胃痛消痞方對功能性消化不良肝郁模型大鼠血清no,小腸推進比的影響

功能障礙（fd）是臨床上常見的胃腸道疾病，與胃腸功能障礙密切相關(guān)。祖國醫(yī)學將其歸屬于“胃脘痛”和“痞滿”等范疇,主要病機是肝郁氣滯,脾胃虛寒。本實驗通過觀測胃痛消痞方對FD肝郁模型大鼠血漿MTL含量,血清NO含量,小腸推進比的影響,探討該藥對胃腸運動的影響。1材料和方法1.1體重220%健康Wistar大鼠60只,10～12周齡,體重(200±20)g,雌雄各半。購自于中國醫(yī)科大學附屬盛京醫(yī)院動物實驗室(使用許可證號SYXK遼2003-0019)。1.2作用于西安楊森制藥中藥組成:柴胡、白芍、延胡索、枳實、砂仁、炒麥芽、焦山楂、炒雞內(nèi)金、黨參、炒白術(shù)、炙甘草(購自于遼寧中醫(yī)藥大學中藥局)。嗎丁啉:購自于西安楊森制藥有限公司(批號H10910003)。NO試劑盒:購自于南京建成生物生物工程研究所;MTL試劑盒:購自于解放軍東亞免疫試劑所。1.3動物模型的制備將60只大鼠隨機分6組(每組10只):正常組,模型組,嗎丁啉組(0.03125mg·kg-1·d-1),低劑量中藥組(0.125g/kg-1·d-1),中劑量中藥組(0.25g/kg-1·d-1),高劑量中藥組(0.5g/kg-1·d-1)。正常組無特殊處理正常喂養(yǎng),其余各組用夾尾激怒法制作FD肝郁大鼠模型。每日4次(8∶00,11∶00,14∶00,17∶00)用鼠夾夾大鼠尾巴遠端1/3處,每次夾尾刺激持續(xù)30min,連續(xù)刺激7天。造模期間,大鼠自由進食、飲水,每日觀察、測定并記錄其一般狀況。1.4灌胃給藥劑量自造模結(jié)束次日起,開始灌胃給藥,每只大鼠每次灌胃劑量為2mL。正常組與造模組均給予等體積生理鹽水灌胃;嗎丁啉組給予已配制的嗎叮啉溶液灌胃給藥;中藥治療組根據(jù)藥理實驗方法學,以成人與大鼠用藥劑量的體重比計算給藥劑量,按每天成人用藥等效劑量的1倍(低劑量組)、2倍(中劑量組)、4倍(高劑量組)制成煎劑灌胃給藥。每日給藥2次,連續(xù)14天。1.5觀測指標和實驗方法1.5.1觀察小鼠的一般情況進食量,飲水量,大小便,體重,毛色光澤,活動度,反應性等。1.5.2mtl及no含量檢測血清NO含量小腸推進比各組大鼠在末次給藥前24h禁食不禁水,末次給藥后予混有墨汁的營養(yǎng)性半固體糊標準餐0.5mL/只灌胃,30min后麻醉大鼠常規(guī)剖開腹腔,于腹主動脈采血2mL/只,血樣4℃離心機分離血漿后,置于-70℃冰箱中保存。按照試劑盒說明逐步操作,采用放射免疫分析法測定MTL含量及NO含量;采血后,結(jié)扎賁門和幽門,剪取幽門至回盲部的腸管,測量小腸總長度及幽門至墨汁前沿的距離,根據(jù)公式(推進百分率=墨汁前端與幽門的距離(cm)/小腸全長(cm)×100%)計算小腸推進比。1.6均數(shù)標準差分析采用SPSS15.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計處理。數(shù)據(jù)以均數(shù)標準差(xˉ±s)(xˉ±s)表示,結(jié)果用單因素方差分析,P<0.01或P<0.05為有顯著性差異;P>0.05為無統(tǒng)計學意義。2結(jié)果2.1造模大鼠的反應夾尾刺激過程中,逐漸引發(fā)大鼠相互間撕打,打斗后,大鼠前肢離地抬高,彼此豎立對峙,并發(fā)出怒吼。造模大鼠在造模第2天出現(xiàn)進食量減少;第3天出現(xiàn)煩躁、易怒,大便溏稀,排泄物穢臭;第5天出現(xiàn)毛色枯槁,光澤減少,反應遲鈍;第7天出現(xiàn)緊張、焦慮,測量1周內(nèi)的體重無明顯上升,個別大鼠體重反而下降。2.2實驗測定結(jié)果2.2.1各組血漿mtl含量的比較模型組血漿MTL含量明顯降低,與正常組比較有顯著性差異(P<0.01),表明造模成功。經(jīng)治療后,低劑量組、中劑量組、高劑量組、嗎丁啉組血漿MTL含量均明顯升高,與模型組比較有顯著性差異(P<0.01)。中劑量組與低劑量組比較有顯著性差異(P<0.01),與高劑量組比較無顯著性差異(P>0.05)。見表1。2.2.2各組血清no含量比較模型組血清NO含量明顯升高,與正常組比較有顯著性差異(P<0.01),表明造模成功。經(jīng)治療后,低劑量組、中劑量組、高劑量組、嗎丁啉組血清NO含量均明顯降低,與模型組比較有顯著性差異(P<0.01)。中劑量組與低劑量組比較有顯著性差異(P<0.01),與高劑量組比較無顯著性差異(P>0.05)。見表1。2.2.3各組小鼠推進比比較模型組小腸推進比明顯降低,與正常組比較有顯著性差異(P<0.01),表明造模成功。經(jīng)治療后,低劑量組、中劑量組、高劑量組、嗎丁啉組小腸推進比均明顯升高,與模型組比較有顯著性差異(P<0.01)。中劑量組與低劑量組比較有顯著性差異(P<0.05),與高劑量組比較無顯著性差異(P>0.05)。見表1。3治胃術(shù)后,促進胃計及胃動素釋放夾尾法可激怒大鼠,造成功能性消化不良大鼠模型。根據(jù)中醫(yī)理論分析,認為激怒法類似于中醫(yī)情志所傷,激怒后大鼠的癥狀表現(xiàn)類似于中醫(yī)辨證的肝郁氣滯型。本病病機主要為肝氣郁結(jié),橫逆犯胃。治法上應疏肝解郁,和胃理氣。柴胡善疏泄肝氣而解郁結(jié),其提取物柴胡甙能促進小腸的推進運動,增強乙酰膽堿對回腸的收縮作用。枳實長于破滯氣、行痰濕、消積滯、除痞滿,能使胃腸運動收縮節(jié)律有力。砂仁和中調(diào)氣,行郁消滯,降胃陰而下食,達脾陽而化谷,能加強小腸腸管收縮,增進腸道運動。炒麥芽善消食化積,散郁行滯、疏肝理氣,有助消化和護肝作用。藥理研究證明,人口服雞內(nèi)金后胃液分泌量、酸度及消化力均增高,而且促使胃運動期延長、蠕動波增強及胃排空加快。炒白術(shù)補脾益氣而燥濕,煎劑有調(diào)節(jié)胃腸運動的作用,可促進胃排空及小腸推進功能。黨參能糾正病理狀態(tài)的胃腸運動功能紊亂,引起的胃運動增加和胃排空加快,顯著提高小腸推進率。胃痛消痞方諸藥合用,謹守FD病機,能明顯增強消化道蠕動功能,改善中上腹脹滿不適、隱痛、呃逆反酸等癥狀。功能性消化不良可能是由于FD患者存在胃竇-幽門-十二指腸協(xié)調(diào)運動失常,胃排空延緩及胃腸激素分泌失調(diào)。大量研究表明,一氧化氮合酶(NOS)廣泛分布于胃腸道,在NO-NOS作用下通過左旋精氨酸與左旋瓜氨酸之間的電子傳遞而形成NO。N0是非腎上腺素能非膽堿能(NANC)神經(jīng)所釋放的主要抑制性神經(jīng)遞質(zhì),介導平滑肌的松馳效應。超生理水平的NO對胃黏膜和胃動力有不利影響。臨床研究表明胃液NO的增高是FD患者胃十二指腸協(xié)調(diào)運動失常,胃排空延緩的重要影響因素。另據(jù)推測造成胃腸激素紊亂的原因與中樞神經(jīng)系統(tǒng)-胃腸-胃腸激素之間可能存在的雙向調(diào)控有關(guān)。胃動素屬于消化間期激素,主要由十二指腸及近端空腸黏膜內(nèi)嗜鉻細胞分泌,一般認為MTL的釋放與迷走神經(jīng)張力增高有關(guān),MTL是對胃腸動力起興奮作用的胃腸激素,迷走神經(jīng)興奮能引起胃動素釋放增多,從而促進胃蠕動。MTL生理功能是促進消化道運動,加速