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文檔簡介
實(shí)驗(yàn)三微生物的純培養(yǎng)一.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.掌握常用的分離純化微生物的基本操作技術(shù):連續(xù)劃平板法及分區(qū)劃平板法;掌握微生物無菌操作技術(shù);2.熟悉各種微生物在固體斜面、半固體和液體培養(yǎng)基上的生長特征。
二.實(shí)驗(yàn)原理1.微生物在自然界中無處不在。但自然界中的微生物都以混雜狀態(tài)存在。要研究某種微生物的性質(zhì),首先要獲得這種微生物的純培養(yǎng)物。微生物純化培養(yǎng)的方法有:顯微操作單細(xì)胞挑取法、稀釋涂平板法、稀釋混合平板法和平板劃線法四種。現(xiàn)在又發(fā)展了基于其DNA和蛋白質(zhì)的分子生物學(xué)分離和鑒定方法用于分離鑒定難以或不能培養(yǎng)的微生物。而厭氧微生物的純化由于其厭氧或低氧化還原電位,要求使用特殊的分離方法。2.微生物在固體斜面、半固體和液體培養(yǎng)基上,不同的微生物有其固有的培養(yǎng)特征。這些培養(yǎng)特征可以作為微生物分類鑒定的指標(biāo),也可作為檢測純培養(yǎng)物是否被污染的指標(biāo)。三、實(shí)驗(yàn)操作
(每組接種四種菌(大腸桿菌,變形桿菌,葡萄球菌,枯草桿菌)每個(gè)同學(xué)分別接種1種菌至四種培養(yǎng)基,寫清楚菌種名,姓名,日期)(一)純培養(yǎng)1.將菌懸液于肉膏蛋白胨平板上劃線分離。2.37℃倒置培養(yǎng),24h后觀察結(jié)果。平板劃線分離操作法示意圖平板劃線菌落分離效果圖(二)其他接種方法將有菌的材料或純粹的菌種轉(zhuǎn)移到另一無菌的培養(yǎng)基上,這個(gè)過程就稱為接種。常用的幾種方法如下:
1.在液體培養(yǎng)基上接種;2.在固體斜面培養(yǎng)基上接種;3.在半固體培養(yǎng)基上接種;于37℃下培養(yǎng)24h后觀察各種菌株在不同的培養(yǎng)基上的培養(yǎng)特征,比較它們培養(yǎng)特征之間的差異。1.斜面接種:
從已長好微生物的菌種管移接到另一斜面管的方法。此法用于好氣性微生物的接種。左手持菌種管和斜面管,使斜面向上,并盡量放平。用右手先將棉塞擰轉(zhuǎn)松動(dòng),再拿接種環(huán),用右手的小指、無名指和手掌撥下棉塞并夾緊,同時(shí)將管口在火焰上燃燒
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