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文檔簡介
生物化學與分子生物學BiochemistryandMolecularBiology生物化學與分子生物學教研室生物化學與分子生物學黨支部
緒論
生物化學就是生命的化學。它是研究活細胞和有機體中存在的各種化學分子及其所參與的化學反應(yīng)的科學。
分子生物學:是研究生物大分子結(jié)構(gòu)、功能及其調(diào)控機制的科學。
一、生物化學發(fā)展簡史二、生物化學研究內(nèi)容三、生物化學與醫(yī)學四、本課內(nèi)容簡介
生物化學研究內(nèi)容生物分子的結(jié)構(gòu)與功能物質(zhì)代謝及其調(diào)節(jié)遺傳信息的傳遞及其調(diào)控
生物化學與醫(yī)學生物化學的理論與技術(shù)已滲透到醫(yī)學科學的各個領(lǐng)域生物化學與分子生物學在生命科學中占有重要的地位生物化學的發(fā)展促進了疾病病因、診斷和治療的研究
本課內(nèi)容簡介(一)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能酶生物氧化糖代謝脂類代謝氨基酸代謝
本課內(nèi)容簡介(二)核酸的結(jié)構(gòu)與功能核苷酸代謝基因信息的傳遞細胞信息傳遞癌基因、抑癌基因與生長因子血液的生化蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能第一章StructureandFunctionofProtein蛋白質(zhì)(protein)是由許多氨基酸(aminoacids)通過肽鍵(peptidebond)相連形成的高分子含氮化合物。蛋白質(zhì)的生物學重要性1.蛋白質(zhì)是生物體的重要組成成分2.蛋白質(zhì)具有重要的生物學功能1)作為生物催化劑2)代謝調(diào)節(jié)作用3)免疫保護作用4)物質(zhì)的轉(zhuǎn)運和存儲5)運動與支持作用6)參與細胞間信息傳遞3.氧化供能蛋白質(zhì)的分子組成
TheMolecularComponentofProtein第一節(jié)蛋白質(zhì)的元素組成主要有C、H、O、N和S。
有些蛋白質(zhì)含有少量P或金屬元素Fe、Cu、Zn、Mn、Co、Mo,個別蛋白質(zhì)還含有I
。蛋白質(zhì)的含氮量平均為16%。通過樣品含氮量計算蛋白質(zhì)含量的公式:蛋白質(zhì)含量(g%)=含氮量(g%)
×6.25蛋白質(zhì)元素組成的特點一、氨基酸
——蛋白質(zhì)的基本組成單位存在自然界中的氨基酸有300余種,但組成人體蛋白質(zhì)的氨基酸僅有20種,且均屬L--氨基酸(甘氨酸除外)。H甘氨酸CH3丙氨酸L-氨基酸的通式R非極岔性疏快水性老氨基食酸極性葉中性糊氨基凍酸酸性火氨基叔酸堿性幼氨基振酸(一救)氨棵基酸望的分度類非極馳性疏帥水性鞏氨基且酸2.極性刷中性匙氨基酸酸3.酸性字氨基辦酸4.堿性英氨基膨酸習慣輔分類禿方法芳香剝族氨伴基酸:Tr彼p、Ty結(jié)r、Ph目e含羥問基氨絡(luò)基酸:Se番r、Th塑r、Ty供r含硫囑氨基仆酸:Cy摔s、Me荒t雜環(huán)誼族氨防基酸下:Hi鼠s雜環(huán)抖族亞責氨基削酸:Pr余o支鏈耗氨基胖酸:Va俱l、Le岸u、Il閱e幾種箏特殊糞氨基針酸Gl飽y:無手遼性碳麗原子適。Pr藝o:為環(huán)謠狀亞哄氨基張酸。Cy械s:可形飾成二弦硫鍵呢。修飾寒氨基撐酸:蛋白供質(zhì)合槳成后笛通過姑修飾悠加工拜生成修的氨奸基酸糾。沒綢有相燈應(yīng)的然編碼俊。如揉:胱膠氨酸敗、羥亦脯氨渣酸(Hy拌p)、塞羥賴姐氨酸親(Hy查l)。非生補蛋白草氨基接酸:蛋白演質(zhì)中菊不存肉在的逝氨基亦酸。休如:聞瓜氨歉酸、鵝鳥氨鋒酸、片同型羞半胱架氨酸回,是暈代謝成途徑貝中產(chǎn)雕生的米。(二赤)氨橫基酸乎的理崇化性單質(zhì)1.兩性糖解離辰及等趟電點2.紫外殿吸收3.茚三淘酮反優(yōu)應(yīng)二、羊肽*肽鍵(p咬ep領(lǐng)ti叢de阻b徹on傭d):是由授一個即氨基下酸的-羧基狐與另桑一個澤氨基護酸的-氨基霜脫水畝縮合答而形肯成的雪化學霉鍵。(一腦)肽(p岸ep貼ti牽de汁)多肽宮鏈(p屑ol凱yp粒ep唇ti怨de觀c柄ha劈燕in火)二肽妨,三瘦肽……寡肽(ol奶ig杯op慮ep鞠ti憂de),多羞肽(p偵ol穴yp卡ep弟ti邊de般)氨基害酸殘頸基(r娘es摸id擺ue閣)氨基插末端魯(am透in妙o額te賭rm閣in逃al)和扮羧基蠅末端(ca電rb靜ox蛛yl溪t綢er影mi尋na五l)主鏈買和側(cè)飛鏈多肽者鏈多肽肌鏈(二惠)幾種汽生物斜活性喚肽1.谷胱六甘肽(g識lu錢ta憲th秧io瓦ne礙,垃GS竹H)結(jié)構(gòu):谷氨帖酸、債半胱慨氨酸杠和甘貌氨酸儀組成紙的三肽谷氨置酸的-羧基形成她肽鍵-SH為活筋性基擦團為酸性話肽是體乞內(nèi)重乒要的還原智劑GS嫂H過氧婚化物劫酶H2O22GSH2H2OGSSGGS差H還原搭酶NA牲DP繁H+H+NA透DP+主要壁功能:肽類各激素忠:如丟促甲琴狀腺應(yīng)素釋伶放激隙素(TR涂H)神經(jīng)玩肽(ne亡ur丙op竿ep沖ti霜de)2.肽類暈激素察及神伙經(jīng)肽三、社蛋白輕質(zhì)的非分類*架根據(jù)饞蛋白恨質(zhì)組挨成成貨分單純蛋白質(zhì)結(jié)合蛋白質(zhì)=蛋白質(zhì)部分+非蛋白質(zhì)部分*悉根據(jù)伍蛋白年質(zhì)形血狀纖維狀蛋白質(zhì)球狀蛋白質(zhì)蛋奧白悉質(zhì)兆的窮分友子悲結(jié)低構(gòu)Th存e策Mo傘le周cu棉la族r耕St撒ru橡ct千ur俱e朋of磚P翻ro釋te豪in第愛二歌節(jié)蛋白美質(zhì)的丹分子投結(jié)構(gòu)棒包括巖:一級朗結(jié)構(gòu)(p踢ri阻ma收ry內(nèi)s遙tr熔uc舟tu淚re瘋)二級少結(jié)構(gòu)(s術(shù)ec駝on周da發(fā)ry太s榴tr公uc進tu判re誰)三級阿結(jié)構(gòu)(t符er架ti槽ar邀y前st妖ru閉ct青ur缺e)四級粱結(jié)構(gòu)(q逝ua正te加rn貍ar綱y叼s議tr勸uc石tu遠re嗎)高級結(jié)構(gòu)定義侍:蛋白香質(zhì)的想一級吉結(jié)構(gòu)針指多州肽鏈悟中氨挨基酸轎的排扛列順拾序。一、話蛋白述質(zhì)的慘一級浩結(jié)構(gòu)主要湯化學勾鍵:肽鍵二硫然鍵的位味置屬帖于一跡級結(jié)鍵構(gòu)研鑰究范剃疇。一級跡結(jié)構(gòu)演是蛋臘白質(zhì)港空間塘構(gòu)象詠和特奔異生仁物學例功能窯的基雞礎(chǔ)。胰島秀素的犯一級鄙結(jié)構(gòu)3021二、促蛋白技質(zhì)的峽二級橋結(jié)構(gòu)蛋白宴質(zhì)分分子中付某一鞠段肽把鏈的描局部作空間退結(jié)構(gòu)替,即需該段姓肽鏈巷主鏈鴿骨架肌原子較的相恐對空選間位筋置,漁并不箏涉及蓋氨基抽酸殘默基側(cè)電鏈的判構(gòu)象。定義縣:穩(wěn)定侮因素:氫鍵(一忍)肽雜單元(pe花pt朱id勸e興un置it助)參與貼組成怖肽鍵反的6個原齒子位否于同畏一平周面,苦又叫陸酰胺做平面惱或肽杏鍵平辨面??炙顷懙鞍赘髻|(zhì)構(gòu)拒象的鐵基本浪結(jié)構(gòu)旺單位虛。肽單延元HHHH蛋白添質(zhì)二便級結(jié)搭構(gòu)的貼主要法形式-螺旋(-h略el愿ix泳)-折疊(-p績le廣at追ed煙s款he陣et宏)-轉(zhuǎn)角(-t虎ur繩n跪)無規(guī)發(fā)卷曲(立ra耗nd防om貸c甚oi清l廣)(二創(chuàng))-螺旋結(jié)構(gòu)旗要點:①多肽幅鏈主泊鏈圍顯繞中扁心軸嶼形成右手萌螺旋,側(cè)鏈伸向我螺旋孟外側(cè)叫。②每圈養(yǎng)螺旋屠含3.咳6個氨淹基酸,螺低距為0.貴54刺nm。③每個沿肽鍵登的亞判氨氫與和第唉四個適肽鍵須的羰劣基氧撫形成復(fù)的氫泊鍵保偷持螺撿旋穩(wěn)羞定。氫鍵與螺馬旋長懷軸基出本平渾行。(三陜)-折疊①多肽囑鏈充居分伸蒼展,撐相鄰袋肽單垃元之針間折天疊成扭鋸齒究狀結(jié)貴構(gòu),由側(cè)鏈尼位于心鋸齒傾結(jié)構(gòu)烤的上刃下方勸。②兩段渣以上倡的β-折疊奮結(jié)構(gòu)爸平行運排列孕,況兩鏈蘇間可圓順向更平行運,也絹可反琴向平傲行負。③兩鏈寨間的杰肽鍵斯之間新形成擇氫鍵驢,以豎穩(wěn)固β-折疊露結(jié)構(gòu)版。氫顫鍵與飯螺旋差長軸顫垂直膝。(四牌)-轉(zhuǎn)角何和無申規(guī)卷主曲-轉(zhuǎn)角幅:無規(guī)他卷曲炕:沒卷有確晴定規(guī)道律性供的肽鵝鏈結(jié)剩構(gòu)。①肽鏈王內(nèi)形堡成18臘0o回折戰(zhàn)。②含4個氨除基酸釋殘基院,第橋一個闊氨基婦酸殘拜基與干第四何個形箭成氫鏟鍵。③第二準個氨封基酸本殘基亦常為Pr倆o。-轉(zhuǎn)角墾:(五麻)??◇w蛋白豎質(zhì)分削子中費,二戀個或析三個固具有恢二級迷結(jié)構(gòu)霧的肽悲段,勿在空表間上盤相互謹接近北,形抖成一攤個具顛有特貫殊功頃能的遷空間陰構(gòu)象棗,被限稱為竹模體(m權(quán)ot父if劑)。螺旋址-環(huán)淋-螺悶旋鋅指(六跌)影腔響二俗級結(jié)揉構(gòu)形挎成的軌因素氨基谷酸側(cè)蘋鏈所棚帶電盯荷進、大盯小及商形狀木。影響α-螺旋桶形成鎮(zhèn)的因幫素:β-折疊董形成憤條件之:要求掩氨基媽酸側(cè)唱鏈較遷小。三、兼蛋白構(gòu)質(zhì)的礦三級輪結(jié)構(gòu)疏水纏鍵、證離子動鍵、屬氫鍵災(zāi)和Va蜜nde確rWa墾al滾s力等歲。穩(wěn)定睛因素弱:整條蟻肽鏈拉中全渠部氨吧基酸維殘基種的相稻對空錄間位傲置。典即肽宣鏈中沫所有脖原子氏在三邊維空氏間的斥排布陵位置躍。定義肌紅司蛋白(M暢b)N端C端纖連蛋白分子的結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu)違域(d騾om態(tài)ai佳n)大分凝子蛋懂白質(zhì)籮的三均級結(jié)棕構(gòu)常勞可分利割成念一個譜或數(shù)橫個球蝦狀或碼纖維駁狀的品區(qū)域喪,折擺疊得幕較為乳緊密蔥,各為行其惱功能盼,稱挖為結(jié)即構(gòu)域升。結(jié)構(gòu)認域Tr股io儲seph腎os揚ph塵at偵eis治om芝er始as條e分子零伴侶(c帶ha太pe瘦ro戶n)通過揮提供貪一個荒保護演環(huán)境崗從而覆加速益蛋白辟質(zhì)折臘疊成秒天然仇構(gòu)象妖或形松成四殘級結(jié)修構(gòu)的核一類膨蛋白郵質(zhì)。*脈可逆磚地與蝦未折訓(xùn)疊肽胡段的襲疏水就部分絮結(jié)合春隨后狗松開慢,如作此重懸復(fù)進銀行可釋使肽揭鏈正磨確折蠢疊。*補與錯傭誤聚殘集的探肽段鬧結(jié)合友,誘猴導(dǎo)其臭正確統(tǒng)折疊家。*出對蛋籃白質(zhì)親分子沒中二肌硫鍵住的正尊確形港成起鴉重要服的作丹用。作用至:亞基掌之間昆的結(jié)灰合力旬主要翼是氫鍵碰和離吸子鍵歸。四、陪蛋白嫩質(zhì)的殃四級翅結(jié)構(gòu)蛋白領(lǐng)質(zhì)分出子中橡各亞懷基的漸空間榆排布蘆及亞臣基接農(nóng)觸部討位的娛布局右和相柿互作終用,議稱為蛋白棋質(zhì)的品四級慈結(jié)構(gòu)智。每條查具有蒙完整膝三級鋸結(jié)構(gòu)貢的多勢肽鏈盤,稱抱為亞基(su胃bu看ni劣t)。血紅狡蛋白殘(Hb)的善四級安結(jié)構(gòu)蛋白貪質(zhì)結(jié)槳構(gòu)與桑功能值的關(guān)利系Th吐e料Re吵la譽ti炎on遮o捧f會St膛ru瓜ct汪ur浩e管an娛d產(chǎn)Fu哀nc趁ti啄on栗o債f柴Pr刪ot稍ei相n第竟三花節(jié)(一弟)一藝級結(jié)博構(gòu)是泉空間情構(gòu)象等的基計礎(chǔ)一、勝蛋白屬質(zhì)一羨級結(jié)鼠構(gòu)與烘功能頑的關(guān)腫系牛核糖核酸酶的一級結(jié)構(gòu)二硫鍵天然膚狀態(tài)歌,有館催化化活性尿素兩、β-巰基像乙醇去除看尿素概、β-巰基嚼乙醇非折壘疊狀技態(tài),菌無活勸性(二漆)一上級結(jié)展構(gòu)與身功能堵的關(guān)氧系例:悠鐮刀泡形紅斯細胞念貧血N-Val·His·Leu·Thr·Pro·Glu·Glu·····C(146)HbSβ肽鏈HbAβ肽鏈N-Val·His·Leu·Thr·Pro·Val
·Glu·····C(146)這種撞由蛋歸白質(zhì)盲分子鴨發(fā)生嶼變異征所導(dǎo)施致的來疾病堵,稱杏為“堂分子尊病”新。(一)肌紅蛋白與血紅蛋白的結(jié)構(gòu)二、種蛋白悶質(zhì)空遮間結(jié)棗構(gòu)與簡功能津的關(guān)堂系Hb與Mb一樣萄能可桃逆地漏與O2結(jié)合霜,Hb與O2結(jié)合帳后稱掘為氧合Hb。氧合Hb占總Hb的百形分數(shù)鍛(稱百分腥飽和痰度)隨O2濃度蓮變化猜而改蜂變。(二壺)血挑紅蛋梁白的崗構(gòu)象勁變化啊與結(jié)認合氧肌紅苦蛋白(M善b)和血摔紅蛋睬白(Hb)的氧阻解離楊曲線*個協(xié)同利效應(yīng)(co鄭op財er樣at某iv驚it站y)一個應(yīng)寡聚憶體蛋費白質(zhì)臺的一有個亞萍基與剖其配今體結(jié)促合后啄,能嗽影響摔此寡滿聚體次中另泰一個者亞基猜與配攻體結(jié)學合能震力的最現(xiàn)象化,稱完為協(xié)同庫效應(yīng)。促進紡作用今稱為正協(xié)勸同效犧應(yīng)(p戶os她it栗iv費eco師op皂er喘at饅iv夫it窯y)抑制毒作用酸稱為負協(xié)仰同效裁應(yīng)(n摧eg高at潔iv乒eco賣op賣er口at挎iv迷it咬y)變構(gòu)堵效應(yīng)(al款lo振st滑er枝icef賢fe懷ct允)凡蛋斤白質(zhì)篇(或謎亞基奴)因疤與某止小分士子物姿質(zhì)相扁互作奶用而衡發(fā)生濾構(gòu)象飯變化冤,導(dǎo)聚致蛋洗白質(zhì)覽(或附亞基立)功拔能的綿變化偵,稱分為蛋共白質(zhì)江的變構(gòu)耀效應(yīng)。(三形)蛋猾白質(zhì)岔構(gòu)象捐改變篩與疾喝病蛋白窄質(zhì)構(gòu)狀象?。喝魠堑鞍讬n質(zhì)的泊折疊僅發(fā)生伐錯誤甲,盡戶管其處一級材結(jié)構(gòu)己不變沈,但愛蛋白放質(zhì)的盒構(gòu)象忙發(fā)生限改變冊,仍凈可影費響其運功能切,嚴峰重時滾可導(dǎo)利致疾里病發(fā)膜生。蛋白本質(zhì)構(gòu)搞象病蜻的機腦理:有些埋蛋白乘質(zhì)錯界誤折終疊后寧相互妖聚集割,常商形成潛抗蛋噴白水孝解酶天的淀焦粉樣父纖維帖沉淀崗,產(chǎn)冤生毒旁性而公致病革,表餓現(xiàn)為雷蛋白鏟質(zhì)淀雁粉樣濕纖維語沉淀直的病乏理改涌變。這類賴疾病埋包括標:人紋邀狀體校脊髓辨變性斑病、脾老年零癡呆蛙癥、裁亨停貫頓舞曠蹈病塌、瘋有牛病善等。瘋牛嫁病瘋牛幫病是換由朊扶病毒判蛋白(pr瘋io鎖npr張ot寧ei屢n,Pr殿P)引起而的一禿組人益和動挖物神潛經(jīng)退拉行性厭病變?nèi)?。正常啞的Pr給P富含α-螺旋流,稱唯為Pr烈Pc。Pr界Pc在某射種未冬知蛋購白質(zhì)佛的作互用下葉可轉(zhuǎn)擁變成圈全為β-折疊琴的Pr織Psc,從而臉致病北。Pr木Pcα-螺旋Pr到Pscβ-折疊正常瘋牛鴿病第四女節(jié)蛋白棉質(zhì)的擺理化洽性質(zhì)宿與分繩離純烤化Th蛇e抵Ph蹦ys縱ic叨al陸a戶nd視C語he截mi假ca叮l滴Ch制ar撈ac盤te蘭rs巾a下nd葵S撫ep冶ar問at潑io頸n記an惡d來Pu谷ri設(shè)fi聽ca正ti拖on夏o砌f禁Pr卻ot課ei要n(一魚)蛋末白質(zhì)除的兩臟性電扎離一、梯理化芬性質(zhì)蛋白糕質(zhì)分亡子除姑兩端蜘的氨睡基和拐羧基腰可解郵離外乘,氨攝基酸翻殘基促側(cè)鏈逢中某黑些基嬌團,叢在一角定的蠻溶液pH條件餐下都敵可解砍離成泥帶負儉電荷拜或正暴電荷絕的基蹤蝶團。蛋白劫質(zhì)的原等電疼點(is紐奉oe佩le悉ct纏ri聰cpo正in臣t,pI)當?shù)笆璋踪|(zhì)匯溶液海處于艙某一pH時,據(jù)蛋白早質(zhì)解艷離成饞正、看負離清子的駁趨勢煮相等屠,即啊成為剝兼性偽離子冒,凈宜電荷菊為零憂,此藥時溶劈燕液的pH稱為蛋白枕質(zhì)的粉等電打點。利用稠蛋白然質(zhì)兩少性電完離的鮮性質(zhì)甩,可拿通過旺電泳倘、離象子交擦換層歪析、饞等電烘聚焦?jié)傻燃柬樞g(shù)分定離蛋妖白質(zhì)比。(二替)蛋吊白質(zhì)搬的膠壁體性版質(zhì)蛋白遲質(zhì)屬優(yōu)于生各物大砍分子葉之一標,分貢子量分可自1萬至10授0萬之券巨,趁其分坡子的身直徑鍋可達1~10澡0n誰m,為膠箱粒范俘圍之捐內(nèi)。*宅蛋白濾質(zhì)膠布體穩(wěn)呢定的冶因素顆??繁砻骊P(guān)電荷水化幫膜+++++++帶正電荷的蛋白質(zhì)--------帶負電荷的蛋白質(zhì)在等電點的蛋白質(zhì)水化渣膜++++++++帶正電荷的蛋白質(zhì)--------帶負電荷的蛋白質(zhì)不穩(wěn)定的蛋白質(zhì)顆粒酸堿酸堿酸堿脫水作用脫水作用脫水作用溶液弦中蛋想白質(zhì)荷的聚閘沉(三燙)蛋分白質(zhì)棟的變賓性、魯沉淀牽和凝酷固*禽蛋白施質(zhì)的鏈變性(de翠na貸tu盈ra奴ti撥on)在某融些物乏理和砍化學臉因素例作用碰下,鴨蛋白范質(zhì)分火子的劍特定填空間凍構(gòu)象胸被破踢壞,帝從而至導(dǎo)致冒其理恭化性桑質(zhì)改釋變和忙生物繪活性添的喪語失。造成識變性肌的因征素:如加櫻熱、漸乙醇跪等有紗機溶惕劑、騰強酸勞、強泰堿、額重金璃屬離能子及駱生物獵堿試修劑等。變性的本質(zhì):——破壞非共價鍵和二硫鍵,不改變蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)。應(yīng)用堅舉例臨床誰醫(yī)學或上,伐變性麻因素虹常被訂應(yīng)用峰來消潤毒及脈滅菌否。防止帖蛋白抱質(zhì)變來性也釘是有條效保急存蛋魚白質(zhì)喚制劑量(如難疫苗頓等)剩的必祝要條箭件。蛋白隔質(zhì)變常性后蝦的性沃質(zhì)改錢變:溶解圓度降伯低、跡粘度呢增加躺、結(jié)徑晶能育力消堡失、菊生物辟活性墳喪失炮及易濕受蛋揭白酶哨水解第。若蛋管白質(zhì)套變性集程度款較輕含,去后除變狂性因市素后雙,蛋份白質(zhì)紹仍可幼恢復(fù)庫或部爬分恢闊復(fù)其太原有任的構(gòu)勿象和棋功能閑,稱著為復(fù)性。復(fù)性(re顏na千tu虛ra男ti師on)天然踩狀態(tài)減,有境催化懶活性尿素飲、β-巰基晌乙醇去除奔尿素猛、β-巰基布乙醇非折柱疊狀廣態(tài),摔無活巧性*迷蛋白敏質(zhì)沉傻淀在一挑定條菠件下炕,蛋善白疏勝水側(cè)蝦鏈暴鐵露在襖外,朵肽鏈姿融會脹相互撿纏繞現(xiàn)繼而獅聚集效,因敞而從舍溶液擠中析亦出。變性負的蛋洲白質(zhì)悄易于慎沉淀騎,有輪時蛋漿白質(zhì)爐發(fā)生更沉淀頌,但末并不脫變性搜。*鬼蛋白鑄質(zhì)的洽凝固撤作用(p湊ro屑te籮in牛c心oa饞gu強la丈ti頂on鴿)蛋白砍質(zhì)變佳性后拌的絮鞏狀物尼加熱份可變茂成比蜘較堅遣固的欺凝塊馬,此遵凝塊旅不易書再溶鄉(xiāng)豐于強溝酸和噴強堿呆中。(四女)蛋察白質(zhì)哈的紫多外吸秒收由于丈蛋白煎質(zhì)分茂子中擔含有接共軛節(jié)雙鍵覺的酪氨淋酸和色氨置酸,因性此在28魚0n賊m波長育處有刺特征青性吸丑收峰霞。蛋踐白質(zhì)室的OD28那0與其顛濃度展呈正名比關(guān)翅系,志因此踢可作銀蛋白相質(zhì)定鑒量測循定。(五獻)蛋身白質(zhì)驢的呈茅色反畢應(yīng)⒈茚三迫酮反濃應(yīng)(ni勸nh陡yd擺ri肢nre此ac雀ti坐on炭)蛋白苗質(zhì)經(jīng)葉水解切后產(chǎn)菌生的氨基育酸也可因發(fā)生沉茚三屠酮反解應(yīng)。⒉雙縮冊脲反屬應(yīng)(bi污ur辣etre誦ac姿ti環(huán)on象)蛋白愉質(zhì)和泊多肽雹分子挽中肽鍵在稀島堿溶份液中姿與硫役酸銅竿共熱排,呈扎現(xiàn)紫理色或癥紅色墻,此方反應(yīng)遣稱為雙縮斷脲反派應(yīng),雙鴿縮脲強反應(yīng)糧可用勒來檢邊測蛋沸白質(zhì)躁水解巾程度健。二、員蛋白謙質(zhì)的捷分離支和純尤化(一謙)透龜析及和超濾曲法*致透析(d知ia廣ly夜si妄s):利用踏透析掏袋把訊大分默子蛋書白質(zhì)賤與小快分子賓化合貓物分悶開的境方法遷。*膝超濾滔法:應(yīng)用屢正壓雪或離次心力繞使蛋占白質(zhì)佛溶液店透過劈燕有一屬定截寫留分延子量疫的超我濾膜籃,達侮到濃吳縮蛋志白質(zhì)奴溶液姐的目惠的。(二待)丙諷酮沉主淀、坦鹽析往及免纏疫沉羽淀*使用丙酮事沉淀時,痛必須剩在0~4℃低溫協(xié)下進熟行,叮丙酮宅用量蓬一般10倍于剖蛋白肥質(zhì)溶響液體惠積。振蛋白督質(zhì)被渠丙酮軍沉淀吸后,透應(yīng)立顏即分韻離。天除了果丙酮僅以外辮,也剝可用蓬乙醇著沉淀鳴。*鹽廳析(s漂al述t媽pr磚ec裹ip哭it臭at毫io側(cè)n)是將出硫酸池銨、駐硫酸截鈉或貧氯化探鈉等洋加入棗蛋白截質(zhì)溶伶液,砌使蛋紛白質(zhì)磨表面欠電荷肢被中饒和以影及水男化膜骨被破勒壞,紀導(dǎo)致銜蛋白擇質(zhì)沉渾淀。*免疫圈沉淀挽法:將某蓬一純蠶化蛋疑白質(zhì)酒免疫提動物瞇可獲葵得抗將該蛋圖白的窩特異培抗體貍。利薦用特拾異抗販體識賞別相葡應(yīng)的疏抗原摩蛋白任,并拍形成催抗原玩抗體類復(fù)合驢物的釀性質(zhì)泡,可蚊從蛋精白質(zhì)闖混合叼溶液茅中分陜離獲盜得抗傲原蛋緣瑞白。(三羊)電已泳蛋白淹質(zhì)在吉高于備或低呢于其pI的溶趟液中性為帶齊電的禾顆粒昆,在弄電場嘆中能紗向正各極或懸負極搬移動詠。這立種通聲過蛋稅白質(zhì)餃在電享場中句泳動仙而達季到分油離各量種蛋艦白質(zhì)嘆的技沙術(shù),稱為電泳(el鐵ct頭ro歉ph醋or敵es曲is)。根據(jù)肺支撐側(cè)物的冶不同含,可妹分為關(guān)薄膜鋪電泳槐、凝羞膠電然泳等轎。幾種寇重要容的蛋靜白質(zhì)永電泳*SD倉S-聚丙老烯酰撫胺凝津膠電趕泳:常痛用于殿蛋白刑質(zhì)分駱子量現(xiàn)的測快定。*等召電聚鎮(zhèn)焦電原泳:通漁過蛋杠白質(zhì)凈等電魄點的倦差異貝而分地離蛋賄白質(zhì)濫的電乖泳方東法。*雙蜂向凝炸膠電匹泳:是蛋犯白質(zhì)徒組學繡研究滴的重霧要技喘術(shù)。(四銅)層缸析層析(c家hr賴om碌at由
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