（優(yōu)選）章核苷酸和核酸當(dāng)前第1頁\共有28頁\編于星期四\10點2.脫氧核苷酸的水解——脫嘌呤當(dāng)前第2頁\共有28頁\編于星期四\10點3.紫外線和一些化學(xué)因子、烷化劑對DNA的損傷當(dāng)前第3頁\共有28頁\編于星期四\10點亞硝酸當(dāng)前第4頁\共有28頁\編于星期四\10點烷化劑：乙基甲烷磺酸（EMS）當(dāng)前第5頁\共有28頁\編于星期四\10點紫外線誘導(dǎo)胸腺嘧啶二聚體當(dāng)前第6頁\共有28頁\編于星期四\10點4.與嵌合劑的反應(yīng)當(dāng)前第7頁\共有28頁\編于星期四\10點當(dāng)前第8頁\共有28頁\編于星期四\10點溴乙啶丫啶橙

放線菌素D

當(dāng)前第9頁\共有28頁\編于星期四\10點二、DNA的酶法甲基化（methylation）甲基供體：S—腺苷甲硫氨酸甲基受體：被修飾堿基（A、C多于G、T）堿基的甲基化修飾不是隨機的，而是限于一定的順序或DNA的某一區(qū)域，在甲基化酶的作用下進行，甲基化是可逆的。甲基化的意義：幫助細胞識別和區(qū)分自身DNA和外來DNA；調(diào)節(jié)基因表達；幫助DNA修復(fù)等。當(dāng)前第10頁\共有28頁\編于星期四\10點第八節(jié)

核酸酶和DNA限制性內(nèi)切酶當(dāng)前第11頁\共有28頁\編于星期四\10點一、核酸酶（nuclease）能水解核酸的酶為核酸酶核酸酶都是磷酸二酯酶（phosphodiesterases）當(dāng)前第12頁\共有28頁\編于星期四\10點核酸酶的分類按底物專一性分類：核糖核酸酶(RNase)和脫氧核糖核酸酶(DNase)按作用方式分類：內(nèi)切核酸酶和外切核酸酶內(nèi)切核酸酶：從核酸的內(nèi)部切割核酸鏈，產(chǎn)生核酸鏈片段。外切核酸酶：從核酸鏈的一端逐個切斷磷酸二酯鍵，釋放單核苷酸。按磷酸二酯鍵斷裂方式：3’-核酸酶和5’-核酸酶當(dāng)前第13頁\共有28頁\編于星期四\10點當(dāng)前第14頁\共有28頁\編于星期四\10點核酸酶對其底物的作用具有特異性當(dāng)前第15頁\共有28頁\編于星期四\10點當(dāng)前第16頁\共有28頁\編于星期四\10點二、限制性內(nèi)切酶（restrictionendonuclease）

限制性內(nèi)切酶是從細菌中分離的一類專門識別和水解特定核苷酸序列的內(nèi)切酶類。這類酶在原核生物體內(nèi)，用于“防御”外來DNA的入侵，將外來DNA以獨特的方式切成無感染能力的片段，而自身不受損害（甲基化作用）。當(dāng)前第17頁\共有28頁\編于星期四\10點1.限制性內(nèi)切酶的分類Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ

基因工程技術(shù)中常用Ⅱ型當(dāng)前第18頁\共有28頁\編于星期四\10點不需要ATP參加；不對DNA進行甲基化或其它方式修飾。專門識別和切割特定的核苷酸序列，這個序列一般含4—6個核苷酸殘基，并具回文結(jié)構(gòu)“落鶴島上島落鶴，垂柳岸邊岸柳垂”。

2.II型限制性內(nèi)切酶

當(dāng)前第19頁\共有28頁\編于星期四\10點Ⅱ類酶識別序列特點

回文結(jié)構(gòu)palindrome當(dāng)前第20頁\共有28頁\編于星期四\10點切口（kerf）：粘端，平端當(dāng)前第21頁\共有28頁\編于星期四\10點當(dāng)前第22頁\共有28頁\編于星期四\10點當(dāng)前第23頁\共有28頁\編于星期四\10點3.限制性內(nèi)切酶的種類（約1000多種）

當(dāng)前第24頁\共有28頁\編于星期四\10點Hin

dⅢ

屬

系

株序Haemophilusinfluenzaed株流感嗜血桿菌d株的第三種酶命名naming第一個字母取自產(chǎn)生該酶的細菌屬（genus）名，用大寫；第二、第三個字母是該細菌的種（species）名，用小寫；第四個字母代表株（strain）；用羅馬數(shù)字表示發(fā)現(xiàn)的先后次序（sequence）。當(dāng)前第25頁\共有28頁\編于星期四\10點