工業(yè)微生物與育種學(xué)實驗PartⅠ實驗基本操作技能實驗一無菌技術(shù)及培育基的制備主要參考資料微生物學(xué)實驗指導(dǎo)：黃秀梨，高等教育出版社，2002微生物學(xué)實驗教程：楊革，科學(xué)出版社微生物學(xué)教程（第2版）：周德慶，高等教育出版社，2000《工業(yè)微生物實驗操作手冊》，諸葛健，輕工出版社，1997?！恫苁考毦到y(tǒng)發(fā)育手冊》、《真菌鑒定手冊》、《酵母鑒定手冊》、《放線菌鑒定手冊》等工具書成果評定單獨設(shè)課，作為一門獨立課程嚴格進行成果考核。本門課程成果評定由平常成果（80%）+實驗理論考試（20%）組成。平常成果包括下列項目：①實驗紀律及籌備（20％）②平常實驗操作和技能（25％）③實驗報告（20％）④實驗設(shè)計創(chuàng)新能力及其它能力（15％）實驗考試為理論與實踐結(jié)合的考試，隨機從題庫中抽取題目，分為：(1)微生物學(xué)實驗的基本操作技能，包括依據(jù)菌落形態(tài)鑒別所屬菌類，制片鏡檢，選擇相應(yīng)的配方，配制斜面、平板培育基，包扎滅菌，在培育基上進行分離接種操作等；(2)設(shè)計一個大型綜合實驗的簡略實驗方案。相對應(yīng)的考核方法為：(1)由同學(xué)從題庫中隨機抽取5道題，現(xiàn)場口頭回答，每題2分力，老師依據(jù)其回答情況評分，一共10分；(2)開卷，在大型綜合實驗，即實驗四進行之前完成，占10分。實驗支配模塊實驗項目學(xué)時備注I培育基的制備6必做微生物的分離純化8必做微生物顯微技術(shù)6必做II曲藥中高溫芽孢菌的分離及初步鑒定12選做釀酒微生物生產(chǎn)特性的檢測12選做窖（曲）房空氣微生物的檢測12選做釀酒酵母的誘變及高乙醇耐受性菌株的篩選12選做四大類型菌DNA的提取及PCR擴增12選做實驗報告內(nèi)容目的要求實驗原理實驗材料實驗步驟結(jié)果與商量1.1無菌技術(shù)與培育基的制備（1）微生物培育的常用器具及其滅菌（2）培育基配置的一般過程（3）選擇培育基1、Petridish（1）微生物培育的常用器具及其滅菌（2）培育基制備的一般程序調(diào)配

過濾

矯正pH

分裝過濾

滅菌（一般121.3℃，20-30min）

鑒定是否有菌

放入冰箱冷藏備用鑒定是否有菌可將培育基置于37℃培育24小時，然后觀察培育基：液體培育基；固體培育基；半固體培育基；固體培育基；半固體培育基；瓊脂實驗室常用培育基肉膏蛋白胨培育基：牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl5g，瓊脂15-20g，水1000ml，pH7.0-7.2；淀粉瓊脂培育基（高氏1號培育基）：可溶性淀粉20g，KNO31g，NaCl0.5g，K2HPO40.5g，F(xiàn)eSO40.01g，瓊脂20g，水1000ml，pH7.0-7.2;PDA培育基：馬鈴薯（去皮）200g，蔗糖或葡萄糖15g，瓊脂15-20g，水1000ml;因高壓之后pH值會下降0.1左右，所以矯正pH時應(yīng)比所需的pH高e.加棉塞，包裝。待分離的微生物生長，其它微生物的生長被抑制高溫下培育：分離嗜熱細菌；培育基中不含N：分離固氮菌；培育基加抗生素：分離抗性菌；（3）選擇培育基富集培育從自然界中分離到所需的特定微生物特定的環(huán)境條件僅適應(yīng)于該條件的微生物旺盛生長待分離微生物在群落中的數(shù)量大大增加營養(yǎng)和生理條件幾乎可無窮盡組合

依據(jù)微生物的