檢驗方法驗證2004-04-151第1頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月檢驗方法驗證的法規(guī)要求新藥申報質(zhì)量標準的必備材料藥典和藥品申報要求關(guān)注方法本身GMP更關(guān)注驗證過程，包括儀器法規(guī)、藥典規(guī)定了驗證的項目而不規(guī)定合格標準變更的再驗證：原料藥合成方法變更，藥品組份變更，分析規(guī)程變更第2頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月化學(xué)分析方法驗證的前提條件儀器已經(jīng)確認、校正并在有效期內(nèi)人員可靠的對照品可靠的實驗試劑確認受試溶液的穩(wěn)定，在規(guī)定時間內(nèi)無降解第3頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月儀器確認計量儀器：溫度、質(zhì)量、容量、分光光度計分析儀器：色譜系統(tǒng)計量儀器進行安裝確認和校正分析儀器：IQ，OQ，PQ、預(yù)防性維修和再確認第4頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月儀器確認安裝確認IQ驗收，登記安裝操作規(guī)程、維護規(guī)程、培訓(xùn)建立使用維修檔案第5頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月儀器確認運行確認OQ分系統(tǒng)試驗，空載及用標準樣品檢查各分系統(tǒng)是否達到預(yù)定要求

第6頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月HPLC系統(tǒng)運行確認試驗及限度各儀器名稱儀器中各組件功能試驗項目限度

泵

流量控制閥

向系統(tǒng)輸出流動相流速準確度

±5％

流動相比例控制閥控制各流動相的比例流動相混合比例的準確度±10％

自動進樣器

進樣體積控制閥

將定量體積的樣品注入色譜柱精密度

RSD應(yīng)≤1.0%

柱溫箱

溫度控制器

保持色譜柱的溫度

準確度精密度

≤±3.0℃波動應(yīng)在1.0℃內(nèi)

UV檢測器單色器從連續(xù)光譜中分離出單色光準確度±3nm光電管測定樣品的吸收度線性相關(guān)系數(shù)不得小于0.999第7頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月儀器確認性能確認（PQ）考察儀器可靠性、運行參數(shù)穩(wěn)定性及結(jié)果重現(xiàn)性系統(tǒng)適用性試驗，與具體分析方法相聯(lián)系第8頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月儀器確認預(yù)防性維修和再確認定期進行OP的某些關(guān)鍵項目可和年度校驗結(jié)合發(fā)現(xiàn)不理想狀況即使更換、修理元件關(guān)鍵部件更換后需進行再確認第9頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月分析方法驗證概述準確度、精密度、專屬性、檢測限、定量限、線性、范圍、粗放性和耐用性引用法定方法：系統(tǒng)適用性試驗已在其他實驗室驗證過的方法：同批對照（t檢驗計算顯著性差異）其他第10頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月分析方法驗證

驗證項目類型類型I

類型II類型III

類型IV

定量測定限度試驗準確度要求要求**－精密度要求要求-要求－專屬性要求要求要求*要求檢測限－－要求*－定量限－要求－*－線性要求要求－*－范圍要求要求**－“－”表示不作要求；“*”表示需根據(jù)實驗特性決定是否作要求。類型I：指用于測定原料藥中主要成分或制劑中活性組分（包括防腐劑）的定量分析方法；類型II：指用于測定原料藥中雜質(zhì)或制劑中降解產(chǎn)物的分析方法，包括定量分析和限度試驗；類型III：指用于測定性能特性（如溶解度、溶出度）的分析方法；類型IV：鑒別試驗。第11頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月分析方法驗證準確度是指用該方法測定的結(jié)果與真實值接近的程度，一般用回收率表示取范圍內(nèi)的三個濃度，每個濃度各測定三次結(jié)果評價：與已知含量樣品或經(jīng)驗證的方法結(jié)果對照精密度指在規(guī)定的測試條件下，同一個均勻樣品，經(jīng)多次取樣測定所得結(jié)果之間的接近程度重復(fù)性ICH要求進行3個濃度各3次或100%濃度6次第12頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月分析方法驗證精密度指在規(guī)定的測試條件下，同一個均勻樣品，經(jīng)多次取樣測定所得結(jié)果之間的接近程度重復(fù)性與中間精密度重復(fù)性ICH要求進行3個濃度各3次或100%濃度6次自樣品制備開始第13頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月分析方法驗證專屬性：抗干擾的能力重復(fù)性與中間精密度重復(fù)性ICH要求進行3個濃度各3次或100%濃度6次自樣品制備開始第14頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月分析方法驗證范圍，指能達到一定精密度、準確度和線性，測試方法適用的高低限濃度或量的區(qū)間含量測定，80％～120％；雜質(zhì)測定，50％～120％；含量均勻度，測試濃度的70％～130％，根據(jù)某些劑型的特點（如氣霧劑），此范圍可適當放寬；溶出度，標準規(guī)定范圍的±20％百分歸一化法測含量與雜質(zhì)，則線性范圍應(yīng)為雜質(zhì)規(guī)定限度的－20％至含量限度的＋20％。第15頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月分析方法驗證耐用性，指測定條件有小的變動時，測定結(jié)果不受影響的承受程度。典型的變動因素被測溶液的穩(wěn)定性，樣品制備方法，流動相的組成和pH值不同廠牌或不同批號的同類型色譜柱、柱溫、流速、進樣器和檢測器的溫度等。第16頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月分析方法驗證步驟驗證方案的制訂待驗證的方法，項目，合格標準驗證的實施由指定人員實施確定相關(guān)儀器、試劑、參照品收集完整的驗證過程記錄和原始圖譜復(fù)核驗證報告評價該方法是否通過驗證第17頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月微生物檢驗方法驗證驗證的意義：藥典僅規(guī)定了通用檢驗法微生物限度檢查無菌檢查防腐劑抑菌效力測定方法

第18頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月微生物檢驗方法驗證核心：消除檢品的抑菌性對結(jié)果的干擾微生物學(xué)檢驗的影響因素藥品本身的抑菌性；藥品中防腐劑的抑菌性；培養(yǎng)基的促菌生長能力；培養(yǎng)條件（溫度、濕度及需氧或厭氧）過濾系統(tǒng)的材質(zhì)；挑戰(zhàn)試驗用微生物菌種的制備方法第19頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月

消除抑菌性的方法化學(xué)中和法中和作用對微生物的損害作用稀釋法薄膜過濾淋洗法濾膜的性質(zhì)第20頁，課件共22頁，創(chuàng)作于2023年2月驗證方法－生長比較法試驗方法：分三組進行，進行三次檢品組――接有試驗菌株的中和檢品組。加入抑菌中和劑，最后接入已知量的菌株(少于100個菌)對照組――接有試驗菌株的緩沖液試驗組。用0.1%蛋白胨溶液代替檢品菌種活性檢查組――不含檢品或中和劑的空白對照組。不加抑菌中和劑，將試驗菌株直接接種培養(yǎng)。