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WidefieldConfocalMultiphoton白熾燈的原理電子吸收能量躍遷到高能級(jí)高能級(jí)不穩(wěn)定高能級(jí)電子回到基態(tài)，發(fā)出光子單光子吸收與熒光顯微鏡熒光分子吸收一種光子躍遷到高能級(jí)高能級(jí)電子回到基態(tài)，發(fā)出熒光多光子效應(yīng)

高能量的激發(fā)光照射熒光分子，熒光分子短時(shí)間內(nèi)吸收兩個(gè)光子躍遷到高能級(jí)高能級(jí)電子回到基態(tài)，發(fā)出熒光多光子顯微鏡雙光子顯微鏡（Leica）多光子顯微鏡優(yōu)勢(shì)—高辨別率雙光子效應(yīng)是低概率事件，需要很高的激光能量，所以只有焦點(diǎn)處會(huì)發(fā)生需要采用高能量、短脈沖（預(yù)防樣品發(fā)燒、提升信噪比）的飛秒激光器雙光子顯微鏡寬場(chǎng)顯微鏡多光子顯微鏡優(yōu)勢(shì)—高辨別率

未發(fā)生雙光子效應(yīng)的區(qū)域，不會(huì)激發(fā)熒光多光子顯微鏡優(yōu)勢(shì)—大深度雙光子顯微鏡穿透深度深與雙光子效應(yīng)無關(guān)，而是因?yàn)殡p光子顯微鏡采用的是長(zhǎng)波長(zhǎng)（紅外）的激光所以，三光子激光器的波長(zhǎng)更長(zhǎng)，穿透深度更深多光子顯微鏡優(yōu)勢(shì)—大深度

選擇波長(zhǎng)應(yīng)處于組織吸收較少的窗口，一般選擇700-900nm之間多光子顯微鏡優(yōu)勢(shì)—偽彩色多波長(zhǎng)熒光的疊加多光子顯微鏡研究—脈沖壓縮提升信噪比多光子顯微鏡研究—自適應(yīng)校正降低組織散射的影響提升辨別率多光子顯微鏡研究—三光子多光子顯微鏡研究—微型化北京大學(xué)程和平院士團(tuán)隊(duì)結(jié)論優(yōu)勢(shì)：大深度（800um）辨別率比寬場(chǎng)高微型化、同

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