（圖片大小可自由調(diào)整）2022-2023年生物技術(shù)期末復(fù)習(xí)-基因工程原理（生物技術(shù)）高頻考點題庫（含答案）第1卷一.綜合考核題庫(共30題)1.雙鏈DNA中一段自我互補的序列被稱為回文序列，這種序列一般具有哪些特征。A、有對稱軸B、兩條鏈的5’→3’方向的序列相同C、是Ⅱ類酶的識別序列D、可增強基因的表達E、是I類酶的識別序列正確答案:A,B,C2.DNA聚合酶I在基因工程中有哪些主要用途？正確答案:用切口平移法標(biāo)記DNA；利用其5'-3'核酸外切酶活性降解寡核苷酸作為合成cDNA第二鏈的引物；用于對DNA分子的3'突出末端進行末端標(biāo)記，用于DNA序列分析。3.能夠產(chǎn)生防御病毒侵染的限制性內(nèi)切核酸酶的細菌，其本身的基因組中沒有被該核酸酶識別的序列。正確答案:正確4.Southernblot檢測的是RNA分子。正確答案:錯誤5.__________通常是指通過基因工程、抗體工程、細胞工程技術(shù)等制備生物藥品用于疾病診斷、預(yù)防和治療的行業(yè)。正確答案:生物制藥6.以RNA為模板，用反轉(zhuǎn)錄酶可同時產(chǎn)生單鏈和雙鏈的cDNA，雙鏈DNA是由自身引物引導(dǎo)合成，但這種自身引物引導(dǎo)的合成效率遠低于外加寡核苷酸引物引導(dǎo)的合成。正確答案:正確7.不是基因工程載體中的報告基因的是A、lacZB、GFPC、AmpD、ori正確答案:D8.II型限制性核酸內(nèi)切酶的基本特征是A、既有內(nèi)切酶活性又有甲基化酶活性B、識別非對稱序列C、有特異的識別序列D、識別序列具有回文對稱結(jié)構(gòu)E、在識別序列內(nèi)或兩側(cè)特異位點切割正確答案:C,D,E9.個體之間DNA限制性片段長度的差異叫_________。正確答案:限制性片段長度多態(tài)性10.寫出分子克隆的載體應(yīng)具備的條件？正確答案:自主復(fù)制，即具有復(fù)制原點；易于擴增分離純化；有適宜的限制酶切位點；具備對重組體易于檢測的選擇性遺傳標(biāo)記；表達載體還應(yīng)有表達調(diào)控元件。11._________是由磷脂組成的膜狀結(jié)構(gòu)，用它包裝外源DNA分子，然后與植物原生質(zhì)體共保溫。正確答案:脂質(zhì)體12._________決定PCR擴增產(chǎn)物的特異性與長度。正確答案:引物13.原核表達系統(tǒng)中通常使用的可調(diào)控的啟動子Tac又叫A、乳糖啟動子B、乳糖和色氨酸的雜合啟動子C、噬菌體的左向啟動子D、色氨酸啟動子正確答案:B14.“基因表達”是指該基因在大腸桿菌內(nèi)A、能進行自我復(fù)制B、能進行轉(zhuǎn)錄C、能控制合成生長抑制素釋放因子D、能合成人的生長激素正確答案:C15.目前應(yīng)用最廣泛的原核表達系統(tǒng)是A、酵母菌表達系統(tǒng)B、枯草桿菌表達系統(tǒng)C、大腸桿菌表達系統(tǒng)D、葡萄球菌表達系統(tǒng)正確答案:C16.第一個被分離的Ⅱ類限制性核酸內(nèi)切酶是：A、EcoKB、HindⅢC、HindⅡD、EcoB正確答案:C17.將抗體、抗原或細胞因子的基因?qū)氩∪梭w內(nèi)，改變病人免疫狀態(tài)，從而達到預(yù)防和治療疾病的目的。這是基因治療策略中的哪一項A、基因增補B、基因激活C、基因失活D、免疫調(diào)節(jié)正確答案:D18.什么是熒光定量PCR?正確答案:是一種利用外參或者內(nèi)參為標(biāo)準(zhǔn)，在PCR體系中加入熒光信號強度與DNA數(shù)目相關(guān)的熒光物質(zhì)，并通過對PCR擴增反應(yīng)中每一個循環(huán)產(chǎn)物熒光信號的實時變化檢測來實現(xiàn)對起始模板定量及定性的分析工作。19.向有功能缺陷的細胞補充相應(yīng)功能基因，以糾正或補償其基因缺陷，達到治療的目的。這個過程叫做A、基因治療B、基因置換C、基因修正D、基因激活正確答案:A20.目前已知持續(xù)合成能力最強的酶是A、大腸桿菌聚合酶IB、Klenow片段C、T4DNA聚合酶D、T7DNA聚合酶正確答案:D21.使外源基因在人體表達從而克服某一缺陷或疾病的技術(shù)稱為A、基因治療B、基因工程C、基因藥物D、免疫治療正確答案:A22.克隆羊多莉是通過哪一個技術(shù)制備的A、顯微注射法B、逆轉(zhuǎn)錄病毒感染法C、胚胎干細胞法D、體細胞核移植法正確答案:D23.下面關(guān)于穿梭質(zhì)粒載體描述最正確的是A、在不同的宿主中具有不同的復(fù)制機制B、在不同的宿主細胞中使用不同的復(fù)制起點C、在不同的宿主細胞中使用不同的復(fù)制酶D、在不同的宿主細胞中具有不同的復(fù)制速率正確答案:B24.進行體外重組時，外源片段和載體分子之間的物質(zhì)的量比值一般為A、（1-5）:1B、（3-10）:1C、1：（3-10）D、1：（1-5）正確答案:B25.基因工程的兩個基本特點是：分子水平上的操作和_________。正確答案:細胞水平上的表達26.________主要是根據(jù)蛋白質(zhì)的氨基酸序列設(shè)計一組混合引物來合成相應(yīng)的基因。正確答案:簡并引物PCR27.在用單一限制酶切載體和目的基因并進行連接時，為防止載體自身環(huán)化，常用____________處理載體。正確答案:堿性磷酸酶28.從E.coli中分離的連接酶A、需要NAD作輔助因子B、可以進行平末端和黏性末端連接C、作用時不需要模板D、需要ATP

作輔助因子正確答案:A29.Cosmid的特點元件是正確答案:cos位點30.在LacI標(biāo)記基因插入外源基因，經(jīng)IPTG誘導(dǎo)，在X-gal培養(yǎng)基中顯_________色，為陽性克隆。正確答案:白第2卷一.綜合考核題庫(共30題)1.試述基因敲除技術(shù)的原理？正確答案:是一種遺傳工程技術(shù)，針對某個序列已知但功能未知的序列，改變生物的遺傳基因，令特定的基因功能喪失作用，從而使部分功能被屏蔽，并可進一步對生物體造成影響，進而推測出該基因的生物學(xué)功能。2.酵母人工染色體要在酵母細胞中穩(wěn)定存在，必須有哪些基本的結(jié)構(gòu)？正確答案:(1)著絲粒；(2)端粒；(3)ARS序列。3.同一種限制性核酸內(nèi)切酶分別切割目的基因DNA與載體DNA時，酶切片段不能互相連接的是A、載體DNA與載體DNA之間B、目的基因與載體DNA之間C、目的基因與mRNA之間D、目的基因與目的基因之間正確答案:C4.常規(guī)PCR反應(yīng)程序中，高溫變性一般設(shè)置多高的溫度A、94℃B、65℃C、55℃D、72℃正確答案:A5.核酸序列測定技術(shù)的發(fā)展經(jīng)歷了哪幾個重要階段？正確答案:經(jīng)典的手工測序；第一代測序技術(shù)；第二代測序技術(shù)；第三代測序技術(shù)。6._________是革蘭氏陽性細菌，在芽孢形成過程中能產(chǎn)生大量的伴孢晶體。正確答案:Bt7.PCR是利用___________的原則，經(jīng)過高溫變性、低溫復(fù)性、子鏈延伸的不斷循環(huán)，選擇性的特異擴增目的基因和目的DNA的一種方法。正確答案:堿基互補配對8.Cre-loxP系統(tǒng)中兩個loxP位點位于同一條DNA鏈上且方向相反，Cre重組酶誘導(dǎo)loxP間的序列翻轉(zhuǎn)正確答案:正確9.轉(zhuǎn)基因技術(shù)導(dǎo)致的生物安全威脅屬于生態(tài)環(huán)境破壞。正確答案:錯誤10.BAC表示的是（）A、人工Y染色B、細菌人工染色體C、粘粒D、酵母人工染色體正確答案:B11.核酸雜交探針可分為兩大類：DNA探針和_______。正確答案:RNA探針12.在cDNA的合成中要用到_________，其作用是切除在第二鏈合成時形成的發(fā)夾環(huán)。正確答案:S1核酸酶13.T4DNA連接酶能催化（）相鄰的5’端磷酸基團與3’端羥基末端之間形成磷酸二酯鍵A、雙鏈DNAB、單鏈DNAC、mRNAD、rRNA正確答案:A14._________是指真核生物基因組中能特異與核基質(zhì)結(jié)合并富含AT的DNA序列。正確答案:核基質(zhì)附著區(qū)15.T4DNA聚合酶具有幾種酶活性A、2種B、3種C、4種D、1種正確答案:A16.影響連接反應(yīng)的因素有A、DNA末端的形式B、DNA分子濃度的影響C、連接反應(yīng)溫度與時間的影響D、連接緩沖液的影響E、酶濃度的影響正確答案:A,B,C,D,E17.一種間歇的培養(yǎng)方式，除了進氣、排氣和補加酸堿調(diào)節(jié)pH外，在培養(yǎng)過程中與外界沒有其他的物料交換。這種培養(yǎng)方式是A、補料分批培養(yǎng)B、連續(xù)培養(yǎng)C、透析培養(yǎng)D、分批培養(yǎng)正確答案:D18.III型限制性內(nèi)切核酸酶A、不同亞基的識別位點甲基化和限制活性相互排斥：MS

亞基促使甲基化，R

亞基促使限制B、由兩個亞基組成，在識別位點附近識別并進行甲基化或限制C、在錯配修復(fù)中起關(guān)鍵作用，因為酶結(jié)合到DNA

上是以結(jié)構(gòu)扭曲為基礎(chǔ)而不是序列錯誤識別D、由兩個亞基組成，僅識別半甲基化位點。甲基化位點相對于限制位點的位置（上游或下游）決定

了DNA

是被甲基化還是被限制正確答案:B19.用Sanger雙脫氧法進行DNA測序時，凝膠上讀出的序列是A、模板鏈的互補鏈B、mRNA的C、cDNA的D、模板鏈的正確答案:A20.應(yīng)用基因工程技術(shù)診斷疾病的過程中必須使用基因探針才能達到檢測疾病的目的。這里的基因探針是指A、人工合成的苯丙氨酸羥化酶的DNA分子B、用放射性同位素或熒光分子等標(biāo)記的蛋白質(zhì)分子C、用放射性同位素或熒光分子等標(biāo)記的DNA分子D、人工合成的免疫球蛋白的DNA分子正確答案:C21.下列具有生物活性的外源蛋白是A、包涵體型蛋白B、分泌型蛋白C、融合蛋白D、復(fù)合蛋白正確答案:B22.Ti質(zhì)粒正確答案:是根癌農(nóng)桿菌染色體外的遺傳物質(zhì)，為共價閉合雙鏈環(huán)狀DNA分子。23.大腸桿菌DNA連接酶在體內(nèi)的主要作用是在DNA復(fù)制、修復(fù)中封閉缺口，A、將雙鏈DNA分子中的5’磷酸基團同3’羥基基團末端重新形成磷酸二酯鍵B、作用時不消耗能量C、需要Mn2+等二價輔助離子D、也可以連接RNA分子正確答案:A24.關(guān)于回文序列，下列各項中哪些是不正確的？A、是限制性內(nèi)切核酸酶的識別序列B、是某些蛋白質(zhì)的識別序列C、是基因的旁側(cè)序列D、是高度重復(fù)序列E、有對稱軸正確答案:A,B,C25.T4DNA連接酶和E．coli連接酶都能催化雙鏈DNA和單鏈DNA的連接。正確答案:錯誤26.通過原位菌落雜交得到的陽性克隆即是重組體，但不能判斷插入的外源基因是否進行了表達。正確答案:正確27.酵母表達系統(tǒng)是最常用的真核表達系統(tǒng)。正確答案:正確28.逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的優(yōu)點不包括A、高效感染宿主細胞B、拷貝數(shù)高C、侵染范圍廣D、基因組小并且簡單正確答案:B29.用人工合成的含有所需堿基變化的寡聚核苷酸，可以將特殊突變引入克隆的基因。正確答案:正確30.作為基因工程所用的克隆載體必須具備以下條件A、復(fù)制原點B、有一個或多個用于篩選的選擇標(biāo)記C、具備合適的限制性核酸內(nèi)切酶的單一識別位點D、有較高的拷貝數(shù)E、目的基因表達的調(diào)控序列正確答案:A,B,C,D第3卷一.綜合考核題庫(共30題)1.何謂基因組文庫？正確答案:指將某生物的全部基因阻DNA切割成一定長度的DNA片段克隆到某種載體上而形成的集合。2.關(guān)于限制性內(nèi)切核酸酶的來源及其天然存在的意義，下列哪種說法是正確的?A、來自噬菌體，具有抗微生物作用B、來自酵母菌，參與DNA復(fù)制C、來自細菌，有防御病毒侵染的意義D、來自噬菌體，用于復(fù)制病毒DNA正確答案:C3.限制酶主要是從_________中分離純化出來的。正確答案:原核生物4.下列屬于基因工程步驟的是（）A、提取目的基因B、目的基因與運載體結(jié)合C、目的基因?qū)胧荏w細胞D、目的基因的表達正確答案:A,B,C,D5.pBR322質(zhì)?？寺≥d體含有的抗性標(biāo)記為A、四環(huán)素和氨芐青霉素B、氨芐青霉素和慶大霉素C、四環(huán)素和慶大霉素D、潮霉素和四環(huán)素正確答案:A6.常用的連接外源性DNA和載體DNA的酶是：A、DNA聚合酶B、T4DNA連接酶C、T4RNA連接酶D、RNA聚合酶正確答案:B7.PCR反應(yīng)中的G+C含量要盡量控制在A、40%-60%之間B、10%-20%之間C、30%-40%之間D、50%-60%之間正確答案:A8.PCR特異性與模板特異性成反比。正確答案:錯誤9.關(guān)于cDNA的最正確的說法是A、同mRNA互補的單鏈DNAB、同mRNA互補的雙鏈DNAC、以mRNA為模板合成的雙鏈DNAD、以上都正確

正確答案:C10.Ptrp表示（）A、噬菌體啟動子B、色氨酸啟動子C、乳糖和色氨酸復(fù)合啟動子D、乳糖啟動子正確答案:B11.外源DNA離開染色體是不能復(fù)制的，將外源DNA與____________連接，構(gòu)建成重組DNA分子，外源DNA則可被復(fù)制。正確答案:克隆載體12.下列不是Southern印跡步驟的是（）A、DNA與載體的連接B、用凝膠電泳分離DNA片段C、DNA片段轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜上D、用限制酶消化DNA正確答案:A13.一個質(zhì)粒含有四環(huán)素抗性基因(tetr)和LacZ基因，tetr內(nèi)有一HindIII位點，LacZ中有一EcoRI

位點。如用這兩種切割載體一并連接入相應(yīng)的外源片段，則帶有該重組質(zhì)粒的細胞將A、對四環(huán)素敏感，在X-gal平板上呈現(xiàn)藍色B、有四環(huán)素抗陛，在X-gal平板上呈現(xiàn)白色C、對四環(huán)素敏感，在X-gal平板上呈現(xiàn)白色D、有四環(huán)素抗性，在X-gal平板上呈現(xiàn)藍色正確答案:C14.主要用來提高擴增特異性的特殊PCR是A、反轉(zhuǎn)錄PCRB、Real-TimePCRC、巢式PCRD、反向PCR正確答案:C15.作為載體需要具備哪些功能？正確答案:為外源基因提供在受體細胞中的復(fù)制和整合能力；為外源基因提供進入受體細胞的轉(zhuǎn)移能力；為外源基因提供在受體細胞中的擴增和表達能力，外源基因的擴增依賴于載體分子在受體細胞中高拷貝自主復(fù)制的能力。16.標(biāo)記靈敏度高效果好的探針是A、32PB、地高辛C、生物素D、熒光素正確答案:C17.原核表達系統(tǒng)中表達效率最高的是A、色氨酸啟動子B、乳糖啟動子C、乳糖和色氨酸的雜合啟動子D、T7噬菌體啟動子正確答案:D18.利用DNA自動測序時通常進行標(biāo)記的是()A、ddNTPB、引物C、dATPD、dNTP正確答案:A19.免疫共沉淀技術(shù)是檢測（)的技術(shù)A、RNA－蛋白相互作用B、蛋白－蛋白相互作用C、RNA－RNA相互作用D、DNA－蛋白相互作用正確答案:B20.基因工程以_________為基本材料。正確答案:DNA21.影響限制性核酸內(nèi)切酶酶切的反應(yīng)條件有哪些A、溫度B、鹽離子濃度C、緩沖體系D、反應(yīng)體積和甘油濃度E、限制性核酸內(nèi)切酶反應(yīng)的時間正確答案:A,B,C,D,E22.下列哪一種疾病是獲得性免疫缺