內(nèi)容提要E花環(huán)試驗淋巴細胞轉(zhuǎn)化試驗2大吞噬試驗3小吞噬試驗4細胞免疫學實驗第1頁E花環(huán)試驗人外周血T淋巴細胞上能與綿羊紅細胞結(jié)合受體，稱為E受體，即CD2分子或LFA-2（淋巴細胞功效相關(guān)抗原-2）；在一定試驗條件下，綿羊紅細胞能與該受體結(jié)合形成以T細胞為中心，四面繞以綿羊紅細胞玫瑰花團，故稱E花環(huán)形成試驗。

TTBSRBCCD2細胞免疫學實驗第2頁固定、染色固定：取出孵育后細胞，滴加0.8%戊二醛200μl（等體積），輕輕懸浮混勻，4℃孵育放置20-30min。涂片：向上述細胞懸液中加50μl美蘭染液，混勻，靜置5min，取一滴于載玻片上，加蓋玻片。細胞免疫學實驗第3頁鏡檢鏡檢：淋巴細胞呈藍色，SRBC呈紅色圍繞淋巴細胞形成花環(huán)，凡表面粘附有3個或3個以上SRBC者為花環(huán)形成細胞（即E陽性細胞）

計數(shù)200個淋巴細胞，算出花環(huán)形成百分率，并推測其T淋巴細胞百分率。正常值為：50～80%。

注意：計數(shù)及搖勻細胞時動作應(yīng)輕柔，防止打散已形成花環(huán)細胞免疫學實驗第4頁結(jié)果細胞免疫學實驗第5頁E花環(huán)分類Ea-RFC(效應(yīng)T細胞)：正常值為15~35%。（activatedrosetteformationcells,A-RFC）。

E-RFC(總和)：正常值為60~80%。意義：①

E-受體為T細胞所特有，是判定T細胞主要標志之一，還用于T細胞分離。②

用于檢測患者外周血中T細胞百分比及數(shù)目，間接反應(yīng)患者細胞免疫功效。視頻動畫細胞免疫學實驗第6頁內(nèi)容提要淋巴細胞轉(zhuǎn)化試驗2E花環(huán)試驗1大吞噬試驗3小吞噬試驗4細胞免疫學實驗第7頁淋巴細胞轉(zhuǎn)化試驗★植物血凝素（PHA）、刀豆蛋白A（ConA）選擇性刺激T細胞增殖；★脂多糖（LPS）、葡萄球菌A蛋白（SPA）可刺激B細胞增殖；T細胞、B細胞表面含有抗原識別受體和有絲分裂原受體美洲商陸細胞免疫學實驗第8頁淋巴細胞轉(zhuǎn)化試驗細胞免疫學實驗第9頁原理當T淋巴細胞在體外培養(yǎng)時，加入PHA或ConA刺激，T淋巴細胞可轉(zhuǎn)化為淋巴母細胞，同時伴有DNA、RNA及蛋白質(zhì)合成增加，最終造成細胞分裂。依據(jù)其轉(zhuǎn)化率可測定T淋巴細胞功效，從而反應(yīng)機體細胞免疫功效。細胞免疫學實驗第10頁DNA合成分化淋巴母細胞刺激物細胞變大細胞漿擴大空泡核仁顯著核染色質(zhì)疏松T淋巴細胞未轉(zhuǎn)化細胞過渡態(tài)細胞淋巴母細胞細胞免疫學實驗第11頁轉(zhuǎn)化淋巴細胞判斷標準細胞類別形態(tài)特征轉(zhuǎn)化淋巴細胞未轉(zhuǎn)化淋巴細胞淋巴母細胞過渡型細胞胞體大?。ㄖ睆剑?0～20μm或更大12～16μm6～8μm

胞核位置多偏于一側(cè)，少數(shù)位于中央中央或稍偏多位于中央染色質(zhì)疏松，呈粒狀較疏松致密團聚核仁清楚，可見1～3個有或無無有絲分裂有時可見無無

胞漿量豐富，核之一側(cè)較寬廣稍寬較少，常呈一窄環(huán)嗜堿性+++++++～++++～+空泡?？梢娪谢驘o無偽足?？梢娪谢驘o無細胞免疫學實驗第12頁內(nèi)容提要大吞噬試驗3淋巴細胞轉(zhuǎn)化試驗2E花環(huán)試驗1小吞噬試驗4細胞免疫學實驗第13頁原理巨噬細胞對顆粒性抗原有強大吞噬能力。慣用細胞型抗原如雞紅細胞、白色念珠菌、酵母細胞等與巨噬細胞孵育，檢測巨噬細胞吞噬能力。細胞免疫學實驗第14頁原理15細胞免疫學實驗第15頁大吞噬試驗雞紅細胞大吞噬細胞對雞紅細胞消化程度分級：Ⅰ級：未消化，雞紅細胞核清楚，著色正常。Ⅱ級：輕度消化，雞紅細胞核含糊，核腫脹，著色淡。Ⅲ級：完全消化，雞紅細胞核溶解，染色極淡。

細胞免疫學實驗第16頁結(jié)果計算可觀察雞紅細胞消化程度，以判斷巨噬細胞胞內(nèi)殺傷功效。吞噬百分比＝吞噬雞紅細胞巨噬細胞數(shù)/所計數(shù)巨噬細胞總數(shù)（吞噬＋未吞噬）×100%吞噬指數(shù)＝100個巨噬細胞吞噬雞紅細胞總數(shù)/100個巨噬細胞細胞免疫學實驗第17頁臨床意義參考值：正常人吞噬百分比為60%～65%，吞噬指數(shù)1%左右臨床意義：可作為機體抗腫瘤能力判斷指標。惡性腫瘤病人吞噬百分比為34%～38%。吞噬指數(shù)為0.6%左右。有些人匯報，食道癌、胃癌、腸癌、乳腺癌以及其它惡性腫瘤患者吞噬百分比都在45%以下，吞噬指數(shù)也降低。不少患者在術(shù)后有不一樣程度回升，提醒本試驗也可作為判斷腫瘤療效及預后一個參考指標。細胞免疫學實驗第18頁內(nèi)容提要3214E花環(huán)試驗淋巴細胞轉(zhuǎn)化試驗大吞噬試驗小吞噬試驗細胞免疫學實驗第19頁原理血液中中