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分子生物學(xué)根本學(xué)問(wèn)點(diǎn)一、填充題1、質(zhì)粒按功能分類(lèi)有 F質(zhì)粒、R質(zhì)粒和Col質(zhì)粒。23、分子雜交反響主要由4、臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)試驗(yàn)室必定包括四個(gè)工作地域③擴(kuò)增反響區(qū);④產(chǎn)物解析區(qū)。
①試劑貯存和預(yù)備區(qū) ;②標(biāo)本制備區(qū);5、腫瘤發(fā)生分三個(gè)階段:
啟動(dòng)階段、促癌階段和轉(zhuǎn)變階段。6、生物芯片技術(shù)是依照生物分子之間特異性相互作用的原理,如
DNA-DNA、DNA-RNA、抗原--配體之間能夠發(fā)生的復(fù)性與特異性結(jié)合,設(shè)計(jì)其中的一方為探針。7、核酸分子雜交技術(shù)按雜交探針標(biāo)志的不同樣能夠分為 同位素雜交和非同位素雜交。8PCR基因組DNA、RNA、質(zhì)粒DNA和線粒體DNA。9DNA基因診斷、DNA10、質(zhì)粒提取方法主要有SDS11PCRdNTP指的是dATPdCTP、dGTPdTTP四種脫氧核苷三磷酸。12、在試管中進(jìn)展的DNA復(fù)制過(guò)程稱(chēng)為PCR和延長(zhǎng)。DNA雙螺旋的氫鍵斷裂是在13、基因重組中用來(lái)鑒別和切割雙鏈 DNA分子中特定核苷酸序列的酶是限制性?xún)?nèi)切酶,假設(shè)產(chǎn)生的缺口錯(cuò)開(kāi)突出,稱(chēng)為 粘尾端。假設(shè)產(chǎn)生的缺口不錯(cuò)開(kāi),稱(chēng)為平尾端。DIP
蛋白質(zhì)序列數(shù)據(jù)庫(kù)、蛋白質(zhì)構(gòu)造數(shù)據(jù)庫(kù) 、蛋白質(zhì)直系同源簇15、轉(zhuǎn)位的遺傳效應(yīng)是基因重排、引起突變和引人的基因。16、依照雜交核酸分子的種類(lèi),能夠?qū)⒑怂岱肿与s交分為RNARNA雜交。
DNADNADNARNA雜交和17DNA重組載體有:質(zhì)粒載體、噬菌體載體、穿越載體和人工染色體。18、基因工程中,平尾端連接法主要有
平接法、同聚體加尾法和人工接頭法三種方法。19、聚合酶鏈反響條件主假設(shè)是
20、在生物芯片技術(shù)中,依照芯片上固定的探針?lè)N類(lèi)分為和組織芯片等。
DNA芯片、蛋白質(zhì)芯片、細(xì)胞芯片21、核酸探針的種類(lèi)有DNARNA探針和寡核苷酸探針。22、核酸探針標(biāo)志方法主要有為內(nèi)含子。
編碼序列與非編碼序列呈間隔排列。前者稱(chēng)為 外顯子,后者稱(chēng)24、PCR試驗(yàn)系統(tǒng)中的污染主要有擴(kuò)增片段的污染〔產(chǎn)物污染〕 、試劑污染和標(biāo)本間的交織污染。25、基因表達(dá)包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個(gè)過(guò)程。26DNA重組技術(shù)中常用的DNADNATaqDNAT4尾端轉(zhuǎn)移酶。27RNAPCRPCR。28、細(xì)胞調(diào)亡又稱(chēng)為細(xì)胞程序性死亡,擁有特其他生物學(xué)意義。29、轉(zhuǎn)位因子包括插入序列、轉(zhuǎn)座子、可轉(zhuǎn)座的噬菌體。二、選擇題1、沒(méi)有功能的基因是〔 〕?!睞〕假基因 〔B〕重復(fù)序列 〔C〕多基因家族 〔D〕重疊基因2PCR反響中,變性溫度一般定在〔〔B〕40-70℃
〕。〔C〕72℃ 〔D〕36℃3、凋亡小體消滅在〔 〕?!睞〕細(xì)胞壞死中 〔B〕程序性死亡中 〔C〕細(xì)胞變性中 〔D〕超敏反響中4、SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳可應(yīng)用在〔 〕?!睞〕蛋白質(zhì)解析 〔B〕DNA解析〔C〕RNA基因解析 〔D〕糖解析5、異硫氰酸鉀—酚氯仿一步法是提取〔〔C〕蛋白質(zhì)6DNA重組中使用的質(zhì)粒大多為〔
〕的方法。DcDNA〕。〔A〕親熱型質(zhì)粒7、細(xì)胞調(diào)亡是一種〔
B〕松馳型質(zhì)?!超F(xiàn)象。
〔C〕抗藥性質(zhì)粒 〔D〕F質(zhì)?!睞〕細(xì)胞壞死
〔B〕細(xì)胞程序性死亡 〔C〕炎性反響
〔D〕超敏反響8、人的體細(xì)胞擁有46條染色體,屬于〔 〕?!睞〕單倍體 〔B〕二倍體 〔C〕三倍體 〔D〕二價(jià)體9PCR反響的引物需要〔〔A〕1條 〔B〕2條
〕?!睠〕3條 〔D〕4條10、原位雜交在〔 〕進(jìn)展。〔A〕濾膜的DNA上〔B〕凝膠的DNA上〔C〕試管中的DNA上 〔D〕細(xì)胞的核酸上11、爭(zhēng)論蛋白質(zhì)組學(xué)是屬于〔 〕?!睞〕生命方案 〔B〕人類(lèi)基因組方案 〔C〕后基因組方案 〔D〕基因工程方案12、真核細(xì)胞基因組的構(gòu)造基因是斷裂基因,它含有〔 〕?!睞〕內(nèi)含子 〔B〕把握子 〔C〕復(fù)制子 〔D〕重組子13、第一個(gè)成立的人工染色體是〔 〕?!睠〕酵母人工染色體
〔B〕噬菌體人工染色體D〕哺乳動(dòng)物人工染色體14、核酸分子雜交依照雜交介質(zhì)的不同樣,能夠分為液相雜交,固相雜交和〔 〕?!睞〕原位雜交 〔B〕菌落雜交〔C〕點(diǎn)與狹縫雜交 〔D〕同位素雜交15、變性梯度凝膠電泳可應(yīng)用在〔 〕?!睞〕蛋白質(zhì)解析 〔B〕DNA解析〔C〕RNA解析〔D〕糖類(lèi)解析16、以下幾種試驗(yàn)方法中,哪一種方法不是
DNA序列測(cè)定方法〔 〕?!睞〕雙脫氧鏈停頓法 〔B〕化學(xué)降解法 〔C〕雜交法〔D〕平端連接法17、RNA解析應(yīng)使用〔 〕雜交方法。印跡 〔B〕Northern 印跡〔C〕Western 印跡〔D〕Eastern 印跡18、以下哪一種現(xiàn)象不是屬于細(xì)胞程序性死亡〔 〕?!睞〕皮膚分為真皮與表皮〔C〕指〔趾〕甲的形成19、法醫(yī)學(xué)中親子推斷應(yīng)用〔
B〕血細(xì)胞的去世與再生D〕細(xì)胞壞死〕?!睟〕STR單倍型解析〔C〕單核苷酸多態(tài)性解析 〔D〕免疫印跡解析20、以下哪一種方法又稱(chēng)為免疫印跡〔 〕。印跡〔B〕Northern 印跡21、以下哪一種疾病和細(xì)胞凋亡無(wú)主要關(guān)系〔
〔C〕Western 印跡〔D〕Eastern 印跡〕?!睞〕血友病 〔B〕腫瘤粒載體應(yīng)擁有〔〔A〕1種 〔B〕2種
〔C〕系統(tǒng)性紅斑狼瘡 〔D〕老年性癡呆〕抗菌素抗性標(biāo)志?!睠〕3種 〔D〕4種23、DNA測(cè)序中,酶法指的是〔 〕。〔A〕雙脫氧鏈停頓法 〔B〕化學(xué)降解法〔C〕酶切法〔D〕酶解法24、基因工程中,將不同樣根源的 DNA分子進(jìn)展特異地切割使用的是〔 〕。聚合酶〔B〕逆轉(zhuǎn)錄酶
C〕連接酶D〕限制性?xún)?nèi)切酶〕?!睞〕酶法 〔B〕酶切法 〔C〕酶解法〔D〕化學(xué)降解法26、成立cDNA時(shí)使用的酶是〔 〕?!睞〕限制性?xún)?nèi)切酶 〔B〕DNA聚合酶〔C〕逆轉(zhuǎn)錄酶 〔D〕連接酶27、真核生物基因組與原核生物基因組的差異是前者基因中一般擁有〔 〕?!睞〕把握子 〔B〕復(fù)制子 〔C〕內(nèi)含子 〔D〕重組子28、原核生物基因組與真核生物基因組的差異是前者基因組中擁有〔 〕?!睞〕把握子 〔B〕復(fù)制子 〔C〕內(nèi)含子 〔D〕重組子30、PCR反響中,鏈的延長(zhǎng)溫度一般定在〔〔A〕95-97℃ 〔B〕40-70℃
〕?!睠〕72℃ 〔D〕36℃31、隱性癌基因一般指的是〔〔A〕細(xì)胞癌基因 〔B〕病毒癌基因
〕?!睠〕原癌基因 〔D〕抑癌基因三、簡(jiǎn)答題1PCR為根底的相關(guān)技術(shù)有哪些逆轉(zhuǎn)錄PCRPCRPCRPCR、差異顯示PCR、PCRPCR。2、核酸分子雜交的種類(lèi)有哪些依照雜交核酸分子分為 DNA與DNA、DNA與RNA、RNA與RNA雜交;依照探針標(biāo)志分為同位素與非同位素雜交;依照雜交介質(zhì)分為液相雜交、固相雜交、原位雜交。3、簡(jiǎn)述PCR試驗(yàn)系統(tǒng)中的主要污染。PCR試驗(yàn)系統(tǒng)中的污染主要有擴(kuò)增片段的污染〔產(chǎn)物污染〕 、試劑污染和標(biāo)本間的交織污染,其中污染的最主要根源是擴(kuò)增產(chǎn)物的污染。4DNA重組的工具酶主要有哪些限制性?xún)?nèi)切酶、DNA聚合酶、DNA連接酶、T4多核苷酸海激酶、堿性磷酸酶。5、核酸探針主要有哪些種類(lèi)DNARNA探針、寡核苷酸探針。6、基因組DNA分別純化的方法有幾類(lèi)酚抽提法、甲酰胺解聚法、玻棒圍繞法、其他方法,如異丙醇積淀法。7、什么是蛋白質(zhì)芯片技術(shù)經(jīng)過(guò)機(jī)械點(diǎn)涂的方法,將多肽或蛋白質(zhì)高密度點(diǎn)陣并固定在載體外表,與標(biāo)志的配體進(jìn)展雜交,依照雜交信號(hào)的有無(wú)、多少進(jìn)展定性與定量解析方法稱(chēng)為蛋白質(zhì)芯片技術(shù)。8PCR反響系統(tǒng)的主要成分包括哪些參與PCR反響的成份主假設(shè)是模板、引物、 dNTP、TaqDNA聚合酶和緩沖液等。9、雜交反響的主要步驟有哪些包括預(yù)雜交、雜交、洗脫三個(gè)步驟10、限制性?xún)?nèi)切酶的主要用途是什么12DNA3DNA4〕DNA5DNA雜交與序列解析。11、蛋白質(zhì)分別純化的一般程序是什么蛋白質(zhì)的種類(lèi)、性質(zhì)、所處系統(tǒng)以及蛋白質(zhì)分別純化的目的不同樣,因此不能能有一個(gè)固定的程序適用于各種蛋白質(zhì)的分別工作。蛋白質(zhì)的分別純化程序一般包括前辦理、粗分別、細(xì)分別三個(gè)步驟。12、抱負(fù)的質(zhì)粒載體一般具備的特點(diǎn)①擁有廢弛型復(fù)制子;②在復(fù)制子外存在幾個(gè)單一的酶切位點(diǎn),以便目的 DNA片段插入;③擁有插入失活的精選標(biāo)志, 抱負(fù)的質(zhì)粒載體應(yīng)擁有兩種抗菌素抗性標(biāo)志;較小但有較高的拷貝數(shù)。13、簡(jiǎn)述DNA重組的主要內(nèi)容
④分子量相對(duì)目的DNA片段與載體被限制性?xún)?nèi)切酶切割并相互連接成 重組體,重組體轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞復(fù)制及表達(dá),重組子的精選與推斷。14、目前常用的DNA重組載體主要有幾類(lèi)質(zhì)粒載體、噬菌體載體、穿越載體、人工染色體15、簡(jiǎn)述防范RNaseRNA水解的。一要防范細(xì)胞外RNase的污染并把握其活性,二要趕忙地把握細(xì)胞內(nèi) RNase的活性并全力地去除RNase。16PCR反響的引物設(shè)計(jì)必定依照哪些〔1〕用于PCR反響的引物需要二條,分別設(shè)在被擴(kuò)增目標(biāo)片段的二端,并分別與模板正負(fù)鏈序列互補(bǔ)?!?〕引物的長(zhǎng)度一般以18-25個(gè)核苷酸為宜?!?〕二條引物之間〔特別在3ˊ端〕的序列不能有互補(bǔ),省得形成引物二聚體。 〔4〕引物的堿基組成應(yīng)平衡,防范出現(xiàn)嘌呤、嘧啶堿基積聚?!?〕PCR擴(kuò)增中的退火溫度是要依照引物的 Tm值而打算的,二條引物的Tm值不能夠差異太大?!?〕依照需要,合成引物時(shí)在其5ˊ端能夠加修飾成分。17PCR產(chǎn)物的檢測(cè)技術(shù)主要有哪些〔1〕PCR-2〕等位基因特異性寡核苷酸〔34〕變56PCR產(chǎn)物的序列解析18、腫瘤發(fā)生學(xué)說(shuō)主要內(nèi)容是什么腫瘤的發(fā)生是由多種致癌因素綜合作用的結(jié)果。當(dāng)正常細(xì)胞遇到物理因素 (如紫外線、電離輻射等)、化學(xué)因素(如黃曲霉毒素)以及生物因素(DNA或RNA致癌病毒)等致癌因子作用后,經(jīng)屢次打擊多階段變化便形成了腫瘤。19、蛋白質(zhì)解析中鹽析法的主要原理是什么原理是蛋白質(zhì)在低鹽濃度下的溶解度隨著鹽濃度高升而增加, 此時(shí)稱(chēng)為鹽溶;當(dāng)鹽濃度連續(xù)高升時(shí),蛋白質(zhì)溶解度又以不同樣程度下降并先后析出,稱(chēng)為蛋白質(zhì)的鹽析。四、看法題1、癌基因包括病毒癌基因(v-onc) 和細(xì)胞癌基因(c-onc) 兩種,擁有潛藏引誘細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)變的特點(diǎn)。2DNA重組不同樣根源的而重組合的過(guò)程,稱(chēng)為3、逆轉(zhuǎn)錄PCR逆轉(zhuǎn)錄PCR是以細(xì)胞內(nèi)總RNAmRNA為資料進(jìn)展體外擴(kuò)增的技術(shù)。4、核酸分子雜交技術(shù)
DNA分子,經(jīng)過(guò)磷酸二酯鍵鏈接DNA重組。根源不同樣的單鏈核酸分子在適宜的溫度和離子強(qiáng)度下, 經(jīng)過(guò)堿基互補(bǔ)形成雙鏈雜交體, 這類(lèi)技術(shù)稱(chēng)作核酸分子雜交技術(shù)。5、基因RNA外,還包括為獲得一個(gè)特異性產(chǎn)物所必定的相關(guān)序列。6、內(nèi)含子是構(gòu)造基因中的非編碼序列,常常與編碼序列呈間隔排列。當(dāng)基因轉(zhuǎn)錄后,在 mRNA的成熟過(guò)程中被剪切。7、變性DNA分子成為單鏈,這一過(guò)程稱(chēng)作變性或融解。8、克隆克隆是指由一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過(guò)無(wú)性生殖今后形成的子代集體。9、限制性?xún)?nèi)切酶它是一類(lèi)核酸水解酶,能鑒別和切割雙鏈 分子中的特定核苷酸序列。10、抑癌基因抑癌基因又稱(chēng)抗癌基因(anti-onc) ,是存在于正常細(xì)胞內(nèi)的一類(lèi)可把握細(xì)胞生長(zhǎng)的基因,并有潛藏抑癌作用。當(dāng)這類(lèi)基因發(fā)生突變、缺失或失活時(shí),可引起細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)變而以致腫瘤的發(fā)生。11、基因組是細(xì)胞或生物體中一套完滿的遺傳物質(zhì)。12、質(zhì)粒是獨(dú)立于細(xì)菌細(xì)胞染色體以外,能自主復(fù)制的共價(jià)閉合環(huán)狀 13、端粒酶一種可催化寡聚核苷酸單鏈的尾端延長(zhǎng)的酶, 由于這類(lèi)酶可催化端粒的延長(zhǎng), 因此將它命名為端粒酶。14、把握子是指原核生物基因組中數(shù)個(gè)功能上相關(guān)系的構(gòu)造基因串通在一起, 組成信息區(qū),連同其上游的調(diào)控區(qū)(包括啟動(dòng)基因和把握基因 )以及下游的轉(zhuǎn)錄停頓信號(hào)所組成的基因表達(dá)單位。15、融解溫度在溫度高升引起的 DNA變性過(guò)程中,DNA的變性會(huì)在一個(gè)很狹窄的溫度范圍內(nèi)發(fā)生,這一溫度范圍的中點(diǎn)被稱(chēng)作融解溫度。16DNA重組載體載體是攜帶靶DNA〔目的DNA〕片段進(jìn)入宿主細(xì)胞進(jìn)展擴(kuò)增和表達(dá)的運(yùn)載工具。常用的載體是經(jīng)過(guò)改造自然的細(xì)菌質(zhì)粒、噬菌體和病毒等成立而成。17、外顯子是構(gòu)造基因中的編碼序列,常常被內(nèi)含子所間隔,當(dāng)基因轉(zhuǎn)錄后,mRNA在成熟過(guò)程中切去內(nèi)含子,外顯子才被拼接成完滿的序列,成為成熟的mRNA,作為指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成的模板。18、重疊基因指同一段DNA序列能編碼2~3種蛋白質(zhì)多肽鏈。即編碼序次位于同一段相互重疊。19、核酸雜交
DNA序列中,并將一種核酸單鏈標(biāo)志成為探針, 再與另一種核酸單鏈進(jìn)展堿基互補(bǔ)配對(duì), 能夠形成異源核酸分子的雙鏈構(gòu)造,這一過(guò)程稱(chēng)作核酸雜交。20、多重PCR在同一反響系統(tǒng)中參與多對(duì)引物,同時(shí)擴(kuò)增一份 DNA樣品中多個(gè)不同樣序列的靶片段。21、核酶是一類(lèi)擁有酶的催化活性的小 RNA分子,在RNA合成后的剪接修飾中擁有重要作用。22、復(fù)性變性DNA只要除掉變性條件,擁有堿基互補(bǔ)地域的單鏈又能夠重結(jié)合形成雙鏈, 這一過(guò)程稱(chēng)作復(fù)性。23、廢弛型質(zhì)粒其復(fù)制不受宿主細(xì)胞嚴(yán)格把握的質(zhì)粒。24、原位雜交是應(yīng)用核酸探針與組織細(xì)胞中的核酸按堿基配對(duì)進(jìn)展特異性雜交, 此后應(yīng)用組織化學(xué)或免疫組織化學(xué)方法在顯微鏡下進(jìn)展細(xì)胞內(nèi)定位或基因表達(dá)的檢測(cè)技術(shù)。25、Northern 印跡靶核酸是RNA的印跡雜交。26、間隔區(qū)DNA真核生物的基因之間存在著編碼空白區(qū)或轉(zhuǎn)錄的空白區(qū),稱(chēng)之為間隔區(qū)
DNA。這些序列往往在單拷貝的構(gòu)造基因側(cè)翼, 并使構(gòu)造基因相互分開(kāi),27、單順?lè)醋?/p>
間隔區(qū)DN
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