第二三章轉(zhuǎn)基因食品生物技術(shù)詳解演示文稿目前一頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)優(yōu)選第二三章轉(zhuǎn)基因食品生物技術(shù)目前二頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)核酸核糖構(gòu)成RNA戊糖 脫氧核糖構(gòu)成DNA目前三頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)

核酸

腺嘌呤(A)嘌呤鳥嘌呤(G)DNA、RNA均有嘧啶堿基胞嘧啶(C)胸腺嘧啶((T))尿嘧啶(U)DNA有RNA有每種核酸都含有四種堿基。目前四頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)脫氧核苷酸

核酸

酯鍵核苷酸：

AMP,GMP,UMP,CMP脫氧核苷酸：

dAMP,dGMP,dTMP,dCMP目前五頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)核酸-DNA核苷酸之間以3′,5′-磷酸二酯鍵連接形成多核苷酸鏈，即核酸。酯鍵（DNA的一級(jí)結(jié)構(gòu)。目前六頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)目前七頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)目前八頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)

核酸-DNADNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)—雙螺旋結(jié)構(gòu)。

DNA分子由兩條反向平行的脫氧核糖 核苷酸鏈組成。氫鍵堿基位于內(nèi)側(cè)，戊糖和磷酸位于外側(cè)堿基之間通過(guò)氫鍵進(jìn)行互補(bǔ)配對(duì)，A=T，C≡G故A+G=T+C呈右手螺旋，堿基平面垂直于螺旋中心軸，螺旋一周包含10個(gè)堿基，螺距3.4nm。(B-DNA)目前九頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)核酸-DNADNA的超螺旋結(jié)構(gòu)超螺旋結(jié)構(gòu)(superhelix或supercoil)DNA雙螺旋鏈再盤繞即形成超螺旋結(jié)構(gòu)。正超螺旋(positivesupercoil)盤繞方向與DNA雙螺旋方向相同負(fù)超螺旋

(negativesupercoil)盤繞方向與DNA雙螺旋方向相反目前十頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)DNA主要攜帶兩類遺傳信息為RNA和蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)編碼的信息調(diào)控信息目前十一頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)

染色體

真核生物染色體由DNA和蛋白質(zhì)構(gòu)成，其基本單位是核小體(nucleosome)。核心組蛋白八聚體核小體的組成DNA：

約200bp(堿基對(duì))DNA組蛋白H1組蛋白：

H1 H2A，H2B H3，H4

核小體目前十二頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)基因DNA的基本功能是作為遺傳信息的載體，為生物遺傳信息的復(fù)制及轉(zhuǎn)錄提供模板。具有特定生物學(xué)功能的DNA片段稱為基因（gene）。這些片段有的編碼蛋白質(zhì)，有的編碼rRNA、tRNA，有的則是與復(fù)制、轉(zhuǎn)錄調(diào)控有關(guān)的DNA序列。一個(gè)生物體的全部DNA序列稱為基因組（genome）。基因組的大小與生物的復(fù)雜性有關(guān)，如病毒SV40的基因組大小為5.1×103bp，大腸桿菌為5.7×106bp，人為3×109bp。目前十三頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)基因的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)結(jié)構(gòu)基因在構(gòu)成基因的特定DNA片段中，一段DNA序列貯存著一個(gè)特定RNA分子的序列信息，此段DNA的一級(jí)結(jié)構(gòu)決定該RNA分子的一級(jí)結(jié)構(gòu)。目前十四頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)結(jié)構(gòu)基因非編碼區(qū)編碼區(qū)非編碼區(qū)目前十五頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)結(jié)構(gòu)基因的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)原核生物真核生物病毒結(jié)構(gòu)連續(xù)斷裂基因連續(xù)/斷裂結(jié)構(gòu)基因中貯存的遺傳信息:RNA的結(jié)構(gòu)信息;蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)信息目前十六頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)基因重疊基因(overlappinggenes)核苷酸彼此重疊的兩個(gè)基因稱為重疊基因。目前十七頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)斷裂基因一個(gè)基因由幾個(gè)不相鄰的編碼序列組成，編碼序列之間被非編碼的序列隔開，這樣的基因被稱為斷裂基因。外顯子（Exon）：斷裂基因中的編碼部分，將包含在成熟的RNA中。內(nèi)含子（Intron）：斷裂基因中非編碼部分，在初始轉(zhuǎn)錄物加工成成熟RNA時(shí)被除去。5‘UTR3‘UTREIEIE目前十八頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)基因假基因(pseudogene)假基因與正?；蛴邢嗨频男蛄?，但是在編碼序列中往往含有移碼或終止密碼，從而使其無(wú)法表達(dá)。目前十九頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)mRNA信使RNA攜帶蛋白質(zhì)的序列信息，在翻譯過(guò)程中作為模板指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成。目前二十頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)原核生物物mRNA的特點(diǎn)多順?lè)醋樱簬追N不同的mRNA連在一起，相互之間由一段短的不編碼蛋白質(zhì)的間隔序列所隔開。這樣的一條mRNA鏈含有指導(dǎo)合成幾種蛋白質(zhì)的信息。目前二十一頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)真核生物物mRNA的特點(diǎn)條mRNARNA鏈單順?lè)醋?:一mRNA模板只含有一個(gè)翻譯起始點(diǎn)和一個(gè)終止點(diǎn)，因而一個(gè)基因編碼一條多肽鏈或或RNA。目前二十二頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)原核生物mRNA5'PPP3'

蛋白質(zhì)真核生物mRNA5'mG-PPP非翻譯區(qū)

AAA3'

蛋白質(zhì)核蛋白體結(jié)合位點(diǎn)起始密碼子終止密碼子編碼序列目前二十三頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)tRNA轉(zhuǎn)運(yùn)RNA在蛋白質(zhì)生物合成中攜帶氨基酸進(jìn)入核糖體，以mRNA為模板，合成蛋白質(zhì)。目前二十四頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)tRNA形狀像三葉草，其一端是攜帶氨基酸的部位（CCA末端），另一端有3個(gè)堿基。這3個(gè)堿基可以與mRNA上的密碼子互補(bǔ)配對(duì)，因而叫反密碼子。在蛋白質(zhì)合成過(guò)程中，攜帶特定氨基酸的tRNA憑借自身的反密碼子識(shí)別mRNA上的密碼子，吧所攜帶的氨基酸摻入到多肽鏈的一定位置上。反密碼子中除常見的4種堿基外，還有次黃嘌呤（I）；共有61種反密碼子。目前二十五頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)rRNA核糖體RNArRNA與核糖體蛋白質(zhì)共同構(gòu)成核糖體，是蛋白質(zhì)生物合成的場(chǎng)所。目前二十六頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)核酶（（ribozyme）具有催化活力的RNA剪切、破壞特定的RNA分子目前二十七頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)遺傳密碼mRNA密碼子目前二十八頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)密碼子的特點(diǎn)遺傳密碼子是三聯(lián)體密碼：一個(gè)密碼子由mRNA上相鄰的三個(gè)堿基組成密碼子具有通用性，不同生物密碼子基本相同。密碼子不重疊，在多核苷酸鏈上任何兩個(gè)相鄰的密碼子不共用任何核苷酸。（與重疊基因不同）密碼子具有簡(jiǎn)并性：除甲硫氨酸和色氨酸外，每一個(gè)氨基酸都至少有兩個(gè)密碼子。這樣可以使氨基酸序列不會(huì)因?yàn)槟骋粋€(gè)堿基被意外替換導(dǎo)致氨基酸錯(cuò)誤。密碼子閱讀和翻譯具有一定方向性：從5’端到3’端。起始密碼子：AUG（甲硫氨酸）；終止密碼子：UAA、UAG、UGA。終止密碼子沒(méi)有相應(yīng)的rRNA，只供釋放因子識(shí)別來(lái)實(shí)現(xiàn)翻譯的終止。目前二十九頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)遺傳密碼決定蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)基因遺傳信息決定蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)決定空間結(jié)構(gòu)目前三十頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)

基因組（genome)：細(xì)胞或生物體所含的一套完整的單倍體遺傳物質(zhì)。核基因組線粒體基因組目前三十一頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)病毒基因組病毒基因組結(jié)構(gòu)和功能的特點(diǎn)：DNA1.不同病毒基因組大小相差較大2.不同病毒的基因組核酸本質(zhì)不同

每種病毒只含有一種核酸：DNA病毒RNA病毒90%%3.基因組編碼序列大于于90目前三十二頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)4.單拷貝基因組（逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組有2個(gè)拷貝）5.基因有連續(xù)和間斷之分：病毒基因結(jié)構(gòu)特征往往是與其宿主細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)相類似。6.相關(guān)基因叢集7.基因重疊目前三十三頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)鏈RNA股RNA與mRNA

病毒基因組核酸的主要類型雙鏈鏈DNA：SV40病毒單鏈正股股DNA：M13噬菌體雙鏈RNA：T4噬菌體單鏈負(fù)股股RNA：?jiǎn)捂溦蒖NA：逆轉(zhuǎn)錄病毒 （＋）股：序列與mRNA相同與mRNA（－）股：序列與mRNA序列互補(bǔ)Back目前三十四頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)原核生物基因組的結(jié)構(gòu)和功能特點(diǎn)1.基因組相對(duì)較小，呈雙鏈環(huán)狀狀DNA分子，無(wú)染色體結(jié)構(gòu)，具有單個(gè)復(fù)制起始點(diǎn)。Ecoli基因組目前三十五頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)2.具有操縱子（operon）結(jié)構(gòu)：

幾個(gè)功能相關(guān)的基因串連在一 起，由一個(gè)啟動(dòng)子控制，構(gòu)成 一個(gè)轉(zhuǎn)錄單位，轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生一個(gè) 多順?lè)醋幼觤RNAmRNA。目前三十六頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)3.其它結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：rRNA

－－基因密度高，多為單拷貝；編碼的基因往往是多拷貝因(－－重復(fù)序列很少－－有編碼同工酶的同基因(分枝酸別構(gòu) 酶、乙酰乳酸合酶）－－不同原核生物物GC含量變化很大 （25%%-75%%）不等目前三十七頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)質(zhì)粒粒DNA(plasmid)的DNA細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)染色體以外的DNA序列。常2共價(jià)閉合環(huán)狀，能自主復(fù)制通常2-3Kb目前三十八頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)質(zhì)粒粒DNA的分類功能：R質(zhì)粒：抗藥性質(zhì)粒。F質(zhì)粒：決定細(xì)菌的性別。Col質(zhì)粒：使大腸桿菌能合成大腸桿菌素?？截悢?shù)：嚴(yán)謹(jǐn)型（stringentplasmid)：低拷貝，一個(gè)細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)只含一個(gè)或者幾個(gè)。松弛型(relaxedplasmid)：高拷貝，一個(gè)細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)含含1010－60個(gè)或者更多。目前三十九頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)基因真核生物基因組（一）染色體DNA的組成1.單一序列2.中度重復(fù)序列3.高度重復(fù)序列目前四十頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)基因單一序列單一序列

只有一個(gè)拷貝,約占人類基因組的50％。結(jié)構(gòu)基因主要存在于單一序列中。目前四十一頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)

基因中度重復(fù)序列

中度重復(fù)序列拷貝數(shù)為102-105,約占人類基因組的35％。在基因表達(dá)及調(diào)控中起重要作用。

tRNA、rRNA基因 編碼組蛋白、免疫球蛋白基因可能是基因調(diào)控相關(guān)序列Alu家族目前四十二頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)基因高度重復(fù)序列高度重復(fù)序列拷貝數(shù)為106-108,一般不能轉(zhuǎn)錄，但參與染色體結(jié)構(gòu)的維持、形成結(jié)構(gòu)基因間隔等。衛(wèi)星DNA：存在于非編碼區(qū)的串聯(lián)重復(fù)序列，在基因組中約占5％，如著絲粒、端粒等。反向重復(fù)序列：兩個(gè)順序列相同的拷貝在DNA鏈上呈反向排列。在基因組中約占5％，常見于基因調(diào)控區(qū)。目前四十三頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)真核基因組結(jié)構(gòu)特點(diǎn)一、結(jié)構(gòu)龐大復(fù)雜，基因數(shù)目多二、由染色體DNA和線粒體DNA組成三、基因組絕大多數(shù)為非編碼序列，到5總DNA50%

編碼序列只有不到5％。其中含有大量的重復(fù)序列占總DNA50%目前四十四頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)二、基因表達(dá)及其調(diào)控基因表達(dá)是DNA分子中蘊(yùn)藏的遺傳信息，通過(guò)轉(zhuǎn)錄、翻譯形成蛋白質(zhì)或轉(zhuǎn)錄形成RNA發(fā)揮功能的過(guò)程。轉(zhuǎn)錄翻譯目前四十五頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)轉(zhuǎn)錄前mRNAmRNA目前四十六頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)翻譯起始

：核糖體在mRNA上的組裝延伸

：氨基酸的轉(zhuǎn)運(yùn)、肽鏈的形成及沿mRNA移位終止

：多肽鏈的釋放目前四十七頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)前導(dǎo)區(qū)TATA框

基因基因表達(dá)調(diào)控

基因的調(diào)控是指對(duì)基因的轉(zhuǎn)錄與翻譯的調(diào)節(jié)機(jī)制。 基因表達(dá)調(diào)控在多層次

進(jìn)行，表現(xiàn)出時(shí)空性

。

外顯子：具有編碼意義 轉(zhuǎn)錄單位 內(nèi)含子：無(wú)編碼意義

結(jié)構(gòu)基因非編碼區(qū)尾部區(qū)調(diào)控區(qū)啟動(dòng)子增強(qiáng)子終止子CAAT框GC框：調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄活動(dòng)

mRNA裂解信號(hào) 回文結(jié)構(gòu)目前四十八頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)轉(zhuǎn)錄的調(diào)控

基因基因表達(dá)調(diào)控

順式作用元件

：能影響基因表達(dá)，但不編碼RNA和蛋白質(zhì)的DNA序列.包括啟動(dòng)子、增強(qiáng)子、終止子。

反式作用因子

：能識(shí)別和結(jié)合特定的順 式作用元件,并影響基因轉(zhuǎn)錄的一類蛋白質(zhì) 或RNA翻譯的調(diào)控目前四十九頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)基因基因表達(dá)調(diào)控1.轉(zhuǎn)錄前的調(diào)控2.轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控3.轉(zhuǎn)錄后的調(diào)控4.翻譯水平的調(diào)控55.翻譯后的調(diào)控目前五十頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)基因轉(zhuǎn)錄前的調(diào)控指基因被激活和抑制的機(jī)理。真核生物基因調(diào)控系統(tǒng)模型螺旋化程度低的常染色質(zhì)可進(jìn)行轉(zhuǎn)錄，螺旋化程度高的異染色質(zhì)不轉(zhuǎn)錄。組蛋白抑制DNA的轉(zhuǎn)錄。組蛋白轉(zhuǎn)位模型目前五十一頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)基因轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控RNA聚合酶與啟動(dòng)子

的結(jié)合對(duì)轉(zhuǎn)錄的啟動(dòng)十分關(guān)鍵。增強(qiáng)子

能加強(qiáng)啟動(dòng)效應(yīng)。終止子

控制著轉(zhuǎn)錄的有效終止。順式作用原件啟動(dòng)子(promoter)是與RNA聚合酶特異性結(jié)合而使轉(zhuǎn)錄開始的特定DNA序列，但本身并不轉(zhuǎn)錄，屬于基因上游對(duì)轉(zhuǎn)錄起調(diào)控作用的5’非編碼區(qū)。增強(qiáng)子(enhancer)是一段能增強(qiáng)啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄效率的特定DNA序列，可以提高基因轉(zhuǎn)錄的效率。具有遠(yuǎn)距離調(diào)控、無(wú)方向性等特點(diǎn)。終止子(terminator)是轉(zhuǎn)錄過(guò)程中，給予RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄終止信號(hào)的DNA序列。終止子分為兩類：一類是本體轉(zhuǎn)錄終止子，其基因序列上有一段富含GC的反向重復(fù)序列，其后跟隨一段富含AT的序列因而轉(zhuǎn)錄生成的mRNA中能形成發(fā)夾式結(jié)構(gòu)，后續(xù)一連串U；另一類是ρ-依賴轉(zhuǎn)錄終止子（ρ-因子為蛋白輔因子），其終止轉(zhuǎn)錄的作用需要ρ因子的協(xié)同。終止子與啟動(dòng)子不同，啟動(dòng)子由DNA序列來(lái)提供信號(hào)，但真正起終止作用的不是DNA序列本身，而是轉(zhuǎn)錄生成的RNA。目前五十二頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)遺傳密碼子（mRNA）起始密碼子mRNA分子中編碼多肽鏈第一個(gè)氨基酸的三聯(lián)體堿基序列；大部分情況下為AUG。終止密碼子mRNA分子中作為肽鏈合成終止信號(hào)的三聯(lián)體堿基序列；大部分情況下為UAA、UAG和UGA，它們不編碼氨基酸。目前五十三頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)區(qū)別啟動(dòng)子和終止子均為結(jié)構(gòu)基因非編碼區(qū)的DNA序列，且長(zhǎng)度遠(yuǎn)不止三個(gè)堿基，都與基因的轉(zhuǎn)錄過(guò)程相關(guān)聯(lián)。起始密碼子和終止密碼子均位于mRNA中，且均只含有三個(gè)堿基，都與mRNA的翻譯過(guò)程相關(guān)聯(lián)。目前五十四頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)基因轉(zhuǎn)錄后的調(diào)控變通性斷裂基因的表達(dá)、核內(nèi)異質(zhì)RNA的加工效率及mRNA的穩(wěn)定性決定了轉(zhuǎn)錄后過(guò)程的特點(diǎn)。目前五十五頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)基因翻譯水平的調(diào)控受核糖體的數(shù)量，mRNA的成熟度，起始因子(IF)，延長(zhǎng)因子(EF)，釋放因子(RF)以及各種酶的影響。目前五十六頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)基因翻譯后的調(diào)控翻譯初產(chǎn)物需經(jīng)加工、修飾才具有活性，翻譯后的調(diào)控主要是指蛋白質(zhì)的加工和修飾：①剪切②化學(xué)基團(tuán)的修飾③酶原的激活目前五十七頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)基因基因突變(genemutation)基因突變

是指基因的核苷酸序列發(fā)生改變，而造成基因表達(dá)產(chǎn)物的變化，從而引起表型的改變。生殖細(xì)胞突變發(fā)生在生殖細(xì)胞中的基因突變，可通過(guò)有性生殖遺傳給后代，并存在于子代的每個(gè)細(xì)胞中。

體細(xì)胞突變

發(fā)生在體細(xì)胞中的基因突變，不會(huì)傳遞給子代，但可傳遞給由突變細(xì)胞分裂所形成的子細(xì)胞，在局部形成突變細(xì)胞群，它可能成為病變甚至癌變的基礎(chǔ)。目前五十八頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)基因基因突變的類型及分子機(jī)制1.堿基替換DNA分子中的一個(gè)堿基對(duì)被另一個(gè)堿基對(duì)所替代，也稱為點(diǎn)突變(pointmutation)。轉(zhuǎn)換(transition)指一種嘌呤被另一種嘌呤所替代或一種嘧啶被另一種嘧啶所替代。顛換(transversion)是嘌呤和嘧啶堿基之間的替代。目前五十九頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)基因2.堿基的插入與缺失移碼突變(frame-shiftmutation)某些化合物與DNA結(jié)合后，可使DNA分子插入或缺失一個(gè)或幾個(gè)堿基對(duì)，使該堿基對(duì)以下的讀碼順序發(fā)生移動(dòng)，從而改變其遺傳信息。目前六十頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)基因3.動(dòng)態(tài)突變又稱不穩(wěn)定三核苷酸重復(fù)序列突變?；虻木幋a區(qū)或非編碼區(qū)的三核苷酸重復(fù)序列，如(CAG)拷貝數(shù)變化，超過(guò)了正常范圍。目前六十一頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)基因基因突變的效應(yīng)基因突變可造成蛋白質(zhì)（包括酶蛋白）結(jié)構(gòu)改變或活性降低，甚至缺乏，導(dǎo)致各種遺傳性疾病的發(fā)生。（1）引起細(xì)胞中結(jié)構(gòu)蛋白的改變分子?。夯蛲粚?dǎo)致蛋白質(zhì)數(shù)量或結(jié)構(gòu)的異常而產(chǎn)生的疾病稱為分子病。如鐮刀狀紅細(xì)胞貧血癥（2）引起遺傳性代謝病遺傳性代謝?。ㄟz傳性酶?。夯蛲蛔儗?dǎo)致酶蛋白結(jié)構(gòu)或數(shù)量的異常而引起的疾病稱為遺傳性代謝病。如苯丙酮尿癥、白化病等。目前六十二頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)基因（3）與腫瘤形成密切相關(guān)目前認(rèn)為與癌癥發(fā)生直接相關(guān)的基因有原癌基因

(oncogene)及抑癌基因

(tumorsuppressorgenes)?；蛲蛔円环矫婵墒乖┗蚣せ盍硪环矫婵墒挂职┗蛉笔Щ蚴Щ?，這兩方面的變化都可導(dǎo)致細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化。目前六十三頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)基因組學(xué)：研究生物系統(tǒng)的基因結(jié)構(gòu)組成，即DNA的序列及其表達(dá)。轉(zhuǎn)錄組學(xué)：研究生物系統(tǒng)中所含mRNA的類型與拷貝數(shù)。蛋白組學(xué)：研究由生物系統(tǒng)表達(dá)的蛋白質(zhì)及由外部刺激引起的差異。代謝組學(xué)：研究生物體系（細(xì)胞，組織或生物體）受外部刺激所產(chǎn)生的所有代謝產(chǎn)物的變化，是基因組學(xué)和蛋白組學(xué)的延伸。目前六十四頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)轉(zhuǎn)錄組（transcriptome）轉(zhuǎn)錄組（transcriptome）：某一生理?xiàng)l件下，一個(gè)活細(xì)胞所能轉(zhuǎn)錄出來(lái)的所有RNA的總稱，包括mRNA，rRNA，tRNA及非編碼RNA；狹義上指所有mRNA。目前六十五頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)轉(zhuǎn)錄組學(xué)(transcriptomics)

轉(zhuǎn)錄組學(xué)時(shí)一門在整體水平上研究細(xì)胞中基因轉(zhuǎn)錄的情況及轉(zhuǎn)錄調(diào)控規(guī)律的學(xué)科，即從RNA水平研究基因表達(dá)的情況。目前六十六頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)

轉(zhuǎn)錄組學(xué)（transcriptomics）基因表達(dá)：基因攜帶的遺傳信息轉(zhuǎn)變?yōu)榭杀鎰e的表型的整翻譯

轉(zhuǎn)錄個(gè)過(guò)程：DNAmRNA蛋白質(zhì)以DNA為模板合成RNA的轉(zhuǎn)錄過(guò)程是基因表達(dá)的第一步，也是基因表達(dá)調(diào)控的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。與基因組不同的是，轉(zhuǎn)錄組的定義包含了時(shí)間和空間的限定。同一細(xì)胞在不同生長(zhǎng)時(shí)期和生長(zhǎng)環(huán)境下，其基因表達(dá)情況是不完全相同的。目前六十七頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)轉(zhuǎn)錄組學(xué)（transcriptomics）人類基因組計(jì)劃完成了對(duì)基因組的測(cè)序工作。人類基因組包含30億個(gè)堿基對(duì)，其中大約只有5萬(wàn)個(gè)基因轉(zhuǎn)錄成mRNA，轉(zhuǎn)錄后的mRNA能被翻譯生成蛋白質(zhì)的也只占轉(zhuǎn)錄組的40%左右。同一組織表達(dá)幾乎相同的一套基因以區(qū)別于其他組織，如：腦組織只表達(dá)全部基因中的30%左右而顯示出組織的特異性。目前六十八頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)蛋白質(zhì)組（proteome）蛋白質(zhì)組（proteome）：PROTEins+genOME，意思是Proteinsexpressedbyagenome（基因組表達(dá)的所有蛋白質(zhì)），即包括一種細(xì)胞乃至一種生物所表達(dá)的全部蛋白質(zhì)。目前六十九頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)蛋白質(zhì)組學(xué)(proteomics)

研究蛋白質(zhì)組的一門新興科學(xué)，其目的是從整體的角度分析細(xì)胞內(nèi)動(dòng)態(tài)變化的蛋白質(zhì)組成、表達(dá)水平與修飾狀態(tài)，了解蛋白質(zhì)組成員間的相互作用關(guān)系，了解蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系，以及基因結(jié)構(gòu)與蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)功能的關(guān)系，揭示蛋白質(zhì)功能與細(xì)胞生命活動(dòng)規(guī)律。目前七十頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)轉(zhuǎn)錄組學(xué)和蛋白組學(xué)的局限性：轉(zhuǎn)錄組學(xué)或蛋白組學(xué)上的變化不總能反映基因變更時(shí)在生化層面的表現(xiàn)型的改變?，F(xiàn)代技術(shù)對(duì)于轉(zhuǎn)錄組學(xué)和蛋白組學(xué)中mRNA以及蛋白質(zhì)

的識(shí)別是通過(guò)已知數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行序列比對(duì)的來(lái)實(shí)現(xiàn)的，因此識(shí)別和對(duì)比過(guò)程是間接

的。如果在缺乏某mRNA或蛋白質(zhì)的數(shù)據(jù)信息時(shí)，以上的兩種組學(xué)就只能為人們提供少量的信息。目前七十一頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)代謝組和代謝組學(xué)代謝組(metabolome)：基因組的下游產(chǎn)物也是最終產(chǎn)物，是一個(gè)細(xì)胞、組織或器官中所有新陳代謝產(chǎn)物的集合,包含一系列不同化學(xué)型的分子,比如肽、碳水化合物、脂類、核酸以及異源物質(zhì)的催化產(chǎn)物等。代謝組學(xué)(Metabonomics/Metabolomics)：通過(guò)考察生物體系（細(xì)胞、組織或生物體）受刺激或擾動(dòng)后（如將某個(gè)特定的基因進(jìn)行修飾），其代謝產(chǎn)物的變化，來(lái)研究生物體系的一門科學(xué)。目前七十二頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)代謝組學(xué)(學(xué)(metabonomics)與轉(zhuǎn)錄組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)比較，代謝組學(xué)專門研究生物體系受外部刺激后所產(chǎn)生的所有代謝產(chǎn)物的變化，能夠更準(zhǔn)確地反映生物體系的狀態(tài)，且位于系統(tǒng)生物學(xué)的最下游，是生物體系整體功能或狀態(tài)最終結(jié)果的表現(xiàn)。因此有人認(rèn)為，“基因組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)告訴你什么可能會(huì)發(fā)生，而代謝組學(xué)則告訴你什么確實(shí)發(fā)生了。

”（BillLasley,UCDavis）目前七十三頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)代謝組學(xué)(學(xué)(metabonomics)代謝組學(xué)研究的目的是定量分析一個(gè)生物系統(tǒng)內(nèi)所有代謝物的含量。代謝組學(xué)分析可以指示細(xì)胞、組織或器官的生化狀態(tài),協(xié)助闡釋新基因或未知功能基因的功能,并且可以揭示生物各代謝網(wǎng)絡(luò)間的關(guān)聯(lián)性,幫助人們更系統(tǒng)地認(rèn)識(shí)生物體。目前七十四頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)代謝組學(xué)的優(yōu)點(diǎn)：1）基因和蛋白表達(dá)的有效的微小變化會(huì)在代謝物上得到放大，從而使檢測(cè)更容易；2）代謝組學(xué)的技術(shù)不需建立全基因組測(cè)序及大量表達(dá)序列標(biāo)簽（EST）的數(shù)據(jù)庫(kù)；3）代謝物的種類要遠(yuǎn)小

于基因和蛋白的數(shù)目，每 個(gè)生物體中代謝產(chǎn)物大約在103數(shù)量級(jí)，細(xì)菌基 因組中幾千個(gè)基因；4）因?yàn)榇x產(chǎn)物在各個(gè)生物體系中都是類似的，所以代謝組學(xué)研究中采用的技術(shù)更通用；目前七十五頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)基因工程也稱基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)一、基因工程的定義 按照人們的意愿，把一種生物的某種基因提取出來(lái)，

供體生物目的基因加以修飾改造，

剪切和拼接，建構(gòu)重組DNA分子然后放到另一種生物的細(xì)胞里，

受體細(xì)胞定向地改造生物的遺傳性狀。目前七十六頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)二、基因工程的理論依據(jù)

DNA是絕大多數(shù)生物的遺傳物質(zhì)，不同生物的

DNA的基本單位和結(jié)構(gòu)相同 中心法則：DNARNA蛋白質(zhì)翻譯復(fù)制

轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄復(fù)制基因是遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的基本單位各種生物共用一套遺傳密碼目前七十七頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)三、DNA重組技術(shù)的基本工具1、限制性核酸內(nèi)切酶——分子手術(shù)刀來(lái)源：主要從原核生物中分離提純特點(diǎn)：高度的專一性多樣性識(shí)別并切割特定的某種核苷酸序列已經(jīng)分離出4000種目前七十八頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)作用：粘性末端連接連接效率高

相同酶切末端平端連接連接效率低識(shí)別雙鏈DNA分子上某種特定的核苷酸序列，

含有4～8個(gè)核苷酸

中心軸線兩側(cè)的堿基反向?qū)ΨQ重復(fù)排列

并使每條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的 磷酸二酯鍵斷開 平切：如SmaⅠ酶，沿中軸線處切開， 形成平末端，連接效率低

錯(cuò)位切：如EcoRⅠ酶，從中軸線兩側(cè)切開， 形成黏性末端，連接效率高目前七十九頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)2、DNA連接酶——“分子縫合針” 將雙鏈DNA分子的兩個(gè)片段連接起來(lái)——通過(guò)形成磷酸二酯鍵E.coliDNA連接酶：連接黏性末端T4DNA連接酶：連接黏性末端或平末端DNA連接酶與DNA聚合酶功能的區(qū)別：DNA連接酶催化兩個(gè)DNA片段之間形成磷酸二酯鍵而連接起來(lái)DNA聚合酶催化游離的脫氧核苷酸與DNA片段之間形成磷酸二酯鍵而連接起來(lái)目前八十頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)3、基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體——“分子運(yùn)輸車”作用：將目的基因（外源基因）送入受體細(xì)胞條件：有一個(gè)或多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)在受體細(xì)胞中能自我復(fù)制，或者能整合到染色體DNA上，隨染色體DNA同步復(fù)制帶有標(biāo)記基因，便于甄別和篩選安全，對(duì)受體細(xì)胞無(wú)害大小合適，方便操作種類：質(zhì)粒（經(jīng)人工改造，常用）、λ噬菌體衍生物、動(dòng)植物病毒、農(nóng)桿菌等目前八十一頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)核酸包括脫氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）;

脫氧核糖核酸（DNA）包括線狀基因組DNA和環(huán)狀

DNA（質(zhì)粒DNA）。目前八十二頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)

質(zhì)粒DNA

質(zhì)粒(Plasmid)是一種染色體外的穩(wěn)定遺傳因子，大小從1-200kb不等，為雙鏈、閉環(huán)的DNA分子，并以超螺旋狀態(tài)存在于宿主細(xì)胞中。 質(zhì)粒具有自主復(fù)制和轉(zhuǎn)錄能力，能在子基因組DNA質(zhì)粒DNA代細(xì)胞中保持恒定的拷貝數(shù)，并表達(dá)所攜帶的遺傳信息。目前八十三頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)四、基因工程的基本操作程序1、目的基因的獲?、艔幕蚪M文庫(kù)中獲取目的基因?qū)⒛成锏幕蚪M進(jìn)行切割，獲得一批長(zhǎng)度為15—20kb的DNA片段限制酶將上述DNA片段分別與運(yùn)載體結(jié)合，再分別導(dǎo)入受體菌群體的各細(xì)胞中儲(chǔ)存、復(fù)制——構(gòu)建成該生物的基因組文庫(kù)需要時(shí)通過(guò)一定方法從基因組文庫(kù)中獲取目的基因目前八十四頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)⑵利用反轉(zhuǎn)錄法獲取目的基因 提取某生物細(xì)胞中的mRNA

反轉(zhuǎn)錄酶

RNA—DNA雜交分子

RNA酶降解RNA鏈

單鏈DNA（cDNA）

DNA聚合酶

雙鏈DNA

導(dǎo)入受體菌細(xì)胞中儲(chǔ)存、復(fù)制，建構(gòu)cDNA文庫(kù)PCR技術(shù)擴(kuò)增

一定方法獲取目的基因目前八十五頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)⑶直接提取后利用PCR技術(shù)擴(kuò)增而獲取目的基因以探針從生物細(xì)胞中提取目的基因堿基序列已知利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因⑷人工合成目的基因測(cè)定某蛋白質(zhì)中氨基酸的排列順序利用密碼子表推測(cè)mRNA中堿基排列順序利用堿基互補(bǔ)配對(duì)原則推測(cè)DNA反義鏈的堿基排列順序化學(xué)合成DNA合成儀合成雙鏈DNA（目的基因）目前八十六頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)真核生物的基因結(jié)構(gòu)非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)外顯子內(nèi)含子啟動(dòng)子終止子

轉(zhuǎn)錄初級(jí)mRNA

加工 成熟mRNA

翻譯 蛋白質(zhì)目前八十七頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)PCR技術(shù)(polymerasechainreaction)中文名稱：聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)1、PCR原理：

變性溫度下，DNA雙鏈變性雙螺旋解開成單鏈DNA，在退火溫度中人工合成的特異引物根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則與單鏈DNAA特異結(jié)合，然后在DNA聚合酶的作用下，在延伸溫度下不同的脫氧核苷酸按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則在引物的引導(dǎo)下合成與模板DNA互補(bǔ)的新鏈，實(shí)現(xiàn)DNA的擴(kuò)增。目前八十八頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)

PCR技術(shù)

原理：DNA的半保留復(fù)制反應(yīng)系統(tǒng)： 微量DNA樣品——模板

DNA聚合酶（Tag聚合酶，具有熱穩(wěn)定性）4種游離的脫氧核糖核苷酸（過(guò)量）

——dAMP、dTMP、dGMP、dCMP引物——人工合成的含有20個(gè)堿基的核苷酸序列（過(guò)量）目前八十九頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)反應(yīng)過(guò)程 樣本DNADNA聚合酶引物提高溫度（90～95℃）,DNA變性 退火（55～60℃）,與引物互補(bǔ)

循環(huán) 進(jìn)行DNA數(shù)量呈指數(shù)方式增加

在適宜溫度下（70～75℃）形 成DNA新鏈目前九十頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)2、PCR反應(yīng)過(guò)程：變性：DNA雙鏈變?yōu)閱捂?；退火：引物與模板結(jié)合；延伸：合成互補(bǔ)鏈；上述過(guò)程通過(guò)PCR儀的程序設(shè)計(jì)及自動(dòng)運(yùn)作完成。目前九十一頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)PCR技術(shù)與體內(nèi)DNA復(fù)制的區(qū)別：1.PCR不需要DNA解旋酶；體內(nèi)DNA復(fù)制需要；

2.PCR需要耐熱的DNA聚合酶（常用TaqDNA聚合酶），而生物體內(nèi)的聚合酶在高溫時(shí)會(huì)變性；

33.PCR一般可以經(jīng)歷三十多次循環(huán)，短時(shí)間內(nèi)形成大量DNA片段；而生物體內(nèi)DNA復(fù)制需要生物體自身的復(fù)制，形成整個(gè)DNA分子。目前九十二頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)

（1）特異PCR

擴(kuò)增所用的引物是特異的，擴(kuò)出的產(chǎn)物也是特定的。FR（2）反轉(zhuǎn)錄PCR（RT-PCR） 是一類以mRNA為最初模板的基因的擴(kuò)增。5`CAPAAAAAAAAAATTTTTTTTTTT目前九十三頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)（3）反向PCR： 根據(jù)已知序列擴(kuò)增兩側(cè)序列的方法。未知序列酶切酶切引物1引物2

已知序列未知序列此PCR操作過(guò)程： 酶切基因組DNA

連接環(huán)化目的DNA

用引物1和引物2組合擴(kuò)增出側(cè)翼序列目前九十四頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)電泳目的：對(duì)核酸分子進(jìn)行分離和檢測(cè)影響電泳遷移率的因素分子的大?。盒t快帶電荷數(shù)：多則快（不同DNA分子片段電荷大致相等）不同的DNA片段的電泳遷移率主要取決于分子的大小!目前九十五頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)凝膠濃度:

濃度大，篩孔小，適合小分子電泳； 濃度小

，篩孔大，適合大分子電泳

?凝膠分辨DNA的能力：瓊脂糖聚丙烯酰胺凝膠濃度分辨范圍(kb)濃度分辨范圍(bbp)0.3%5-600.6%1-200.7%0.8-100.9%0.5-71.2%0.4-63.51000-2000 590-50082001525-1601.5%0.2-3206-100原來(lái)如 此！凝膠濃度的選擇：取決于待檢測(cè)的DNA的大小目前九十六頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建使目的基因穩(wěn)定存在并遺傳一個(gè)基因表達(dá)載體包括：（最核心步驟）使目的基因表達(dá)和發(fā)揮作用啟動(dòng)子——RNA聚合酶的識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn)，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄目的基因——使受體生物表現(xiàn)出更符合人類需求的性狀終止子——結(jié)束轉(zhuǎn)錄標(biāo)記基因——鑒別篩選出含目的基因的受體細(xì)胞其他如復(fù)制原點(diǎn)、運(yùn)載體上原有的基因目前九十七頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)DNA重組技術(shù)基本步驟?1.分離獲得目的基因；

2.在體外進(jìn)行DNA重組，將外源DNA連接到能自我復(fù)制又帶有選擇標(biāo)記的載體上；3.將重組DNA轉(zhuǎn)移入受體細(xì)胞；44.篩選出含有目的DNA的受體細(xì)胞克?。荒壳熬攀隧?yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)目的基因制備和載體系統(tǒng)

目的基因來(lái)源：基因組DNA分離、化學(xué)合成、PCR擴(kuò)增、cDNA文庫(kù)及DNA文庫(kù)中制得。載體：質(zhì)粒、λ噬菌體、柯氏質(zhì)粒、YAC載體等工具酶：限制性內(nèi)切酶、連接酶、DNA聚合酶等目前九十九頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)一、DNA重組技術(shù)相關(guān)概念克隆(clone)來(lái)自于同一始祖的一群相同分子、細(xì)菌、細(xì)胞或動(dòng)物（常被成為副本或拷貝）?？寺』?cloning)獲取大量單一拷貝的過(guò)程，也稱無(wú)性繁殖。目前一百頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)DNA克隆(DNAcloning)

應(yīng)用酶學(xué)的方法，在體外將各種來(lái)源的遺傳物質(zhì)（同源的或異源的、原核的或真核的、天然的或人工的DNA）與載體DNA接合成一具有自我復(fù)制能力的DNA分子。繼而通過(guò)轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞，篩選出含有目的基因的轉(zhuǎn)化子細(xì)胞。

再進(jìn)行擴(kuò)增提取獲得大量同一DNA分子，又稱基因克隆(genecloning)或分子克隆(molecularcloing)。目前一百零一頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)

“克隆”某一基因或DNA片段過(guò)程中，將外源DNA插入載體分子所形成的復(fù)制子是雜合分子－嵌合DNA，所以DNA克隆又稱重組DNA(recombinantDNA)。

實(shí)現(xiàn)DNA克隆所用的方法及相關(guān)的工作稱DNA重組技術(shù)(recombinantDNAtechnology)，又稱基因工程(geneticengineering)。目前一百零二頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)二、DNA重組技術(shù)基本程序外源DNA的獲取克隆載體的選擇與構(gòu)建目的基因與載體的連接DNA導(dǎo)入受體菌重組體的篩選克隆基因的表達(dá)目前一百零三頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)三、DNA重組的基本步驟+

連接載體目的基因

+

轉(zhuǎn)化、篩選和鑒定陽(yáng)性克隆

克隆基因表達(dá)

含重組子的陽(yáng)性克隆分、切、接、轉(zhuǎn)、篩目前一百零四頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)目的基因的載體連接--接，重組DNA技術(shù)核心目前一百零五頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)

二、外源DNA片段和載體的連接（一）粘性末端連接法適用于插入片段和質(zhì)粒載體具有相同的粘 性末端單酶

目的基因

用同一種限制性內(nèi)切酶酶切酶切

DNA連接酶重組質(zhì)粒

缺陷

高背景(自身環(huán)化)雙向(正、反)插入 多拷貝插入目前一百零六頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)（二）平頭末端連接法

質(zhì)粒

產(chǎn)生平末端的

內(nèi)切酶

核酸酶S1

目的基因

DNA連接酶

本法適用于在質(zhì)粒 和目的基因上沒(méi)有相同的酶切位點(diǎn)！重組質(zhì)粒目前一百零七頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)（三）人工接頭法目的基因++接頭(linker)質(zhì)粒

DNA連接酶

用同一種限制性內(nèi)切酶酶切

DNA連接酶

本法適用于在質(zhì)粒和 目的基因上沒(méi)有相同的重組質(zhì)粒酶切位點(diǎn)目前一百零八頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)（四）同聚物接尾法

質(zhì)粒

內(nèi)切酶末端轉(zhuǎn)移酶

+dGTP

目的基因末端轉(zhuǎn)移酶

+dCTPDNA連接酶重組質(zhì)粒

本法適用于在質(zhì)粒和目的基因上沒(méi)有相同的酶切位點(diǎn)連接反應(yīng)：16℃，16h如何實(shí)現(xiàn)？目前一百零九頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)

三、重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞----轉(zhuǎn)宿主細(xì)胞：被導(dǎo)入重組分子的細(xì)胞

原核細(xì)胞：大腸桿菌、鏈霉菌宿主細(xì)胞及枯草桿菌真核細(xì)胞：酵母、昆蟲細(xì)胞及哺乳動(dòng)物細(xì)胞目前一百一十頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)大腸桿菌的轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化原意：細(xì)菌細(xì)胞的生物學(xué)特性由于受納了外源DNA而發(fā)生可遺傳的改變。轉(zhuǎn)化(transformation)質(zhì)粒DNA或以質(zhì)粒為載體構(gòu)建的重組DNA導(dǎo)入細(xì)菌的過(guò)程轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵：感受態(tài)細(xì)菌的制備目前一百一十一頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)大腸桿菌2DNA化學(xué)轉(zhuǎn)化法感受態(tài)細(xì)胞----competentcell

用理化方法人工誘導(dǎo)細(xì)胞，使 之處于易于吸收和容納外源DNA

分子的狀態(tài)，此時(shí)的細(xì)菌稱～。

轉(zhuǎn)化原理及轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)染程序

CaCl0～4℃膨脹成球形

附著細(xì)胞表面原理

42℃

90s

熱休克細(xì)胞吸收抗DNA酶的羥基-鈣磷酸復(fù)合物

復(fù)蘇

分裂增殖目前一百一十二頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)細(xì)胞電擊：重組質(zhì)粒的導(dǎo)入方法P

化學(xué)法：需感受態(tài)細(xì) 胞轉(zhuǎn)化程序法：不需感受態(tài)

對(duì)數(shù)生長(zhǎng)CaCl

感受態(tài)細(xì)菌(4℃保存24h)

期的細(xì)菌02～4℃重組質(zhì)粒DNA+細(xì)菌

4℃熱休克30min(42℃,90s)普通培養(yǎng)基溫育涂布于含抗生素37℃的培養(yǎng)基平板倒置培養(yǎng)單菌落目前一百一十三頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)（一）抗生素平板篩選----實(shí)為插入失活法Kanr

KansAmpr

Ampps

Tetr

Tets非轉(zhuǎn)化子陽(yáng)性重組子自身環(huán)化載體未酶解完全載體非目的基因插入載體單抗生素篩選 轉(zhuǎn)化子

僅作為初步篩選目前一百一十四頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)(二）酶切電泳鑒定快速小量提取質(zhì)粒DNA瓊脂糖凝膠電泳跑得慢--重組質(zhì)粒跑得快--空載體目前一百一十五頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)分離基因

克隆到某中間載體 轉(zhuǎn)化大腸桿菌 提取質(zhì)粒 限制酶切/連接克隆到植物表達(dá)載體

pKS,pBR332,pGEM-TJM109,TOP10…HindIII/EcroI…T4ligase pBI121,pCAM1001…基因槍轉(zhuǎn)化

轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌LBA4404,EHA目前一百一十六頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)裸子植物

3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞（1）將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用

農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌提取

Ti質(zhì)粒目的基因

構(gòu)建表達(dá)載體轉(zhuǎn)入感染雙子葉植物 農(nóng)桿菌目的基因整合目的基因插入受體細(xì)胞染色體DNA目的基因隨染色體DNA復(fù)制并表達(dá)目前一百一十七頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)基因槍法（適用于單子葉植物）目的基因

花粉管法 柱頭子房壁 胚珠簡(jiǎn)便經(jīng)濟(jì)

萌發(fā)的花粉粒 花粉管 精核 卵細(xì)胞 極核目前一百一十八頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)（2）將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞——顯微注射技術(shù)提純表達(dá)載體

顯微注射儀注射受體動(dòng)物受精卵移植雌性動(dòng)物輸卵管或子宮內(nèi)發(fā)育具有新性狀的動(dòng)物（轉(zhuǎn)基因動(dòng)物）目前一百一十九頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)（3）將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞 表達(dá)載體DNACa2+處理常態(tài)細(xì)菌感受態(tài)細(xì)胞

混合

被轉(zhuǎn)化的細(xì)菌細(xì)菌吸收（含目的基因）目前一百二十頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)4、目的基因的檢測(cè)與鑒定檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因——分子雜交技術(shù)以被標(biāo)記的目的基因作探針，與轉(zhuǎn)基因生物基因組DNA雜交，觀察是否出現(xiàn)雜交帶以被標(biāo)記的目的基因作探針，檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA——分子雜交技術(shù)與轉(zhuǎn)基因生物提取出的mRNA雜交，觀察是否出現(xiàn)雜交帶目前一百二十一頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)

——抗原—抗體雜交技術(shù) 目的基因表達(dá)的蛋白質(zhì)（抗原）

刺激

產(chǎn)生相應(yīng)抗體從轉(zhuǎn)基因生物體內(nèi)提取蛋白質(zhì)抗原—抗體雜交

觀察是否出現(xiàn)雜交帶檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的性狀 觀察或測(cè)定是否出現(xiàn)目的基因所決定的性狀

抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等目前一百二十二頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)第三章轉(zhuǎn)基因技術(shù)在食品生產(chǎn)和加工中應(yīng)用1、生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因食品利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)得到的新型生物叫轉(zhuǎn)基因生物，又叫遺傳飾變生物（geneticallymodifiedorganism，GMO），即用遺傳工程的方法將一種生物的基因轉(zhuǎn)入到另一生物體內(nèi)，從而是接受外來(lái)基因的生物獲得它本身所不具有的新特性。

含有轉(zhuǎn)基因生物成分或者利用轉(zhuǎn)基因生物（植物、動(dòng)物、微生物）生產(chǎn)加工的食品，稱為轉(zhuǎn)基因食品（GMF），包括食品原料及食品添加劑。目前一百二十三頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)1983年世界首次報(bào)道轉(zhuǎn)基因煙草和馬鈴薯。1989年首例轉(zhuǎn)基因工程菌生產(chǎn)的凝乳酶獲批在奶酪工業(yè)中應(yīng)用（瑞士），1994年首批轉(zhuǎn)基因植物獲準(zhǔn)進(jìn)行商品化生產(chǎn)（美國(guó)），如延熟番茄，抗除草劑棉花等。 轉(zhuǎn)基因作物主要是大豆、玉米、棉花、油菜，其次是西紅柿、馬鈴薯、甜椒、煙草、南瓜等。主要種植國(guó)：美國(guó)、阿根廷、加拿大和中國(guó)。目前一百二十四頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)轉(zhuǎn)基因作物優(yōu)點(diǎn)： ①解決食物短缺。 ②增加食品品種。 ③改進(jìn)營(yíng)養(yǎng)成分。④增強(qiáng)作物抗病蟲害、抗逆性能。⑤延長(zhǎng)食品貨架期等。目前一百二十五頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)2、改造食品微生物（1）改良微生物菌種。如面包酵母轉(zhuǎn)入有關(guān)酶基因后，其麥芽糖透性酶和麥芽糖酶含量大大提高，生產(chǎn)出面包CO2多，膨發(fā)性好，松軟可口。將大麥中α-淀粉酶轉(zhuǎn)入啤酒酵母，這種酵母可直接利用淀粉進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)啤酒。（2）生產(chǎn)酶制劑。如凝乳酶的生產(chǎn)，把小牛胃的凝乳酶基因轉(zhuǎn)移到細(xì)菌或真核生物中，再培養(yǎng)生產(chǎn)出凝乳酶。1990年美國(guó)FDA已批準(zhǔn)在干酪生產(chǎn)中使用這種凝乳酶。目前一百二十六頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)3、改善食品原料的品質(zhì)改良動(dòng)物、植物食品原料品質(zhì)，改善園藝產(chǎn)品采后品質(zhì)。4、改進(jìn)食品生產(chǎn)工藝5、生產(chǎn)食品添加劑（如氨基酸）和功能性食品目前一百二十七頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)一、轉(zhuǎn)基因技術(shù)對(duì)生態(tài)環(huán)境可能造成的影響1、基因轉(zhuǎn)移問(wèn)題。

植物間傳粉也可能將基因轉(zhuǎn)移給環(huán)境中的野生近緣種，也可能將基因轉(zhuǎn)移給同一物種的其它植物。2、雜草化問(wèn)題。

轉(zhuǎn)基因植物本身可能演化為雜草?？赡軐⒁恍┛共∠x害基因、抗逆基因轉(zhuǎn)移給野生近緣種或雜草，產(chǎn)生“超級(jí)雜草”。目前一百二十八頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)3、生物多樣性問(wèn)題。

轉(zhuǎn)基因植物的新性狀不僅對(duì)目標(biāo)生物種群大小、進(jìn)化速度產(chǎn)生直接影響，也可對(duì)非目標(biāo)生物產(chǎn)生直接或間接影響。4、抗病毒轉(zhuǎn)基因問(wèn)題。轉(zhuǎn)入的病毒基因可能與侵染該植物的其它病毒進(jìn)行重組，產(chǎn)生出新的病毒。5、毒性和過(guò)敏問(wèn)題。

大多數(shù)轉(zhuǎn)基因生物作為人類的食品或動(dòng)物飼料，如轉(zhuǎn)入的外源基因增加了受體作物的毒性或其產(chǎn)物是人類的過(guò)敏源，那將引起中毒和過(guò)敏的可能性。目前一百二十九頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)1、轉(zhuǎn)基因食品外源基因的食用安全性外源基因含兩大類：①目的基因：人們期望宿主生物獲得的某一或某些性狀的遺傳信息載體。

②標(biāo)記基因：在遺傳轉(zhuǎn)化過(guò)程中，篩選和鑒定轉(zhuǎn)化細(xì)胞、組織時(shí)，需要一些起幫助作用的基因，這類外源基因叫標(biāo)記基因。有時(shí)標(biāo)記基因本身也就是目的基因，如除草劑抗性基因。目前一百三十頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)選擇標(biāo)記基因：如抗生素抗性基因，除草劑抗性基因等。報(bào)告基因：如黃類素酶、氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶，綠色熒光蛋白酶等。轉(zhuǎn)基因食品外源基因食用安全性：①有無(wú)直接毒性；②是否會(huì)水平轉(zhuǎn)移。（1）有無(wú)直接毒性①目前轉(zhuǎn)基因食品所用外源基其組成與普通DNA并無(wú)差異；②轉(zhuǎn)基因食品中外源基因的含量很少。目前未發(fā)現(xiàn)外源基因的食用有直接毒性。目前一百三十一頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)2、未預(yù)料的基因多效性（genepolypheny）

由于外來(lái)基因的插入，宿主原遺傳信息被打亂，可能發(fā)生一些意外效應(yīng)。但目前尚無(wú)這方面的報(bào)道。（1）位置效應(yīng)。外源基因插入位置，宿主某些基因可能被破壞，可能誘發(fā)某些沉默基因（silentgene）的表達(dá)。（2）干擾代謝作用。插入基因的產(chǎn)物可能與宿主代謝途徑中的一些酶相互作用，干擾代謝途徑，使某些代謝物在宿主體內(nèi)積累或消失。（3）改變食品營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)。增加或降低。（4）潛在毒性。外源基因可能提高天然植物毒素基因的表達(dá)，如土豆茄堿、豆類蛋白酶抑制劑基因等目前一百三十二頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)3、轉(zhuǎn)基因食品中外源基因編碼蛋白的安全性外源基因編碼蛋白有無(wú)直接毒性、過(guò)敏性和抗藥性。（1）外源基因編碼蛋白有無(wú)直接毒性。

①據(jù)外源基因編碼蛋白的化學(xué)組成，將其與已知毒性蛋白的化學(xué)組成進(jìn)行同源性比較，判斷其毒性。 ②采用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法，評(píng)判外源基因編碼蛋白的毒性情況。目前一百三十三頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)（2）外源基因編碼蛋白有無(wú)過(guò)敏性。過(guò)敏蛋白特點(diǎn)：①具有T細(xì)胞和B細(xì)胞的識(shí)別區(qū)。②可產(chǎn)生專一的免疫球蛋白（IgE）抗體。從以下幾方面判斷外源基因編碼蛋白有無(wú)過(guò)敏性：①外源基因是否編碼過(guò)敏蛋白。②兩類蛋白（外源基因編碼蛋白、過(guò)敏蛋白）的氨基酸序列是否有免疫學(xué)上的明顯內(nèi)源性。 ③外源基因編碼蛋白屬某類蛋白成員，此類蛋白家庭的某些成員是否過(guò)敏蛋白。目前一百三十四頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)（3）外源基因編碼蛋白有無(wú)抗藥性。

目前轉(zhuǎn)基因植物食品中常用的標(biāo)記基因是抗生素抗性基因，因此食用這些含抗生素抗性基因的轉(zhuǎn)基因食品是否會(huì)產(chǎn)生抗藥性是轉(zhuǎn)基因食品安全性評(píng)價(jià)的又一方面。目前一百三十五頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)三、轉(zhuǎn)基因食品的檢測(cè)技術(shù)轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)工作中所涉及的檢測(cè)目標(biāo)包括三種類型：DNA、RNA和蛋白質(zhì)。對(duì)于蛋白質(zhì)的檢測(cè)主要用血清學(xué)方法，對(duì)于DNA和RNA的檢測(cè)主要采用PCR及核酸雜交的方法。目前一百三十六頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)第三節(jié)轉(zhuǎn)基因食品的安全性評(píng)價(jià)和法規(guī)管理一、轉(zhuǎn)基因食品的安全性評(píng)價(jià)安全性評(píng)價(jià)是安全管理的核心和基礎(chǔ)之一。1、轉(zhuǎn)基因食品安全性評(píng)價(jià)目的

①保障人類健康和環(huán)境安全。 ②回答公眾疑問(wèn)。 ③促進(jìn)國(guó)際貿(mào)易，維護(hù)國(guó)家權(quán)益。 ④促進(jìn)生物技術(shù)的可持續(xù)發(fā)展。 ⑤提供科學(xué)決策的依據(jù)。目前一百三十七頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)2、轉(zhuǎn)基因食品安全性評(píng)價(jià)的原則（1）實(shí)質(zhì)等同性（substantialequivalence）原則（2）預(yù)先防范（precaution）原則（3）個(gè)案評(píng)估（casebycase）原則（4）逐步評(píng)估（stepbystep）原則實(shí)驗(yàn)室研究——中間試驗(yàn)——環(huán)境釋放——生產(chǎn)性試驗(yàn)——商業(yè)化生產(chǎn)（5）風(fēng)險(xiǎn)效益平衡（balanceofbenefitsandrisks）原則（6）熟悉性（familiarity）原則目前一百三十八頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)3、轉(zhuǎn)基因食品安全性評(píng)價(jià)內(nèi)容①遺傳工程體的特性分析，②實(shí)質(zhì)等同性分析。（1）遺傳工程體（GMO）的特性分析。這有助于判斷某種新食品與已有食品是否有顯著差異。 ①供體：來(lái)源、分類、學(xué)名、食用歷史、關(guān)鍵營(yíng)養(yǎng)成分、是否有毒性史、過(guò)敏性、傳染性、抗?fàn)I養(yǎng)因子、生理活性物質(zhì)、與其它物種關(guān)系等。②被修飾基因及插入的外源DNA：來(lái)源、結(jié)構(gòu)、功能、用途、轉(zhuǎn)移方法、介導(dǎo)物的名稱、來(lái)源、特性及安全性。③受體：與供體相比的表型特性和穩(wěn)定性、外源基因拷貝量、引入基因的功能與特性、引入基因移動(dòng)的可能性等。目前一百三十九頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)

（2）實(shí)質(zhì)等同性分析

1993年經(jīng)濟(jì)合作發(fā)展組織（OCED）在綠皮書《現(xiàn)代生物技術(shù)食品的安全性評(píng)價(jià)：概念與原則》中，提出對(duì)現(xiàn)代生物技術(shù)食品采用實(shí)質(zhì)等同性（substantialequivalence）的評(píng)價(jià)原則。 實(shí)質(zhì)等同性比較內(nèi)容：①生物學(xué)特性比較：②主要營(yíng)養(yǎng)成分比較：③天然有毒物質(zhì)比較：④抗?fàn)I養(yǎng)因子比較：⑤過(guò)敏原比較：目前一百四十頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)實(shí)質(zhì)等同原則（Substantialequivalence）1993年經(jīng)濟(jì)合作發(fā)展組織提出的。通過(guò)檢測(cè)證明轉(zhuǎn)基因作物加工的食品及食品成分與目前市場(chǎng)上銷售食品的成分相同，則原則認(rèn)為它們沒(méi)有差異，無(wú)需進(jìn)一步檢測(cè)。如果個(gè)別成分不同，則只需要對(duì)這些個(gè)別成分進(jìn)行單獨(dú)的安全性檢測(cè)。目前一百四十一頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)實(shí)質(zhì)等同原則的5項(xiàng)具體原則1)如兩者本質(zhì)是相同的，用傳統(tǒng)的安全性評(píng)價(jià)程序?qū)D(zhuǎn)基因食品評(píng)價(jià)。2)如在一定范圍內(nèi)有差別，用集中于對(duì)產(chǎn)生差別的因子進(jìn)行評(píng)價(jià)。3)如果氨基酸序列與已知蛋白毒素的氨基酸序列是同系物，則要進(jìn)行毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)。4)如有蛋白質(zhì)產(chǎn)生了抗?fàn)I養(yǎng)作用，或營(yíng)養(yǎng)成分發(fā)生改變，則要進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)學(xué)評(píng)價(jià)。5)如兩者完全不同或沒(méi)可比的傳統(tǒng)食品，則要特別設(shè)計(jì)動(dòng)物模型試驗(yàn)證明其無(wú)毒后，須進(jìn)行人體營(yíng)養(yǎng)學(xué)試驗(yàn)。目前一百四十二頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)①生物學(xué)特性比較：比較形態(tài)、生長(zhǎng)、產(chǎn)量、抗病性、繁殖性、生理特性等。②主要營(yíng)養(yǎng)成分比較：比較蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物、礦物質(zhì)、維生素等。③天然有毒物質(zhì)比較：如番茄中的α-番茄素，馬鈴薯中茄堿，葫蘆科作物的葫蘆素等。

④抗?fàn)I養(yǎng)因子比較：抗?fàn)I養(yǎng)因子是指能夠影響人對(duì)食品中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收和對(duì)食物消化的物質(zhì)，如豆科作物的蛋白酶抑制劑、脂肪氧化酶及植酸等。⑤過(guò)敏原比較：過(guò)敏原（allergen）是指能夠造成某些人群食用后產(chǎn)生過(guò)敏反應(yīng)的物質(zhì)。過(guò)敏蛋白質(zhì)在加工過(guò)程及消化過(guò)程中不易被降解，不易被糖基化目前一百四十三頁(yè)\總數(shù)一百五十七頁(yè)\編于十六點(diǎn)

應(yīng)用實(shí)質(zhì)等同性原則評(píng)價(jià)轉(zhuǎn)基因食品時(shí)，應(yīng)根據(jù)不同國(guó)家地區(qū)、不同文