消毒滅菌定稿第一頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三內(nèi)容提要:一、物品清洗二、消毒滅菌方法1.物理法2.化學(xué)法第二頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三一、清洗

體外細(xì)胞對(duì)任何有害物質(zhì)都非常敏感培養(yǎng)器皿嚴(yán)格清洗，依材料不同選擇不同清洗方法。第三頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三1.常用玻璃器皿清洗浸泡刷洗浸酸沖洗烘干（晾干）第四頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三（1）浸泡初次使用和培養(yǎng)使用后的玻璃器皿均需先用清水浸泡，以使附著物軟化或被溶液掉。新玻璃器皿表面帶有大量的干固的灰塵及對(duì)細(xì)胞有害的物質(zhì)等。新瓶先用自來(lái)水簡(jiǎn)單刷洗，再用5%稀鹽酸液浸泡過(guò)夜，以中和堿性物質(zhì)。再次使用的玻璃器皿則常附有大量蛋白質(zhì)，干固后不易洗掉，故用后要立即完全浸入水中。

第五頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三（2）刷洗

浸泡后的玻璃器皿一般要用毛刷沾洗滌劑刷洗，以除去器皿表面附著較牢的雜質(zhì)。刷洗要適度，過(guò)度會(huì)損害器皿表面光澤度。

第六頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三（3）浸酸（關(guān)鍵）清潔液：由重鉻酸鉀、濃硫酸和蒸餾水配制而成。去污能力很強(qiáng)，對(duì)玻璃器皿無(wú)腐蝕作用。浸泡時(shí)器皿要充滿，勿留氣泡。浸泡時(shí)間一般為過(guò)夜，不應(yīng)少于6小時(shí)。

注意：配酸時(shí)須穿戴耐酸手套和圍裙。先重鉻酸鉀溶于水中，再緩慢加濃硫酸并不停攪拌。配制溶液應(yīng)選擇塑料制品。配成后一般為棕紅色。時(shí)間長(zhǎng)會(huì)變色失效第七頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三清潔液的配制第八頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三（4）沖洗：清水充分洗滌?？捎孟礈煅b置或手工操作（20次）蒸餾水清洗3-5次去離子水沖洗一遍

（五）烘干用烘箱烘干或自然晾干第九頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三2.膠塞、蓋子等的清洗

不能用清潔液浸泡，常規(guī)清洗后，2％NaOH中煮10－20min，洗凈晾干，再用1％稀HCL泡30min,沖洗，蒸餾水2－3次，三蒸水一次，晾干備用第十頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三3、塑料制品的清洗2%NaOH浸泡過(guò)夜自來(lái)水充分沖洗5%鹽酸溶液浸泡30分鐘自來(lái)水和蒸餾水沖洗干凈，晾干備用。第十一頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三二、消毒滅菌

（一）消毒滅菌有關(guān)概念

1消毒：指殺死病原菌，但不包括芽胞。用以消毒的化學(xué)藥物稱為消毒劑。2滅菌：是指殺滅物體上所有微生物3無(wú)菌：物品中沒(méi)有活的微生物存在。4防腐：是指防止或抑制微生物生長(zhǎng)繁殖的方法。同一種化學(xué)藥品在高濃度時(shí)為消毒劑，低濃度為防腐劑5、無(wú)菌操作：防止細(xì)菌進(jìn)入機(jī)體或物品的操作技術(shù)。第十二頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三擦拭法高壓蒸汽滅菌法（二）常用消毒滅菌的方法物理法化學(xué)法浸泡法熏蒸法噴霧法熱力消毒法生物凈化法輻射消毒法燃燒法烤箱法煮沸法干熱法濕熱法日光曝曬法紫外線燈照射法電子滅菌燈法電離輻射法第十三頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三1.物理消毒滅菌法：（1）熱力消毒滅菌法：①干熱滅菌法：焚燒廢棄物、尸體燒灼接種環(huán)、試管口干烤高溫不損害、不變質(zhì)、不蒸發(fā)物品第十四頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三干烤用于消毒玻璃器皿，利用干烤箱滅菌（160~170oC，2h）優(yōu)點(diǎn)：器皿干燥，易保存缺點(diǎn)：熱傳導(dǎo)慢，需較長(zhǎng)時(shí)間和較高溫度注意：消毒完不可突然開(kāi)烤箱門(mén)，以免冷空氣突然進(jìn)入，影響消毒效果和損壞玻璃器皿或發(fā)生事故。第十五頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三干燥箱第十六頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三2、濕熱消毒滅菌法：巴氏消毒法

62℃30秒牛乳、酒精煮沸法

100℃5分鐘細(xì)菌繁殖體芽孢需1-2h流通蒸氣消毒法

100℃15—30分鐘繁殖體高壓蒸氣滅菌法

103.4kPa.121.3℃

15—20分鐘芽孢第十七頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三高壓蒸氣滅菌法滅菌效果最好。高壓蒸氣滅菌器是一個(gè)密閉、耐高壓蒸鍋。

103.4kPa（1.05kg/cm2）溫度可達(dá)121.3oC15~20min，可殺滅包括細(xì)菌芽胞在內(nèi)的所有微生物。常用于一般培養(yǎng)基、生理鹽水、實(shí)驗(yàn)用品等耐高溫、耐濕物品的滅菌。消毒前包裝：用硫酸紙、牛皮紙或棉布等。離心管、瓶塞、滴管等可放入鋁制飯盒中消毒。第十八頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三注意事項(xiàng)：1.滅菌包不宜過(guò)大，不超過(guò)30cm×30cm×25cm，放置時(shí)各包之間留有空隙，便于蒸汽流通。2.有孔的容器應(yīng)將孔蓋打開(kāi)，以利蒸汽進(jìn)入。3.布類(lèi)物品放在上層，瓶裝液體不宜過(guò)滿（不超過(guò)3/4)。4.被滅菌物品應(yīng)待干燥后，才能取出備用。5.定期監(jiān)測(cè)滅菌效果。6.滅菌物品，有效時(shí)間十天至兩周第十九頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三監(jiān)測(cè)滅菌效果的方法有：1.物理監(jiān)測(cè)法：用150℃或200℃的留點(diǎn)溫度計(jì)，滅菌后檢查其讀數(shù)是否達(dá)到滅菌溫度。

2.化學(xué)監(jiān)測(cè)法：臨床常用的有化學(xué)指示卡與化學(xué)指示膠帶，化學(xué)指示卡放在包的中央，化學(xué)指示膠帶粘貼在包的外面。

3.生物監(jiān)測(cè)法：是最可靠的監(jiān)測(cè)法，利用對(duì)熱耐受力較強(qiáng)的非致病性嗜熱脂肪桿菌芽胞作為指示劑。

第二十頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三高壓蒸汽滅菌鍋第二十一頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三濕熱與干熱滅菌效果的比較熱型溫度（℃）時(shí)間布層內(nèi)的溫度（℃）滅菌效果（h）20層40層100層濕熱90-105.33101101101.5完全干熱130-1404867270.5不完全

濕熱優(yōu)勢(shì)：1細(xì)菌蛋白質(zhì)在有水的情況下易于凝固變性2濕熱穿透力強(qiáng)3濕熱蒸氣有潛熱存在，水蒸氣凝固成水釋放潛熱，迅速提高被滅菌物體的溫度第二十二頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三日光曝曬法：6h可達(dá)消毒目的適用：被褥、床墊、毛毯、衣物等注意：定時(shí)翻動(dòng)

利用紫外線或其他一些射線，使菌體蛋白質(zhì)光解變性而死亡。（2）輻射殺菌法①日光曝曬第二十三頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三②紫外線燈管消毒法UVA:UVB:UVC:第二十四頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三②紫外線燈管消毒法最佳殺菌波長(zhǎng)：253.7nm最佳溫度、濕度：20℃以上，40％～50％，有效距離：物品：25～60cm,空氣：＜2m照射時(shí)間：燈亮5～7min后記時(shí)，＞30min適用：室內(nèi)空氣、物體表面(穿透力差)特點(diǎn)：簡(jiǎn)單、方便、無(wú)損物品類(lèi)型：懸吊式、移動(dòng)式、屏幕式第二十五頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三殺菌機(jī)制使菌體DNA失去轉(zhuǎn)換能力而死亡；破壞菌體蛋白質(zhì)中的氨基酸，使菌體蛋白光解變性；降低菌體內(nèi)氧化酶的活性，使氧化能力喪失；使空氣中的氧電離產(chǎn)生具有極強(qiáng)殺菌作用的臭氧。殺菌特點(diǎn)：可殺滅多種微生物，包括桿菌、病毒、真菌、細(xì)菌繁殖體等。第二十六頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三房間內(nèi)應(yīng)保持清潔、干燥；被消毒物品不能有遮蔽，經(jīng)常翻動(dòng)。燈管表面保持清潔。溫度過(guò)低或相對(duì)濕度過(guò)高，應(yīng)延長(zhǎng)照射時(shí)間。注意保護(hù)眼睛、皮膚，避免人體直接照射。注意保護(hù)燈管，關(guān)閉后勿即開(kāi)和移動(dòng)。定期監(jiān)測(cè)紫外線消毒效果。定期測(cè)量燈的輸出強(qiáng)度或建立使用登記本。紫外線消毒的注意事項(xiàng)第二十七頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三紫外線燈管強(qiáng)度監(jiān)測(cè)1.將強(qiáng)度測(cè)定儀置于燈管正中垂直1m處，開(kāi)燈照射5min，儀表即可指示強(qiáng)度，若低于70μW/cm2時(shí)，應(yīng)予更換。一般每3~6個(gè)月測(cè)定一次；2.無(wú)強(qiáng)度測(cè)定儀，則應(yīng)建立使用時(shí)間記錄卡，凡使用時(shí)間超過(guò)1000h，則應(yīng)更換。第二十八頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三

利用丙種（ｒ）射線或高能量電子束進(jìn)行滅菌，又稱“冷滅菌”，具有廣譜殺菌作用。③電離輻射滅菌法特點(diǎn)：不使物品升溫、穿透力強(qiáng)、操作 簡(jiǎn)便、成本低適用：忌熱物品，如一次性醫(yī)療物品、精密器械、生物制品、藥品、食品。第二十九頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三

臭氧發(fā)生管利用電場(chǎng)作用，將空氣中的氧氣轉(zhuǎn)換成高純臭氧，依靠其強(qiáng)大的氧化作用而殺菌。

④臭氧滅菌燈消毒法注意：關(guān)閉門(mén)窗、離開(kāi)現(xiàn)場(chǎng)，結(jié)束后 20～30min進(jìn)入第三十頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三（3）過(guò)濾除菌法：

用物理阻流的方法除去液體或空氣中的細(xì)菌，達(dá)到無(wú)菌的目的。主要用于不耐高溫的血清、抗毒素、抗生素、藥液以及空氣等的除菌。第三十一頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三用于濾過(guò)除菌的各式濾器第三十二頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三

采用空氣潔凈技術(shù)，通過(guò)初、中、高三級(jí)空氣過(guò)濾器，選用合理的氣流方式，濾除0.5~5um的塵埃，達(dá)到空氣潔凈的目的。適用：手術(shù)室、燒傷、血液、器官移植 病房

生物凈化法第三十三頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三

定義：用化學(xué)藥品進(jìn)行消毒。

作用機(jī)制：

①使菌體蛋白質(zhì)變性或凝固，②破壞細(xì)菌的酶系統(tǒng)③改變細(xì)菌細(xì)胞壁或胞漿膜的通透性，導(dǎo)致細(xì)菌死亡。

2.化學(xué)法第三十四頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三消毒劑的主要種類(lèi)、濃度及用途（1）酚類(lèi)：作用：高濃度使菌體蛋白凝固，低濃度破壞細(xì)菌的細(xì)胞膜，使胞質(zhì)內(nèi)容物滲出濃度：石炭酸為2%-5%、來(lái)蘇為2%用途：地面、器具表面和皮膚的消毒第三十五頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三（2）醇類(lèi)作用機(jī)制：損傷細(xì)胞膜，使菌體蛋白變性，滅活酶類(lèi)濃度：乙醇70%-75%用途：主要用于皮膚的消毒和體溫計(jì)等的浸泡第三十六頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三（3）重金屬鹽類(lèi)作用機(jī)制：（1）使細(xì)菌發(fā)生變性和沉淀（2）使細(xì)菌的酶活性喪失種類(lèi)、濃度與用途：（1）1%硝酸銀新生兒滴眼，預(yù)防淋球菌感染（2）2%紅汞用于皮膚、粘膜和小創(chuàng)傷的消毒（3）0.05-0.01%升汞，非金屬器皿的消毒第三十七頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三（4）氧化劑：

機(jī)制：

（1）靠氧化作用，滅活酶類(lèi)（2）使蛋白質(zhì)變性種類(lèi)和用途：（1）0.1%高錳酸鉀，皮膚、尿道、水果等（2）3%過(guò)氧化氫，創(chuàng)傷、皮膚粘膜消毒（3）2%-2.5%碘酒,皮膚消毒（4）0.2ppm-0.5ppm氯，飲水和游泳池消毒（5）10%-20%漂白粉，地面、廁所與排泄物消毒第三十八頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三（5）表面活性劑：機(jī)制：

（1）損傷細(xì)胞（2）滅活酶類(lèi)（3）蛋白質(zhì)沉淀種類(lèi)和用途：（1）0.05%-0.1%新潔爾滅，皮膚粘膜消毒、浸泡手術(shù)器械（2）0.05%-0.1%杜滅芬，傷口沖洗，金屬器械、塑料、橡皮類(lèi)消毒第三十九頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三（6）烷化劑：機(jī)制：

使菌體蛋白和核酸的烷基化

種類(lèi)、濃度及作用：（1）10%甲醛，物品表面、空氣消毒（2）

2%戊二醛，精密儀器、內(nèi)窺鏡等消毒缺點(diǎn)：對(duì)人體有一定的毒性，且有的有致癌作用，如β-內(nèi)脂第四十頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三常用消毒劑的種類(lèi)、濃度、用途及作用機(jī)制（一）種類(lèi)常用濃度用途作用機(jī)制1.酚類(lèi)

石炭酸

2.醇類(lèi)

乙醇

3.重金屬鹽類(lèi)

硝酸銀

4.氧化劑

高錳酸鉀

過(guò)氧化氫

氯

漂白粉

碘酒

3%-5%

70%-75%

1%

0.1%

3%

0.2-0.5ppm

10%-20%

2.0%-2.5%

器械、排泄物消毒

皮膚、體溫計(jì)消毒

新生兒滴眼

皮膚、尿道、蔬菜、水果消毒

創(chuàng)口、皮膚粘膜消毒

飲水及游泳池消毒

地面、廁所與排泄物消毒

皮膚消毒蛋白質(zhì)變性損傷細(xì)胞膜，滅活酶類(lèi)

蛋白質(zhì)變性凝固、干擾代謝

氧化作用,蛋白質(zhì)變性與沉淀,滅活酶類(lèi)

氧化作用,蛋白質(zhì)沉淀第四十一頁(yè)，共四十七頁(yè)，編輯于2023年，星期三種類(lèi)常用濃度用途作用機(jī)制5.表面活性劑

新潔爾滅

6.染料

龍膽紫

7.烷化劑

甲醛

8.酸堿類(lèi)

醋酸

生石灰

0.05%-0.1%

2%-4%

10%

5-10ml/m加等量水蒸發(fā)

按1：4--1：8配成糊狀

外科手術(shù)洗手,皮膚粘膜消毒,浸泡手術(shù)器械

淺表創(chuàng)傷消毒

物體表面消毒,空氣消毒

空氣消毒

地面、排泄物消毒損傷細(xì)胞膜,滅活氧化酶活性,蛋白質(zhì)沉淀

抑制細(xì)菌繁殖,干擾氧化過(guò)程

菌體蛋白質(zhì)及核酸烷基化

破壞細(xì)胞膜和細(xì)胞壁,蛋白質(zhì)凝固常用消毒劑的種類(lèi)、濃度、用途