紫外可見分光光度計的基本操作第一頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期三

能認知儀器組成、配套部件和控制面板閱讀說明書，編寫儀器操作規(guī)程能熟練操作紫外-可見分光光度計能對儀器進行校驗，和對儀器進行日常維護與保養(yǎng)能力目標第二頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期三

2005年中央12臺曾報道，上海市的蔡女士一家剛住進新房沒多久，丈夫就得了白血病去世。通過檢測機構(gòu)對室內(nèi)的空氣質(zhì)量進行一次檢測，發(fā)現(xiàn)儲藏室和臥室中的甲醛含量竟然遠遠超出標準值的三倍。

學(xué)生根據(jù)所查資料現(xiàn)場討論以決定各方法的優(yōu)劣

國家標準《公共場所空氣中甲醛測定方法》（GB/T18204.26-2000）；第一法：酚試劑分光光度法

（仲裁法）；第二法：氣相色譜法。課程引入請大家思考，現(xiàn)代家裝過程中經(jīng)常會出現(xiàn)甲醛超標，如何進行測定？

第三頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期三測定過程一打開電源開關(guān)檢驗吸收池的成套性（具體過程在后面內(nèi)容中操作）選擇工作波長（按設(shè)定鍵，以及增加、減小按鈕，進行設(shè)定）

第四頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期三潤洗比色皿，依次裝入?yún)⒈热芤汉蜏y量溶液參比溶液于光路中，透射比模式下同時調(diào)0和100%在吸光度模式下，測定測量溶液的吸光度選擇測量方式（按方式鍵選擇透射比模式與吸光度模式）

測定過程二學(xué)生自學(xué)儀器使用說明書

學(xué)生閱讀儀器UV-7504使用說明書

對照說明書,學(xué)生認知儀器的主要組成部分第五頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期三光源單色器吸收池檢測器信號顯示系統(tǒng)組成結(jié)構(gòu)第六頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期三光源：提供符合要求的入射光。要求：在整個紫外光區(qū)或可見光譜區(qū)可以發(fā)射連續(xù)光譜，具有足夠的輻射強度、較好的穩(wěn)定性、較長的使用壽命。紫外光源---氘燈(185-375nm)可見光源---鎢燈(320-1000nm)光源第七頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期三單色器：將光源發(fā)射的復(fù)合光分解成連續(xù)光譜并可從中選出任一波長單色光的光學(xué)系統(tǒng)。棱鏡單色器利用不同波長的光在棱鏡內(nèi)折射率不同將復(fù)合光色散為單色光。光柵單色器一系列等寬、等距離的平行狹縫以光的衍射現(xiàn)象和干涉現(xiàn)象為基礎(chǔ)（平面反射光柵和平面凹面光柵）單色器單色器主要由狹縫、色散元件和透鏡系統(tǒng)組成。色散元件是棱鏡和反射光柵的組合狹縫和透鏡系統(tǒng)控制光的方向第八頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期三吸收池：又叫比色皿，用于盛放待測溶液和決定透光液層厚度的器件。主要有石英吸收池和玻璃吸收池兩種。在紫外區(qū)須采用石英吸收池，可見區(qū)一般用吸收玻璃池。吸收池主要規(guī)格0.5cm、1.0cm、2.0cm、3.0cm和5.0cm注意事項：手執(zhí)兩側(cè)的毛面，盛放液體高度四分之三。第九頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期三檢測器：利用光電效應(yīng)將透過吸收池的光信號變成可測的電信號。常用的檢測器有光電池、光電管及光電倍增管。檢測器

光電池

光電管光電倍增管第十頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期三信號顯示器以檢流計或微安表指示儀表數(shù)字顯示和自動記錄型裝置

信號顯示系統(tǒng)第十一頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期三請學(xué)生對其他類型的分光光度計認知7230型紫外可見分光光度計其他型號儀器學(xué)生進行儀器的基本操作訓(xùn)練第十二頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期三儀器操作規(guī)程學(xué)生總結(jié)、歸納并示范Uv7504儀器的操作規(guī)程。學(xué)生總結(jié)、歸納7230儀器的操作規(guī)程。第十三頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期三同學(xué)們根據(jù)教師的要求用白紙片遮住光路，改變波長從750nm到400nm，觀察白紙片中顏色的變化。波長準確度的準確檢查譜釹濾光片吸收曲線苯蒸汽的吸收曲線儀器的校驗一第十四頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期三

波長

/nm

溫度

/℃2352573133502518.213.751.322.9

的溶液的透射比以0.001mol.L-1HClO4為參比，以1cm的石英比色皿做吸收池，分別在235、257、313、350波長處測定相應(yīng)溶液的透射比。儀器的校驗二透射比正確度的檢驗第十五頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期三JJG178-96規(guī)定：石英吸收池：220nm、蒸餾水；350nm、K2Cr2O70.001mol.L-1HClO4溶液；玻璃吸收池：600nm、蒸餾水；相對校正法：用一套比色皿裝待測試樣的溶劑，以其中一個為參比，測定其他吸收池的吸光度。若吸光度為零，或相等，即可配對。若不相等，可選最小吸光度值的作參比，測定其它的吸光度，求修正值。儀器的校驗三吸收池成套性檢驗第十六頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期三

學(xué)生操作訓(xùn)練、教師指導(dǎo)學(xué)生操作，教師指導(dǎo)。隨機抽查學(xué)生進行操作演示。學(xué)生評價。第十七頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期三

日常維護、保養(yǎng)

對儀器工作環(huán)境的要求穩(wěn)固的工作臺溫度、濕度合適

儀器保養(yǎng)和維護方法儀器工作電源光源使用注意事項單色器使用注意事項正確使用吸收池第十八頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期三

故障排除第十九頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期三

故障排除第二十頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期三引入問題：為什么分光光度法能測定空氣中甲醛的含量？主要是由于空氣中的甲醛與酚試劑反應(yīng)生成嗪，嗪在酸性溶液中被高鐵離子氧化形成蘭綠色化合物，可以對630nm的光產(chǎn)生選擇性吸收，而可以建立相應(yīng)的分析方法。問題：為什么不同的物質(zhì)呈現(xiàn)不同的顏色？原因由于溶液對光的選擇性吸收引起的，溶液呈現(xiàn)的是被吸收物質(zhì)的互補色。硫酸銅溶液吸收黃光，呈現(xiàn)蘭色。高錳酸鉀溶液吸收綠色光，呈現(xiàn)紫紅色第二十一頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期三單色光：具有同一波長的光稱為單色光。復(fù)合光：含有多種波長的光稱為復(fù)合光?；パa光：如果把適當顏色的兩種光按一定強度比例混合，可合成白色光，這兩種顏色的光稱為互補色?？梢姽猓悍彩悄鼙蝗庋鄹杏X到的光稱為可見光。

幾種光的性質(zhì)紫外可見分光光度法概念紫外可見分光光度法是基于物質(zhì)分子對200-780nm區(qū)域光的選擇性吸收而建立起來的分析方法。第二十二頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期三紫外可見分光光度法分類比色分析法：利用比較待測溶液本身的顏色或加入試劑后呈現(xiàn)的顏色深淺來測定溶液中待測物質(zhì)的濃度的方法按檢測器不同分為目視比色法和光電比色法。以人的眼睛來檢測顏色深淺的方法稱目視比色法；以光電轉(zhuǎn)換器為檢測器來區(qū)別顏色深淺的方法稱光電比色法；根據(jù)物質(zhì)對不同波長的單色光的吸收程度不同而對物質(zhì)進行定性和定量分析的方法稱為分光光度法。第二十三頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期三紫外可見分光光度法特點

較高的靈敏度；適合于測定低含量和微量組分，而不適用于中高組分分析速度快，操作簡便；價格低廉，應(yīng)用廣泛紫外可見分光光度法應(yīng)用

紫外吸收光譜可用于芳香化合物及含共軛體系化合物的鑒定與結(jié)構(gòu)分析紫外與可見分光光度法均可用于定量分析。紫外與可見分光光度法還可用于化學(xué)反應(yīng)平衡的研究。第二十四頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期三按波長范圍劃分：可見分光光度計（400-780nm）紫外可見分光光度計(200-1000nm)紫外可見分光光度計類型按光路劃分：單光束分光光度計雙光束分光光度計雙波長分光光度計第二十五頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期三單光束分光光度計雙光束分光光度計雙波長分光光度計光路第二十六頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期三吸收光譜曲線（定性分析）1-c(KMnO4)=1.56×10-4mol·L-12-c(KMnO4)=3.12×10-4mol·L-13-c(KMnO4)=4.68×10-4mol·L-1

KMnO4溶液的光吸收曲線

將不同波長的光依次通過某一固定濃度和厚度的有色溶液，分別測出它們對各種波長光的吸收程度（用吸光度A表示）。以波長為橫坐標，以吸光度為縱坐標作圖，畫出曲線，此曲線即稱為該物質(zhì)的光吸收曲線（或吸收光譜曲線）。溶液對不同波長的光的吸收程度是不同的，存在最大吸收峰的位置稱為最大吸收波長。不同濃度的溶液，其吸收曲線的形狀相似，最大吸收波長也一樣。不同物質(zhì)的吸收曲線，其形狀和最大吸收波長都各不相同，可利用吸收曲線來作為物質(zhì)定性分析的依據(jù)。第二十七頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期三光的吸收程度與光程長的關(guān)系？朗伯定律第二十八頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期三比爾定律光的吸收程度與濃度的關(guān)系？第二十九頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期三光吸收定律：幾個概念：入射光通量、透射光通量、透射比、吸光度、比例常數(shù)光吸收定律（定量分析）成立的條件：一是必須使用單色光二是吸收發(fā)生在均勻的介質(zhì)三是吸收過程中，吸收物質(zhì)互相不發(fā)生作用第三十頁，共三十三頁，編輯于2023年，星期三吸收系數(shù)的物理意義：單位濃度的溶液液層線厚度為1cm時，在一定波長下測得的吸光度。A=εbc