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轉(zhuǎn)基因檢測技術(shù)第一頁,共十六頁,編輯于2023年,星期四Page
2那么什么是轉(zhuǎn)基因食品呢?第二頁,共十六頁,編輯于2023年,星期四轉(zhuǎn)基因食品(GeneticallyModifiedFood,GMF)概念:指利用基因工程(轉(zhuǎn)基因)技術(shù)在物種基因組中嵌入了(非同種)外源基因的食品,包括轉(zhuǎn)基因植物食品、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物食品和轉(zhuǎn)基因微生物食品。轉(zhuǎn)基因作為一種新興的生物技術(shù)手段,它的不成熟和不確定性,必然使得轉(zhuǎn)基因食品的安全性成為人們關(guān)注的焦點(diǎn)。Page
3第三頁,共十六頁,編輯于2023年,星期四Page
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7第七頁,共十六頁,編輯于2023年,星期四Page
8第八頁,共十六頁,編輯于2023年,星期四世界上對轉(zhuǎn)基因食品的態(tài)度目前,世界上已經(jīng)形成了兩大陣營。一個(gè)陣營以美國為代表,包括加拿大和阿根廷等國支持轉(zhuǎn)基因食品。據(jù)國際農(nóng)業(yè)生物技術(shù)應(yīng)用服務(wù)組織報(bào)告,2009年,全球1.34億公頃的轉(zhuǎn)基因作物中,美國占到了47.8%,居全球之首。另一個(gè)陣營以歐盟為代表,包括澳大利亞、新西蘭、日本、英國等國反對轉(zhuǎn)基因食品。歐盟的轉(zhuǎn)基因作物種植面積還不到全球的0.3%。Page
9上第九頁,共十六頁,編輯于2023年,星期四Page
10第十頁,共十六頁,編輯于2023年,星期四
轉(zhuǎn)基因食品檢測技術(shù)的由來由于轉(zhuǎn)基因物質(zhì)有可能在耕種、收割、運(yùn)輸、儲(chǔ)存和加工過程中混入食品,對食品造成偶然污染。因此,不論是對轉(zhuǎn)基因食品貼示標(biāo)簽,或是對轉(zhuǎn)基因與非轉(zhuǎn)基因原料進(jìn)行分別輸送,轉(zhuǎn)基因原料和舊食品的檢測都是必不可少的;另外,要區(qū)分轉(zhuǎn)基因與非轉(zhuǎn)基因食品,對轉(zhuǎn)基因食品進(jìn)行選擇性標(biāo)記,對食品中的轉(zhuǎn)基因含量的多少加以限制,也需要準(zhǔn)確有效的基因檢測技術(shù)。
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11第十一頁,共十六頁,編輯于2023年,星期四Page
12凝膠電泳測序該技術(shù)是由美國centus公司的karymullis發(fā)明,于1985年由saiki等首次報(bào)道,是近年來開發(fā)的體外快速擴(kuò)增dna技術(shù)。1988年,r.k.saiki等人又成功地將熱穩(wěn)定taqdna聚合酶應(yīng)用于pcr擴(kuò)增,是pcr技術(shù)上向?qū)嵱没囊淮瓮黄菩缘倪M(jìn)展。。由于許多獲得批準(zhǔn)的遺傳工程體(gmo)表現(xiàn)出一定的導(dǎo)入基因的性狀,因此,基因檢測也需要以蛋白質(zhì)為基礎(chǔ)的檢測技術(shù),這就出現(xiàn)了elisa法。1971年engvall和perlman發(fā)表了有關(guān)酶聯(lián)免疫吸附分析法用于免疫球蛋白g(igg)定量測定的文章,使該技術(shù)發(fā)展成為液體標(biāo)本中微量物質(zhì)的測定方法。
轉(zhuǎn)基因存在的檢測主要方法是一大類技術(shù),被科學(xué)工作者用于分離不同物理性質(zhì)(如大小、形狀、等電點(diǎn)等)的分子。凝膠電泳通常用于分析用途,但也可以作為制備技術(shù),在采用某些方法(如質(zhì)譜(MS)、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)、克隆技術(shù)、DNA測序或者免疫印跡)檢測之前部分提純分子。第十二頁,共十六頁,編輯于2023年,星期四Page
13第十三頁,共十六頁,編輯于2023年,星期四Page
14第十四頁,共十六頁,編輯于2023年,星期四轉(zhuǎn)基因食品檢測展望轉(zhuǎn)基因檢測技術(shù)的發(fā)展方向除了在傳統(tǒng)的檢測技術(shù)上改進(jìn)和幾種檢測技術(shù)的組合以外,還包括有以往沒有用于轉(zhuǎn)基因食物領(lǐng)域的檢測方法在這個(gè)領(lǐng)域的嘗試以及全新的技術(shù)。例如,色譜技術(shù)、毛細(xì)管電泳技術(shù)、近紅外波譜技術(shù)和超分支滾環(huán)擴(kuò)增技術(shù)等。食品加工過程可能破壞植物纖維結(jié)構(gòu),以致轉(zhuǎn)基因檢測方法難以判斷食品是否含有轉(zhuǎn)基因成分。Hurburgh等利用近紅外波譜技術(shù)初步解決了這個(gè)問題。此外,免疫PCR被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域,它也可以被應(yīng)用于轉(zhuǎn)基因食品檢測領(lǐng)域。傳統(tǒng)PCR檢測方法是利用瓊脂糖凝膠電泳分析產(chǎn)物,結(jié)果可能出現(xiàn)假陽性;而免疫PCR結(jié)合了PCR的高效性與ELISA的高特異性。該技術(shù)首先利用PCR對目標(biāo)核酸進(jìn)行擴(kuò)增,再用標(biāo)記探針與之雜交,最后用堿性磷酸酶標(biāo)記的鏈親和素進(jìn)行ELISA檢測,使檢測的靈敏度和準(zhǔn)確度都有很大的提高,因此預(yù)計(jì)這種技術(shù)在轉(zhuǎn)基因食
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