)，從而有助于細(xì)胞向惡性化方向發(fā)展。第22頁/共28頁（8）胞嘧啶脫氨酶ApOBEC3s在肝細(xì)胞肝癌發(fā)病機(jī)制中的作用

HBV基因組為部分環(huán)狀的雙鏈DNA，含有四個(gè)相互重疊的開放閱讀框，分別為s、p、c和x，編碼表面抗原(HBsAg)、聚合酶(Polymerase)、核心抗原(HBcAg)、E抗原(HBeAg)和X蛋白(HBx)。

胞嘧啶脫氨酶APOBEC3s家族為近年新發(fā)現(xiàn)的一類具有抗病毒能力的細(xì)胞內(nèi)天然免疫蛋白分子。第23頁/共28頁胞嘧啶脫氨酶APOBEC3S家族及其編輯產(chǎn)生的C端截短型HBx突變體在肝細(xì)胞肝癌發(fā)生過程中的作用過程如下：

1.在HBV感染過程中α和β干擾素能夠誘導(dǎo)胞嘧啶脫氨酶APOBEC3S家族在肝細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)，APOBEC3s家族表達(dá)升高一方面抑制HBV的復(fù)制，另一方面持續(xù)的HBV感染引起APOBEC3s家族持續(xù)呈高水平表達(dá)導(dǎo)致HBX(乙型肝炎病毒X基因)突變產(chǎn)生C端截短型HBx（乙型肝炎病毒X蛋白）突變體。第24頁/共28頁

2、持續(xù)的慢性HBV感染導(dǎo)致肝細(xì)胞內(nèi)胞嘧啶脫氨酶APOBEC3s家族被持續(xù)誘導(dǎo)，其中A3B（載脂蛋白BmRNA催化多肽樣蛋白3B）的持續(xù)高表達(dá)具有促進(jìn)細(xì)胞增殖的作用，可能通過影響細(xì)胞內(nèi)某些基因的表達(dá)或通過引起基因組DNA突變導(dǎo)致基因組不穩(wěn)定而參與肝細(xì)胞肝癌的發(fā)病過程。第25頁/共28頁針對(duì)這種肝癌的發(fā)生過程提出下列