血液病的流式細胞術(shù)分析華西醫(yī)院臨檢血液室蔣能剛?cè)A西醫(yī)院臨檢血液室蔣能剛1流式細胞術(shù)在血液病中的應(yīng)用：急性白血病免疫分型淋巴細胞增殖性疾病免疫分型骨髓增生異常綜合征輔助診斷微小殘留白血病ZAP70、P糖蛋白等預(yù)后指標(biāo)檢測PNH（CD55、CD59）細胞周期分析CD34+細胞絕對計數(shù)流式細胞術(shù)在血液病中的應(yīng)用：2標(biāo)本種類外周血骨髓胸腹水腦脊液淋巴結(jié)細針穿刺液活檢組織標(biāo)本種類外周血3標(biāo)本要求

室溫或2～4℃72h內(nèi)骨髓：急性白血病，MDS，MM外周血：CD55、CD59，LGL標(biāo)本要求

4標(biāo)本前處理：離心收集細胞（胸腹水、腦脊液）或制備細胞懸液（活檢組織）了解標(biāo)本中細胞組成（瑞氏染色、臺盼藍染色）標(biāo)本前處理：5血液疾病流式細胞術(shù)分析ppt課件6細胞濃度調(diào)整細胞濃度調(diào)整7一般處理步驟胞膜抗原：標(biāo)記-溶血-洗滌胞漿抗原：標(biāo)記-溶血-固定/破膜-標(biāo)記-洗滌免疫球蛋白：溶血-洗滌-標(biāo)記-洗滌一般處理步驟8設(shè)門方案SSC/FSCCD45CD19、CD20CD3、CD5設(shè)門方案9血液疾病流式細胞術(shù)分析ppt課件10光散射特征與細胞形態(tài)的關(guān)系光散射特征與細胞形態(tài)的關(guān)系11正常骨髓淋巴單核粒細胞CD45SSC原始嗜堿嗜酸Blastwindows正常骨髓淋巴單核粒細胞CD45SSC原始嗜堿嗜酸Blast12抗體設(shè)置

髓系一般標(biāo)志：CD13、CD33、CD117、MPO其他標(biāo)記：CD14、CD64、CD4CD71、GlyACD61、CD41CD36其他非髓系標(biāo)記：CD2、CD5、CD7、CD56、CD19抗體設(shè)置

髓系13骨髓增生異常綜合癥（MDS）主要表現(xiàn)為粒系及單核系抗原表達異常正確的結(jié)果解釋有賴于良好的質(zhì)量控制和標(biāo)本細胞活性骨髓增生異常綜合癥（MDS）14血液疾病流式細胞術(shù)分析ppt課件15B淋巴細胞κ、λ確定克隆性階段性B細胞標(biāo)記物：CD5、CD10、CD20、CD22、CD23、FMC7其他標(biāo)記物：CD11c、CD25、CD103、CD38B淋巴細胞16血液疾病流式細胞術(shù)分析ppt課件17T/NK細胞抗原表達缺失和強度變化T淋巴細胞：CD2、CD3、CD4、CD5、CD7、CD8NK細胞：CD16、CD56T/NK細胞18benignMalignantbenignMalignant19結(jié)果分析分析的重點在于確定每一個細胞標(biāo)記的存在與否以及表達的強弱（模式識別）。每個抗體在陽性細胞上的表達百分率并不重要。以殘存正常細胞（如正常成熟淋巴細胞）作為分析參照物。

結(jié)合細胞形態(tài)可事半功倍。結(jié)果分析分析的重點在于確定每一個細胞標(biāo)記的存在與否以及表達的20AML-M1AML-M2AML-M3AML-M4/M5AML-M1AML-M2AML-M3AML-M4/M521AML-M6非造血細胞非特異性染色（死亡細胞）ALLAML-M6非造血細胞非特異性染色（死亡細胞）ALL22血小板附著于原始粒細胞所致CD61陽性拖尾巨核細胞白血病血小板附著于原始粒細胞所致CD61陽性拖尾巨核細胞白血病23血液疾病流式細胞術(shù)分析ppt課件24血液疾病流式細胞術(shù)分析ppt課件25血液疾病流式細胞術(shù)分析ppt課件26血液疾病流式細胞術(shù)分析ppt課件27血液疾病流式細胞術(shù)分析ppt課件28微小殘留白血?。红`敏度為1/1000～1/10000以初診時免疫表型作為設(shè)置抗體組合的依據(jù)排除非特異性染色細胞和雜質(zhì)的影響微小殘留白血?。?9血