一、名詞解釋中心法則：遺傳信息由DNA轉(zhuǎn)錄RNA，再翻譯出蛋白質(zhì)的過程，另外DNA、RNA也可復(fù)制，RNA也可逆轉(zhuǎn)錄成DNA。DNA變性：雙鏈DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)氫銉斷裂，變成單鏈，但不涉及一級(jí)結(jié)構(gòu)變化的過程。必需氨基酸：人體必需但又不能自已合成，需要從食物中獲得的氨基酸。酶的別構(gòu)效應(yīng)：酶分子中除有活性部位外還有別構(gòu)部位，當(dāng)別構(gòu)部位與別構(gòu)效應(yīng)物結(jié)合后，會(huì)導(dǎo)至酶分子的構(gòu)象發(fā)生變化，其結(jié)果會(huì)影響到酶對(duì)底物的催化速度。順式作用元件：順式作用元件是指對(duì)基因表達(dá)有調(diào)節(jié)活性的DNA序列，其活性只影響與其自身同處一個(gè)DNA分子上的基因；同時(shí)這種DNA序列通常不編碼蛋白質(zhì)，多位于基因旁側(cè)或內(nèi)含子中。超二級(jí)結(jié)構(gòu)：在球狀蛋白質(zhì)分子的一級(jí)結(jié)構(gòu)順序上，相鄰的二級(jí)結(jié)構(gòu)常常在三維結(jié)折疊中相互靠近，彼此作用，在局部區(qū)域形成規(guī)則的二級(jí)結(jié)構(gòu)的聚合體，稱超二級(jí)結(jié)構(gòu)。7.Ribozyme：某些具有催化功能的RNA，即為核酶。8.PCR：聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，1985年Mullis發(fā)明的一種體外模擬自然DNA復(fù)制的核酸擴(kuò)增技術(shù)。基本過程為DNA的加熱變性，引物與DNA模板的退火，目的DNA序列的延伸幾部分構(gòu)成。9.結(jié)構(gòu)域：在多肽鏈上在二級(jí)結(jié)構(gòu)或超二級(jí)結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上形成的三級(jí)結(jié)構(gòu)的局部折疊區(qū)，它是相對(duì)獨(dú)立的緊密球狀實(shí)體。10.酶的活性中心：酶中含有底物結(jié)合部位和參與催化底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物的氨基酸殘基的部分。11.生物化學(xué)：是研究生物體的化學(xué)及其化學(xué)變化規(guī)律的科學(xué)；對(duì)象為生物體，方法為物理、化學(xué)和生物學(xué)理論和方法，核心為生命現(xiàn)象的化學(xué)本質(zhì)。12.糖：是多羥基醛或多羥基酮以及可以水解產(chǎn)生這些化合物的物質(zhì)的總稱。13.脂類：脂類是脂肪酸和醇等所組成的脂類及其衍生物；其化學(xué)元素組成主要是C.H.O.N.P。14.肽：一分子氨基酸的α-羧基與另一分子氨基酸α-氨基脫水縮合的化合物叫做肽，氨基酸之間通過酰胺鍵（肽鍵）連接而成。15..等電點(diǎn)：兩性離子所帶電荷因溶液的pH值不同而改變,當(dāng)兩性離子正負(fù)電荷數(shù)值相等時(shí),溶液的pH值即其等電點(diǎn)。16.酶（enzyme）：是具有生物催化功能的蛋白質(zhì)或核酸。17.DNA變性（denaturation）：在外界物理化學(xué)作用的處理下，使DNA氫鍵的斷裂，DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)分開，成為兩條單鏈DNA分子。18.同功酶：催化同一化學(xué)反應(yīng)而化學(xué)組成不同的一組酶。它們彼此在氨基酸序列、底物的親和性等方面都存在著差異。19．蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)：在蛋白質(zhì)分子中的局部區(qū)域內(nèi)氨基酸殘基的有規(guī)則的排列，常見的二級(jí)結(jié)構(gòu)有α-螺旋和β-折疊。二級(jí)結(jié)構(gòu)是通過骨架上的羰基和酰胺基團(tuán)之間形成的氫鍵維持的。20.蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)：使蛋白質(zhì)分子處于兼性分子狀態(tài)，在電場中不遷移（分子的凈電荷為零）時(shí)的溶液pH值。21.蛋白質(zhì)變性：生物大分子的天然構(gòu)象遭到破壞導(dǎo)致其生物活性喪失的現(xiàn)象。蛋白質(zhì)在受到光照、熱、有機(jī)溶劑以及一些變性劑的作用時(shí)，次級(jí)鍵受到破壞，導(dǎo)致天然構(gòu)象的破壞，使蛋白質(zhì)的生物活性喪失。22.別構(gòu)效應(yīng)：又稱之變構(gòu)效應(yīng)。是蛋白質(zhì)或酶（寡聚蛋白）與配基結(jié)合改變蛋白質(zhì)的構(gòu)象，導(dǎo)致蛋白質(zhì)或酶生物活性改變的現(xiàn)象。23.α—螺旋：最常見、含量最豐富的蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)，其多肽鏈形成右手螺旋結(jié)構(gòu)，螺距為0.54nm,含3.6個(gè)氨基酸殘基；兩個(gè)氨基酸之間的距離0.15nm；肽鏈內(nèi)形成氫鍵，氫鍵幾乎與軸平行，第一個(gè)氨基酸殘基的酰胺基團(tuán)的-CO基與第四個(gè)氨基酸殘基酰胺基團(tuán)的-NH基形成氫鍵。24.直鏈淀粉：能溶于熱水，可被淀粉酶催化水解生成麥芽糖，進(jìn)而變?yōu)槠咸烟潜蝗梭w吸收，由多個(gè)a-D－葡萄糖分子以a（1?4）糖苷鍵聚合而成。25.活性肽：具有活性的多肽又稱生物活性肽，具有人體代謝和生理調(diào)節(jié)功能，是蛋白質(zhì)中20個(gè)天然氨基酸以不同組成和排列方式構(gòu)成的寡肽類的總稱。26.蛋白聚糖：是一類特殊的糖蛋白，由一條或多條糖胺聚糖和一個(gè)核心蛋白共價(jià)連接而成。糖的比例高于蛋白。27．b-折疊：是蛋白質(zhì)中的一種二級(jí)結(jié)構(gòu)原件，由兩條或多條幾乎完全伸展的肽鏈平行排列，通過鏈間的氫鍵交聯(lián)而形成的。氨基酸等電點(diǎn)：在某一特定pH值溶液時(shí)，氨基酸主要以兩性離子形式存在，凈電荷為零，在電場中不向電場的正極或負(fù)極移動(dòng)，這時(shí)的溶液pH值稱為該氨基酸的等電點(diǎn)。28．固定化酶：是通過吸附、耦聯(lián)、交聯(lián)和包埋等物理或化學(xué)的方法把酶連接到某種載體上，做成仍具有酶催化活性的水不溶性酶。底物通過擴(kuò)散作用與酶接觸并發(fā)生反應(yīng)。在反應(yīng)結(jié)束后，產(chǎn)物擴(kuò)散到反應(yīng)介質(zhì)中與酶分離。而酶則可能重復(fù)進(jìn)行催化作用。這種酶在反應(yīng)體系中以固相形式存在，的以稱為固定化酶或固相酶。29．寡聚蛋白質(zhì)：由兩個(gè)或兩個(gè)以上的亞基組成的蛋白稱。組成的亞基可以相同，也可以不同。30．增色效應(yīng)與減色效應(yīng)：增色效應(yīng)：雙鏈DNA變性過程中其光吸收升高。減色效應(yīng)：在DNA復(fù)性(恢復(fù)雙鏈)的過程中則伴隨著光吸收的減少。二、選擇題1．應(yīng)用微量凱氏(Micro-Kjedahl)定氮法測得某醬油樣品的含氮量為4.0g/L，那么4L該醬油中粗蛋白的含量約為多少？(B)A．16.0gB．100.0gC．25.0gD．64.0g 2．下列氨基酸(aminoacid)中屬于堿性氨基酸的是：（A）A．HisB．GluC．IleD．Pro4．某月餅食品中含有下列4種糖，其中屬于還原性糖的是：(A)A．麥芽糖B．蔗糖C．淀粉D．纖維素5．蛋白質(zhì)變性是由于：(D)A．蛋白質(zhì)氨基酸組成的改變B．蛋白質(zhì)氨基酸順序的改變C．蛋白質(zhì)肽鍵的斷裂D．蛋白質(zhì)空間構(gòu)象的破壞6．核酸分子中各核苷酸單位之間的主要連接鍵是：(B)A．肽鍵B．磷酸二酯鍵C．二硫鍵D．糖苷鍵E．氫鍵8．人體細(xì)胞中蛋白質(zhì)合成的主要部位是：(A)A．核糖體B．核仁C．線粒體D．溶酶體9．某一酶促反應(yīng)的速度為最大反應(yīng)速度的80%時(shí)，Km等于(C)A．［S］B．1/2［S］C．1/4［S］D．0.4［S］E．0.8［S］10．有一混合蛋白質(zhì)溶液，各種蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)分別為4.6，5.0，5.3，6.7，7.3，電泳時(shí)欲使所有蛋白質(zhì)泳向正極，緩沖液的pH應(yīng)該是(A)A．8.0B．7.0C．6.03．蛋白質(zhì)三維結(jié)構(gòu)的構(gòu)象特征主要取決于（C）A.氫鍵、鹽鍵、范德華力和疏水力等構(gòu)象維系力B.肽鏈間及肽鏈內(nèi)的二硫鍵C.氨基酸的組成、順序和數(shù)目D.溫度、pH和離子強(qiáng)度等環(huán)境條件4.Sanger試劑是指（D）A．PITCB．對(duì)氯苯甲酸C．DNS-CID．DNFB5．酶的可逆競爭性抑制劑可以使（B）A.Vmax減小，Km減小B.Vmax不變，Km增大C.Vmax不變，Km減小D.Vmax減小，Km增大6.在pH6.0，用陽離子交換柱層析時(shí)，第一個(gè)被洗脫下來的氨基酸是（B）A.Val(pI=5.96)B．Asp(pI=2.77)C．Lys(pI=9.74)D．Arg(pI=10.76)7．在生理pH條件下，具有緩沖作用的氨基酸殘基是（B）A．TrpB.HisC．TyrD．Lys9．下列哪一種物質(zhì)最不可能通過線粒體內(nèi)膜？（A）A.NADHB.蘋果酸C.檸檬酸D.丙酮酸12.糜蛋白酶專一水解多肽鍵中（D）

A．Lys、Arg殘基N端B.Phe、Trp、Tyr殘基N端C．Lys、Arg殘基C端D.Phe、Trp、Tyr殘基C端13.鐮刀型紅細(xì)胞貧血癥的病因是由于正常的血紅蛋白分子中β鏈第六位的氨基酸被另一個(gè)氨基酸所置換.（C）

A.Val→GluB.Gln→ValC.Glu→ValD.Ala→Gln15.核酸變性后可發(fā)生哪些變化（BD）A．減色效應(yīng)B．增色效應(yīng)C．失去對(duì)紫外線的吸收能力D．溶液粘度降低16.下列氨基酸中，哪一種含氮量最高?（A）A.ArgB.HisC.LysD.Gly2．下列哪一種氨基酸[а]25D=0（B）A.ValB.GlyC.GluD.Leu3．天冬氨酸的pK1＝2.09，pK2＝3.86，pK3＝9.82，則其等電點(diǎn)為（C）A.6.84B.3.68C.2.97D.2.095．根據(jù)Watson-Crick模型，每一微米DNA雙螺旋核苷酸對(duì)的平均數(shù)為（A）A.2941B.2540C.29411D.254007．下列寡糖中，不具有還原性的是（C）A.乳糖B.纖維二糖C.蔗糖D.麥芽糖10．實(shí)驗(yàn)測得某酶的Km=1.1╳10-5mol/L，Vmax=5.0╳10-5（L·min），加入某種抑制劑后，Km為1.1╳10-5mol/L，Vmax變?yōu)?.5╳10-6mol/（L·min），那么該抑制作用屬于：（C）A不可逆抑制作用B競爭性抑制作用C非競爭性抑制作用D反競爭性抑制作用1.下列對(duì)氨基酸的敘述錯(cuò)誤的是（C）A.賴氨酸和精氨酸都是堿性氨基酸B.絲氨酸和酪氨酸均含羥基C.谷氨酸和天冬氨酸各含兩個(gè)氨基D.苯丙氨酸和酪氨酸均含苯環(huán)2.DNA變性涉及（C）A.分子中磷酸二酯鍵斷裂B.堿基一戊糖間的共價(jià)鍵斷裂C.配對(duì)堿基之間氫鍵斷裂D.上下相鄰堿基對(duì)之間靜電引力3.酶與一般催化劑的主要區(qū)別是（D）A.當(dāng)作用物濃度很低時(shí)，增加催化劑的濃度則酶促反應(yīng)速度升高B.在化學(xué)反應(yīng)前后，本身不發(fā)生變化C.

能加速化學(xué)反應(yīng)速度，不能改變平衡點(diǎn)D.專一性強(qiáng)，催化效率極高6．當(dāng)K2>K3時(shí)，Km=(k2+k3)/k1≈K2/K1=KS；此時(shí)，Km值可用來表示酶對(duì)底物的親和力。兩者之間的關(guān)系是（A）A.Km值增大，親和力減小B.Km值增大，親和力增大C.Km值減小，親和力減小D.Km值增大或減小，親和力均增大7．欲獲得不變性的蛋白質(zhì)制劑，可采用下述哪種分離方法：（D）A.生物堿試劑沉淀B.重金屬鹽沉淀C.加熱D.低溫鹽析8.某一符合米曼氏方程的酶，當(dāng)[S]=2Km時(shí)，其反應(yīng)速度V等于：A.VmaxB.2/3VmaxC.3/2VmaxD.2VmE.1/2Vmax10.已知兩種酶互為同工酶：（D）A.它們的Km的值一定相同B.它們的等電點(diǎn)相同

C.它們的分子結(jié)構(gòu)一定相同D.它們所催化的化學(xué)反應(yīng)相同13．為了打開蛋白質(zhì)分子中的二硫鍵，需要使用（C）A．甲酸B．尿素C．β-巰基乙醇D．FDNB6.在pH6.0，用陽離子交換柱層析時(shí)，第一個(gè)被洗脫下來的氨基酸是（B）A.Val(pI=5.96)B．Asp(pI=2.77)C．Lys(pI=9.74)D．Arg(pI=10.76)9．鐮刀型貧血癥患者，Hb中氨基酸的替換及位置是（D）A.α－鏈第六位Val換成GluB.β-鏈第六位Val換成GluC.α-鏈第六位Glu換成ValD.β-鏈第六位Glu換成Val3．維持蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的主要因素是（A）氫鍵、鹽鍵、范德華力和疏水力等構(gòu)象維系力肽鏈間及肽鏈內(nèi)的二硫鍵氨基酸的組成、順序和數(shù)目溫度、pH和離子強(qiáng)度等環(huán)境條件10．有一多肽經(jīng)酸水解后產(chǎn)生等摩爾的Lys、Gly和A1a，如用胰蛋白酶水解該肽，僅發(fā)現(xiàn)有游離的Gly和一種二肽。下列多肽的一級(jí)結(jié)構(gòu)中，哪一個(gè)符合該肽的結(jié)構(gòu)（B）A.Gly-Lys-Ala-Lys-Gly-AlaB.Ala-Lys-GlyC.Gly-Lys-AlaD.Ala-Gly-Lys5.核酸溶液的最大紫外吸收波長為(D)250nmB．270nmC．280nmD．260nm6.下列分離蛋白質(zhì)的方法中，哪種不是根據(jù)蛋白電荷不同性質(zhì)進(jìn)行分離(D)聚丙烯酰胺凝膠電泳B．離子交換層析C．電泳D．親和層析7.有一混合蛋白質(zhì)溶液，各種蛋白質(zhì)的pI分別為4.6、5.0、5.3、6.7,電泳時(shí)欲使各種蛋白質(zhì)都泳向正極，緩沖液的pH值應(yīng)該是(D)A．5.0B．4.0C．6.0D．8.組成直鏈淀粉的單糖通過哪種糖苷鍵連接(D)?-1,6B．?-1,4C．α-1,6D．α10.下列常見脂肪酸中，具有18C的單不飽和脂肪酸是(C)A．硬脂酸B．軟脂酸C．油酸D．亞麻酸11.將RNA轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上，進(jìn)行分子雜交的技術(shù)叫(B)Southern雜交法B．Northern雜交法C．Eastern雜交法D．Western雜交法12.下列哪一種輔酶可以作為氨基酸脫羧、消旋和轉(zhuǎn)氨反應(yīng)的輔酶(A)A．pLpB．FADC．TppD．NAD13．下列物質(zhì)中，不屬于抗氧化劑的是(D)A．超氧化物歧化酶B．過氧化氫酶C．維生素ED．卵磷脂14.下列關(guān)于酶活性部位的描述，哪一項(xiàng)是錯(cuò)誤的(A)A．不同肽鏈上的有關(guān)基團(tuán)不能構(gòu)成該酶的活性部位B．活性部位的基團(tuán)按功能可分為兩類：一類是結(jié)合基團(tuán)，一類是催化基團(tuán)C．酶活性部位的基團(tuán)可以是同一條肽鏈但在一級(jí)結(jié)構(gòu)上相距很遠(yuǎn)的基團(tuán)D．活性部位是酶分子中直接與底物結(jié)合，并發(fā)揮催化功能的部分15.下列物質(zhì)中，可以作為去污劑使用的是(C)A．AgaroseB．SODC.SDSD．PAGE16.酶的比活力是指(A)A．每毫克蛋白的酶活力單位數(shù)B．以某種酶的活力作為1來表示其他酶的相對(duì)活力C．任何純酶的活力與其粗酶的活力比D．一種酶與另一種酶的活力比17.下列氨基酸中，哪個(gè)含氮量最高(B)A．HisB．ArgC．LysD．Pro19.關(guān)于酶的下列三種專一性，A絕對(duì)專一性，B鍵專一性，C基團(tuán)專一性中，其專一性由弱到強(qiáng)的次序是(D)A．ACBB．CBAC．ABCD．BCA20.核酸中核苷酸之間的連接方式是(C)A．2’-3’磷酸二酯鍵B．C．3’-5’1.有一種血清蛋白(pI=4.9)和一血紅蛋白(pI=6.8)的混合物，欲采用電泳方法分離，選擇最好的pH值應(yīng)是：（C）A.8.6B.6.8C2．有一蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物在pH=6時(shí)，用陽離子交換樹脂進(jìn)行分離，首先通過層析柱下來的氨基酸是：（C）A.Val(pI=5.96)B.Lys(pI=9.74)C.Asp(pI=2.77)D.Arg(pI=10.76)3.關(guān)于大多數(shù)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的敘述中錯(cuò)誤的是：（D）A.分子中二硫鍵的生成對(duì)蛋白質(zhì)分子構(gòu)象的保持有關(guān)B.大多數(shù)帶電荷的氨基酸側(cè)鏈伸向蛋白質(zhì)分子表面C.一級(jí)結(jié)構(gòu)是決定高級(jí)結(jié)構(gòu)的重要因素D.只有極少數(shù)疏水氨基酸側(cè)鏈處于分子內(nèi)部4.下列關(guān)于DNATm值的敘述，其中正確的是：（B）A.只與DNA鏈的長短有關(guān)系B.與G-C堿基對(duì)的含量成正比C.與A-T堿基對(duì)的含量成正比D.與堿基對(duì)的成分無關(guān)5.下列敘述中符合tRNA結(jié)構(gòu)特征的是：（A）A.分子中含有較多的稀有堿基B.分子中有反密碼環(huán)和5′端的-C-C-A結(jié)構(gòu)C.各種tRNA的3′-末端堿基都不相同，所以結(jié)合不同的氨基酸D.分子中所有核苷酸的糖苷鍵類型均為α-糖苷鍵8．某種酶活性需要以－SH基為必需基團(tuán)，能保護(hù)些酶不被氧化的物質(zhì)（C）

A.胱氨酸B.兩價(jià)陽離子C.谷胱甘肽D.尿素10．下列關(guān)于DNA復(fù)制的敘述，其中錯(cuò)誤的是：（C）A.為半保留復(fù)制B.有以DNA指導(dǎo)的RNA聚合酶參加C.以四種dNMP為原料D.有以DNA指導(dǎo)的DNA聚合酶參加11.關(guān)于糖類化合物的敘述錯(cuò)誤的是：（D）A.纖維素是自然界存在最豐富的多糖B.甘油醛是最簡單的一種糖C.氨基糖常出現(xiàn)于動(dòng)物和細(xì)菌的結(jié)構(gòu)多糖中D.人腦中常儲(chǔ)存大量糖原作為能量來源三、填空1.維持蛋白質(zhì)膠體溶液穩(wěn)定的因素有雙電層和水化層。3.欲使酶反應(yīng)速度達(dá)到Vmax的80%，此時(shí)底物濃度應(yīng)是此酶Km值的_4倍。4.DNA指導(dǎo)下的RNA聚合酶的核心酶由4個(gè)亞基組成。5.蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)和三級(jí)結(jié)構(gòu)之間往往還存在超二級(jí)結(jié)構(gòu)和結(jié)構(gòu)域兩種組合體（結(jié)構(gòu)層次）。7.寫出下列簡寫形式中文名稱：FH4四氫葉酸、Tyr酪氨酸、cAMP環(huán)腺苷酸、GSH還原型谷胱甘肽TPP：焦磷酸硫胺素Cyt：細(xì)胞色素CIP3肌醇三磷酸（三磷酸肌醇）、NAD+(還原型)煙酰胺腺嘌呤二核苷酸、Lys賴氨酸、Try色氨酸、PCR聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)當(dāng)氨基酸溶液的pH>pI時(shí)，氨基酸以負(fù)（或陰）離子形式存在。賴氨酸帶三個(gè)可解離基團(tuán),它們pK分別為2.18,8.95,10.53,其等電點(diǎn)為9.74。通?？捎米贤夥止夤舛确y定蛋白質(zhì)的含量，這是因?yàn)榈鞍踪|(zhì)分子中的苯丙氨酸（Phe）、酪氨酸（Tyr）和色氨酸（Trp）三種氨基酸的共軛雙鍵有紫外吸收能力。如果一個(gè)酶對(duì)A、B、C三種底物的米氏常數(shù)分別為Kma、Kmb和Kmc，且Kma>Kmb>Kmc，則此酶的最適底物是C。HMP的限速酶是葡萄糖-6-磷酸脫氫酶；膽固醇合成的限速酶是HMG-CoA還原酶。在DNA指導(dǎo)下RNA的合成稱為轉(zhuǎn)錄，需要DNA指導(dǎo)下的RNA聚合酶(轉(zhuǎn)錄酶)酶的催化；以RNA為模板而按照RNA中的核苷酸順序合成DNA的過程稱逆轉(zhuǎn)錄，由RNA指導(dǎo)下的DNA聚合酶(逆轉(zhuǎn)錄酶)酶催化；以mRNA為模板的蛋白質(zhì)的合成稱為翻譯蛋白質(zhì)合成的部位是核糖體。蛋白質(zhì)之所以出現(xiàn)各種內(nèi)容豐富的構(gòu)象是因?yàn)開_Cα－N_鍵和_Cα－C_鍵能有不同程度的旋轉(zhuǎn)。通?？捎米贤夥止夤舛确y定蛋白質(zhì)的含量，這是因?yàn)榈鞍踪|(zhì)分子中的_苯丙氨酸_、__酪氨酸__和__色氨酸__三種氨基酸的共軛雙鍵有紫外吸收能力。當(dāng)氨基酸溶液的pH<pI時(shí)，氨基酸以正離子形式存在。某酶的初提取液（含有雜質(zhì)蛋白）的活力單位為3200U/ml，蛋白質(zhì)含量為20mg/ml，則比活力為160U/mg(160)。使酶促反應(yīng)速度達(dá)到最大速度70％,此時(shí)底物濃度是此酶Km值7/3(2.33)倍。蛋白酶是生物催化劑，相對(duì)一般化學(xué)催化劑，具有_高專一性__、_高催化效率_、__易失活_等特點(diǎn)。支鏈淀粉葡萄糖分子間除以α-1，4糖苷鍵相連外，還有以α-1，6糖苷鍵相連的分支3．在生理?xiàng)l件下，蛋白質(zhì)分子中賴氨酸、精氨酸氨基酸側(cè)鏈幾乎完全帶正電荷，而天門冬氨酸、谷氨酸氨基酸側(cè)鏈幾乎完全帶負(fù)電荷。6.組成谷胱甘肽的氨基酸有谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸。9．核苷酸生物合成的兩條途徑是從頭合成途徑和補(bǔ)救合成途徑。10．核酸變性或降解時(shí)，出現(xiàn)增色效應(yīng)。通常可用紫外分光光度法，波長280nm下測定蛋白質(zhì)的含量，其原理是蛋白質(zhì)分子中的苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸的共軛雙鍵有紫外吸收能力。酶是生物催化劑，其相對(duì)一般化學(xué)催化劑，具有變性失活、_高效率_、專一性_、_受多種因素控制和影響__等特點(diǎn)。α-螺旋是蛋白質(zhì)中最常見的一種二級(jí)結(jié)構(gòu)，也是構(gòu)成毛發(fā)的主要結(jié)構(gòu)成分。1.糖肽鍵的兩種常見類型是N－糖肽鍵和O－糖肽鍵。2．磷脂包括甘油磷脂和鞘磷脂兩種。3．可以使生物膜在液晶態(tài)和凝膠態(tài)進(jìn)行轉(zhuǎn)變的物質(zhì)是膽固醇。4．大多數(shù)蛋白質(zhì)在280nm附近顯示強(qiáng)的吸收，因此可以利用紫外吸收法測定蛋白質(zhì)濃度。5．氨基酸在等電點(diǎn)時(shí)，主要以兼性（兩性）離子形式存在，在pH>pI的溶液中，大部分以陰離子形式存在。6．酪氨酸的三字符英文為Tyr。7．激素和受體復(fù)合物通過G蛋白活化腺苷酸環(huán)化酶，催化ATP生成cAMP后經(jīng)級(jí)聯(lián)放大作用產(chǎn)生相應(yīng)的生理效應(yīng)。8．超二級(jí)結(jié)構(gòu)指蛋白質(zhì)中相鄰的二級(jí)單元組合在一起，彼此相互作用，形成有規(guī)則的、在空間上能辨認(rèn)的二級(jí)結(jié)構(gòu)組合體。其常見的3種基本組合形式有αα、ββ、βαβ。9．能催化同一種化學(xué)反應(yīng)，但其酶蛋白本身的分子組成、結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)和免疫性能等方面都存在明顯差異的一組酶叫做同工酶。10．結(jié)合酶由酶蛋白與輔因子共同構(gòu)成。其中，酶蛋白決定酶促反應(yīng)的專一性，而輔因子決定酶促反應(yīng)的反應(yīng)類型。11．在生物體內(nèi)可以作為脫氫酶的輔酶存在的兩種B族維生素是VB2和VB5。12．氰鈷胺素是維生素B12。13．PCR是核酸的體外擴(kuò)增技術(shù)，其循環(huán)程序過程包括變性、復(fù)性（退火）和延伸三個(gè)步驟。14．真核生物mRNA5’末端具有帽子結(jié)構(gòu)，315．被喻為基因工程的“分子剪刀”的核酸酶是限制性內(nèi)切酶。16．目前比較好的解釋氧化磷酸化作用機(jī)制的假說是化學(xué)滲透假說。3.根據(jù)酶活性調(diào)節(jié)方式的不同調(diào)節(jié)酶可分為兩大類別構(gòu)酶共價(jià)修飾酶四、判斷題大腸桿菌的核糖體是70S，它由50S和30S兩種亞基構(gòu)成。（T）(A＋T)百分含量越高，DNA的Tm值也就越高。（F）真核細(xì)胞中DNA只存在于細(xì)胞核中。（F）紫外線照射可引起DNA兩條互補(bǔ)鏈上的T之間形成二聚體。（F）加入非競爭性抑制劑后，Km值變大，Vmax變小了。（F）人體可以合成各種類型的飽和脂肪酸和不飽和脂肪酸。（F）DNA聚合酶I具有3'5'聚合酶活性。（F）腎上腺素不是通過“第二信使學(xué)說”機(jī)制發(fā)揮調(diào)節(jié)血糖濃度的作用。（F）1.真核細(xì)胞中DNA只存在于細(xì)胞核中。（F）2．蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)可以定義為由兩個(gè)或兩個(gè)以上的亞基通過共價(jià)鍵形成的大分子體系。（T）3．生物體中酶的化學(xué)本質(zhì)均是蛋白質(zhì)。（F）4．稀有堿基主要存在于mRNA中。（F）5．當(dāng)某一氨基酸晶體溶于pH7.0的水中后，所得溶液的pH為8.0，則此氨基酸的pI必大于8.0。（F）6．加入非競爭性抑制劑后，Km值變大，Vmax變小了。（F）7．所有單糖和寡糖都是還原糖。（F）8．(A＋T)百分含量越高，DNA的Tm值也就越高。（F）9．細(xì)胞膜的內(nèi)在蛋白通常比外周蛋白疏水性強(qiáng)。（T）10．Sanger試劑是指DNFB。（T）稀有堿基主要存在于mRNA分子中。（×）人類嘌呤核苷酸分解代謝終產(chǎn)物是尿酸。（√）氨基酸、蛋白質(zhì)、核苷酸和核酸都是兩性電解質(zhì)。（√）2，4-二硝基苯酚是氧化磷酸化的解偶聯(lián)劑。（√）有一小肽，用測N末端的方法未出現(xiàn)游離的α-NH2，則此肽必為環(huán)肽（×）葉酸、泛酸和煙酸都是維生素。（√）組成蛋白質(zhì)的氨基酸都具有一個(gè)不對(duì)稱α-碳原子。（F）乳糖是由1分子葡萄糖和1分子果糖組成。（F）維生素B2稱為核黃素，其輔酶形式是FAD和FMA。（F）氨基酸、蛋白質(zhì)、核苷酸和核酸都是兩性電解質(zhì)。（T）變性的蛋白質(zhì)不一定沉淀，沉淀的蛋白質(zhì)不一定變性。(T)在DNA的右手雙螺旋結(jié)構(gòu)中，兩條多核苷酸鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械摹?T)維生素A、維生素C和維生素E都是脂溶性維生素。(F)加入非競爭性抑制劑后，Km值變大，Vmax變小了。(F)2.當(dāng)糖原完全降解時(shí)只產(chǎn)生葡萄糖－1－磷酸，而不產(chǎn)游離的葡萄糖。（×）3.葉酸是轉(zhuǎn)移一碳單位酶系的輔酶。（×）5.氫鍵是維持蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的作用力。（√）6.2，4-二硝基苯酚是氧化磷酸化的解偶聯(lián)劑。（√）7.核酸變性或降解時(shí)，出現(xiàn)減色效應(yīng)。（×）9.嘌呤核苷酸的生物合成過程中，最先合成的是次黃嘌呤核苷酸。（√）人類嘌呤堿分解代謝終產(chǎn)物是尿酸。（√）核酸變性或降解時(shí)，出現(xiàn)增色效應(yīng)。（√）酶活性的變構(gòu)調(diào)節(jié)均使酶的活性降低。（×）蛋白質(zhì)分子有幾條多肽鏈就有幾個(gè)亞基。（×）維生素B2稱為核黃素，其輔酶形式是FAD和FMA。(F)氨基酸、蛋白質(zhì)、核苷酸和核酸都是兩性電解質(zhì)。(T)Sanger反應(yīng)和Edman反應(yīng)都可用來鑒定蛋白質(zhì)或多肽的C端氨基酸。(F)加入非競爭性抑制劑后，Km值變大，Vmax變小了。(F)過去用桐油來保護(hù)木制家具是利用了脂肪酸的酸敗性質(zhì)。（T）氨基酸、蛋白質(zhì)、核苷酸和核酸都是兩性電解質(zhì)。(T)在DNA的右手雙螺旋結(jié)構(gòu)中，兩條多核苷酸鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械摹?T)如果來自物種A的DNA其Tm值比物種B的Tm值高，則物種A所含的A－T堿基對(duì)的比例比物種B的低。(T)1.DL型構(gòu)型命名系統(tǒng)中，醛糖的構(gòu)型指分子中離羰基碳最遠(yuǎn)的那個(gè)手性碳原子構(gòu)型。如果在投影式上此碳原子的羥基具有和D-甘油醛的C2羥基相同取向，就是L-型糖(F)2．三酰甘油和蠟是常見的復(fù)合脂質(zhì)。(F)3．神經(jīng)酰胺是由脂肪酸和鞘胺醇兩部分組成的。(T)4．血紅蛋白的氧合曲線是雙曲線，肌紅蛋白的氧合曲線是S型。(F)5．1/Km愈大，表明酶與底物的親和力越小。(F)6．蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)決定于它的氨基酸順序。(T)7．酶的激活與酶原的激活是完全不同的兩個(gè)過程。(T)8．維生素A是一種常見的水溶性維生素，缺乏會(huì)導(dǎo)致夜盲癥。(F)9．原核生物mRNA是單順反子結(jié)構(gòu)(F)10．生物體內(nèi)的DNA都是以右手螺旋的形式存在的。(F)1.不同來源的DNA鏈在一定條件下能進(jìn)行雜交的分子基礎(chǔ)是兩條鏈有著相同的堿基排列順序。（×）3．縮短磷脂分子中脂肪酸的碳?xì)滏?，可增加膜的流?dòng)性。（√）4．凡具有相同氨基酸組成的蛋白質(zhì)一定具有相同的構(gòu)象。（×）5．變性蛋白質(zhì)通常由于溶解度降低而產(chǎn)生沉淀，因此凡使蛋白質(zhì)產(chǎn)生沉淀的因素都可使蛋白質(zhì)發(fā)生變性作用。（×）6．兩類核酸中對(duì)堿穩(wěn)定的是DNA，易被堿水解的是RNA。（√）7．所有的酶類中都需要特定的輔酶(或輔基)才具有催化活性。（×）8．同工酶對(duì)同一底物有不同的Km值。（√）9．具有對(duì)底物分子起催化功能的不都是蛋白質(zhì)。（√）10．酶的抑制劑通常是小分子有機(jī)物及各類離子，通常采用透析的方法可除去酶的各類抑制劑以恢復(fù)酶的活性。（×）五、簡答題（16分）1.DNA復(fù)制所需要的酶和蛋白因子有哪些？DNA復(fù)制有何特點(diǎn)？（4分）要點(diǎn)（1）DNA聚合酶、引物酶或RNA聚合酶（引發(fā)酶）、解螺旋酶、DNA旋轉(zhuǎn)酶、單鏈DNA結(jié)合蛋白、DNA連接酶（ligase）（2分）（2）半保留復(fù)制、半不連續(xù)復(fù)制和高保真性（2分）2.酶活性受哪些因素調(diào)節(jié)？答：別構(gòu)調(diào)節(jié)、可逆的共價(jià)修飾、酶原激活（3分）反饋抑制、抑制劑與激活劑的調(diào)節(jié)同工酶形式的調(diào)節(jié)（1分）激素及特異調(diào)控蛋白的調(diào)節(jié)（1分）3.什么是蛋白質(zhì)的一、二、三、四級(jí)結(jié)構(gòu)？答：蛋白質(zhì)分子的一級(jí)結(jié)構(gòu)指構(gòu)成蛋白質(zhì)分子的氨基酸在多肽鏈中的排列順序和連接方式。蛋白質(zhì)分子的二級(jí)結(jié)構(gòu)是指蛋白質(zhì)多肽鏈主鏈原子的局部空間排列。多肽鏈在二級(jí)結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上進(jìn)一步卷曲折疊，形成具有一定規(guī)律性的三維空間結(jié)構(gòu)，即為蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)。由兩條或兩條以上獨(dú)立存在并具有三級(jí)結(jié)構(gòu)的多肽鏈借次級(jí)鍵締合而成的空間結(jié)構(gòu)，稱為蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)。4．簡述直鏈和支鏈的特點(diǎn)及如何區(qū)分直鏈和支鏈淀粉？答：直鏈淀粉由α－D－葡萄糖分子通過1－4糖苷鍵連接而成，相對(duì)分子量約為3.2×104～1.6×105，易溶于水。每個(gè)直鏈分子是一條線性的無分支的鏈狀結(jié)構(gòu)，平均每6個(gè)葡萄糖單位構(gòu)成一個(gè)螺旋圈，含有一個(gè)還原端和一個(gè)非還原端（2分）。支鏈淀粉是一種帶分支的多糖，葡萄糖殘基以α（1－4）糖苷鍵連接，在結(jié)合11～12個(gè)葡萄糖殘基后即產(chǎn)生一個(gè)分支，支鏈與主鏈之間以α（1－6）糖苷鍵連接，不溶于水。支鏈內(nèi)葡萄糖殘基以α（1－4）糖苷鍵連接，含一個(gè)還原端和n+1個(gè)非還原端。區(qū)分：可利用淀粉與碘的顏色反應(yīng)來區(qū)分，直鏈淀粉遇碘產(chǎn)生藍(lán)色，支鏈淀粉遇碘產(chǎn)生紅色。5．簡述生物膜的主要成分有哪些？答：所有的生物膜都是由蛋白質(zhì)和脂質(zhì)組成。根據(jù)膜蛋白分離的難易程度及其與脂質(zhì)結(jié)合的牢固程度，膜蛋白分為外周蛋白和內(nèi)在蛋白。組成膜的脂質(zhì)主要是磷脂、糖脂及膽固醇。6．什么是酶作用的特異性?酶的特異性可分為幾種?答：酶作用的特異性指酶對(duì)其作用的底物有比較嚴(yán)格的選擇性，這種現(xiàn)象稱為酶作用的特異性。酶的特異性分三種類型。①絕對(duì)特異性，酶只能催化一種底物，進(jìn)行一種反應(yīng)并生成一定的產(chǎn)物。②相對(duì)特異性，酶對(duì)同一類化合物或同一種化學(xué)鍵都具有催化作用。③立體異構(gòu)特異性，有的酶對(duì)底物的立體構(gòu)型有特異的要求，只選擇地作用于其中一種立體異構(gòu)體。7．何謂蛋白質(zhì)的變性作用?有何實(shí)用意義？答：蛋白質(zhì)的變性作用是指蛋白質(zhì)在某些理化因素的作用下，其空間結(jié)構(gòu)發(fā)生改變(不改變其一級(jí)結(jié)構(gòu))，因而失去天然蛋白質(zhì)的特性，這種現(xiàn)象稱為蛋白質(zhì)的變性作用。實(shí)用意義：利用變性原理，如用酒精，加熱和紫外線消毒滅菌，用熱凝固法檢查尿蛋白等；防止蛋白質(zhì)變性，如制備或保存酶、疫苗、免疫血清等蛋白質(zhì)制劑時(shí)，應(yīng)選擇適當(dāng)條件，防止其變性失活。8.酶作為一種特殊的催化劑，具有的催化特性：（1）與普通催化劑一樣，能催化動(dòng)力學(xué)上可進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)，改變反應(yīng)速度，但反應(yīng)前后其質(zhì)量和性質(zhì)不發(fā)生變化；（2）具有高效性，比普通的催化劑催化效率更高（106～1013）；（3）具專一性，只對(duì)一類和一種底物起催化作用；（4）條件溫和性，在常溫常壓、中性條件下催化反應(yīng)進(jìn)行；（5）可調(diào)控性，其催化效率受到體內(nèi)激素、調(diào)節(jié)因子等的調(diào)節(jié)控制。9.簡述蛋白酶分離純化的基本步驟及在此過程中應(yīng)注意的問題？答：酶的分離純化一般包括三個(gè)基本步驟：即抽提、純化、結(jié)晶或制劑。首先將所需的酶從原料中引入溶液，此時(shí)不可避免地夾帶著一些雜質(zhì)，然后再將此酶從溶液中選擇性地分離出來，或者從此溶液中選擇性地除去雜質(zhì)，嘴后制成純化的酶制劑。在此過程中應(yīng)注意的問題：首先對(duì)待純化的酶的理化性質(zhì)有比較全面的了解；以酶活力和比活力為標(biāo)準(zhǔn)，判斷所選擇的方法是否得當(dāng)；嚴(yán)格控制操作條件，防止酶的變性失活。10.簡述蛋白質(zhì)的變性作用？變性蛋白質(zhì)有何特點(diǎn)？白質(zhì)變性后哪些性質(zhì)會(huì)發(fā)生改變？有何實(shí)際應(yīng)用？答案：（1）蛋白質(zhì)的變性作用蛋白質(zhì)分子在變性因素的作用下，分子的特定空間結(jié)構(gòu)被破壞，失去生物活性的現(xiàn)象稱為蛋白質(zhì)的變性作用。（2）變性蛋白質(zhì)的特點(diǎn)變性后的蛋白溶解度降低，不對(duì)稱程度增加，粘度增加、失去生物活性，易被蛋白酶水解等(3)白質(zhì)變性后會(huì)發(fā)生以下幾方面的變化：生物活性喪失；理化性質(zhì)的改變；生物化學(xué)性質(zhì)的改變，分子結(jié)構(gòu)伸展松散，易被蛋白酶分解。(4)利用變性可用于消毒、滅菌、防蟲等，但制備活性蛋白質(zhì)時(shí)嚴(yán)防蛋白質(zhì)變性。11.簡述由關(guān)鍵酶催化的生化反應(yīng)特點(diǎn)？答案：它催化的反應(yīng)速度最慢，其活性決定整個(gè)代謝途徑的總速度。這類酶催化單向反應(yīng)，它的活性決定整個(gè)代謝途徑的方向。這類酶活性除受底物控制外，還受多種代謝物或效應(yīng)劑的調(diào)節(jié)。12．維持蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)的作用力有哪些？（5分）答案：氫鍵、二硫鍵、離子鍵、疏水作用力等。13.輔酶或輔基的功能？舉出3例參與代謝的重要輔酶及功能？答案：（1）輔酶是一類具有特殊化合物結(jié)構(gòu)和功能的化合物，參與的酶促反應(yīng)主要為氧化還原反應(yīng)或基團(tuán)轉(zhuǎn)移反應(yīng)。（2分）（2）3例參與代謝的重要輔酶及功能①NAD+(煙酰胺-腺嘌呤二核苷酸，又稱為輔酶I)，是多種重要脫氫酶的輔酶，起遞氫的作用。②磷酸吡哆醛和磷酸吡哆胺是氨基酸轉(zhuǎn)氨作用、脫羧和消旋作用的輔酶。③四氫葉酸的主要作用是作為一碳基團(tuán)，如-CH3,-CH2-,-CHO等的載體，參與多種生物合成過程14．請(qǐng)列舉影響酶促反應(yīng)速率的各種因素并做簡要說明。（1）底物濃度對(duì)酶反應(yīng)速率的影響：當(dāng)反應(yīng)的其他條件都恒定的話，酶促反應(yīng)速率將隨著底物濃度的變化而變化。在低底物濃度時(shí),反應(yīng)速度與底物濃度成正比，表現(xiàn)為一級(jí)反應(yīng)。隨著底物濃度的增加，反應(yīng)速率不再按照正比升高，反應(yīng)表現(xiàn)為混合級(jí)反應(yīng)。當(dāng)?shù)孜餄舛鹊竭_(dá)相當(dāng)高的時(shí)候，底物濃度對(duì)反應(yīng)速率影響變小，最后反應(yīng)速率與底物濃度幾乎無關(guān)，反應(yīng)達(dá)到最大速率，表現(xiàn)為0級(jí)反應(yīng)（2）酶的抑制作用，各種抑制劑會(huì)對(duì)酶的活力產(chǎn)生影響，從而影響酶促反應(yīng)速率1分（3）溫度對(duì)酶反應(yīng)速度的影響：任何酶都有自己的最適反應(yīng)溫度，在最適溫度的時(shí)候，酶的活力最大，相應(yīng)的酶促反應(yīng)速率就越大。（4）pH對(duì)酶反應(yīng)的影響：（與溫度的類似）（5）此外，很多離子，小分子有機(jī)物等物質(zhì)都可以作為激活劑對(duì)酶反應(yīng)速率產(chǎn)生影響。15．試命名下列氨基酸(1)用強(qiáng)酸強(qiáng)堿處理能轉(zhuǎn)變成存在于蛋白質(zhì)中的另外一種氨基酸。(2)空氣中即可氧化為存在于蛋白質(zhì)中的另外一種氨基酸。(3)能在279nm強(qiáng)烈吸收紫外光，易被強(qiáng)酸破壞。(4)在Ph6-8范圍內(nèi)有緩沖能力。(5)與茚三酮反應(yīng)生成一種黃色產(chǎn)物。(6)水溶液無旋光性。答案：(1)谷氨酰胺或者天冬酰胺。其脫去酰胺基后轉(zhuǎn)變成谷氨酸或者天冬氨酸(2)半胱氨酸。其-SH具有還原性，兩分子半胱氨酸易氧化成胱氨酸(3)色氨酸(4)組氨酸，咪唑基的PK是6.0(5)脯氨酸。與其他氨基酸不同，其氨基與R基成吡咯環(huán)，是A亞氨基酸，與茚三酮反應(yīng)不產(chǎn)生藍(lán)紫色產(chǎn)物，而是一種黃色產(chǎn)物。(6)甘氨酸。是最小的氨基酸，不含有手性碳原子，是20種氨基酸中為一的沒有旋光性的分子。16．試述腎上腺皮質(zhì)激素的作用機(jī)制。激素穿過細(xì)胞質(zhì)膜與細(xì)胞質(zhì)中的受體結(jié)合，進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)加大轉(zhuǎn)錄的速度產(chǎn)生特殊的蛋白質(zhì)。這個(gè)過程進(jìn)行得比較慢，固醇類激素及少量含氮激素以此方式17.請(qǐng)簡述tRNA二級(jí)結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)。tRNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)共同特征：三葉草型結(jié)構(gòu)（一臂四環(huán)或者說四臂四環(huán)均可）1分五部分：氨基酸接受臂：接受活化氨基酸二氫尿嘧啶環(huán)：與氨甲酰tRNA合成酶的結(jié)合有關(guān)反密碼環(huán)：反密碼子可以識(shí)別信使RNA中的密碼子額外環(huán)：是分類的指標(biāo)TψC環(huán)：與核糖體的結(jié)合有關(guān)18.一個(gè)九肽具有下面的氨基酸順序：Glu-Ala-Phe-Gly-Ser-Val-Arg-Pro-Gly請(qǐng)回答：（6分）①該肽用胰凝乳蛋白酶降解可產(chǎn)生幾個(gè)片段，用胰蛋白酶處理能產(chǎn)生兩個(gè)片嗎？為什么？（3分）②假設(shè)該肽是某多肽鏈中的一小段，就這段肽鏈而言，它能形成α－螺旋嗎？為什么？（3分）答案：①可產(chǎn)生兩個(gè)片段。因胰凝乳蛋白酶專一性切斷Phe-Gly羧基形成的肽鍵，且右側(cè)不是Pro。②不能。因α－螺旋每周需3.6個(gè)氨基酸殘基形成。遇Pro和Gly不能形成。六、分析問答題（24分,1,4任選1題做）1.如何確定一種酶的抑制劑是競爭性可逆抑制劑還是非競爭性可逆抑制劑？（10分）答：(1)配制兩組不同濃度底物，分別加入相同的酶濃度，一組加A，另一組加B。(2)采用一定的實(shí)驗(yàn)方法測出單位時(shí)間內(nèi)產(chǎn)物的生成量，可通過制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。(3)取單位時(shí)間內(nèi)產(chǎn)物生成量的倒數(shù)即1/v為縱坐標(biāo)，以對(duì)應(yīng)的底物濃度的倒數(shù)即1/[S]為橫坐標(biāo)作雙倒數(shù)圖(或v-v/[s]作圖)，求出Km值。(4)若Km值變大，則為競爭性抑制劑。若Km不變則為非競爭性抑制劑。2.有一個(gè)七肽，經(jīng)分析它的氨基酸組成是：Lys,Pro,Arg,Phe,Ala,Tyr,和Ser。此肽未經(jīng)糜蛋白酶處理時(shí)，與FDNB反應(yīng)不產(chǎn)生α－DNP－氨基酸。經(jīng)糜蛋白酶作用后，此肽斷裂成兩個(gè)肽段，其氨基酸組成分別為Ala,Tyr,Ser和Pro,Phe,Lys,Arg。這兩個(gè)肽段分別與FDNB反應(yīng)，可分別產(chǎn)生DNP－Ser和DNP－Lys。此肽與胰蛋白酶反應(yīng)，同樣能生成兩個(gè)肽段，它們的氨基酸組成分別是Arg,Pro和Phe,Tyr,Lys,Ser,Ala。試問此七肽的一級(jí)結(jié)構(gòu)是怎樣的？答：1）與FDNB作用不產(chǎn)生a-氨基酸：說明此肽鏈可能為一環(huán)肽或N末端為Pro。糜蛋白酶水解Phe、Trp和Tyr疏水殘基a-羧基形成的肽鍵，由已知條件可知，兩個(gè)肽段構(gòu)成分別為：Ser-Ala-Tyr和Lys-(Pro,Ary)-Phe胰蛋白酶水解Ary、Lys殘基a-羧基形成的肽鍵，由已知條件可知，兩個(gè)肽段構(gòu)成分別為：Pro-Ary和Phe-Ser-Ala-Tyr-Lys（3分）所以，此多肽為環(huán)肽，順序是：-Phe-Ser-Ala-Tyr-Lys-Pro-Ary-（2分）在一抽提液中含有三種蛋白質(zhì)，其性質(zhì)如下：蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量等電點(diǎn)A300009.5B460007.9C80004.5試設(shè)計(jì)兩個(gè)方案來分離純化這三種蛋白質(zhì)。并說明實(shí)驗(yàn)原理。若你想得到一種有活性的酶，在提純過程中應(yīng)注意哪些事項(xiàng)？答：方案一：利用凝膠過濾層析法，依照蛋白質(zhì)分子大小不同，三種物質(zhì)分離順序?yàn)椋築,A,C原理：固定相是多孔凝膠，各組份的分子大小不同，因而在凝膠上受阻滯的程度不同；也就是蛋白質(zhì)的大小不一，凝膠上有大小不一的孔；大的蛋白質(zhì)在凝膠中不進(jìn)入孔內(nèi)直接下來，速度最快，中等大小的進(jìn)入大孔中，下來速度較慢；小的蛋白質(zhì)則進(jìn)入大小孔中，下來速度最慢。方案二：利用等電點(diǎn)沉淀法，根據(jù)蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)差異，逐漸提高溶液的pH各蛋白質(zhì)分離順序?yàn)椋篊,B,A原理：蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)時(shí)溶解度最小。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)混合液的pH值被調(diào)到其中某一種成分的pI時(shí)，該種成分蛋白質(zhì)將會(huì)沉淀下來，這種沉淀出來的蛋白質(zhì)保持著天然構(gòu)象(活性)能再溶解。高于或低于該pI的蛋白質(zhì)留在溶液。因此可根據(jù)蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)差異，逐漸改變?nèi)芤旱膒H，將等電點(diǎn)差異的各蛋白質(zhì)沉淀分離。（5分）酶提取時(shí)的注意事項(xiàng)（3分）：提取、分離方法條件要溫和：控制T、pH值、時(shí)間等，使目的蛋白質(zhì)和酶的活性和功能不受損害，即防止蛋白質(zhì)的不可逆變性。分離純化一般在溶液(緩沖溶液中)進(jìn)行，可加入使蛋白質(zhì)構(gòu)象穩(wěn)定和酶活性的還原劑等。1.影響酶促反應(yīng)速度的因素有哪些？并加以簡單解釋。(15分)答：①底物濃度：當(dāng)?shù)孜餄舛容^低時(shí)，反應(yīng)速率與底物濃度呈正比，隨著底物濃度增加，反應(yīng)速率不再按正比增加，當(dāng)?shù)孜餄舛认喈?dāng)高時(shí)，反應(yīng)速率達(dá)最高值。②酶濃度，當(dāng)?shù)孜餄舛茸銐虼螅渌鼦l件適合時(shí)，反應(yīng)速率隨酶濃度增加而增大。③溫度：表現(xiàn)在兩個(gè)方面，一是隨溫度增加，反應(yīng)速率加大，另一方面由于酶是蛋白質(zhì)，隨溫度升高，使酶蛋白逐漸失活，引起酶促反應(yīng)速率下降。酶所表現(xiàn)的最適溫度是兩種影響的綜合結(jié)果。④pH值：達(dá)最適pH之前，隨著pH增加，反應(yīng)速率增大，而后隨pH增加，反應(yīng)速率下降。⑤激活劑：激活劑對(duì)酶的作用有一定的選擇性，即一種激活劑對(duì)某種酶起激活作用，而對(duì)另一種酶可能起抑制作用。⑥抑制劑：分不可逆抑制和可逆抑制兩種。可逆抑制：又分為競爭性抑制、非競爭性抑制、和反競爭性抑制，競爭性抑制Vmax不變，Km變大，非競爭性抑制Km不變，Vmax變小，反競爭性抑制Km和Vmax都變小。3．水解肽A時(shí)發(fā)現(xiàn)其含有等量的Arg，Val，Tyr，Glu，Lys，Ala和Gly七種氨基酸(1)

肽A用DNFB法分析，產(chǎn)生出DNP-Ala；(2)

肽A用羧肽酶短時(shí)間處理，產(chǎn)生游離的Glu是第一個(gè)可鑒定的氨基酸；(3)用胰蛋白酶水解肽A時(shí)，得到如下物質(zhì)：Arg，Ala-Lys和含有Glu，Gly，Tyr，Val的肽B；(4)用胰凝乳蛋白酶水解肽B，產(chǎn)生兩個(gè)二肽：Val-Tyr和Gly-Glu，問該肽A的氨基酸排列順序是怎樣的?答：a）與DNFB作用產(chǎn)生DNP-Ala：說明此肽鏈N末端為Ala。用羧肽酶短時(shí)間處理，產(chǎn)生游離的Glu是第一個(gè)可鑒定的氨基酸：說明此肽鏈C末端為Glu。胰蛋白酶處理得到如下物質(zhì)：Arg，Ala-Lys和含有Glu，Gly，Tyr，Val的肽B：胰蛋白酶水解位點(diǎn)是Lys和Arg羧基端的肽鍵，由此可知其中的一個(gè)Ala-Lys-Arg，另一個(gè)為肽B，含有Glu，Gly，Tyr，Val。胰凝乳蛋白酶水解位點(diǎn)為芳香族氨基酸，在Glu，Gly，Tyr，Val中，Tyr為芳香族氨基酸，由已知條件可知，肽B為Val-Tyr-Gly-Glu。所以，此多肽順序是：-Ala-Lys-Arg-Val-Tyr-Gly-Glu-一個(gè)七肽，經(jīng)分析它的氨基酸組成是：Lys,Pro,Arg,Phe,Ala,Tyr,和Ser。此肽未經(jīng)糜蛋白酶處理，與FDNB反應(yīng)不產(chǎn)生α－DNP－氨基酸。經(jīng)糜蛋白酶作用后，此肽斷裂成兩個(gè)肽段，其氨基酸組成分別為Ala,Tyr,Ser和Pro,Phe,Lys,Arg。這兩個(gè)肽段分別與FDNB反應(yīng)，可分別產(chǎn)生DNP－Ser和DNP－Lys。此肽與胰蛋白酶反應(yīng)，同樣能生成兩個(gè)肽段，它們的氨基酸組成分別是Arg,Pro和Phe,Tyr,Lys,Ser,Ala。試問此七肽一級(jí)結(jié)構(gòu)是怎樣的？答：1）與FDNB作用不產(chǎn)生a-氨基酸：說明此肽鏈可能為一環(huán)肽或N末端為Pro。（2分）糜蛋白酶水解Phe、Trp和Tyr疏水殘基a-羧基形成的肽鍵，由已知條件可知，兩個(gè)肽段構(gòu)成分別為：Ser-Ala-Tyr和Lys-(Pro,Ary)-Phe胰蛋白酶水解Ary、Lys殘基a-羧基形成的肽鍵，由已知條件可知，兩個(gè)肽段構(gòu)成分別為：Pro-Ary和Phe-Ser-Ala-Tyr-Lys所以，此多肽為環(huán)肽，順序是：-Phe-Ser-Ala-Tyr-Lys-Pro-Ary-3.有一肽段，經(jīng)酸水解測定知由4個(gè)氨基酸組成。用胰蛋白酶水解成為兩個(gè)片段，其中一個(gè)在280nm處有強(qiáng)的光吸收，并且對(duì)Pauly反應(yīng)、坂口反應(yīng)都呈陽性；另一個(gè)片段用CNBr處理后釋放出一個(gè)氨基酸與茚三酮反應(yīng)呈黃色，試推導(dǎo)出該肽段的氨基酸排列順序。（10分）推導(dǎo)：胰蛋白酶水解為2個(gè)片斷，可知其第2個(gè)氨基酸為堿性氨基酸，結(jié)合坂口反應(yīng)可知為Arg；與之結(jié)合的第1個(gè)氨基酸在280nm處有強(qiáng)的光吸收，說明其為芳香族氨基酸，結(jié)合Pauly反應(yīng)可知其為Tyr；CNBr可專一降解Met，為第3個(gè)氨基酸；茚三酮反應(yīng)呈黃色的為Pro。故該肽段為：Tyr-Arg-Met-Pro。簡述蛋白酶分離純化的基本步驟及在此過程中應(yīng)注意的問題？答：酶的分離純化一般包括三個(gè)基本步驟：即抽提、純化、結(jié)晶或制劑（2分）。首先將所需的酶從原料中引入溶液，此時(shí)不可避免地夾帶著一些雜質(zhì)，然后再將此酶從溶液中選擇性地分離出來，或者從此溶液中選擇性地除去雜質(zhì)，然后制成純化的酶制劑。2.在此過程中應(yīng)注意的問題：首先對(duì)待純化的酶的理化性質(zhì)有比較全面的了解；以酶活力和比活力為標(biāo)準(zhǔn)，判斷所選擇的方法是否得當(dāng)；嚴(yán)格控制操作條件