第一小組成員：王智巧劉念琪從少波王川文開司韋云劍生物化學(xué)PBL案例討論小組案例一

一位25歲的廣西籍孕婦在其12周孕期時到醫(yī)院婦產(chǎn)科進行首次產(chǎn)前檢查，這是她的首次懷孕，她非常關(guān)注她懷的小孩患家族其他成員出現(xiàn)的一種遺傳性血液病的風(fēng)險。孕婦主訴輕度貧血史，但是沒有向她哥哥那樣嚴(yán)重，其哥哥患有嚴(yán)重的貧血，需要經(jīng)常輸血，10歲去世。該孕婦以往被診斷為貧血，但沒有任何貧血的癥狀。體格檢查符合12周妊娠，超聲波檢查確診為12周宮內(nèi)妊娠，血液檢查顯示為小細胞低色素貧血（血紅蛋白（HB）濃度為90g/L）,血紅蛋白電泳分析顯示血紅蛋白A2（HbA2）含量增高（4.0%），胎兒血紅蛋白量也增高，符合輕型β-地中海的表現(xiàn)。為了檢查胎兒是否患有地中海貧血，孕婦進行了絨毛膜穿刺檢查，幾個小時后得到診斷結(jié)果。診斷：β-地中海貧血CD41-42(-CTTT)缺失突變什么是貧血？貧血是指一定體積的血液內(nèi)血紅蛋白濃度的降低或紅細胞計數(shù)的減少，可伴有血氧運輸障礙。到目前為止，貧血最常見的原因是缺鐵，缺鐵導(dǎo)致小細胞性貧血。其他常見的小細胞性貧血的原因是地中海貧血（本病例中所患）。某些種族如地中?；驏|亞血統(tǒng)的人群的地貧的發(fā)病率較高。引自材料貧血的嚴(yán)重程度分類：

分級血紅蛋白（g/L）臨床表現(xiàn)輕度120～91(12～9.1g/dl)癥狀輕微中度90～61(9～6.1g/dl)體力勞動后感到心慌、氣短重度60～31(6～3.1g/dl)臥床休息時也感心慌、氣短極度<30(3.0以下g/dl)常合并貧血性心臟病體格檢查指對人體形態(tài)結(jié)構(gòu)和機能發(fā)展水平進行檢測和計量。其內(nèi)容包括：（1）運動史和疾病史；（2）形態(tài)指標(biāo)測量；（3）生理機能測試；（4）身體成分測定；（5）特殊檢查（化驗、x光、心電、腦電、肌電、超聲心動、肌肉針刺活檢等）。超聲波檢查利用超聲產(chǎn)生的波在人體內(nèi)傳播時，通過示波屏顯示體內(nèi)各種器官和組織對超聲的反射和減弱規(guī)律來診斷疾病的一種方法。超聲波具有良好的方向性，當(dāng)在人體內(nèi)傳播過程中，遇到密度不同的組織和器官，即有反射、折射和吸收等現(xiàn)象產(chǎn)生。根據(jù)示波屏上顯示的回波的距離、弱強和多少，以及衰減是否明顯，可以顯示體內(nèi)某些臟器的活動功能，并能確切地鑒別出組織器官是否含有液體或氣體，或為實質(zhì)性組織。血紅蛋白電泳血紅蛋白種類正常范圍血紅蛋白A95％血紅蛋白A21.6％～3.5％血紅蛋白F0.2％～2.0％檢查介紹：各種血紅蛋白的等電點不同的特點，在一定pH緩沖液中所帶的正、負(fù)電荷不同，經(jīng)電泳后各血紅蛋白的移動方向不同。臨床意義：該試驗是為了確診是否有異常血紅蛋白存在，以及各種血紅蛋白的比例。(1)HbA2增高是輕型β—海洋性貧血最重要的診斷依據(jù)；(2)鐮狀細胞性貧血（HbS?。?、β鏈異常的不穩(wěn)定Hb病及某些巨幼細胞性貧血患者HbA2也可增高；(3)缺鐵性貧血時，HbA2常降低，可與輕型β—海洋性貧血鑒別；(4)正常人Hb電泳后，一般只見兩條區(qū)帶(HbA和HbA2)，若出現(xiàn)新的區(qū)帶，則可能為異常Hb，應(yīng)進一步檢查。

絨毛膜取樣術(shù)絨毛膜取樣術(shù)就是用一根很細的針穿刺到胎盤的組織中去，取適量的絨毛組織出來，可進行一些細胞或遺傳方面的檢查。檢查時機：懷孕10～12周檢查目的：可進行細胞遺傳診斷，基因分析及先天生化代謝疾病分析（1）染色體分析：有直接法和培養(yǎng)法。（2）基因分析：可診斷單基因遺傳疾病，如海洋性貧血癥等。（3）生化分析：有直接法和培養(yǎng)法；以羊水來檢查代謝疾病。檢查方法：（1）經(jīng)子宮頸法；(2)經(jīng)腹部法；(3)經(jīng)陰道法；(4)經(jīng)膀胱法。注：最早也最常使用的是經(jīng)子宮頸法。檢查風(fēng)險：導(dǎo)致胎兒流產(chǎn)率約2%。曾發(fā)現(xiàn)進行絨毛取樣后胎兒四肢缺陷的病例，但至今未證實；是爭議性較大的一項檢查。不過，妊娠早期即可進行取樣，最快可于數(shù)小時內(nèi)得知結(jié)果，萬一發(fā)現(xiàn)胎兒有異常，妊娠早期的子宮擴刮術(shù)比妊娠中期的引產(chǎn)術(shù)要安全、經(jīng)濟。檢查報告：數(shù)小時后即可得知檢查結(jié)果：可得知胎兒有無異常。異常：下一步如果發(fā)現(xiàn)胎兒有嚴(yán)重異常，建議中止妊娠?！裁词堑刂泻Ｘ氀?？其患者有何分布特點？低中海貧血（簡稱地貧）指海的貧血，它不是一種簡單的病癥，而是一種遺傳性溶血性貧血；其共同特點是由于珠蛋白基因的缺陷使血紅蛋白中的珠蛋白肽鏈有一種或幾種合成減少或不能合成，導(dǎo)致血紅蛋白的組成成分改變。地中海貧血基因攜帶者或輕型地中海貧血患者平常是沒有明顯癥狀的，若夫妻為同型地中海型貧血的帶因者，每次懷孕，其子女有1/4的機會為正常，1/2的機會為帶因者，另1/4的機會為重型地中海型貧血患者。此病遍布世界各地，以地中海地區(qū)、中非洲、亞洲、南太平洋地區(qū)發(fā)病較多。在我國以廣東、廣西、貴州、四川為多。引自材料

地中海貧血患者血細胞

地中海貧血遺傳機制——血紅蛋白有哪幾個亞基組成，亞基如何排列？血紅蛋白的合成有什么特點？人體內(nèi)的血紅蛋白由四個亞基構(gòu)成，分別為兩個α亞基和兩個β亞基，每個亞基結(jié)構(gòu)中間有一個疏水局部，可結(jié)合一個血紅素并攜帶一分子氧，因此一分子Hb共結(jié)合4分子氧。Hb亞基之間通過8對鹽鍵，使四個亞基緊密結(jié)合而形成親水的球狀蛋白。血紅蛋白由珠蛋白和血紅素締結(jié)而成。合成特點分為血紅素合成特點和珠蛋白合成特點。血紅素合成特點：（1）合成的主要部位是骨髓和肝臟，但成熟紅細胞不能合成；（2）合成的原料簡單：琥珀酰CoA、甘氨酸、Fe2+等小分子物質(zhì)；（3）合成過程的起始與最終過程在線粒體，中間過程在胞液。血紅素合成后與珠蛋白結(jié)合成血紅蛋白。珠蛋白合成的特點：（1）血紅素合成后與珠蛋白結(jié)合成血紅蛋白。（2）珠蛋白的合成同一般蛋白質(zhì)的合成，其合成受血紅素調(diào)控。（課本）——β-地中海貧血癥的分子基礎(chǔ)是什么？β珠蛋白生成障礙性貧血是由于位于11號染色體短臂的兩個β珠蛋白基因或者與其相關(guān)的DNA序列發(fā)生點突變，在轉(zhuǎn)錄、RNA的加工及翻譯過程中出現(xiàn)各種障礙，導(dǎo)致β珠蛋白合成不足或缺失。

CD71-72、CD41-42、CD17→0、IVS-Ⅱ-654C→T、-28A→G《多重等位基因PCR技術(shù)對中國人5種常見β-地中海貧血突變的快速產(chǎn)前診斷》

焦飛，趙新東,馬穎，劉長福

第44卷第6期2008年12月青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報五種常見突變檢測β-地中海貧血：1.寡苷酸探針雜交技術(shù)2.反向點雜交3.等位基因聚合酶鏈反應(yīng)4.限制性內(nèi)切酶分析檢測方法如何檢測？寡核苷酸探針雜交應(yīng)用引物擴增珠蛋白基因，同時合成與正常序列和突變序列完全互補的寡核苷酸探針。將PCR擴增產(chǎn)物點在尼龍膜上，分別與標(biāo)記的正常和突變的ASO探針雜交，不完全互補的探針，在一定條件下可以完全洗脫，再從放射自顯影觀察雜交結(jié)果。如果兩個等位B珠蛋白基因正常，僅與正常探針雜交，反之，均帶有突變時，則僅與突變探針雜交。這種檢測方法快速、靈敏針對B地中海貧血的突變類型設(shè)計特異堿基引物，根據(jù)擴增得到的電泳帶判斷是否存在對應(yīng)的點突變，結(jié)果清晰、準(zhǔn)確可靠，