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文檔簡介
梅毒的實驗室檢查第一頁,共19頁。梅毒的定義定義:梅毒是一種慢性傳染性疾病。是由梅毒螺旋體(蒼白螺旋體)引起,患病后病程漫長,早期侵犯生殖器和皮膚,晚期侵犯全身各器官,并生多種多樣的癥狀和體征,病變幾乎能累及全身各個臟器。第二頁,共19頁。3
微生物形態(tài)
螺旋細(xì)密(5-15um長,um寬)、規(guī)則一端/兩端鉤狀,菌體成8、S或C形在暗視野顯微鏡下運(yùn)動活潑
G-,Fontana鍍銀染色,染成棕褐色第三頁,共19頁。4形態(tài)與染色暗視野顯微鏡下觀察第四頁,共19頁。5梅毒螺旋體梅毒螺旋體,F(xiàn)ontana鍍銀染色第五頁,共19頁。傳播途徑梅毒患者的皮膚、粘膜中含梅毒螺旋體,未患病者在與梅毒患者的性接觸中,皮膚或粘膜若有細(xì)微破損則可得病。獲得性梅毒(后天)早期梅毒病人是傳染源,95%是通過不潔性交傳染,少數(shù)通過接吻,握手、輸血、接觸污染的內(nèi)衣濕毛巾、茶杯、煙斗、哺乳、尿布等傳染。胎兒梅毒(先天):孕婦體內(nèi)螺旋體,一般在妊娠3—4月通過胎盤感染嬰兒。第六頁,共19頁。
免疫性特異性抗體感染2周后產(chǎn)生特異性IgM抗體,不能通過胎盤感染4周后出現(xiàn)特異性IgG抗體,可通過胎盤非特異性抗體刺激機(jī)體產(chǎn)生抗心磷脂抗體/反應(yīng)素RPR
和
TRUST等方法可檢出:5~7周或硬下疳后2~3周完全治愈的早期梅毒可再感染第七頁,共19頁。
梅毒血清試驗梅毒螺旋體侵入人體后產(chǎn)生:抗心磷脂抗體:即非特異性抗體、反應(yīng)素
RPR、TRUST抗梅毒螺旋體抗體:IgG、IgM
ELISA、TPPA兩種抗體第八頁,共19頁。1.抗心磷脂抗體血清學(xué)試驗(RPR,TRUST等)目的:檢測血清中抗心磷脂抗體
抗原:心磷脂第九頁,共19頁。甲苯胺紅不加熱血清試驗(TRUST):原理:抗原以膽固醇晶粒為載體,包被上心磷脂和卵磷脂,構(gòu)成VDRL(抗類脂)抗原顆粒。再把抗原顆粒結(jié)合到甲基胺紅上,當(dāng)抗原與血清中反應(yīng)素以一定的比例相互作用時,出現(xiàn)凝集,凝集顆粒呈紅色。第十頁,共19頁。甲苯胺紅不加熱血清試驗(TRUST):特點:敏感度高、特異性低,易出現(xiàn)假陽性用途作為篩選定量檢測:觀察療效、復(fù)發(fā)和再感染第十一頁,共19頁。2、梅毒螺旋體抗體血清學(xué)試驗:方法:1、梅毒螺旋體抗體測定(ELISA法)2、TPPA(明膠凝集實驗)等第十二頁,共19頁。梅毒螺旋體抗體測定(ELISA法)
特點:檢測總抗體(1)用作篩查和確認(rèn)試驗:敏感性、特異性高
(2)不用于觀察療效、復(fù)發(fā)和再感染:感染梅毒螺旋
體后,體內(nèi)產(chǎn)生的抗螺旋體抗體持續(xù)存在,甚至
終生,即使經(jīng)過足夠的抗梅治療,其血清反應(yīng)仍
持續(xù)陽性第十三頁,共19頁。TPPA(明膠凝集實驗)
確證實驗/確診實驗采用梅毒螺旋體天然抗原作為診斷抗原特異性和靈敏度高,檢測的是IgM抗體,可以檢測到潛伏梅毒,但操作繁瑣,費用高第十四頁,共19頁。梅毒血清試驗假陽性因素:技術(shù)性:標(biāo)本的污染溶血操作失誤生物學(xué)假陽性:某些疾?。航Y(jié)核、瘧疾、肝病、紅斑狼瘡、流感、肺炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕性心臟病、風(fēng)疹、系統(tǒng)性硬化癥等,疾病發(fā)展過程中釋放心磷脂,到血液中假陽性(多見于TRUST)生理機(jī)能發(fā)生變化:少數(shù)孕婦也可發(fā)生生物學(xué)假陽性第十五頁,共19頁。梅毒螺旋體抗體測定(ELISA法)結(jié)果的解讀
陰性對照OD≤0.1,陽性對照OD>0.8時實驗正常,否則實驗無效。計算方法:cut-off(co)值=0.12+陰性對照平均OD值s/co值=病人OD值/cut-off(co)值,s/co值大于或等于1判為陽性,s/co值小于1判為陰性注s/co值在0.5~2.0之間的灰區(qū)樣本需復(fù)檢確認(rèn)后報告第十六頁,共19頁。梅毒檢測流程圖A1(ELISA)A1+A1-A2(PRP或TRUST)A1+A2+感染:既往或現(xiàn)在A1+A2-A3(TPPA)A1+A2-A3+可能是梅毒感染需結(jié)合臨床表現(xiàn)A1+A2-A3-基本排除梅毒潛伏期美國2009年指南第十七頁,共19頁。三種
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