血培養(yǎng)問(wèn)與答20114第1頁(yè)/共46頁(yè)CLSI血培養(yǎng)的原則和操作程序推薦（Approved）指南ProposedGuideline2006年10月出版：M47-PApprovedGuideline2007年5月出版:M47-A2005-09-08出版：BSOP37第5版.uk/pdf_sops.asp參編單位：醫(yī)學(xué)微生物協(xié)會(huì),臨床微生物協(xié)會(huì)蘇格蘭微生物協(xié)會(huì),IBMS,Welsh微生物協(xié)會(huì)統(tǒng)一由衛(wèi)生防護(hù)署（HealthProtectionAgency）領(lǐng)導(dǎo)英國(guó)HPA的血培養(yǎng)的研究及操作程序第2頁(yè)/共46頁(yè)Question血培養(yǎng)的適應(yīng)癥是什么?第3頁(yè)/共46頁(yè)

發(fā)熱(>38°C)體溫過(guò)低(<36°C)白細(xì)胞增多(>10.000/μl)粒細(xì)胞減少(<1.000/μl)低血壓局部感染：肺炎、尿路感染、腦膜炎、…突發(fā)精神萎靡的兒童或老年人虛弱、精神狀態(tài)錯(cuò)亂、體重突然下降的老年人腎功能不全、無(wú)法解釋的白細(xì)胞增多及精神狀態(tài)改變免疫功能低下的患者CRPPCTAnswer（血培養(yǎng)適應(yīng)癥）CUMITECHBloodCulturesIV,ASMPress2005MylotteandTayaraEJCMID2000第4頁(yè)/共46頁(yè)Qestion血培養(yǎng)最佳的采血時(shí)機(jī)?第5頁(yè)/共46頁(yè)Answer最佳采血時(shí)機(jī)盡可能在抗菌藥物使用前盡可能在寒顫和發(fā)熱初起時(shí)第6頁(yè)/共46頁(yè)03060Time(min)Temp體溫Chills寒戰(zhàn)BloodCultures血培養(yǎng)BACTEREMIALEVEL菌血癥的水平第7頁(yè)/共46頁(yè)Question血培養(yǎng)瓶的種類?第8頁(yè)/共46頁(yè)我院常用血培養(yǎng)瓶采集標(biāo)本前：于室溫保存，切勿冷凍。如冷藏需恢復(fù)至室溫使用。采集標(biāo)本后：盡快送微生物室，如無(wú)法及時(shí)送檢，應(yīng)置于室溫，不能置于冰箱或溫箱，以免影響檢出。第9頁(yè)/共46頁(yè)Question血培養(yǎng)應(yīng)該采幾套?每套包括幾個(gè)瓶子?第10頁(yè)/共46頁(yè)AnswerCLSI要求每次采集2-3套標(biāo)本,每套應(yīng)包括一個(gè)需氧培養(yǎng)瓶,一個(gè)厭氧培養(yǎng)瓶成年病人不能只采1瓶血培養(yǎng)標(biāo)本，采血量不足和只做1套血培養(yǎng)所得得結(jié)果是很難正確解釋的第11頁(yè)/共46頁(yè)采血套數(shù)Cockerill,CID2004血培養(yǎng)套數(shù)與陽(yáng)性檢出率（％）65％80％96％99％第12頁(yè)/共46頁(yè)采血套數(shù)Weinsteinetal.DetectionofBloodstreamInfectionsinAdults:HowManyBloodCulturesAreNeededJClinMicrobiol.2007;45:3546-3548第13頁(yè)/共46頁(yè)

ICU1區(qū)ICU2區(qū)ICU保13區(qū)％1瓶1104%1套03618%3瓶1104%2套及以上4（66％）5（50％）28（82.4%)74%廣東省人民醫(yī)院3－4月ICU1/2/13區(qū)血培共分離出50株可疑致病菌株（不含CNS）菌株檢出與采血套數(shù)的關(guān)系：CNS:凝固酶陰性葡萄球菌第14頁(yè)/共46頁(yè)Question一套血培養(yǎng)為何選擇1個(gè)需氧+1個(gè)厭氧的組合?第15頁(yè)/共46頁(yè)Answer研究表明：用需氧瓶加厭氧瓶的組合檢測(cè)出的葡萄球菌，腸桿菌科菌中某些菌和苛氧菌比一對(duì)需氧瓶多。第16頁(yè)/共46頁(yè)2001年Khanna數(shù)據(jù)7072份血培養(yǎng)，640份陽(yáng)性，陽(yáng)性率為9％組別陽(yáng)性率需氧瓶厭氧瓶均報(bào)陽(yáng)55％僅需氧瓶報(bào)陽(yáng)26％僅厭氧瓶報(bào)陽(yáng)19％EurJClinMicrobiolInfectDDis,2001,20:217-219第17頁(yè)/共46頁(yè)儲(chǔ)從家數(shù)據(jù)（2000年）組別陽(yáng)性率需氧瓶厭氧瓶均報(bào)陽(yáng)50份僅需氧瓶報(bào)陽(yáng)7份僅厭氧瓶報(bào)陽(yáng)23份591份血培養(yǎng)，81份陽(yáng)性，陽(yáng)性率為13.17％中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2000，23：285第18頁(yè)/共46頁(yè)O’Donnel試驗(yàn)8620份血培養(yǎng)，704株組別陽(yáng)性菌株數(shù)陽(yáng)性率2組均報(bào)陽(yáng)487株69.2%2個(gè)需氧瓶組均報(bào)陽(yáng)86株12.2%1個(gè)需氧瓶1個(gè)厭氧瓶組131株18.6%ClinInfectDis,1999,29:1309-1311第19頁(yè)/共46頁(yè)報(bào)告時(shí)間提前出現(xiàn)陽(yáng)性時(shí)間：需氧瓶有9%比厭氧瓶早1天報(bào)告結(jié)果厭氧瓶有5%比需氧瓶早1天報(bào)告結(jié)果因此,只做需氧菌不做厭氧菌培養(yǎng),將有19%的菌株不能發(fā)現(xiàn),另有5%的血培養(yǎng)延遲1天報(bào)告陽(yáng)性結(jié)果

KhannaP,CollignonP.Anaerobicbottlesarestillimportantinbloodculturesets.EurJClinMicrobiolInfectDis,2001,20:217-219第20頁(yè)/共46頁(yè)結(jié)論

如果血培養(yǎng)只做需氧瓶培養(yǎng)，漏檢的不僅是嚴(yán)格厭氧菌,也會(huì)影響兼性厭氧菌的分離率及報(bào)告陽(yáng)性結(jié)果的時(shí)間第21頁(yè)/共46頁(yè)Qestion如何采集第二套血培養(yǎng)?第22頁(yè)/共46頁(yè)Answer一個(gè)靜脈穿刺點(diǎn)只能采集1套血培養(yǎng)，采集第2套血培養(yǎng)應(yīng)該選擇第2個(gè)靜脈穿刺點(diǎn)第23頁(yè)/共46頁(yè)Qestion患者應(yīng)采集多少血液?第24頁(yè)/共46頁(yè)Answer即寒戰(zhàn)—升溫之間采血20ml，分裝兩個(gè)瓶?jī)?nèi)，各分配10ml,當(dāng)采血量不足20ml,應(yīng)先注入需氧瓶,這樣首先滿足需氧瓶的采血量可以更好地分離出真菌、綠膿桿菌、嗜麥芽窄食單胞菌。第25頁(yè)/共46頁(yè)Qestion兒童的血培養(yǎng)應(yīng)如何采集?(用何種類的瓶子,采集多少血液,需要采幾套)第26頁(yè)/共46頁(yè)Answer兒童厭氧菌感染極少，建議只采用兒童瓶厭氧培養(yǎng)只考慮針對(duì)特殊的高危兒童對(duì)于嬰幼兒患者，采血量不超過(guò)患者總血量的1％

<1月:≥

0.5mL

1月

–36月:≥

1.0mL

≥36月:≥

4.0mLConnellTG.Pediatrics2007;119(5):891.第27頁(yè)/共46頁(yè)新生兒敗血癥最低的采血量不確定，通常0.75-1.0ml的血量是推薦的。文獻(xiàn)證實(shí)只采一套血培養(yǎng)大約10％－15％的敗血癥不能檢出即使血培養(yǎng)陰性，根據(jù)臨床癥狀敗血癥仍然可以被懷疑Long:PrinciplesandPracticeofPediatricinfectiousDiseases,2nded.,2003第28頁(yè)/共46頁(yè)兒童專用培養(yǎng)瓶：領(lǐng)取時(shí)注意：粉紅色標(biāo)簽專門(mén)為兒童設(shè)計(jì)，采血量?jī)H為1-3ml

添加特殊促進(jìn)細(xì)菌生長(zhǎng)因子，采用樹(shù)脂專利技術(shù)低SPS濃度可提高兒童特征性病原菌（如耐瑟氏菌）的檢出率樹(shù)脂顆粒能中和抗生素第29頁(yè)/共46頁(yè)Qestion皮膚和血培養(yǎng)瓶的消毒方法?第30頁(yè)/共46頁(yè)Answer美國(guó)CLSI推薦皮膚的消毒方法為：首先確定靜脈穿刺點(diǎn)，首選70％異丙醇消毒并待干，然后用主要消毒劑（洗必泰、碘酊、碘伏）消毒并待干，使之作用足夠的時(shí)間，整個(gè)過(guò)程要求嚴(yán)格無(wú)菌操作血培養(yǎng)瓶的消毒方法：棄去瓶頂塑料帽，用75％乙醇消毒瓶頂橡皮塞，待干60秒第31頁(yè)/共46頁(yè)Qestion每次采集血培養(yǎng)的間隔時(shí)間？第32頁(yè)/共46頁(yè)Answer每份血培養(yǎng)間隔應(yīng)不超過(guò)30分鐘，因?yàn)榫W(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)對(duì)于一過(guò)性菌血癥和間歇性菌血癥在15～30分鐘內(nèi)可清除（CLSI規(guī)定每份血培養(yǎng)應(yīng)同時(shí)獲得，或盡可能短的時(shí)間內(nèi)）第33頁(yè)/共46頁(yè)關(guān)于采血的一些問(wèn)題：1、血培養(yǎng)采血建議從外周靜脈采，不建議采動(dòng)脈血，為什么？

——對(duì)檢出結(jié)果無(wú)明顯差異，但動(dòng)脈穿刺危險(xiǎn)性較大2、常規(guī)血培養(yǎng)不宜從靜脈導(dǎo)管或靜脈留置裝置取血，為什么？

——污染菌或定植菌的可能性較大，除非懷疑CRBSI3、如果需要從導(dǎo)管處取血，初段血或?qū)Ч軆?nèi)的補(bǔ)液是否需要棄去？為什么？

——不能棄去，以便于判斷污染菌、定植菌或病原菌4、如果用注射器采血，采好后注入血培養(yǎng)瓶之前是否需要更換針頭？為什么？

——無(wú)需更換，對(duì)提升陽(yáng)性率無(wú)統(tǒng)計(jì)差異，增加了針刺傷的幾率第34頁(yè)/共46頁(yè)Qestion已接受抗菌藥物治療的患者，使用含樹(shù)脂培養(yǎng)瓶是否有助于提高檢出率？第35頁(yè)/共46頁(yè)BDBACTECTMResin樹(shù)脂技術(shù)CHCHCH2CH2CHCH2CHCH2CH2CHCH2CHCHCH2CH2CHCH2SO3-H+SO3-H+陽(yáng)離子交換樹(shù)脂多價(jià)吸附樹(shù)脂樹(shù)脂包含有非離子樹(shù)脂和陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，能患者在（預(yù)）治療過(guò)程中，可能存在的中和各種抗菌藥物和其它可能的抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的物質(zhì)。

有助于溶解血細(xì)胞，以便釋放被吞噬的細(xì)菌，使其更為快速生長(zhǎng)為細(xì)菌生長(zhǎng)提供生長(zhǎng)中心（growth-centres），以提高生長(zhǎng)速度，提高檢出率（高達(dá)40%多）。一個(gè)BACTEC血培養(yǎng)瓶的樹(shù)脂作用表面相當(dāng)于5個(gè)標(biāo)準(zhǔn)足球場(chǎng)的面積...

革蘭氏染色鏡檢不受干擾GramstainreadingsCharcoalbasedsystems第36頁(yè)/共46頁(yè)Meta-分析BACTEC樹(shù)脂培養(yǎng)瓶的性能43份臨床評(píng)估1982－1996評(píng)估130503份血培養(yǎng)樹(shù)脂對(duì)非樹(shù)脂結(jié)果總計(jì)：提高18.3%治療患者：提高35.4%第37頁(yè)/共46頁(yè)Qestion懷疑導(dǎo)管相關(guān)的血流感染(CRBSI)時(shí)應(yīng)如何送檢?第38頁(yè)/共46頁(yè)CLSI對(duì)非隧道式和隧道式的中心靜脈導(dǎo)管和輸液港(VenousAccessPorts,VAP)推薦的培養(yǎng)方法目標(biāo)人群:攜帶深靜脈導(dǎo)管超過(guò)48小時(shí),出現(xiàn)原因不明的發(fā)熱、低血壓的患者，兒童患者出現(xiàn)低體溫者送檢方法：首先判斷導(dǎo)管是否有保留的必要性，按導(dǎo)管保留與否分別采取不同的送檢方法第39頁(yè)/共46頁(yè)送檢方法：保留情況采取至少2套血培養(yǎng)，其中至少1套來(lái)自外周靜脈，并做好標(biāo)志，另外的1套則從導(dǎo)管中心或硅酮隔膜無(wú)菌采獲，兩個(gè)來(lái)源的采血時(shí)間必須接近（≯5min），各自做好標(biāo)記。第40頁(yè)/共46頁(yè)送檢方法：不保留情況從獨(dú)立的外周靜脈無(wú)菌采集2套血培養(yǎng)無(wú)菌狀態(tài)下取出導(dǎo)管并剪下5cm導(dǎo)管尖端或近心端交付實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行Maki半定量平板滾動(dòng)培養(yǎng)或者定量培養(yǎng)第41頁(yè)/共46頁(yè)Qestion血培養(yǎng)對(duì)CAP、HAP的檢出率如何？第42頁(yè)/共46頁(yè)AnswerCAP菌血癥發(fā)生率住院患者：4%-14%重癥患者：18%大多數(shù)CAP的指南推薦住院的患者進(jìn)行血培養(yǎng)