血清癌胚抗原(CEA)定量檢測標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程××醫(yī)院檢驗科臨床免疫室作業(yè)指導(dǎo)書文件編號:XXX生效日期：共頁第頁1.目的規(guī)范操作流程，保證血清癌胚抗原(CEA)定量的準(zhǔn)確性和可靠性。2.原理采用雙抗體夾心法原理，整個過程18min完成。μl標(biāo)本、生物素化的單克隆CEA特異抗體和釕(Ru)標(biāo)記的單克隆CEA特異抗體混勻，形成夾心復(fù)合物。2．2·第2步孵育：加入鏈霉親和素包被的微粒，讓上述形成的復(fù)合物通過生物素與鏈霉親和素間的反應(yīng)結(jié)合到微粒上。質(zhì)被清洗液洗去，電極加電壓后產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光，通過光電倍增管進(jìn)行測定。檢測結(jié)果由機(jī)器自動從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出。此曲線由儀器通過2點定標(biāo)校正，由從試劑條形碼掃描入儀器的原版標(biāo)準(zhǔn)曲線而得。3.標(biāo)本要求3．1．1血清標(biāo)本采集用標(biāo)準(zhǔn)樣本試管或含分離膠的試管。標(biāo)本在2~8℃可穩(wěn)定7天，－20℃可穩(wěn)定3個月。含沉淀的標(biāo)本使用前需離心。心 (大約15000g，10min或2000~3500r／min，5~10min)澄清，方可進(jìn)行檢測。3．3·患者準(zhǔn)備的一般要求：患者在采血前24h內(nèi)應(yīng)避免運(yùn)動和飲酒，不宜改變飲食習(xí)慣和睡眠習(xí)慣。一般主張在禁食12h后空腹取血，門診患者提倡靜坐15min后再采血。4.試劑與儀器4．2·試劑使用：試劑盒中的試劑是一個整體，打開后可立即使用，不能被分開。正確操作需要的所有信息可通過相應(yīng)的試劑條碼讀取。素結(jié)合能力：470ng生物素／mg粒子。含防腐劑。4．3．3R2：Ru(bpy)32＋標(biāo)記的抗CEA單克隆抗體(黑色瓶蓋)，1瓶，8ml。濃度4．3．5腫瘤標(biāo)志物質(zhì)控品(PreciControlTumorMarker)1和2，每個2×3ml。4．4·其他材料：分析杯和Elecsys分析吸頭(移液管吸頭加樣槍頭)、通用稀釋液、lM系統(tǒng)緩沖液、ProbeWashM清洗液、廢物袋。4．5．1存放在2~8℃。為了確保使用前自動混勻期間提供足夠量的磁性微粒，試劑盒器上，8周(交替貯存在冰箱內(nèi)和儀器上，室溫20~25℃，開瓶使用時間累計約20h)。5.操作步驟5．1．1在使用前分析儀自動使微粒處于懸浮狀態(tài)。通過各試劑條形碼可讀取其詳細(xì)實驗參數(shù)。在少數(shù)情況下，分析儀無法自動讀取信息時，請輸入標(biāo)簽上的15位數(shù)字序列。儀將自動調(diào)節(jié)反應(yīng)溫度及各試劑瓶瓶蓋的開關(guān)狀態(tài)。6.校準(zhǔn)CEA試劑組帶有一個含有各批試劑定標(biāo)具體信息的條碼標(biāo)簽。預(yù)先確定的主曲線適用于用CEACalSet試劑盒進(jìn)行測定的分析儀。6．2·定標(biāo)頻率：必須使用新鮮試劑對每個試劑批進(jìn)行一次定標(biāo)(即試劑盒上機(jī)登入后的24h內(nèi))。下列情況建議重新定標(biāo)：使用同一批試劑的1個月后(28天)；7天后(在分析儀上使用同一試劑盒)；根據(jù)需要：質(zhì)控結(jié)果超出范圍時，比如質(zhì)控結(jié)果在規(guī)定的限值外；若兩水平質(zhì)控均在控，則定標(biāo)曲線可延至試劑及質(zhì)控批號更換。線的有效性，注意任何偏差。7.質(zhì)控該測試適用的質(zhì)控液PreciControlTumorMarker1和2；也可以用其他合適的質(zhì)控液，如××LyphochekTumorMarkerPlusControl。在以下情況建議進(jìn)行質(zhì)控檢測：每24h進(jìn)行一次檢測；每一個新批號試劑盒；每一次定標(biāo)以后。所獲值應(yīng)在限定內(nèi)。如果超出限定值，實驗室應(yīng)及時采取糾正措施。8.結(jié)果判斷。如果測定值低于最低檢測限，報告為＜0．200ng／ml。如果測定值高于檢測范圍，報告為＞1000ng／ml(結(jié)果達(dá)到50000ng／ml樣本應(yīng)作50倍稀釋)。8．3·稀釋：CEA濃度高于檢測范圍的標(biāo)本可用通用稀釋液稀釋。建議1∶50稀釋(既可以自動稀釋也可以手工稀釋)。稀釋后的標(biāo)本CEA含量必須高于20ng／ml。如用手工稀釋，結(jié)果應(yīng)乘上稀釋倍數(shù)。如果是機(jī)器自動稀釋，軟件會自動計算結(jié)果。8．4·檢測結(jié)果的不確定度：具體參見AFP標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程的相關(guān)內(nèi)容。9.生物參考區(qū)間本實驗室血清CEA生物參考區(qū)間為＜5ng／ml。10.性能參數(shù)l結(jié)果不受干擾。接受高劑量生物素(＞5mg／d)治療的患者，至少要等最后一次攝入生物素8h后才能采血。不受類風(fēng)濕因子干擾(1500U／ml)。CEA濃度高達(dá)200000ng／ml也不出現(xiàn)鉤狀效應(yīng)。試劑含有鼠單克隆抗體，接受過小鼠單抗治療或診斷的患者會出現(xiàn)錯誤報告。與AFP和α1酸性糖蛋白沒有交叉反應(yīng)。11.臨床意義11．1·CEA主要來源于胎兒的胃、腸道和血液。在正常成人的腸道、胰腺和肝組織中也有少量存在。出生后，CEA的形成被抑制，因此，在正常成人的血液中CEA很難測出。CE