SPR(SurfacePlasmonResonance)即外表等離子體共振。SPR2090SPR芯片上配位體于分析物作用的一種技術(shù)。一、原理1、根本原理：外表等離子共振是一種物理光現(xiàn)象。利用光在玻璃界面處發(fā)生全內(nèi)反射時共振，入射光被吸取，使反射光能量急劇下降，在反射光譜上消滅共振峰(即反同。2、消逝波全反射的光波會透過光疏介質(zhì)約為光波波長一半的一個深度，在沿界面流淌為消逝波。3、假設(shè)把金屬的價電子看成是均勻正電荷背景中運(yùn)動的電子氣體，這實際上也布會變得不均勻。金屬外表等離子波濃度的梯度分布，并由此形成局限于外表上的等離子體振蕩。Stem和Fam將此振蕩在外表上形成的電子疏密波定義為外表等離子體子(SP)。4、SPR儀光學(xué)原理的能量急劇削減。SPR儀光學(xué)原理波長，對的入射角為SPR角。SPR角隨金屬外表折射率變化而變化，而折射率的變化又與金屬外表結(jié)合的分子質(zhì)量成正比這就是SPR對物質(zhì)結(jié)合檢測的根本原理。SPR二、SPR檢測的類型直接檢測夾心反響替代反響競爭抑制反響〔1〕直接檢測a、操作簡潔b、相對分子質(zhì)量>10kDA圖1.直接檢測原理示意圖(2)夾心反響a、相對分子質(zhì)量>5000Da2.夾心反響原理示意圖替代反響b、可用于熒光分析c、此類型稀有3.替代反響原理示意圖競爭抑制反響b、應(yīng)用范圍廣c、可再生4.競爭抑制反響原理示意圖三、SPR特點(diǎn)1、可進(jìn)展實時檢測2、無需樣品標(biāo)記3、樣品用量少4、靈敏度高，應(yīng)用范圍光5、不需對樣品進(jìn)展前處理6、能測量渾濁甚至不透亮樣品四、SPR的構(gòu)造SPR儀的構(gòu)造示意圖以Biacore3000為例，Biacore3000的工作單元有：片外表，另一個泵負(fù)責(zé)自動進(jìn)樣裝置中的樣品傳送。·自動上樣裝置(autosampler)：負(fù)責(zé)樣品的混合、注射和回收?！ひ惑w化U型射流器〔Integratedu-FluidicCartridge,IFC〕：包含液體傳送通道，樣品環(huán)和閥門?！z測單元：包括能夠產(chǎn)生和測量SPR信號的光電組分?！に膫€可探測的液體池(flowcell)：該液體池通過將IFC靠在傳感芯片上而形成?！の⑻幚硌b置(microprocessors)IFC的閥門并且能對SPR信號作根本的處理Biacore3000的液體流路簡圖五、SPR的工作1、溫度掌握Biacore3000承受Peltier不穩(wěn)定，儀器前部面板上的黃色LED〔light-emittingdiode〕會不停的閃耀。通過預(yù)先設(shè)定，我們可以把溫度掌握在4-40oC之間任意一點(diǎn)。2、LED狀態(tài)指示器3、SPR儀的傳感芯片〔sensorchip〕幾種芯片：CM5傳感芯片CM4傳感芯片CM3傳感芯片SA傳感芯片NTA傳感芯片HPA傳感芯片L1傳感芯片六、配體與傳感芯片的偶聯(lián)方法氨基偶聯(lián)法配體巰基偶連醛基偶連法七、基于波長調(diào)制的SPR傳感器1、波長調(diào)制法：固定入射光的角度，轉(zhuǎn)變?nèi)肷涔獾牟ㄩL，觀測入射光的歸一化強(qiáng)度。2、美國熱電公司分子光譜部以其10年傅立葉變換紅外技術(shù)閱歷結(jié)合最的SPR技術(shù)推出了嶄的FT-SPR檢測模塊-SPR100，與角度掃描型SPR檢測技