生化藥物題號 一 二 三 總分分數(shù)一名詞解釋：得分 評卷人超濾：是在一定壓力下，使用一種特制半透膜對混合溶液中不同溶質分子進行選擇性濾過的分離方法。離心沉降系數(shù)：單位離心力作用下粒子的沉降速度酶單位又稱酶活力單位，指一定條件下,使酶反應達到某一速度所需的酶量。國際酶學委員會于1961年規(guī)定,在確定的最適反應條件下,每分鐘催化1μmol底物轉變成產物所需的酶量為一個酶活力單位,單位符號為IU或U。當?shù)孜餅榈鞍踪|、多糖等包括多個能被酶作用的鍵或基團時,用每分鐘催化1μmol被作用的基團或鍵的變化來表示。核酸類藥物：指具有藥用價值的核酸、核苷酸、核苷、及堿基。糖胺聚糖：指動物來源的含有氨基己糖（己糖胺）的多糖的總稱。得分評卷人二簡答：1.簡述有機溶劑分級沉淀的基本原理。答：蛋白質、核酸、酶等生物大分子為兩性電解質，在溶液中，其自身所帶的不同電荷與水分子作用，形成水化膜的保護，保證了它的結構穩(wěn)定性。但在有機溶劑存在下，有機溶劑與蛋白質等生物大分子爭奪與水的作用破壞了大分子膠粒表面的水化膜，此外，有機溶劑的介電常數(shù)較水低，其加入導致該溶液的介電常數(shù)降低，極性減小，兩性1/11下載文檔可編輯電介質的溶解度降低，從而產生沉淀。蛋白質的顏色反應有哪些？答：1.茚三酮反應 蛋白質與茚三酮混合加熱，反應呈現(xiàn)藍紫色。雙縮脲反應蛋白質在堿性溶液中可與Cu2+產生紫紅色反應。這是蛋白質的太腱反應。酚試劑反應在堿性條件下，蛋白質分子中的酪氨酸可與酚試劑反應呈現(xiàn)藍色。簡述肝素的臨床應用。答：肝素是需要迅速達到抗凝作用的首選藥物，例如治療深層近端靜脈血栓形成、肺栓塞、急性動脈閉塞或急性心肌梗死；也可用于外科預防血栓形成以及妊娠者的抗凝治療。肝素的另一重要臨床應用是在心臟手術合腎臟透析時維持血液體外循環(huán)暢通。肝素還用于治療各種原因引起的彌散性血管內凝血，也用于治療腎小球腎炎、腎病綜合征、類風濕性關機炎等。得分 評卷人 三論述：試述糖胺聚糖的提取方法和原理。答：粘多糖的提取方法有非降解法、降解法。1.非降解法是指用水或鹽溶液從動物組織中提取粘多糖的方法。此法適用于與其他組織結構連接不牢固的粘多糖或其蛋白質復合物的提取，如從玻璃體、臍帶中提取玻璃酸。用本法提取的粘多糖仍結合有蛋白質，需用酶解等方法去除。2/11下載文檔可編輯2.降解法分為堿處理法與酶處理法。堿處理法：用堿處理的方法可以從組織中對粘多糖進行較完全的提取，此法的缺點是粘多糖分子有從裂解的一端被堿進一步降解的可能。所以如果希望藥物成分在特定的范圍內保持分子完整，則不宜用此法，或盡可能地使用稀堿并避免高溫。酶處理法：用蛋白酶消化，是常用的從組織中釋出粘多糖的方法之一。通常選用專一性低的蛋白酶，以進行廣泛的蛋白質水解。常用的有胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、鏈酶蛋白酶等。什么是蛋白質的沉淀？簡述蛋白質沉淀的幾種方法和條件。答：蛋白質的沉淀：蛋白質分子聚集而從溶液中析出的現(xiàn)象。蛋白質沉淀的方法：1中性鹽沉淀反應：在溶液中加入中性鹽即正鹽而使蛋白質沉淀的現(xiàn)象，稱為鹽析。低濃度的中性鹽離子減少蛋白質分子之間靜電引力，增加蛋白質和溶劑的相互作用而增加溶解度，但隨著中性鹽濃度的增加，蛋白質表面的電荷被中和，最后破壞蛋白質表面的水化膜，促使蛋白質分子聚集而沉淀。不同蛋白質用不同的中性鹽進行鹽析所需的濃度不同，據此可對蛋白質進行分級沉淀。此法的優(yōu)勢是可以保持蛋白質的活性。2.有機溶劑沉淀反應：在蛋白質溶液中加入一定量的水溶性有機溶劑（如乙醇、丙酮），有機溶劑與水的相互作用使得蛋白質分子表面的水化膜厚度降低，蛋白質分子容易相互聚集而從溶液中沉淀析出。3.加熱沉淀反應：加熱可以使大多數(shù)蛋白質變性沉淀，但在偏酸或偏堿的環(huán)境中加熱雖然可以使蛋白質變性，卻不一定沉淀。4.金屬鹽沉淀：蛋白質在比其等電點高的 pH溶液中帶負電荷，可與一3/11下載文檔可編輯些帶正電荷的金屬粒子形成不溶性蛋白鹽復合物沉淀析出。5.生物堿試劑和某些酸類沉淀反應：蛋白質在比其等電點低的 pH溶液中正電荷，可以與苦味酸、磷鉬酸等生物堿試劑縮合成不溶性復合物而沉淀析出。多肽由于分子較小，與生物堿試劑反應不易沉淀析出。生化藥物題號 一 二 三 總分分數(shù)一名詞解釋：得分 評卷人凝膠層析：混合物隨流動相流經裝有凝膠作為固定相的層析柱時，混合物因分子大小不同而被分離的技術。氨基酸輸液：是多種L-氨基酸按一定比例配制而成的靜脈營養(yǎng)輸注液。酶的比活力每毫克酶蛋白每秒鐘所催化底物的mol數(shù)。用語計算某一純化步驟的效果，即純度的提高。糖復合物通常將糖蛋白、蛋白聚糖、糖脂及脂多糖的等歸稱為糖復合物蛋白質的變性在某些物理因素或化學因素的作用下，蛋白質分子的空間構象發(fā)生改變或破壞，生物活性喪失和一些理化性質改變的現(xiàn)象。得分評卷人二簡答：1.蛋白質結合上帶正電荷的金屬離子后其等電點向什4/11下載文檔可編輯么方向偏移？為什么？答：等電點將增大。因為在蛋白質的等電點時，蛋白質表面所帶的正電荷與負電荷相等，即蛋白質解離為正離子與負離子的趨勢相等。當?shù)鞍踪|結合上帶正電荷的金屬離子時，蛋白質表面所帶的正電荷增加，解離的負電荷也相應增加，所以等電點將增大簡述免疫核糖核酸的藥理作用與臨床應用。答：免疫核糖核酸是重要的免疫調節(jié)劑，臨床上常與特異性轉移因子、聚肌胞等藥物合用，具有明顯的抗腫瘤作用。已有用于治療消化道腫瘤、肝癌、腎癌、膀胱癌、乳腺癌、黑色素瘤等的報道，對慢性乙型肝炎也有一定的療效。肝素的臨床應用有哪些？答：肝素是需要迅速達到抗凝作用的首選藥物，例如治療深層近端靜脈血栓形成、肺栓塞、急性動脈閉塞或急性心肌梗死；也可用于外科預防血栓形成以及妊娠者的抗凝治療。肝素的另一重要臨床應用是在心臟手術合腎臟透析時維持血液體外循環(huán)暢通。肝素還用于治療各種原因引起的彌散性血管內凝血，也用于治療腎小球腎炎、腎病綜合征、類風濕性關機炎等。得分評卷人三論述：1.試述多肽和蛋白質藥物的常用純化方法。答：多肽和蛋白質的純化包括兩部分內容。一是將蛋白質與非蛋白質分開，根據非蛋白質的性質采用不同的方法去除，如脂類可用有機溶5/11下載文檔可編輯劑提取去除。二是將不同蛋白質的分開，利用他們性質的差異采用的方法有（一）利用溶解度不同的純化方法，利用蛋白質不同進行分離的方法有鹽析法、有機溶劑法、等電點沉淀法、加熱變性法等（二）利用分子性狀不同的純化方法蛋白質分子性狀各異，分子量大小不等，利用這些性質，可以采用凝膠層析及超濾法來分離蛋白質。（三）利用電離性質不同的純化方法 組成蛋白質的某些氨基酸殘基側鏈基團含有各種可解離的基團，如谷氨酸和天冬氨酸含有羧基，賴氨酸含有氨基等，這些基團的數(shù)量和分布各異，使得不同的蛋白質表面的帶電情況不盡相同，所以利用這種電離性質上的差異來分離純化蛋白質。離子交換法是利用電荷性質分離蛋白質的最常用的方法，電泳法亦較常用。（四）利用生物功能專一性的不同純化蛋白質 蛋白質是有專一性生物功能的物質，通過與其它生物大分子或小分子屋子相互結合而發(fā)揮功其功能，這種結合方式經常是專一且可逆的。利用蛋白質這一特性可進行親和層析來純化蛋白質。親和層析的優(yōu)點是條件溫和、操作簡單、效率高、特別是對分離含量低而又不穩(wěn)定的蛋白質尤為有效。試述糖胺聚糖的純化方法。答：用乙醇沉淀等方法從提取液中獲得的粘多糖，仍含有低分子量的消化產物和殘存的蛋白質。去掉殘存蛋白質的方法有等電點沉淀法、加熱變性法、蛋白質沉淀劑法，也可兩種以上方法結合使用。對于結合于粘多糖分子上未完全水解的蛋白質，可選用較高純度的蛋白酶進行水解，最好選用與提取時使用的不同的酶。6/11下載文檔可編輯去掉粘多糖中小分子物質最常用的方法時透析法和超濾法。特別時超濾法，適合于大規(guī)模生產。用乙醇或季銨鹽沉淀粘多糖，使小分子量的消化產物存留于上清液中，也是在各種規(guī)模的生產中最為常用的有效方法。有色物質是常見于一些粘多糖產品中的另一類雜質，常用的去除方法是氧化法，常用的氧化劑為高錳酸鉀和過氧化氫。在偏酸性和加熱的條件下使用活性炭也可脫去粘多糖中的大部分有色物質，但在此條件下可引起脫硫酸基和降解反應，對于肝素這樣的粘多糖應謹慎使用。應用超濾技術也可除去部分小分子的有色物質。生化藥物題號 一 二 三 總分分數(shù)一、名詞解釋：得分 評卷人親和層析利用分子間親和吸附和解析的層析方法免疫核糖核酸：從致敏動物的細胞中提取的RNA，分子量約為135000，具有轉移免疫活性功能的作用鹽析：當在蛋白質或酶的水溶液所含鹽濃度增大時，蛋白質或酶從溶液中沉淀析出。蛋白質的等電點在某個PH溶液中，蛋白質表面所帶的正電荷與負電荷相等，即蛋白質解離為正離子與負離子的趨勢相等，此時溶液的PH值稱為該蛋白質的等電點。糖生物學研究生物體內多糖的科學。7/11下載文檔可編輯得分評卷人 二、簡答：簡述凝膠層析法測定分子量的原理；答：凝膠層析是指混合物隨流動相經過裝有凝膠作為固定相的層析柱時，混合物因分子大小不同而被分離的技術。借助混合物中各物質分子大小不同，選用適當?shù)哪z裝柱，然后用大量蒸餾水或稀溶液洗柱，分子量大的物質不能進入凝膠網孔而沿凝膠顆粒間的空隙最先流出柱外，分子量小的物質因能進入網孔內，故下移速度落后于大分子物質，從而是樣品中分子大小不同的物質按順序流出柱外而得到分離。簡述氨基酸的主要藥理作用。答：氨基酸類藥物是治療因蛋白質代謝混亂和缺乏所引起的一系列疾病的生化藥物，也是具有高度營養(yǎng)價值的蛋白質補充劑，有著廣泛的生化作用與臨床療效。（1）作為營養(yǎng)補劑（2）降血氨（3）保護作用（4）轉變成重要的生物活性：如谷氨酸經氧化脫羧可轉變成物質 r-氨基丁酸，是抑制性神經遞質（5）離子載體（6）其他作用：如胱氨酸和半胱氨酸有促進毛發(fā)生長，延緩衰老的作用，組氨酸、谷氨酸和谷氨酰胺用于消化道潰瘍的輔助治療等。定磷法測定RNA含量的原理是什么？8/11下載文檔可編輯答：由于RNA是磷酸和戊糖通過磷酸二酯鍵形成的長鏈，而且磷酸的量正比與RNA的量，所以可以通過測定磷酸的量來斷定RNA的量。用濃硫酸或過氯酸將RNA消化，是其中的磷變成正磷酸，在酸性條件下與鉬酸作用生成磷鉬酸，后者在還原劑的存在下，立即還原成鉬藍，鉬藍的最大吸收波長在660nm處，在一定濃度范圍內，溶液的光密度和磷的含量成正比，可用標準曲線算出樣品的含磷量。得分評卷人 三、論述：試述低分子肝素的藥理作用。答：LMWH主要通過親和于ATⅢ和肝素輔因子Ⅱ而發(fā)揮抗血栓作用。ATⅢ可抑制活化的凝血因子，包括凝血酶、凝血因子 Xa、IXa、XIa和XⅡa，主要是抑制凝血酶和因子Xa。LMWH作為催化劑，可使凝血酶與ATⅢ復合物以及凝血酶與因子Xa復合物的形成速率提高約1000倍。這種抗Xa因子作用與體內抗栓形成作用密切相關。此外，LMWH可以促進釋放纖維蛋白溶酶原激活劑和縮短優(yōu)球蛋白溶解時間，并能促進釋放脂蛋白脂酶和肝三酰甘油脂酶。LMWH皮下注射2～3h后達血漿峰濃度，半衰期約4h，比UFH長一倍。LMWH的生物利用度約為90％，而UFH僅約20％。LMWH的這些特征，使之每日只需皮下注射一次，可作為長程預防治療。然而必須主意，不同方法生產的LMWH具有不同的藥理特征，不同的產品應做不同的研究實驗。試述基因治療的策略。答：基因治療就是采用分子生物學的方法和原理，在核酸水平上開展9/11下載文檔可編輯的疾病治療方法。隨著對疾病本質的深入了解和新的分子生物學方法的不斷涌現(xiàn)，基因治療方法有了較大的發(fā)展。根據所采用的方法不同，基因治療的策略大致可分為以下幾種：基因置換：基因置換就是用正常的基因原位替換病變細胞內的致病基因，使細胞內的DNA完全恢復正常狀態(tài)。這種治療方法最為理想，但目前由于技術原因尚難達到。基因修復：基因修復是指將致病基因的突變堿基序列糾正，而正常部分予以保留。這種基因治療方式最后也能使致病基因得到完全恢復，操作上要求高，實踐中有一定難度?；蛐揎椨址Q基因增補，將目的基因導入病變細胞或其它細胞，目的基因的表達產物能修飾缺陷細胞的功能或使原有的某些功能得以加強。在這種治療方法中，缺陷基因仍然存在于細胞內，目前基因治療多采用這種方式。如將組織型纖溶酶原激活劑的基因導入血管內皮細胞并得以表達后，防止經皮冠狀動脈成形術誘發(fā)的血檢形成?；蚴Щ睿豪梅戳x技術能特異地封閉基因表達特性，抑制一些有害基因的表達，已達到治療疾病的目的。如利用反義RNA、核酶或肽核酸等抑制一些癌基因的表達，抑制腫瘤細胞的增殖，誘導腫瘤細胞的分化。用此技術還可封閉腫瘤細胞的耐藥基因的表達，