心肌缺血再灌注損傷的研究進(jìn)展

心肌缺血（mi）是指由各種原因引起的動(dòng)脈血流量減少、心肌氧氣和其他物質(zhì)的供應(yīng)不足，以及代謝產(chǎn)物的減少。近年來(lái),動(dòng)脈搭橋術(shù)、溶栓療法、經(jīng)皮腔內(nèi)冠脈血管成形術(shù)、體外循環(huán)心臟外科手術(shù)和心肺腦復(fù)蘇術(shù)等手段的建立和推廣應(yīng)用,使得缺血心臟能在短時(shí)間內(nèi)重新獲得血液灌注并恢復(fù)氧供應(yīng)。多數(shù)情況下,缺血后再灌注可使損傷的結(jié)構(gòu)得到修復(fù),心功能恢復(fù),病情好轉(zhuǎn);但有時(shí)不僅不能使心功能恢復(fù),反而會(huì)加重心臟功能障礙和結(jié)構(gòu)損傷。這種在心肌缺血基礎(chǔ)上恢復(fù)血流后組織損傷加重、甚至發(fā)生不可逆性損傷的現(xiàn)象稱(chēng)為心肌缺血再灌注損傷(myocardialischemia-reperfusioninjury,MIRI)。已有大量研究顯示,MIRI與鈣超載、能量代謝和細(xì)胞凋亡等過(guò)程密切相關(guān),其中所涉及到的一些關(guān)鍵性物質(zhì)有一氧化氮(NO)合酶(NOS)、氧自由基、細(xì)胞間黏附分子-1、腫瘤壞死因子-α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)、p53蛋白及Bcl-2蛋白家族等。通過(guò)不斷探索,研究人員已發(fā)現(xiàn)一系列可通過(guò)不同的作用機(jī)制預(yù)防MIRI,保護(hù)缺血心肌的化合物及藥物,如促紅細(xì)胞生成素(NOS激動(dòng)劑)、維生素E和維生素C(自由基清除劑)、SEA0400(1,鈉鈣交換抑制劑)、葛根素(可改善心肌能量代謝)、麝香醒腦寧(可抑制TNF-α表達(dá))及麝香保心丸(抗心肌細(xì)胞凋亡)等。雖然關(guān)于MIRI的報(bào)道已有很多,但其發(fā)病機(jī)制過(guò)于復(fù)雜,人們對(duì)MIRI的現(xiàn)有認(rèn)識(shí)相對(duì)有限,臨床上亦缺乏理想的治療藥物。本文就近年來(lái)國(guó)內(nèi)外科研工作者在MIRI的病理機(jī)制和治療藥物方面的研究進(jìn)展作一綜述,旨在為MIRI治療藥物的進(jìn)一步研究開(kāi)發(fā)提供參考和思路。1內(nèi)源性因素對(duì)細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)途徑的影響目前,學(xué)術(shù)界普遍認(rèn)為,MIRI與L-精氨酸、5-脂氧合酶(5-lipoxygenase,5-LOX)、高溫需求蛋白A2(hightemperaturerequirementA2,HtrA2)、線(xiàn)粒體內(nèi)膜通透性轉(zhuǎn)換孔(mitochondrialpermeabilitytransitionpore,MPTP)、細(xì)胞色素P450單氧化酶/環(huán)氧-二十碳三烯酸(EET)系統(tǒng)及P38絲裂原活化蛋白激酶(P38mitogen-activatedproteinkinase,P38MAPK)等內(nèi)源性因素參與的細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)途徑密切相關(guān)。1.1la-精氨酸為直接補(bǔ)充的nvcm-ros后,積極Venardos等近來(lái)提出,在MIRI發(fā)生時(shí)用于合成NO的L-精氨酸會(huì)不足,這是導(dǎo)致MIRI繼續(xù)惡化的關(guān)鍵因素。該課題組發(fā)現(xiàn)新生大鼠心室肌細(xì)胞(neonatalratventricularcardiomyocytes,NVCM)在缺氧3小時(shí)再恢復(fù)給氧2小時(shí)后,對(duì)L-精氨酸的攝取量和NO水平分別下降至正常NVCM的42%±2%和71%±4%(P<0.01)。同時(shí),線(xiàn)粒體膜電位會(huì)下降至正常組的66%±5%(P<0.01),而活性氧(Reactiveoxygenspecies,ROS)的水平則增加至正常NVCM的129%±4%(P<0.01)。轉(zhuǎn)染了攜有L-精氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體CAT1基因的腺病毒的NVCM與補(bǔ)充了L-精氨酸的NVCM在缺氧3小時(shí)再恢復(fù)給氧2小時(shí)后,NO水平分別為正常NVCM的90%±1%和86%±1%(正常NVCM為74%±1%,P<0.001);線(xiàn)粒體膜電位分別為正常NVCM的86%±1%和82%±1%(正常NVCM為73%±1%,P<0.001);ROS的產(chǎn)生和乳酸脫氫酶的釋放分別為正常NVCM的51%±8%(P<0.01)和65%±9%(P<0.05)。在體外試驗(yàn)中,在缺血后再灌注的小鼠心臟灌流液中加入L-精氨酸,結(jié)果,心肌細(xì)胞中Akt激酶的磷酸化水平顯著高于空白對(duì)照組(P<0.05),提示L-精氨酸保護(hù)MIRI的機(jī)制與其激活A(yù)kt激酶磷酸化有關(guān)。綜上,可認(rèn)為L(zhǎng)-精氨酸水平降低是MIRI發(fā)病機(jī)制中的一個(gè)關(guān)鍵性因素,通過(guò)加強(qiáng)CAT1表達(dá)來(lái)上調(diào)L-精氨酸水平或者直接補(bǔ)充L-精氨酸均可改善MIRI。但并不是任何時(shí)候補(bǔ)充L-精氨酸都能起到減少M(fèi)IRI的效果,據(jù)報(bào)道,只有盡早補(bǔ)充L-精氨酸(于再灌注前10min至灌注后50min期間內(nèi)給藥)才能加強(qiáng)左心室功能;相反,較遲補(bǔ)充L-精氨酸(于再灌注后3小時(shí)給藥)則會(huì)增加過(guò)亞硝酸鹽的形成,從而加劇心肌功能損傷。1.25miri相關(guān)的炎癥反應(yīng)當(dāng)缺血再灌注發(fā)生時(shí),5-LOX可轉(zhuǎn)移、聚集至缺血再灌注器官,并促使花生四烯酸轉(zhuǎn)化為白三烯,后者可引發(fā)炎癥反應(yīng)并加劇器官的缺血損傷,故很多人認(rèn)為5-LOX在心肌缺血再灌注發(fā)生后的炎癥反應(yīng)中亦起重要作用。但近來(lái)也有人認(rèn)為MIRI不同于其他類(lèi)型的缺血再灌注損傷,且5-LOX在MIRI相關(guān)的炎癥反應(yīng)中并無(wú)作用。如Adamek等分別取5-LOX基因缺陷的小鼠和正常的野生型小鼠,在結(jié)扎冠狀動(dòng)脈30分鐘后解除結(jié)扎,使之再灌注,結(jié)果,24小時(shí)時(shí)兩組小鼠的心肌梗死面積并無(wú)明顯差別(61.7%±3.9%vs55.8%±6.6%,P>0.05),而5-LOX基因缺陷型小鼠梗死心肌的中性粒細(xì)胞數(shù)量顯著高于正常組小鼠(P=0.006),且腫瘤壞死因子表達(dá)量上調(diào),使MIRI引起的缺血后炎癥反應(yīng)情況加重。1.3胞色素因子HtrA2為一種絲氨酸蛋白酶,是MIRI致心肌細(xì)胞凋亡的關(guān)鍵性物質(zhì)。其通常位于線(xiàn)粒體膜間隙,當(dāng)MIRI發(fā)生時(shí),心肌細(xì)胞的線(xiàn)粒體膜完整性受到破壞,HtrA2和細(xì)胞色素C隨之從線(xiàn)粒體膜間隙轉(zhuǎn)移至細(xì)胞質(zhì)中。流入細(xì)胞質(zhì)中的細(xì)胞色素C會(huì)與脫氧腺苷三磷酸(dATP)、凋亡蛋白酶活化因子1(apoptoticproteaseactivatingfactor-1,Apaf-1)及Caspase-9前體結(jié)合成為一個(gè)凋亡小體,從而激活Caspase-9和Caspase-3。X-染色體連鎖凋亡蛋白抑制因子(X-chromosome-linkedinhibitorofapoptosisprotein,XIAP)可抑制Caspase-9前體、Caspase-9、-3及-7的活性。而流入細(xì)胞質(zhì)中的HtrA2可與XIAP結(jié)合并促使其降解,從而激活Caspase-9、-3和-7,促進(jìn)細(xì)胞凋亡(見(jiàn)圖1),提示抑制HtrA2的表達(dá)可有效阻止MIRI導(dǎo)致的心肌細(xì)胞凋亡。1.4vdac在心肌梗死再灌之間的協(xié)同作用MPTP是位于線(xiàn)粒體內(nèi)的非選擇性、高導(dǎo)電性復(fù)核孔道,主要由線(xiàn)粒體外膜上的電壓依賴(lài)性陰離子通道(voltagedependentanionchannel,VDAC)、內(nèi)膜的腺苷酸轉(zhuǎn)移酶、基質(zhì)和親環(huán)蛋白D等組成。VDAC參與維持線(xiàn)粒體膜的通透性,且在細(xì)胞凋亡和死亡中也起著重要作用。近來(lái)研究表明,心肌缺血再灌注期間MPTP會(huì)開(kāi)放。而環(huán)孢素A(cyclosporinA,CsA)可阻止其開(kāi)放,Xie等將大鼠分為2組,分別給其靜脈注射CsA(10mg·kg-1)或空白溶劑,10分鐘后結(jié)扎其冠狀動(dòng)脈左前降支,30分鐘后解除結(jié)扎,使之再灌,并于再灌180分鐘后測(cè)定大鼠心肌梗死面積。結(jié)果顯示,相比于溶劑對(duì)照組,CsA組大鼠心肌梗死面積顯著減少(30.3%±2.7%vs48.8%±5.8%,P<0.05),提示CsA可能通過(guò)抑制MPTP開(kāi)放來(lái)保護(hù)心血管,且證明MPTP在MIRI導(dǎo)致的心肌缺血死亡中起重要作用。1.5單氧化酶抑制劑單次灌注氧自由基增多、鈣超載和白細(xì)胞激活是公認(rèn)的MIRI機(jī)制,而細(xì)胞色素P450單氧化酶在參與氧化還原反應(yīng)的過(guò)程中往往可激活分子氧并產(chǎn)生自由基,故與MIRI的發(fā)生有密切關(guān)系;此外,心肌缺血可引起磷脂分解并產(chǎn)生花生四烯酸,后者可通過(guò)細(xì)胞色素P450單氧化酶代謝途徑代謝為4種EETs:5,6-、8,9-、11,12-和14,15-EET。EETs是一種內(nèi)皮衍生性超極化因子,具有促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖、抗血栓形成、激活心肌ATP敏感性鉀通道、調(diào)控L-型鈣通道、抑制鈉通道以及調(diào)節(jié)MAPK等功能。心肌缺血再灌注發(fā)生時(shí)血液中EETs水平顯著上調(diào),提示P450單氧化酶/EETs系統(tǒng)對(duì)MIRI有一定影響,但部分觀點(diǎn)認(rèn)為其可加重MIRI,如Moffat等發(fā)現(xiàn)5,6-EET及11,12-EET可使細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度持續(xù)升高引起鈣超載,從而延遲離體豚鼠心臟缺血再灌注時(shí)心功能的恢復(fù)時(shí)間,Granville等發(fā)現(xiàn),P450抑制劑氯霉素可減少離體大鼠心臟缺血再灌注后的心臟梗死面積;另一部分人則持相反觀點(diǎn),如Seubert等報(bào)道稱(chēng)CYP450亞型CYP2J2高表達(dá)及EETs的增加可改善MIRI。另外,也有人發(fā)現(xiàn)細(xì)胞色素P450ω-羥化酶及其催化花生四烯酸產(chǎn)生的19-和20-羥烷四烯酸可加重MIRI。1.6對(duì)miri的調(diào)節(jié)機(jī)制商MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)可將細(xì)胞外信息傳遞到細(xì)胞內(nèi),以介導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生各種反應(yīng),P38MAPK蛋白是MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)中的重要組成部分,其對(duì)MIRI亦存在雙重調(diào)節(jié)機(jī)制:一方面,在MIRI發(fā)生時(shí),P38MAPK可通過(guò)介導(dǎo)Caspase-1、-3和-11的激活及參與Fas/Fas-L信號(hào)傳導(dǎo)途徑等方式來(lái)促使心肌細(xì)胞凋亡并加重MIRI;另一方面,在MIRI發(fā)生時(shí),P38MAPK的激活會(huì)導(dǎo)致胞內(nèi)小熱休克蛋白(α-B晶體蛋白)在59位絲氨酸發(fā)生磷酸化,抑制MPTP開(kāi)放,從而保護(hù)心臟免受MIRI的損傷。2治療心肌缺血，再注射損傷藥物的開(kāi)發(fā)2.1uf-119對(duì)小鼠心肌細(xì)胞凋亡和心肌梗死的影響Cilenti等報(bào)道了一種對(duì)HtrA2有高度選擇性的抑制劑——ucf-101(2),其在體外對(duì)HtrA2的IC50為9.5μmol·L-1;當(dāng)濃度為10μmol·L-1時(shí),可抑制Caspase-9基因缺陷的成纖維細(xì)胞的凋亡(36小時(shí)凋亡率為40%,而未用藥細(xì)胞為70%)。Liu等將小鼠分為治療組和溶劑對(duì)照組,2組小鼠均行冠狀動(dòng)脈左前降支結(jié)扎術(shù),20分鐘后治療組小鼠灌胃給予ucf-101(0.6～1.8μmol·kg-1),10分鐘后解除結(jié)扎,使之再灌。分別于再灌3和24小時(shí)測(cè)定2組小鼠心肌細(xì)胞凋亡率和心肌梗死面積。結(jié)果顯示,治療組小鼠心肌梗死面積、細(xì)胞凋亡率及DNA損傷程度均明顯低于溶劑對(duì)照組,表明HtrA2抑制劑對(duì)MIRI具有改善作用,同時(shí)也提示HtrA2可作為MIRI治療藥物開(kāi)發(fā)的一個(gè)理想靶點(diǎn)。2.2大鼠體內(nèi)caspase-3和bax蛋白水平檢測(cè)磺胺苯吡唑?yàn)橐环NCYP2C9亞型的抑制劑,可抑制細(xì)胞色素P450介導(dǎo)的羥基化反應(yīng)。Ishihara等在對(duì)大鼠進(jìn)行冠狀動(dòng)脈左前降支結(jié)扎1小時(shí)后解除結(jié)扎,再灌注24小時(shí),再灌注的同時(shí)分別給其靜脈注射磺胺苯吡唑(10或30mg·kg-1)或空白溶劑,結(jié)果發(fā)現(xiàn),相比于對(duì)照組,使用上述2種劑量磺胺苯吡唑的大鼠心肌梗死面積分別減少41.7%和73.2%。另有研究表明,一些選擇性的細(xì)胞色素P450ω-羥化酶抑制劑可降低19-和20-羥烷四烯酸水平,抑制血管收縮,增加血流量,從而減少缺血再灌注對(duì)心肌細(xì)胞的損傷。Lv等將大鼠分為4組,分別對(duì)其腹腔注射3種P450ω-羥化酶抑制劑:17-十八炔酸(17-ODYA,0.3或3mg·kg-1)、N-甲磺?；?12,12-二溴代十二烷基-11-烯酰胺(DDMS,0.4或0.8mg·kg-1)和N-羥基-N′-(4-丁基-2-甲苯基)-甲脒(HET0016,0.1或1mg·kg-1)或空白溶劑,10分鐘后對(duì)其行冠狀動(dòng)脈左前降支結(jié)扎術(shù),30分鐘后解除結(jié)扎,使之再灌。再灌后2小時(shí)測(cè)定大鼠心肌細(xì)胞凋亡率及凋亡蛋白水平。結(jié)果,與溶劑對(duì)照組相比,上述3種藥物可分別使大鼠心肌細(xì)胞凋亡率降低22%、31%、35%、56%、50%和67%。WesternBlot法檢測(cè)結(jié)果顯示,上述3種化合物均可使大鼠體內(nèi)Caspase-3及Bax蛋白表達(dá)水平顯著下調(diào),并上調(diào)Bcl-2蛋白表達(dá)。由此可見(jiàn),細(xì)胞色素P450ω-羥化酶抑制劑也是一種潛在理想的MIRI治療藥物。2.3對(duì)美蘇氏小鼠心肌梗死面積和心功能的影響在MIRI發(fā)生時(shí),介導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)途徑被認(rèn)為與Ras蛋白有關(guān),P38-MAPK、JNK和Mst-1這3種激酶均受Ras蛋白的調(diào)節(jié),提示抑制Ras蛋白活性可減輕MIRI。Pando等研究表明,Ras抑制劑S-farnesylthiosalicylicacid(FTS,3)可有效減弱MIRI。該課題組取離體Wistar大鼠心臟進(jìn)行冠狀動(dòng)脈左前降支結(jié)扎,30分鐘后解除結(jié)扎,再灌注30分鐘,再灌注期間分別在灌注液中加FTS(1μmol·L-1)或PBS緩沖液,結(jié)果,FTS組大鼠心臟梗死面積顯著小于PBS組(12.7%±2%vs23.7%±4%,P<0.05),且心肌中JNK和Mst-1表達(dá)量下調(diào);此外,該課題組對(duì)Wistar大鼠進(jìn)行冠狀動(dòng)脈左前降支結(jié)扎術(shù),30分鐘后再灌注,結(jié)扎前7天每日給予FTS(5mg·kg-1)或PBS1次,在結(jié)扎后14天內(nèi),隔天給藥1次。結(jié)果,FTS組大鼠的心臟梗死面積亦顯著小于PBS組(17.3%±2.5%vs36%±7%,P<0.05),且FTS組大鼠心肌細(xì)胞中JNK和Mst-1的表達(dá)也發(fā)生下調(diào)。2.4主要的離子通道抑制劑心肌缺血時(shí)細(xì)胞內(nèi)的無(wú)氧代謝作用增強(qiáng),細(xì)胞出現(xiàn)酸中毒,進(jìn)而促進(jìn)鈉氫交換,使內(nèi)鈉水平升高,阻礙ATP生成;此外,內(nèi)鈉水平升高可導(dǎo)致鈉鈣反交換增加,使細(xì)胞外鈣內(nèi)流,從而造成細(xì)胞內(nèi)鈣超載,最終誘發(fā)細(xì)胞凋亡。離子通道阻斷劑可抑制這2種交換機(jī)制,故對(duì)心肌細(xì)胞具有一定保護(hù)作用。該類(lèi)藥物早已用于MIRI的治療,但文獻(xiàn)報(bào)道的以鈉離子通道抑制劑和鈣離子通道抑制劑為主。近來(lái)研究發(fā)現(xiàn),心肌細(xì)胞膜ATP敏感性鉀通道(ATPsensitivepotassiumchannel,KATP)抑制劑也能用于治療MIRI,如Vajda等報(bào)道,與對(duì)照組相比,靜脈注射選擇性KATP抑制劑HMR1883(4,劑量為3或10mg·kg-1)的MIRI大鼠存活率顯著提高(82%,96%vs24%),并能延長(zhǎng)其QT間隔[(89±4.6)ms,(89±4.9)msvs(60±2.4)ms]。但另有研究人員發(fā)現(xiàn),某些KATP通道開(kāi)放劑如環(huán)錦熟黃楊甙D對(duì)MIRI亦有改善作用。Hu等給MIRI模型大鼠灌胃使用環(huán)錦熟黃楊苷D(20mg·kg-1),共給藥3次,每次間隔為12小時(shí)。結(jié)果,治療組大鼠心肌梗死面積明顯低于未用藥組(28%±4%vs48%±4%)。此外,環(huán)錦熟黃楊苷D可保護(hù)大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞免受缺氧損傷,促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞釋放NO,并抑制大鼠靜脈血栓形成。提示該化合物對(duì)MIRI的緩解作用可能與其開(kāi)放KATP通道、刺激NO生成及抑制靜脈血栓生成有關(guān)。上述研究結(jié)果顯示KATP通道抑制劑及開(kāi)放劑對(duì)MIRI均有一定治療作用,但具體機(jī)制仍有待深入探討。2.5外施pahs抑制劑線(xiàn)粒體F1F0ATP合酶是生物體內(nèi)產(chǎn)生ATP的主要酶之一。研究顯示,在MIRI發(fā)生時(shí),線(xiàn)粒體F1F0ATP水解酶水平上調(diào),從而導(dǎo)致ATP能源的大量浪費(fèi)。金輪霉素B和寡霉素B可通過(guò)抑制線(xiàn)粒體F1F0ATP水解酶的活性阻止ATP的損耗,但兩者均為非選擇性抑制劑,對(duì)線(xiàn)粒體F1F0ATP合酶亦有抑制作用,從而影響正常組織產(chǎn)生ATP,故并不能用來(lái)治療MIRI。近來(lái),研究人員發(fā)現(xiàn)了一種苯并吡喃類(lèi)選擇性線(xiàn)粒體F1F0ATP水解酶抑制劑——BMS-199264(5),體外抑酶試驗(yàn)顯示,其對(duì)線(xiàn)粒體F1F0ATP水解酶的IC50為0.5μmol·L-1,且在高達(dá)100μmol·L-1的濃度下對(duì)F1F0ATP合酶無(wú)任何作用。在體外試驗(yàn)中,向缺血大鼠心臟灌注液中加入BMS-199264(1和10μmol·L-1),結(jié)果,再灌30分鐘后2個(gè)用藥組大鼠心臟心率顯著高于未用藥組(249±22次/min,275±11次/minvs221±25次/min,P<0.05);左心室形成壓升高(127±5mmHgvs18±4mmHg;125±6mmHgvs46±3mmHg,P<0.05)。結(jié)果表明,BMS-199264對(duì)心肌收縮功能有改善作用,具有開(kāi)發(fā)為MIRI治療藥物的前景。2.6小鼠心肌梗死面積及內(nèi)源性因子的變化近來(lái)研究表明,活化的凝血因子(FⅦa)與細(xì)胞膜上的組織因子(TF)結(jié)合形成復(fù)合物后,不僅可觸發(fā)凝血酶的產(chǎn)生,還能影響細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)傳導(dǎo),故對(duì)MIRI有一定影響。已有報(bào)道稱(chēng),抑制FⅦa-TF復(fù)合物活性可顯著減輕MIRI,在Loubele等采用活性位點(diǎn)被阻斷的FⅦa(activesiteinhibitedfactorVIIa,ASIS。其對(duì)TF的親和力比天然的FⅦa更高,且因活性位點(diǎn)受阻,不能激活Ⅸ因子和Ⅹ因子,故而不會(huì)觸發(fā)凝血連鎖反應(yīng))進(jìn)行的試驗(yàn)中,先結(jié)扎小鼠冠狀動(dòng)脈,1小時(shí)后解除結(jié)扎,使之再灌。結(jié)扎后15分鐘和再灌后5分鐘各給予1次ASIS1mg·kg-1或安慰劑。分別于再灌2、6和24小時(shí)測(cè)定小鼠心肌梗死面積以及胞內(nèi)多種內(nèi)源性因子水平。結(jié)果顯示,ASIS組在這3個(gè)時(shí)間點(diǎn)的梗死面積均比安慰劑組低40%,且心肌細(xì)胞內(nèi)分化抗原簇14(CD14)、Toll樣受體-4(TLR-4)、白細(xì)胞介素-1(IL-1)、IL-1受體相關(guān)激酶(IRAK-IL-1)和IκBа的mRNA表達(dá)量發(fā)生下調(diào),TLR-4及核轉(zhuǎn)錄因子κB(NF-κB)介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)亦受到抑制。例如在再灌2和24小時(shí)時(shí),ASIS組小鼠心肌細(xì)胞的NF-κB水平分別為(1.1±1.1)和(6.9±1.8)ng·L-1,安慰劑組分別為(7.5±2.2)和(39.0±1.8)ng·L-1(P<0.05),表明ASIS可有效阻止MIRI發(fā)生時(shí)NF-κB介導(dǎo)的炎癥損傷;在再灌注6和24小時(shí)時(shí),CD45陽(yáng)性細(xì)胞分別降低至(164.1±35.4)和(109±23.2)個(gè)/cm2,安慰劑組為(334.0±26.9)和(323.9±36.9)個(gè)/cm2,表明ASIS可減少梗死區(qū)內(nèi)白細(xì)胞的浸入。綜上所述,ASIS對(duì)MIRI有較好的改善作用。2.7mel對(duì)miri的影響褪黑激素(Melatonin,Mel)即N-乙酰-5-甲氧色胺,是由位于第三腦室后壁的松果體分泌的激素,也是迄今人們所發(fā)現(xiàn)的最強(qiáng)的內(nèi)源性自由基清除劑。丙二醛(MDA)生成量與氧化應(yīng)激損傷程度呈正比,乳酸脫氫酶(LDH)外漏量與細(xì)胞膜損傷程度呈正比,故這兩種內(nèi)源性物質(zhì)可作為MIRI的考察指標(biāo)之一。Yeung等將SD大鼠分為Mel組(10mg·kg-1·d-1,ip,連續(xù)給藥4周)、溶劑對(duì)照組和正常組,給藥4周后取Mel組和溶劑對(duì)照組大鼠心臟,結(jié)扎其冠狀動(dòng)脈左前降支,30分鐘后解除結(jié)扎,再灌5分鐘時(shí)進(jìn)行LDH外漏量測(cè)定,120分鐘時(shí)進(jìn)行丙二醛(MDA)水平、心臟梗死面積及肌內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Ca2+-ATP酶水平測(cè)定。結(jié)果,再灌5分鐘時(shí),Mel組LDH外漏量為正常組的105%(溶劑對(duì)照組為正常組的127%);再灌120分鐘時(shí),Mel組大鼠心肌細(xì)胞內(nèi)MDA水平為正常組的125%(溶劑對(duì)照組為正常組的313%);心臟梗死面積為正常組的101%(溶劑對(duì)照組為正常組的124%);肌內(nèi)質(zhì)