第三節(jié)—骨髓細胞學(xué)檢查

內(nèi)容

Contents1.骨髓細胞學(xué)檢查（骨髓分析）2.常用血細胞的細胞化學(xué)染色3.常見血液病的血液學(xué)特征2編輯pptLogo主要內(nèi)容

骨髓細胞學(xué)檢查：

骨髓細胞學(xué)檢查的臨床意義

骨髓和外周血細胞化學(xué)染色

常見血液病的血液學(xué)特征：

缺鐵性貧血1、貧血

巨幼細胞性貧血

溶血性貧血

再生障礙性貧血3編輯pptLogo主要內(nèi)容常見血液病的血液學(xué)特征：2、白血?。汗撬杓毎螒B(tài)學(xué)分型〔FAB分型〕MMICM分型免疫表型分析〔免疫學(xué)〕I染色體分析〔細胞遺傳學(xué)〕C基因診斷〔分子生物學(xué))M3、原發(fā)性血小板減少性紫癜〔ITP〕4、骨髓瘤〔MM〕

4編輯pptLogo

病例：

患者：男性，41歲，左上腹不適，乏力，消瘦3

月余而入院體檢：T37.3C，R21次/分，P68次/分，Bp14/8kPa

肝肋下1cm,脾肋下3cm；

下一步做什么檢查？5編輯pptLogo病例

實驗室檢查：1、血液常規(guī)檢驗

Hb：150g/LWBC：250×109/L

PLT：559×109/L

分類：

原始粒細胞1%

早幼粒細胞

4%

中、晚幼粒細胞41%

嗜酸性粒細胞8%

嗜堿性粒細胞6%

問題在哪里？

6編輯pptLogo實驗診斷學(xué)laboratory7編輯pptLogo8編輯pptLogo實驗診斷學(xué)laboratory9編輯pptLogo實驗診斷學(xué)laboratory10編輯pptLogo病例2、骨髓細胞檢查

骨髓極度增生以粒細胞增生為主外周血分類：原始粒細胞2%1%早幼粒細胞4%4%

中晚幼粒細胞46%41%

紅細胞系統(tǒng)6%

中晚幼紅為主

形態(tài)正常11編輯pptLogo病例細胞化學(xué)染色：中性粒細胞堿性磷酸酶〔ALP〕陰性細胞遺傳學(xué)檢驗：Ph染色體陽性分子生物學(xué)〔基因〕檢查：BCR/ABL112編輯pptLogo如何分析？如何診斷？原始及幼稚細胞病例分析13編輯pptLogo最后的診斷慢性粒細胞性白血病〔急性期〕14編輯pptLogo普通光學(xué)顯微鏡15編輯pptLogo白血病細胞16編輯pptLogo淋巴細胞白血病細胞17編輯pptLogo骨髓細胞形態(tài)學(xué)骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢驗

細胞化學(xué)染色

一種簡單、歷史悠久的診斷手段18編輯pptLogo破骨細胞19編輯pptLogo骨髓細胞20編輯pptLogo1233341---原粒2---早幼粒3---中幼粒4---晚幼粒21編輯pptLogo骨髓報告骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查22編輯pptLogo二、骨髓細胞學(xué)檢查的

臨床意義23編輯pptLogo

臨床應(yīng)用

1．適應(yīng)癥

血細胞減少或增多，外周血出現(xiàn)幼稚細胞；不明原因的骨痛、骨質(zhì)破壞、腎功能異常、

黃疸、紫癜；

不明原因的發(fā)熱，肝、脾、淋巴結(jié)腫大；血液系統(tǒng)疾病化療后的定期復(fù)查及療效觀察；

其他：骨髓活檢、造血干細胞培養(yǎng)、染色體分析、

微生物培養(yǎng)及寄生蟲檢查24編輯pptLogo

臨床應(yīng)用

2、禁忌癥：

出血傾向、血友病、晚期妊娠

25編輯pptLogo骨髓標(biāo)本的采集骨髓取材的部位和方法部位：胸骨、棘突、髂骨等處方法：多用穿刺法吸取26編輯pptLogo

穿刺部位的選擇部位：胸骨，髂后上棘,髂前上棘，胸骨穿刺髂后上棘穿刺27編輯pptLogo標(biāo)本采集骨穿針骨髓液的采集骨髓量：0.2mL抗凝：EDTA-K2骨髓涂片3-5張迅速揮干28編輯pptLogo1、骨髓穿刺術(shù)常規(guī)消毒，局部麻醉29編輯pptLogo骨髓穿刺術(shù)局部麻醉30編輯pptLogo骨髓穿刺術(shù)進骨髓穿刺針31編輯pptLogo骨髓穿刺術(shù)抽吸骨髓液，制備骨髓片32編輯pptLogo骨髓片制備情況涂片制備良好涂片制備良好涂片制備不佳涂片制備差33編輯pptLogo2、骨髓涂片的顯微鏡檢查1、低倍鏡檢查：〔1〕觀察骨髓涂片質(zhì)量:取材：骨髓小粒、脂肪小滴。制片：厚薄，頭、體、尾分布染色：細胞著色情況34編輯ppt〔2〕骨髓增生程度分級增生程度 有核細胞：RBC常見原因 平均增生極度活潑1:1 各型白血病增生明顯活潑 1:10 各型白血病、增生性貧血增生活潑 1:20正常骨髓像、某些貧血增生減低 1:50 再障〔慢性型〕、粒缺增生極度減低 1:200再障〔急性型〕骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查35編輯pptLogo骨髓增生程度分級(高倍鏡〕36編輯pptLogo

〔3〕巨核細胞計數(shù)巨核細胞的數(shù)量:低倍鏡計數(shù)，油鏡分類；骨髓涂片〔1.5cm×3.0cm血膜上〕

37編輯pptLogo異常細胞38編輯pptLogo各類轉(zhuǎn)移癌39編輯pptLogo2、油鏡檢查：1〕有核細胞分類：計數(shù)200-500個有核細胞〔增生極度活潑100個增生明顯活潑-500個〕計算各系統(tǒng)各階段細胞百分率選擇適宜部位40編輯pptLogo2、油鏡檢查：〔2〕計數(shù)粒紅比例〔G∶E〕〔3〕觀察各系細胞形態(tài)有無異?！?〕觀察有無其他特殊細胞及寄生蟲。41編輯pptLogo細胞形態(tài)觀察①粒系②紅系③單核④淋巴⑤漿細胞、⑥巨核細胞⑦其他細胞的數(shù)量。⑧骨髓小粒的成份。⑨有無寄生蟲及其他異常細胞。⑩全片復(fù)查增生情況，各階段細胞所占的比例、大小、形態(tài)、核染色質(zhì)、核仁、核形、胞質(zhì)量多與少、漿、顆粒42編輯pptLogo

正常骨髓象報告：1)增生活潑2)粒紅比值正?！睲∶E2～4：1〕3)粒系增生良好：a.占有核細胞的40～60%；b.各階段細胞比例適當(dāng)原粒＜2%，早幼粒＜5%，中晚幼粒各＜15%，桿狀核百分率＞分葉核，嗜酸性粒細胞＜5%，嗜堿性粒細胞＜1%；c.細胞形態(tài)無明顯異常。骨髓細胞學(xué)檢查43編輯pptLogo

4)紅系增生良好：

a.占有核細胞的15～20%左右

b.各階段比例適當(dāng)；

原紅細胞<1%，

早幼紅細胞<5%，以中、晚幼紅細胞為主，各占10%；

c．形態(tài)無明顯異?；虺墒旒t細胞形態(tài)大致正常。骨髓細胞學(xué)檢查44編輯pptLogo5)淋巴細胞系統(tǒng)占20～25%；〔主要是成熟細胞〕6〕單核細胞系統(tǒng)<4%〔主要是成熟細胞〕7〕漿細胞系統(tǒng)<2%〔主要是成熟細胞〕骨髓細胞學(xué)檢查45編輯pptLogo

8)巨核細胞

a.數(shù)量/全片：7～35個(1.5cm×3.0cm)

b.各階段情況正常；原巨核細胞0～5%

幼巨核細胞

0～10%，

顆粒巨核細胞10～50%，

產(chǎn)血小板巨核細胞20～70%，

裸核型

0～30%，

血小板易見、成堆狀存在，形態(tài)正常。

骨髓細胞學(xué)檢查46編輯pptLogo

8)其他細胞:

組織細胞、內(nèi)皮細胞、肥大細胞、網(wǎng)狀細胞及組織嗜堿細胞等歐間，未見異常。

9)無特殊細胞及寄生蟲。骨髓細胞學(xué)檢查47編輯pptLogo骨髓報告的診斷價值

肯定性、

支持性、

排除性、

形態(tài)學(xué)描寫

療效判斷48編輯pptLogo骨髓象檢查的本卷須知

正確認識細胞檢查者必須反復(fù)實踐，積累經(jīng)驗，需經(jīng)較長時間的鍛煉才能熟練掌握。不要根據(jù)一兩個特點就做出肯定或否認的判斷。寧可看得仔細而少看，不可貪多而馬虎。49編輯pptLogo〔四〕骨髓細胞形態(tài)學(xué)的

臨床意義50編輯pptLogo血液細胞51編輯pptLogo紅細胞形態(tài)的診斷價值52編輯pptLogo紅細胞形態(tài)的診斷價值53編輯pptLogo紅細胞形態(tài)的診斷價值54編輯pptLogo粒細胞系統(tǒng)異常的臨床意義55編輯pptLogo淋巴細胞的異常

(白血病)56編輯pptLogo紅白血病57編輯pptLogo瘧原蟲微絲蚴58編輯pptLogo利什曼原蟲弓形體蟲59編輯pptLogo小結(jié)骨髓細胞形態(tài)學(xué)的診斷價值肯定性診斷支持性診斷、排除性診斷、形態(tài)學(xué)描述療效判斷60編輯pptLogo細胞形態(tài)

主觀區(qū)分？61編輯pptLogo三、常用的血細胞化學(xué)染色定義：血細胞化學(xué)染色是以形態(tài)學(xué)為根底，根據(jù)化學(xué)反響原理,將骨髓片染色,觀察單個細胞內(nèi)在的生化特性，了解它們的代謝活動，生理功能和病理變化.鑒別各種類型血液細胞62編輯pptLogo本節(jié)主要內(nèi)容常見的細胞化學(xué)染色及臨床應(yīng)用〔POX、ALP、ACP、PAS、SE、NSE染色〕63編輯pptLogo細胞化學(xué)染色方法

酶脂類糖原鐵64編輯pptLogo〔一〕過氧化物酶染色

(Peroxidase,POX)

[原理]

H2O2細胞內(nèi)

POX[O]↑

聯(lián)苯胺[O]聯(lián)苯胺藍+

亞硝基氰化鈉暗藍色顆粒(定位于胞漿內(nèi))計數(shù)100個原始細胞報告百分率

[結(jié)果]

粒系：強陽性單核系：弱陽性淋巴系：陰性

[臨床意義]

鑒別急粒和急淋65編輯pptLogo過氧化物酶〔POX〕66編輯pptLogo各型白血病的MPO反響

粒系白血病細胞淋巴細胞白血病細胞67編輯pptLogo〔二〕酯酶染色

EsteraseStaining方法偶氮偶聯(lián)法1特異性酯酶染色萘酚AS-D氯乙酸酯酶染色〔SpecificEsteraseStaining〕〔NAS-DCEorCAE〕〔粒細胞酯酶〕

〔單核細胞酯酶〕

2.非特異性酯酶染色Non-SpecificEsteraseStaining〕

α-乙酸萘酚酯酶染色〔α-NAE)а-丁酸萘酚酯酶染色〔a-NBE〕分類68編輯pptLogo氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色

naphytholAS-Dchloroacetateesterase,AS-DCAE細胞化學(xué)染色檢驗69編輯pptLogo臨床評價

急性白血病的鑒別：1.急性粒白血病M31+～2+2+～3+2.急性單核細胞白血病

原、幼單核細胞---陰性3.急性淋巴細胞白血病

原、幼淋細胞----陰性

細胞化學(xué)染色檢驗70編輯pptLogoα-丁酸萘酚酯酶染色結(jié)果

〔單核細胞酯酶〕骨髓細胞學(xué)檢查71編輯pptLogo臨床評價

〔單核細胞白血病〕72編輯pptLogo

α-乙酸萘酚酯酶〔α-NAE〕

染色結(jié)果〔非特異性酯酶〕

細胞化學(xué)染色檢驗73編輯pptLogo臨床評價鑒別白血病類型；同時必須做NaF抑制試驗細胞化學(xué)染色檢驗74編輯pptLogo2張相同標(biāo)本同時固定后，配制2缸孵育液，其中一缸內(nèi)參加NaF〔抑制酶活性〕，然后將2張標(biāo)本分別放入2個缸內(nèi)各自染色。最后分別進行積分，求出抑制率?！博?0％〕氟化鈉抑制試驗〔NaFInhibittest〕NaF抑制率＝抑制前陽性率或積分抑制后陽性率或積分抑制前陽性率或積分×100％-細胞化學(xué)染色檢驗75編輯pptLogo

結(jié)果急性粒細胞白血病

---

原粒細胞弱陽性，不被NaF抑制急性單核細胞白血病---

原單核細胞陽性，被NaF抑制；細胞化學(xué)染色檢驗76編輯pptLogo非特異性酯酶+NaF77編輯pptLogo一種特異性酯酶染色加一種特異性酯酶染色臨床意義：粒、單核細胞白血病酯酶雙染78編輯pptLogo酯酶雙染〔粒單細胞白血病〕

兩種酯酶在同一張片子上染色細胞化學(xué)染色檢驗79編輯pptLogo〔三〕中性粒細胞堿性磷酸酶染色

〔alkalinephosphataseALP〕

80編輯pptLogo報告方式：百分率：計數(shù)100個成熟中性粒細胞，計算其陽性率。積分值：計數(shù)100個成熟粒細胞，按反響強度作出分級，將其百分率乘以級數(shù)然后相加。81編輯pptLogo[參考值]

正常：百分率10-40%，

積分7-51[臨床意義]1.區(qū)別CML、類白血病反響↓↓積分為0;↑積分>200分2.AA時↑PNH↓3.化膿性感染↑病毒性感染時↓4、真性紅細胞增多癥↑繼發(fā)性紅細胞增多癥N82編輯pptLogo類白血病反響慢粒白血病反響83編輯pptLogo慢性粒細胞性白血病ALP

Chronicmyeloidleukemia

陰性84編輯pptLogo〔四〕糖原染色〔過碘酸-雪夫反響〕

〔periodicacid–Schiff,PAS〕各系細胞糖原結(jié)果判斷85編輯pptLogo臨床評價陽性或強陽性：紅細胞系統(tǒng)疾?。骸灿准t細胞〕紅血病、紅白血病、MDS淋巴細胞系統(tǒng)疾?。杭绷堋苍?、幼淋巴細胞〕單核細胞系統(tǒng)疾?。杭眴巍苍瓎?、幼單核細胞〕86編輯pptLogo紅血病、紅白血病〔原始紅細胞〕87編輯pptLogo淋巴細胞判斷88編輯pptLogo〔四〕、酸性磷酸酶

〔acidphoshataseACP)原理：硫化鉛和偶帶偶聯(lián)法結(jié)果：胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黑色顆粒者為陽性〔硫化鉛〕胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)亮紅色顆粒者為陽性〔偶氮偶聯(lián)法〕

89編輯pptLogo臨床意義

鑒別多毛細胞白血病，不被L-酒石酸所抑制90編輯pptLogo鑒別T細胞白血病與B細胞白血病

陽性陰性鑒別Gaucher病與Nienann-Pick病

陽性陰性Gaucher病Nienann-Pick病91編輯pptLogo細胞形態(tài)和血液病細胞形態(tài)細胞化學(xué)染色鑒別血液病92編輯pptLogo本節(jié)主要內(nèi)容常見的細胞化學(xué)染色及臨床應(yīng)用〔POX、ALP、ACP、PAS、SE、NSE染色〕93編輯pptLogo主要內(nèi)容

1、骨髓細胞學(xué)檢查：

骨髓細胞學(xué)檢查的

臨床意義

2、骨髓和外周血--