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其他酶免疫技術(shù)免疫學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)—*—

設(shè)計(jì)情景提問(wèn)其他酶免疫技術(shù)今收到血清標(biāo)本一份,要一次性測(cè)出其中是否含有針對(duì)Ag1-Ag5相應(yīng)的5種IgG類(lèi)抗體(判斷陰陽(yáng)性)。現(xiàn)有:已知的5種純化抗原(Ag1-Ag5),分別裝在5個(gè)瓶子里;一瓶針對(duì)IgG的酶標(biāo)二抗;一長(zhǎng)條硝酸纖維素膜(NC),怎樣操作能做出結(jié)果?微課:斑點(diǎn)酶免疫吸附試驗(yàn)(“畫(huà)點(diǎn)”)—*—

其他酶免疫技術(shù)斑點(diǎn)酶免疫吸附試驗(yàn)NC加待測(cè)標(biāo)本包被Ag加酶標(biāo)二抗加底物顯色—*—

其他酶免疫技術(shù)斑點(diǎn)酶免疫吸附試驗(yàn)方法評(píng)價(jià):優(yōu)點(diǎn):可在同一張膜條上點(diǎn)多種抗原,用于一份標(biāo)本的檢測(cè),同時(shí)得到多種疾病診斷信息。缺點(diǎn):操作麻煩,洗滌不便?!?—

設(shè)計(jì)情景提問(wèn)其他酶免疫技術(shù)今收到血清標(biāo)本一份,要一次性測(cè)出其中是否含有針對(duì)Ag1-Ag5相應(yīng)的5種IgG類(lèi)抗體(判斷陰陽(yáng)性)?,F(xiàn)有:已知5種抗原Ag1-Ag5(分子量從小到大)的混合物;一瓶針對(duì)IgG的酶標(biāo)二抗;一長(zhǎng)條硝酸纖維素膜(NC);SDS-PAGE;電泳槽,怎樣操作能做出結(jié)果?微課:免疫印跡試驗(yàn)(“畫(huà)線”)—*—

其他酶免疫技術(shù)免疫印跡試驗(yàn)步驟:(1)SDS按分子大小分離蛋白(Ag),條帶不可見(jiàn)。(2)電轉(zhuǎn)移凝膠中已經(jīng)分離的條帶轉(zhuǎn)移至NC上,條帶不可見(jiàn)。—*—

其他酶免疫技術(shù)免疫印跡試驗(yàn)(3)酶免疫定位在NC上依次與特異性抗體和酶標(biāo)二抗作用后加不溶性顯色底物,使區(qū)帶著色。應(yīng)用:確定分子量,HIV感染確證試驗(yàn)、抗ENA抗體檢測(cè)等?!?—

其他酶免疫技術(shù)均相酶免疫技術(shù)(舉例)分析方法:競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合原理要點(diǎn):酶結(jié)合物在形成Ag-Ab復(fù)合物后活性減弱或增強(qiáng),反應(yīng)后測(cè)定總酶活性的變化值推算出待測(cè)物含量(成反比)?!?—

其他酶免疫技術(shù)均相酶免疫技術(shù)(舉例)應(yīng)用:小分子激素和半抗原的測(cè)定。反應(yīng)后—*—

其他酶免疫技術(shù)液相酶免疫技術(shù)結(jié)果:待檢抗原量與沉淀物中酶活性成反比。離心酶標(biāo)Ag+待測(cè)Ag+特異性Ab待測(cè)Ag+特異性Ab+酶標(biāo)Ag

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