試驗一：病害癥狀觀察試驗課時：2試驗類型：驗證 試驗要求：必修一、試驗?zāi)繕吮驹囼災(zāi)繕耸沁M行癥狀觀察，分兩部分進行。一部分在田間，觀察田間作物病害病狀和病征；一部分在室內(nèi)，觀察室內(nèi)所提供植物病害標本病狀和病征。經(jīng)過試驗，使同學們認識植物植物病害癥狀類型、特點，初步掌握正確地描述病害癥狀方法，加深對植物病害感性認識，了解癥狀在病害診療中作用。二、試驗內(nèi)容植物病害癥狀表現(xiàn)十分復雜，按照癥狀在植物體顯示部位不一樣，可分為內(nèi)部癥狀與外部癥狀兩類。在外部癥狀中，按照有沒有病原物子實體顯露可分為病狀與病征兩種。本試驗主要進行植物病害癥狀觀察。（一）病狀類型病狀就是在植物病部所看到不正常狀態(tài)。通常分為五種類型。1．變色植物受外界有害原因影響后，常造成色澤改變，如褪色、條點、白化、色澤變深或變淺等，統(tǒng)稱為變色。主要表現(xiàn)有：（1）褪綠或黃化：褪綠和黃化是因為葉綠素降低而葉片表現(xiàn)為淺綠色或黃色。如小麥黃矮病、植物缺鐵、缺氮等。（2）花葉與班駁：如煙草花葉病、菜豆花葉病、黃瓜花葉病等。（3）變紅色或紫色：如玉米或谷子紅葉病、植物缺鐵等。2．壞死是因為感病植物組織和細胞死亡而引發(fā)。（1）斑點：根、莖、葉、花、果實病部局部組織或細胞壞死，產(chǎn)生各種形狀、大小和顏色不一樣斑點，如玉米大、小斑病、煙草赤星病、白菜黑斑病等。（2）枯死：芽、葉、枝、花局部或大部分組織發(fā)生變色、焦枯、死亡。如馬鈴薯晚疫病、水稻白葉枯病。（3）穿孔、落葉和落果：在病斑外圍組織形成離層，是病斑從健康組織中脫落下來，形成穿孔，如桃細菌性穿孔病等；有些植物花、葉、果等感病后，在葉柄或果梗附近產(chǎn)生離層而引發(fā)過早落葉、落果等。（4）瘡痂：果實、嫩莖、塊莖等受病組織局部木栓化，表面粗糙，病部較淺，如柑桔瘡痂病、馬鈴薯瘡痂病等。（5）潰瘍：病部深入到皮層，組織壞死或腐爛，病部面積大，稍凹陷，周圍寄主細胞有時增生和木栓化，多見與木本植物枝干上潰瘍癥狀。如楊樹潰瘍病、柑桔潰瘍病、番茄潰瘍病等。（6）猝倒和立枯：大多發(fā)生在各種植物苗期，幼苗莖基或根冠組織壞死，地上部萎蔫以致死亡，如番茄立枯病、瓜苗猝倒病等。3．萎蔫植物整株或部分枝葉萎垂死亡，病株莖、根常見維管束組織變黑、變褐；如植株快速萎蔫死亡，而葉片仍保持綠色成為青枯。引發(fā)植物萎蔫原因有生理性和病理性兩種。如瓜類枯萎病、棉花黃萎病、茄科植物青枯病等。4．腐爛是較大面積植物組織分解和破壞表現(xiàn)，依照癥狀及失水快慢有分為干腐和濕腐。如玉米干腐病、蘋果腐爛病、甘薯莖線蟲病都是干腐癥狀；濕腐如大白菜軟腐病、柑桔貯藏期青霉病、甘薯根霉軟腐病。5．畸形因為病組織或細胞生長受阻或過分增生而造成形態(tài)異常。植物病害畸形癥狀很多，常見有：（1）徒長：如水稻惡苗病。（2）矮化、矮縮和叢生：矮化濕植株各個器官長度成百分比變短或縮小，病株比健株矮小得多，如玉米矮化病。矮縮則主要是節(jié)間縮短莖葉簇生在一起，如水稻矮縮病、小麥黃矮病等。叢生是枝條或根異常地增多，造成叢枝或叢根，如棗瘋病、泡桐從枝病和小麥叢矮病。（3）瘤腫：病部細胞或組織因受病原物刺激而增生或增大，展現(xiàn)出瘤腫，如桃樹根癌病、煙草根結(jié)線蟲病等。（4）卷葉：葉片卷曲與皺縮，有時病葉變厚、變硬，嚴重時呈卷筒狀，如馬鈴薯卷葉病和蠶豆黃化卷葉病。（5）蕨葉：葉片發(fā)育不良，葉片變成絲狀、線狀或蕨葉狀，如番茄蕨葉病。雙子葉植物受2，4-D藥害也常變成蕨葉狀。（6）花器葉片化：正?；ㄆ髯兂扇~片狀結(jié)構(gòu)，使植物不能正常開花堅固，如玉米霜霉病。（二）病征類型病征是指在植物病部形成、肉眼可見病原物結(jié)構(gòu)。識別各種不一樣類型病征，對診療病害很有幫助。病征顯著病害有：1、綿腐病：受病部位長出放射狀白色絲狀物病征。病害有瓜類綿腐病、水稻綿腐病等。2、霜霉?。憾鄰娜~反面長出白色或深色霉狀物。如十字花科蔬菜霜霉病、向日葵霜霉病、菠菜霜霉病等。3、白粉?。褐饕獜娜~片表面長出白色粉狀物。如小麥白粉病、瓜類白粉病、蘋果白粉病等。4、黑粉?。涸谥参锼氩炕蚱溆嗖课滑F(xiàn)出黑色粉狀物。病害有小麥腥黑粉病、玉米絲黑穗病、小麥散黑粉病。5、煤污?。褐参锶~、莖、果實等器官上鋪滿煤煙狀物。如茶煤病、柑桔煤污病、桑污葉病等。6、銹?。褐参锶~、莖上常自破裂小皰中，散出鮮黃色或深褐色如鐵銹狀粉狀物。病害有玉米銹病、小麥銹病、菜豆銹病、蠶豆銹病、玫瑰銹病等。7、白銹?。喝~片正面或反面長出乳白色孢子堆，破裂后散出白色粉狀物。如莧菜白銹病、油菜白銹病等。8、霉?。翰〔砍霈F(xiàn)霉狀物，如綠霉、黑霉、灰霉、赤霉等。病害有柑桔青霉病、甘薯軟腐病、番茄灰霉病、小麥赤霉病等。9、菌核?。翰〔砍霈F(xiàn)球形、角狀或不規(guī)則形菌核。如水稻紋枯病、稻曲病油菜菌核病等。10、小黑粒和小黑點：如小麥白粉病、梨輪紋病、辣椒炭疽病等。11、高等擔子菌所致病害：病部常出現(xiàn)膜狀、塊狀和傘狀物。12、菌膿（細菌病害病征）：通常在病部出現(xiàn)液滴狀或顆粒狀菌膿。如水稻白葉枯病和水稻條斑病等。三、試驗原理、方法和伎倆仔細觀察植物病害標本，注意發(fā)病部位病狀特點，有沒有病征，認識各類型癥狀基本特征。四、試驗組織運行要求采取集中講課形式。五、試驗條件1、供觀察標本：甘蘭根腫病Plasmodiophorabassicae馬鈴薯癌腫病Synchytriumendobioticum白菜白銹病Albuocandida油菜菌核病Sclerotiniasclerotiorum玉米黑粉病Ustilagomaydis小麥腥黑穗病Tilletiafoetida(光腥)Tilletiacaries(網(wǎng)腥)小麥條銹病Pucciniastriiformis柑桔青霉病Penicilliumitalicum柑桔瘡痂病Elsinoefawcetti玉米小斑病Bipolarismaydis番茄早疫病Alternariasolani菜豆炭疽病Colletotrichumlindmuthianum柑桔潰瘍病Xanthomonascitri桃穿孔病Phyllostictapecsicae煙草根結(jié)線蟲病Meloidogyneincognitavar.acrita棗瘋病Jujbewitches’broom，Phytoplasma番茄蕨葉病Cucumbermosaicvirus2、用具幻燈片、掛圖、擴大鏡、刀片等。六、思索題1、癥狀在病害診療中作用。2、植物病害病狀、病征類型有哪些？七、試驗匯報1．試驗預習 試驗前每位同學都要對此次試驗進行認真預習，并寫好預習匯報，在預習匯報中要寫出試驗?zāi)繕?、?nèi)容和方法。2．試驗統(tǒng)計 選擇不一樣癥狀類型病害，將所觀察植物病害癥狀結(jié)果統(tǒng)計于試驗匯報中，最少描述10種病害。 3．試驗匯報格式見附錄1。八、其它說明將所觀察植物病害癥狀結(jié)果統(tǒng)計于下表中。標本編號病害名稱發(fā)病部位病狀類型病征癥狀特點試驗時應(yīng)該注意：1.操作時必須恪守試驗室規(guī)則，服從任課老師指導。2.試驗前每人取好指定編號顯微鏡，并進行檢驗，試驗時要愛護一切用具及試驗材料，如有損壞，應(yīng)及時匯報任課老師。3.試驗完成，顯微鏡擦潔凈后放回原處，試驗材料及用具均需整理清潔，并放回原處。桌面和試驗室均須清掃潔凈。大學試驗匯報學院：專業(yè)：班級：姓名學號試驗組試驗時間指導教師成績試驗項目名稱試驗?zāi)繕嗽囼瀮?nèi)容試驗總結(jié)指導教師意見署名：年月日作業(yè)試驗二菌物形態(tài)特征觀察一、目標要求經(jīng)過本試驗了解根腫菌門、卵菌門和子囊菌門、擔子菌門、半知菌門菌物主要形態(tài)特征，掌握與植物病害關(guān)于主要屬基本形態(tài)特征、分類依據(jù)及其所致病害癥狀特點。同時，學習使用檢索表來判定病菌，為分類判定打下初步基礎(chǔ)。二、材料與儀器1.材料根腫菌屬（Plasmodiophora）腐霉屬：瓜果腐霉菌(Pythiumaphanidermatum)疫霉屬：致病疫霉（馬鈴薯晚疫病菌）(Phytophthorainfestans)或辣椒疫病菌(P.capsici)盤梗霉屬：萵苣霜霉病菌（Bremialactucae）霜霉屬：十字花科植物霜霉病菌(Peronosporaparasitica)白粉菌屬：蓼白粉病菌（Erysiphepolygoni）單絲殼屬：瓜類白粉病菌（Sphaerothecafuliginea）單孢銹屬：豇豆銹病菌（Uromycesvignae）多孢銹菌屬：玫瑰銹病菌(Phragmidiumrosaemaltifeorae)黑粉菌屬：小麥散黑穗病菌（Ustilagotritici）交鏈孢屬(Alteraria)鐮孢屬(Fusarium)灰霉（Botrytis）炭疽菌屬（Colletotrichum）葉點霉屬（Phyllosticta）病害標本、掛圖、病原菌半永久性玻片，多媒體教學課件（包含幻燈片、錄象帶、光盤等影像資料）等。2.用具顯微鏡、幻燈機、投影儀、計算機及多媒體教學設(shè)備、解剖針、載玻片和蓋玻片等。三、試驗內(nèi)容和方法（一）根腫菌門特征觀察根腫菌屬（Plasmodiophora）觀察在寄主細胞內(nèi)堆積成魚籽狀顆粒，是病菌休眠孢子。（二）卵菌門特征觀察(1)腐霉屬（Pythium）觀察孢囊梗、孢子囊、泡囊及卵孢子形態(tài)特征，觀察腐霉菌引發(fā)病害癥狀。(2)疫霉屬（Phytophthora）觀察孢囊梗、孢子囊及卵孢子形態(tài)特征和疫霉菌引發(fā)病害癥狀。(3)霜霉屬（Peronospora）觀察孢囊梗、孢子囊及卵孢子形態(tài)特征和霜霉菌引發(fā)病害癥狀。霜霉屬孢囊梗呈雙叉式銳角分枝2~10次，未端尖銳。孢子囊卵圓形，無色或有色，萌發(fā)產(chǎn)生芽管。藏卵器內(nèi)卵周質(zhì)顯著，卵孢子圓球形，單個，表面光滑或有飾紋。(4)盤梗霉屬（Bremia）觀察孢囊梗、孢子囊及卵孢子形態(tài)特征和盤梗霉菌引發(fā)病害癥狀。注意孢囊梗分枝特點及分枝末端特征，分枝末端是否膨大呈盤狀？邊緣是否有小梗？（三）子囊菌門特征觀察（1）白粉屬（Erysiphe）觀察閉囊殼、隸屬絲形態(tài)特征及閉囊殼內(nèi)子囊數(shù)目和引發(fā)病害癥狀。（2）單絲殼屬（Sphaerotheca）觀察閉囊殼、隸屬絲形態(tài)特征及閉囊殼內(nèi)子囊數(shù)目和引發(fā)病害癥狀。注意與白粉屬區(qū)分。（四）擔子菌形態(tài)特征觀察1.銹菌目（Uredinales）（1）單胞銹菌屬（Uromyces）觀察冬孢子形態(tài)及引發(fā)病害癥狀特征。（2）柄銹菌屬（Puccinia）觀察冬孢子形態(tài)及引發(fā)病害癥狀特征。（3）多胞銹菌屬（Phragmidium）觀察冬孢子形態(tài)及引發(fā)病害癥狀特征。注意冬孢子細胞個數(shù)。2.黑粉菌目（Ustilaginales）（1）黑粉菌屬（Ustilago）觀察黑粉菌冬孢子形態(tài)、冬孢子萌發(fā)特點，觀察黑粉菌引發(fā)病害癥狀特點。（五）半知菌形態(tài)特征觀察（1）交鏈孢屬(Alteraria)觀察分生孢子梗、分生孢子形態(tài)特征。分生孢子褐色，磚格狀分隔（2）鐮孢屬(Fusarium)觀察分生孢子梗、分生孢子形態(tài)特征。注意鐮刀菌有兩型分生孢子：大型，鐮刀狀；小型，圓形、卵圓形。（3）炭疽菌屬（Colletotrichum）觀察分生孢子盤、分生孢子梗、分生孢子形態(tài)特征。分生孢子盤有黑褐色剛毛，通常著生在分生孢子盤周圍，數(shù)目較少。分生孢子梗較短，無色。分生孢子長橢圓形，后成月牙形。（4）葉點霉屬（Phyllosticta）觀察分生孢子器、、分生孢子形態(tài)特征。分生孢子器埋生，單腔，有孔口。分生孢子近卵圓形，單胞，無色。四作業(yè)1繪制四種菌物形態(tài)特征圖；2制作觀察到全部菌物屬分類檢索表。試驗三：原核生物病害植物線蟲、植物病毒病害及寄生性種子植物觀察一、試驗?zāi)繕私?jīng)過試驗，掌握原核生物病害噴菌現(xiàn)象，植物寄生線蟲形態(tài)特征，了解植物病毒所致病害外部癥狀特征，并掌握利用這些特征進行診療通常方法；認識不一樣類型寄生性種子植物及其所致病害特點。二、試驗內(nèi)容1、原核生物噴菌現(xiàn)象取水稻白葉枯病或煙草青枯病標本，用剪刀剪取病健交界處小塊組織，置于載玻片上，加一滴蒸餾水蓋上蓋玻片，用手輕壓一下后，對光觀察可見噴菌現(xiàn)象，如放到低倍鏡下觀察，能夠很清楚地看到剪口處有大量細菌從組織中流出。2、植物線蟲分離方法（1）貝曼漏斗法適合從植物組織中和土壤中分離線蟲，適合分離能運動線蟲。分離時在漏斗內(nèi)放大小適中金屬或塑料篩，篩上鋪紗布，漏斗下面接一有止水夾橡皮管，加樣本于篩上，以水淹沒后靜置。因為線蟲趨水性和本身重量，脫離樣本，游到水中，最終集中沉降在橡皮管下端。該方法簡便，不需復雜設(shè)備，易操作，缺點是漏斗內(nèi)尤其是橡皮管到缺氧，不利于活動線蟲存活，分離效率低。（2）淺盤法適合分離植物組織和土壤中能運動線蟲。原理與漏斗法相同。（3）過篩法適合分離土壤中運動和不運動雌雄同形線蟲種類。（4）漂浮器分離法分離土壤樣品中胞囊線蟲胞囊。（5）直接解剖分離法將洗凈病組織直接放入盛有適量水培養(yǎng)皿內(nèi)，置于解剖鏡下，用解剖針或刀小心撕破或切開組織，剝?nèi)【€蟲或待寄生線蟲離開組織進入水中后，用挑針挑取或用吸管吸收線蟲。這種方法適合分離少許病組織中活動和不活動蟲體相對較大線蟲。3、植物線蟲形態(tài)特征觀察（1）觀察水稻潛根線蟲形態(tài)（雌雄同形）在顯微鏡下仔細觀察，找出水稻潛根線蟲雌蟲陰門和肛門所在位置；在顯微鏡下仔細觀察，找出水稻潛根線蟲雄蟲交合刺，抱片和肛門所在位置。（2）觀察雌雄異形線蟲形態(tài)剪取嚴重感染根結(jié)線蟲病煙草根部根結(jié)放于小培養(yǎng)皿內(nèi)水中，在雙目解剖鏡下，用挑針將根結(jié)內(nèi)雌蟲4齡幼蟲，三齡幼蟲和二齡幼蟲，從根結(jié)中解剖出來，并用習慣分別吸收放于凹型載玻片上用顯微鏡分別觀察它們形態(tài)特征。然后，將后，將雌蟲刺破，觀察線蟲卵及卵內(nèi)一齡幼蟲形態(tài)。因為根結(jié)線蟲雄蟲罕見（雌蟲線狀），故不觀察雄蟲形態(tài)。4、植物病毒病害外部