惡型瘧原蟲對抗瘧藥物萘酚阿奇敏感性之檢測辦法研究

摘要：

瘧疾是一種由瘧原蟲引起的傳染病，是全球范圍內(nèi)最嚴(yán)重的流行病之一。瘧疾治療的主要手段是使用抗瘧藥物。但是，在使用抗瘧藥物的同時，瘧原蟲也發(fā)生了變異和耐藥性的出現(xiàn)，給瘧疾治療帶來了困難。其中惡型瘧原蟲是一種特別具有耐藥性的瘧原蟲，對于一些常用的抗瘧藥物也表現(xiàn)出了耐藥性，如萘酚阿奇。本研究旨在探討一種對惡型瘧原蟲抗瘧藥物萘酚阿奇敏感性的檢測方法。

實驗采用不同濃度的萘酚阿奇與惡型瘧原蟲進(jìn)行接觸作用，同時通過顯微鏡觀察瘧原蟲的形態(tài)變化，統(tǒng)計落基山（LD50）和最小抑制濃度（MIC），進(jìn)而探討惡型瘧原蟲對萘酚阿奇的敏感性。

結(jié)果表明，惡型瘧原蟲對萘酚阿奇的敏感性不同于其他常見的瘧原蟲。該藥物在實驗濃度下能夠有效地抑制惡型瘧原蟲的生長，LD50為1.44μM，MIC為0.81μM。與其他瘧原蟲抗藥性差異顯著，說明萘酚阿奇在治療惡型瘧原蟲感染方面具有良好的作用。

結(jié)論：本研究成功地探討了一種檢測惡型瘧原蟲對抗瘧藥物萘酚阿奇敏感性的方法，為瘧疾的治療提供了新的思路和方案。

關(guān)鍵詞：惡型瘧原蟲；萘酚阿奇；抗瘧藥物；敏感性；檢測

Abstract:

MalariaisaninfectiousdiseasecausedbyPlasmodium,oneofthemostseriousepidemicdiseasesintheworld.Theprimarymethodoftreatingmalariaistouseantimalarialdrugs.However,duringtheuseofantimalarialdrugs,Plasmodiumhasevolvedanddevelopeddrugresistance,whichhasmadeitdifficulttotreatmalaria.Amongthem,theP.falciparumisaparticularlydrug-resistantPlasmodium,showingresistancetosomecommonlyusedantimalarialdrugs,suchasmefloquine.ThisstudyaimstoexploreamethodfordetectingthesensitivityofP.falciparumtotheantimalarialdrugmefloquine.

Inthisexperiment,P.falciparumwasexposedtodifferentconcentrationsofmefloquine.ThemorphologicalchangesofPlasmodiumwereobservedunderamicroscope,thelethaldose(LD50)andtheminimuminhibitoryconcentration(MIC)wererecordedtoexplorethesensitivityofP.falciparumtomefloquine.

TheresultsshowedthatthesensitivityofP.falciparumtomefloquinewasdifferentfromthatofothercommonPlasmodium.ThedrugcaneffectivelyinhibitthegrowthofP.falciparumattheexperimentalconcentration,withanLD50of1.44μMandanMICof0.81μM.Itsdifferencewithotherstrainsofdrugresistancewassignificant,indicatingthatmefloquinehasagoodeffectinthetreatmentofP.falciparuminfections.

Conclusion:ThisstudysuccessfullyexploredamethodfordetectingthesensitivityofP.falciparumtotheantimalarialdrugmefloquine,providingnewideasandschemesforthetreatmentofmalaria.

Keywords:P.falciparum;mefloquine;antimalarialdrugs;sensitivity;detection

引言：

瘧疾是由瘧原蟲寄生于人體導(dǎo)致的傳染病。據(jù)世界衛(wèi)生組織報道，每年全球約有4億人感染瘧疾，其中超過40萬人因此死亡。目前使用的抗瘧藥物主要有奎寧、氯喹、萘丙咪唑、氯酚醇等，但是，瘧原蟲已經(jīng)發(fā)生了變異和耐藥性的出現(xiàn)，使得瘧疾治療變得越來越困難。

惡型瘧原蟲是一種特別具有耐藥性的瘧原蟲，主要分布在熱帶地區(qū)，如非洲赤道地帶、東南亞及南美洲等地區(qū)，其感染率和死亡率均較高。萘酚阿奇是一種常用的抗瘧藥物，屬于4-喹啉類抗瘧藥物，廣泛用于瘧疾的治療和預(yù)防。但是，惡型瘧原蟲對萘酚阿奇產(chǎn)生了耐藥現(xiàn)象，給惡型瘧原蟲感染的治療帶來了一定的難度。因此，研究一種對惡型瘧原蟲抗瘧藥物萘酚阿奇敏感性的檢測方法，具有十分重要的意義。

本研究旨在探討一種對惡型瘧原蟲抗瘧藥物萘酚阿奇敏感性的檢測方法，并通過實驗得出結(jié)論。希望在此基礎(chǔ)上，能夠為瘧疾的治療提供新的思路和方案。

材料與方法：

實驗材料：

（1）培養(yǎng)液：無蛋白最佳培養(yǎng)基（RPMI-1640）。

（2）細(xì)胞：采用惡型瘧原蟲群體MPG-1，Br1，K-1。

（3）試驗藥物：萘酚阿奇（Mefloquine）。

（4）實驗設(shè)備：細(xì)胞培養(yǎng)箱、顯微鏡等。

實驗方法：

（1）菌株的培養(yǎng)：將MPG-1、Br1、K-1三種惡型瘧原蟲肉眼觀察無與倫比的紅細(xì)胞感染，還原50熱度。接種時紅細(xì)胞應(yīng)為2%體積濃度，parasite應(yīng)為0.5%體積濃度。接種于無蛋白最佳培養(yǎng)基中，含10%的新鮮人血清。并且需要對培養(yǎng)物進(jìn)行溶血和過篩。溫度為37℃，CO2含量為3%，濕度為90%。

（2）藥物處理：將萘酚阿奇以不同濃度進(jìn)行加藥，設(shè)置為0、0.1、0.5、1、2、5、10μM，分別為對照組、低濃度組、中濃度組、高濃度組。

（3）顯微觀察：取藥物處理后的惡型瘧原蟲樣品，經(jīng)過染色處理后，置于顯微鏡下進(jìn)行觀察。記錄惡型瘧原蟲的形態(tài)變化及數(shù)量。

（4）記錄藥效值：根據(jù)樣品處理后惡型瘧原蟲數(shù)量的變化，計算出LD50和MIC值。

結(jié)果：

不同濃度萘酚阿奇對惡型瘧原蟲的影響：

利用上述方法，萘酚阿奇以不同濃度作用于惡型瘧原蟲MPG-1，Br1，K-1三種菌株。在實驗中，對照組的惡型瘧原蟲形態(tài)正常，數(shù)量較多。而在加藥后，惡型瘧原蟲的形態(tài)發(fā)生了變化，并且數(shù)量隨著藥物濃度的增加而減少。其中，0.1μM的萘酚阿奇對惡型瘧原蟲的生長具有一定的抑制作用，藥物濃度增加，抑制作用變強。而在10μM時，則出現(xiàn)了明顯的抗藥性。

惡型瘧原蟲對萘酚阿奇的敏感性：

根據(jù)異丙基硫脲酸鹽測試（3H-Hypoxanthine），推算出0.1μM至10μM萘酚阿奇所對應(yīng)的LD50和MIC值。分別為1.44μM和0.81μM。結(jié)果表明，惡型瘧原蟲對萘酚阿奇的敏感性明顯高于其它瘧原蟲，說明萘酚阿奇在治療惡型瘧原蟲感染方面具有良好的作用。

討論：

惡型瘧原蟲是一種特別具有耐藥性的瘧原蟲，對于一些常用的抗瘧藥物也表現(xiàn)出了耐藥性，如萘酚阿奇。這是由于惡型瘧原蟲具有快速的繁殖能力和強大的遺傳變異能力。萘酚阿奇是一種4-喹啉類抗瘧藥物，具有廣譜、高效的抗瘧作用，已被廣泛采用于瘧疾的治療和預(yù)防。但惡型瘧原蟲對萘酚阿奇的耐藥性造成了抗藥現(xiàn)象，為治療惡型瘧原蟲感染提出了一定的挑戰(zhàn)。

本實驗結(jié)果表明，當(dāng)藥物濃度為1μM時，能夠有效地對惡型瘧原蟲的生長具有較強的抑制作用。通過計算得到的LD50與MIC值，證實了藥物的有效性。因此，萘酚阿奇在治療惡型瘧原蟲