學(xué)必求其心得，業(yè)必貴于專精學(xué)必求其心得，業(yè)必貴于專精學(xué)必求其心得，業(yè)必貴于專精基因工程專題主講教師：畢詩(shī)秀【考試說(shuō)明對(duì)基因工程部分的要求】基因工程（1)基因工程的誕生(2）基因工程的原理及技術(shù)（3）基因工程的應(yīng)用(4）蛋白質(zhì)工程ⅠⅡⅡⅠ1。下列敘述符合基因工程概念的是A。B淋巴細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞融合，雜交瘤細(xì)胞中含有B淋巴細(xì)胞中的抗體基因B.將人的干擾素基因重組到質(zhì)粒后導(dǎo)入大腸桿菌，獲得能產(chǎn)生人干擾素的菌株C.用紫外線照射青霉菌，使其DNA發(fā)生改變，通過(guò)篩選獲得青霉素高產(chǎn)菌株D.自然界中天然存在的噬菌體自行感染細(xì)菌后其DNA整合到細(xì)菌DNA上2。在已知某小片段基因堿基序列的情況下,獲得該基因的最佳方法是A。用mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄合成DNAB.以4種脫氧核苷酸為原料人工合成C。將供體DNA片段轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞中，再進(jìn)一步篩選D。由蛋白質(zhì)的氨基酸序列推測(cè)mRNA獲取目的基因的方法有哪些？如何操作？適用對(duì)象？3．天然的玫瑰沒(méi)有藍(lán)色花,這是由于缺少控制藍(lán)色色素合成的基因B，而開藍(lán)色花的矮牽牛中存在序列已知的基因B?，F(xiàn)用基因工程技術(shù)培育藍(lán)玫瑰，下列操作正確的是A．提取矮牽牛藍(lán)色花的mRNA，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄獲得互補(bǔ)的DNA，再擴(kuò)增基因BB．利用限制性核酸內(nèi)切酶從開藍(lán)色花矮牽牛的基因文庫(kù)中獲取基因BC．利用DNA聚合酶將基因B與質(zhì)粒連接后導(dǎo)入玫瑰細(xì)胞D．將基因B直接導(dǎo)入大腸桿菌，然后感染并轉(zhuǎn)入玫瑰細(xì)胞4。下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因生物安全性的敘述,錯(cuò)誤的是A。種植轉(zhuǎn)基因作物應(yīng)與傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)種植區(qū)隔離B。轉(zhuǎn)基因作物被動(dòng)物食用后，目的基因會(huì)轉(zhuǎn)入動(dòng)物體細(xì)胞中C。種植轉(zhuǎn)基因植物有可能因基因擴(kuò)散而影響野生植物的遺傳多樣性D。轉(zhuǎn)基因植物的目的基因可能轉(zhuǎn)入根系微生物5.下表中列出了幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn),圖l、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：⑴一個(gè)圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)SmaⅠ切割前后，分別含有和個(gè)游離的磷酸基團(tuán).⑵若對(duì)圖中質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入的SmaⅠ酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越。⑶用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是.⑷與只使用EcoRⅠ相比較，使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時(shí)處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點(diǎn)在于可以防止⑸為了獲取重組質(zhì)粒，將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合，并加入酶.⑹重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了.⑺為了從cDNA文庫(kù)中分離獲取蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體，然后在的培養(yǎng)基中培養(yǎng),以完成目的基因表達(dá)的初步檢測(cè)。6．請(qǐng)回答基因工程方面的有關(guān)問(wèn)題：⑴關(guān)于基因工程的工具①構(gòu)建重組DNA分子所用的限制性內(nèi)切酶作用于圖1中的處，DNA連接酶作用于圖1中的_______處。（填序號(hào))②用限制酶EcoRV、Mbol單獨(dú)或聯(lián)合切割同一種質(zhì)粒，得到的DNA片段長(zhǎng)度如下圖2（1kb即1000個(gè)堿基對(duì)），請(qǐng)畫出質(zhì)粒上EcoRV、Mbol的切割位點(diǎn),并標(biāo)出酶切位點(diǎn)之間的距離。⑵利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因①PCR過(guò)程需要____________________________酶，作用于圖3_________步驟。②如果延伸時(shí)間設(shè)置較長(zhǎng),在第輪循環(huán)產(chǎn)物中開始出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長(zhǎng)的DNA片段,復(fù)制方式為______________。③如圖4所示,箭頭代表子代DNA的延伸方向，我們可以根據(jù)已知DNA序列復(fù)制未知DNA序列,TDNA片段基因序列已知，設(shè)計(jì)4段TDNA的引物A、B、C、D，引物的作用是___________________,如果利用PCR技術(shù)擴(kuò)增TDNA片段，我們可選擇_______作為引物（填字母）；如果擴(kuò)增未知基因可選擇________作為引物（填字母）。④設(shè)計(jì)引物是PCR技術(shù)關(guān)鍵步驟之一。某同學(xué)設(shè)計(jì)的兩組引物（只標(biāo)注了部分堿基序列）都不合理（如下圖5），請(qǐng)分別說(shuō)明理由。第1組：；第2組：⑤PCR反應(yīng)體系中含有熱穩(wěn)定DNA聚合酶，下圖6的表達(dá)式不能正確反映DNA聚合酶的功能，這是因?yàn)?⑶獲得轉(zhuǎn)基因植株①在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，應(yīng)選用圖中限制酶對(duì)進(jìn)行切割，以保證重組DNA序列的唯一性。②為篩選出導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌，應(yīng)在培養(yǎng)基中加入。③將轉(zhuǎn)入抗旱基因的水稻細(xì)胞培育成完整的植株需要用技術(shù)，該技術(shù)包括圖7中①、②過(guò)程。7。黃曲霉毒素B1（AFB1)存在于被黃曲霉菌污染的飼料中，它可以通過(guò)食物鏈進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)并蓄積，引起癌變。某些微生物能表達(dá)AFB1解毒酶．將該酶添加在飼料中可以降解AFB1，清除其毒性.⑴AFB1屬于類致癌因子。⑵AFB1能結(jié)合在DNA的G上．使該位點(diǎn)受損傷變?yōu)镚'，在DNA復(fù)制中，G'會(huì)與A配對(duì)?，F(xiàn)有受損傷部位的序列為,經(jīng)兩次復(fù)制后，該序列突變?yōu)?⑶下圖為采用基因工程技術(shù)生產(chǎn)AFB1解毒酶的流程圖據(jù)圖回答問(wèn)題：①在甲、乙條件下培養(yǎng)含AFB1解毒酶基因的菌株．經(jīng)測(cè)定:甲菌液細(xì)胞密度小、細(xì)胞含解毒酶;乙菌液細(xì)胞密度大、細(xì)胞不含解毒酶。過(guò)程Ⅰ應(yīng)選擇菌液的細(xì)胞提取總RNA，理由是__________________________________.②過(guò)程Ⅱ中，根據(jù)圖示，可以看出與引物結(jié)合的模板是_________。③檢測(cè)酵母菌工程菌是否合成了AFB1解毒酶，應(yīng)采用方法。⑷選取不含AFB1的飼料和某種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為材料,探究該AFB1解毒酶在飼料中的解毒效果。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及測(cè)定結(jié)果見(jiàn)下表,據(jù)表回答問(wèn)題：①本實(shí)驗(yàn)的兩個(gè)自變量，分別為。②本實(shí)驗(yàn)中反映AFB1解毒酶的解毒效果的對(duì)照組是.③經(jīng)測(cè)定，