動物微生物

成都農(nóng)業(yè)科技職業(yè)學(xué)院

第一講：緒論

簡介動物微生物的基本理論知識

1）動物微生物的基本知識（主要指病原性細菌、病真菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)、染色特性、生

長要求、培養(yǎng)特性、抵抗力、致病性、微生物學(xué)診斷等）

2）免疫學(xué)的基本知識（免疫器官、免疫過程、特異性免疫、非特異性免疫）及應(yīng)用。

3）了解微生物在飼料加工、畜產(chǎn)品加工、微生態(tài)制劑中的作用。

簡介微生物試驗技能

1）微生物檢驗中常用的玻璃器皿的準備、使用及后處理。

2）微生物檢驗中常用的儀器。

3）細菌病料的采集、涂片、染色、鏡檢（觀察單個菌體的形態(tài)、大小、染色特點及特

殊結(jié)構(gòu)）、培養(yǎng)（觀察菌落形態(tài)）、分離、生化鑒定、藥敏試驗等

4）病毒病料的采集、病毒分離、傳代培養(yǎng)、鑒定等。

5）血清學(xué)常用試驗（沉淀反應(yīng)、凝集反應(yīng)、補體結(jié)合反應(yīng)、熒光抗體染色等）

6）菌種的分離培養(yǎng)、鑒定、保存。

緒論內(nèi)容

微生物的概念，種類和特點

微生物的重要性

微生物的發(fā)展簡史及重要事件

動物微生物現(xiàn)狀及任務(wù)

*1微生物的概念、特點、種類

1.1概念：微生物（Microorganisms）：是存在自然界中的一群結(jié)構(gòu)簡單，繁殖快，種

類繁多，分布廣泛，個體微小的生物的總稱。

1.2特點

＞個體微小，結(jié)構(gòu)簡單

＞種類繁多，分布廣泛，數(shù)量大

＞代謝旺盛，繁殖迅速

＞容易變異

△1.2.1微生物在自然界中分布極廣泛，江河湖海、空氣、土壤、礦物質(zhì)層中，都有

數(shù)量不等的微生物。在人類、動物、植物的體表，以及人和動物與外界相通的腔道中

也有多種多樣的微生物寄生。

121.1土壤：具備著多種微生物生長繁殖所需的營養(yǎng)、水分、氣體環(huán)境、酸堿度、滲

透壓和溫度等條件。故有微生物天然培養(yǎng)基之稱。土壤中微生物的種類很多，有細菌、

放線菌、真菌、螺旋體、藻類和噬菌體等。但以細菌為最多（占70%-90%）。土壤是

微生物在自然界中最大的貯藏所，是人類最豐富的“菌種資源庫”。

微生物數(shù)量、種類最多，是微生物天然的培養(yǎng)基。

eg：肥沃的土壤：幾十億個/克

貧瘠的土壤：幾百萬——幾千萬/克

▲補充：土壤傳染病：土壤被污染了病源菌，可稱為疫源地，病源菌以土壤為媒

介，而使人、畜發(fā)生傳染。

土壤污染的細菌學(xué)指標：

細菌總數(shù)：1g土壤中含有的細菌數(shù)。

大腸桿菌值：被檢土壤中發(fā)現(xiàn)有大腸桿菌的最小土壤量，通常用g來表示。

產(chǎn)氣莢膜梭菌值：是指能檢出產(chǎn)氣莢膜梭菌的最小土壤量(g)。

eg:清潔的土壤：細菌總數(shù)：1萬左右，大腸桿菌值：1g

嚴重污染的土壤：細菌總數(shù)：100萬左右，大腸桿菌值：＜0.001g

121.2空氣：缺乏營養(yǎng)元素、干燥、空氣流動性、陽光直接照射一微生物數(shù)量、種類

少

飛沫傳染：在醫(yī)院、獸醫(yī)院及畜禽舍的空氣中，常懸浮帶有病原微生物的氣

溶膠，健康人或動物因吸入帶病源微生物的飛沫受到的感染，稱為飛沫傳播和塵埃傳

播，總稱為空氣傳播。

空氣的細菌學(xué)檢查主要是測定每m3空氣中的菌落總數(shù)和鏈球菌數(shù)。

121.3水：土壤、空氣塵埃、人畜糞便、污水一含有較多數(shù)量和種類的微生物，水中

的微生物主要為腐生性細菌，其次還有真菌、螺旋體、噬菌體、藻類和原生動物等。

大腸桿菌指數(shù)：每1000ml水中含有的大腸桿菌數(shù)。eg:1000ml水中發(fā)現(xiàn)4個大

腸桿菌，則大腸桿菌指數(shù)為4。

大腸桿菌價：含有一個大腸桿菌的最小水量。eg:在250ml水中發(fā)現(xiàn)一個大腸

桿菌存在，則大腸桿菌價就是250。

飲用水指標：1ml水中細菌總數(shù)不超過100個，大腸桿菌指數(shù)不超過3,大腸桿菌

價不低于300?

1.2.L4人類、動物、植物的體表，以及人和動物與外界相通的腔道中也有多種多樣的

微生物寄生。

eg：人體內(nèi)的微生物以細菌為主：大約有幾十萬億到百萬億，重量為L5-2Kg,其中

腸道約有：IKg以上，肺：200g,口腔：20g,鼻孔10g,眼：1g,皮膚200g。

△補充：無菌動物：指正常的健康胎兒或成熟的雞胚胎用無菌手續(xù)取出來，即刻飼養(yǎng)

與一個特定的無任何細菌的環(huán)境中，在實驗階段或整個生活期內(nèi)的飲水、飼料和空氣

均要進行嚴格的滅菌處理，對于接觸它的試驗人員或其它器具也要通過嚴格的消毒和

滅菌。

(用于研究消化道細菌與動物營養(yǎng)的關(guān)系，免疫、腫瘤、病理及傳染病的凈化等)

無特殊病源菌動物：在胎兒取出或育成的最初階段，和無菌動物相同飼

養(yǎng)，但在2周齡以后，入群于籠內(nèi)飼養(yǎng)。第5-6周齡斷乳，溫度維持在19c以上。(用

于感染慢性傳染病豬群的凈化)

*病源微生物(病源體)：凡能引起動物治病的微生物統(tǒng)稱病源微生物。eg:豬瘟,

豬丹毒

*條件性病源微生物：在正常條件下不致病，只有在特定的條件下才引起疾病。

eg：巴氏桿菌

▲益生菌(probiotics):正常動物體表或體內(nèi)腔道有一層微生物，它們對宿主是

有益的和必需的，稱為正常微生物群或正常菌群。eg：雙歧桿菌

*1.3微生物的種類：

按細胞結(jié)構(gòu)的特點，可將微生物分為三大類：

＞非細胞型微生物(Acellular)：體積更微小，大約為0.01-0.25gm,只有--種

核酸，RNA或DNA,僅能在細胞內(nèi)生長繁殖，eg:病毒(Viruses)

＞原核細胞型微生物(Prokaryote)：體積大約為0.1-10小，缺乏完整的細胞器，

無核仁及核膜，僅有DNA長絲盤繞成團的無組蛋白的原始核。eg:細菌

(Bacteria)、放線菌、螺旋體、支原體、立克次氏體、衣原體。

＞真核細胞型微生物(Eukaryote)：胞漿內(nèi)有完整的細胞器，細胞核的分化程度

較高，有核膜、核仁和染色體。eg:真菌(Fungi)

2微生物的重要性：

?參與自然界中碳素、氮素、硫的循環(huán)，凈化環(huán)境

?工業(yè)生產(chǎn)

?農(nóng)業(yè)生產(chǎn)

?醫(yī)藥衛(wèi)生

?維護動物健康

2.1參與自然界中碳素、氮素、硫的循環(huán)，凈化環(huán)境

■微生物分解和利用周圍環(huán)境中的有機物作為養(yǎng)料，一方面作為本身的細胞物

質(zhì)，另一方面，大量的有機物被分解成水，二氧化碳、無機物歸還到大氣中，

供植物合成有機物。

■清除環(huán)境中的有毒物質(zhì)，凈化環(huán)境。eg：分解農(nóng)藥

■微生物增加土壤的肥沃性，土壤中的微生物能將動植物蛋白質(zhì)分解轉(zhuǎn)化為無機

含氮化合物

2.2工業(yè)生產(chǎn)

利用微生物的生命活動，提供生物學(xué)動力

?在食品方面：釀酒、制醋、酸奶等

?洗滌劑、造紙、紡織：纖維素酶

2.3農(nóng)業(yè)生產(chǎn)

?固氮菌作用空氣中的氮，供植物生長需要

?利用微生物制造菌肥、植物生長刺激劑等

?利用微生物殺蟲，蘇云金桿菌

2.4維護動物健康

＞調(diào)節(jié)動物消化道內(nèi)的微生態(tài)平衡。

＞提高飼料的利用率，促進動物生長

＞提供營養(yǎng)元素

＞提高動物機體的免疫機能

3發(fā)展簡史及重要事件

1）微生物形態(tài)時期

1674年荷蘭人呂文.虎克發(fā)明了放大270x的簡陋顯微鏡；觀察到了微生物的基本形

態(tài)如球菌、桿菌和螺旋菌

2）微生物生理學(xué)時期

法國化學(xué)家巴斯德：發(fā)酵和腐敗由外來看不見的微生物引起，推翻了“自然發(fā)生

輪

德國科學(xué)家柯霍：發(fā)明了馬鈴薯、凝固血清、明膠等固體配制培養(yǎng)基；苯胺染色

法；發(fā)現(xiàn)了炭疽桿菌、結(jié)核桿菌、霍亂弧菌等；并于1884年提出斷菌的三大原則：

1）在特殊疾病中，只能由規(guī)律的發(fā)現(xiàn)同一種病原菌，并獲得該菌的純培養(yǎng)物；

2）該培養(yǎng)物接種到易感動物，能引起相同的疾??；3）能從感染的試驗

動物再次獲得該病源菌的純培養(yǎng)物，并能傳代。

俄國科學(xué)家伊萬諾夫斯基：發(fā)現(xiàn)煙草花葉的病源體，創(chuàng)立了傳染病的病毒學(xué)說。

3）免疫學(xué)的萌芽時期

英國醫(yī)生琴納解決了人的天花預(yù)防問題

巴斯德創(chuàng)造了雞霍亂、豬丹毒、炭疽、狂犬病疫苗

德國化學(xué)家歐立希闡述了體液免疫的機制

俄國動物學(xué)家梅契尼柯夫提出細胞免疫機理

英國細菌學(xué)家弗萊明于1929年發(fā)現(xiàn)了青霉素

4）近代微生物學(xué)和免疫學(xué)時期

理論上取得的成就及其應(yīng)用價值

第一,微生物遺傳理論的研究大大發(fā)展

第A~A~一-----?，組織移植、免疫耐受的研究

第三，化學(xué)治療藥劑及抗生素的研究

第四,抗體研究及應(yīng)用

技術(shù)上的重大創(chuàng)新及其應(yīng)用價值

第一，電子顯微鏡的應(yīng)用

第二，標記抗原和標記抗體的應(yīng)用

第三，細胞培養(yǎng)、空斑技術(shù)、蛋白質(zhì)及核酸的提純的應(yīng)用

第四，核磁共振儀的應(yīng)用

第五，分子克隆、PCR、電子計算機等技術(shù)的應(yīng)用

4任務(wù)：保障畜禽健康，促進畜牧業(yè)發(fā)展，防止傳染病的發(fā)生及疫病傳播，確保人類

健康；將有益實踐，同時控制和消滅有害的微生物。

主要參考書

《動物微生物學(xué)》，1997,四川科技出版社，郭萬柱等主編

《獸醫(yī)微生物學(xué)》（二版），農(nóng)業(yè)出版社，甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)主編

《畜牧微生物學(xué)》（二版），農(nóng)業(yè)出版社，華南農(nóng)學(xué)院等主編

《微生物學(xué)》，輕工出版社，無錫輕工業(yè)學(xué)院等主編

《家畜傳染病學(xué)》（三版），中國農(nóng)業(yè)出版社，蔡寶祥等主編

《免疫學(xué)》，南京農(nóng)業(yè)大學(xué)，杜念興主編

細菌總論

第二講：細菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu)

*細菌（bactrium）：是一類形態(tài)微小，結(jié)構(gòu)簡單，具有細胞壁，無典型細胞核（無

核膜/核仁），而只有核質(zhì)（染色體），不能進行有絲分裂而主要靠二等分分裂繁殖的

原核單細胞微生物。

廣義上的細菌還包括：放線菌、螺旋體、立克次氏體、衣原體、支原體（霉形體）

*1細菌的形態(tài)——球菌、桿菌、螺旋菌

1.1球菌（coccus）：單個菌體呈球形或近似球形（橢圓形或半月狀）

按分裂方向和分裂后的排列方式分：雙球菌（Diplococcus）、

鏈球菌（Streptococcus）、

四聯(lián)球菌（Tetracoccus）、

八疊球菌（Sarcina）＞

葡萄球菌（Staphylococcus）0

1.2桿菌（Bacterium或Bacillus）：菌體呈正圓柱形，也有近似卵圓形的，多數(shù)平

直，也有稍微彎曲的。

按形態(tài)分類：球桿菌、分支桿菌、棒狀桿菌、長絲狀桿菌

按分裂方向和分裂后的排列方式分：單桿菌、雙桿菌、連桿菌

1.3螺形菌（Spirillum）：弧菌（Vibrio）、螺菌（Spirillum）

（細菌的形態(tài)具有種的特異性。具有鑒定意義）

補充：細菌的衰老型：（退化型）（involutionform）在老齡培養(yǎng)物中，有些細菌會出現(xiàn)

各種和正常形態(tài)不一樣的個體，稱為——o（一般幼齡菌生長迅速，形體較大。老齡

菌形體較?。?/p>

細菌的多形性（pleomorphism）：有些細菌，即使在最適宜的正常環(huán)境中生長，其

形態(tài)也不一致，這種現(xiàn)象是——

菌落（colony）：某個細菌在適合生長的培養(yǎng)基表面或內(nèi)部，在適宜的條件中，

經(jīng)過一定時間培養(yǎng)，生長繁殖出巨大數(shù)量的菌體，形成一個肉眼可見的，由一定形態(tài)

的獨立群體稱——；若長出的菌落連成一片稱為菌苔（lawn）（特征性的菌落群體形

態(tài)具有鑒定意義）

2細菌的大小

2.1表示單位：um（常見的畜禽病原菌多在兒個um之間）

球菌：以直徑來表示：D=0.5-2um

桿菌:長x寬：較大桿菌：3-8umxl-1.25um

中等大桿菌：2-3umx0.5-lum

小桿菌：0.7-1.5umx0.2-0.4um

螺形菌：長x寬：以其兩端的直徑做長度,2-20umx040.2um

2.2細菌的重量：約lxio-9/xio-iOmg

*3細菌的基本結(jié)構(gòu)及功能——細胞壁、細胞膜、細胞質(zhì)（細胞漿）、核質(zhì)（核體）、

內(nèi)容物

3.1細胞壁：位于細菌細胞的最外層，是一層無色透明，堅韌而具有一定彈性的膜，

約占細菌干重的10-40%o

*3.1.1細胞壁結(jié)構(gòu)及化學(xué)組成

G-：具有明顯的分化結(jié)構(gòu)：外胞壁和內(nèi)胞壁

外胞壁：具有三層結(jié)構(gòu)：最外層：脂多糖（特異多糖、核心多糖、脂類A）

次外層：脂層雙層及穿插其間的蛋白質(zhì)組成。

內(nèi)層：脂蛋白層

內(nèi)胞壁：太聚糖（粘肽）（10-20%）

肽聚糖磷壁酸蛋白質(zhì)脂多糖

G+40-90%少量少量無

G-10-20%無少量有

圖1-5細菌細胞壁模式圖

（一）革蘭氏陽性菌：1.細胞壁2.胞漿膜

（-）革蘭氏陰件菌：a.外胞壁b.內(nèi)胞壁

*3.1.2細胞壁的功能：1）維持菌體固有的外形

2）保護細菌免受外界環(huán)境的損害

3）內(nèi)外物質(zhì)交換（l-10nm）

4）在細菌分裂繁殖上起作用

5）細胞壁上有許多抗原決定簇，決定了細菌菌體的抗原性

3.2細胞膜：位于細胞壁內(nèi)側(cè)，緊包著細胞漿，是一-種柔軟而具有彈性的半滲透性生

物膜。占細胞干重的10-30%。

3.2.1結(jié)構(gòu)及化學(xué)組成

結(jié)構(gòu)平行的脂類雙層（磷脂一多；糖脂一少）

組成：蛋白質(zhì)（70%）

脂類（30%）

多糖（少量）

*322功能：1）物質(zhì)轉(zhuǎn)運與營養(yǎng)作用

2）細菌細胞能量轉(zhuǎn)換（呼吸作用）

3）信息傳遞

4）參與細胞壁的生物合成

5）在細胞分裂中起作用

△補充：間體（中介體）：細菌的細胞膜向內(nèi)陷入胞漿中折疊而成的管狀或囊狀結(jié)構(gòu)。

3.3細胞漿：是細菌的原生質(zhì)，無色透明，均勻的粘稠膠體。

3.3.1功能：1）合成蛋白質(zhì)和核酸的場所

2）營養(yǎng)物質(zhì)進行代謝的場所

3）容納細胞器

3.4核體：--根單一的環(huán)狀雙鏈DNA在胞漿中反復(fù)盤繞而成的。

3.4.1排列方式：密實的出于菌體的中心或邊緣，呈球形、卵狀、帶狀、啞鈴狀

松散的排列，呈網(wǎng)狀、海綿狀

顆粒狀分布于整個胞漿中

△補充：質(zhì)類：細胞核體以外的一小段環(huán)狀雙鏈DNA,能獨立復(fù)制，維持許多代，

帶有遺傳信息，控制細胞某些特定的遺傳性狀，但并非細菌生命活動所

必需的。

3.5內(nèi)容物：核糖體、異染顆粒、脂肪滴、糖原和淀粉粒、空泡和氣泡。

*4細菌的特殊結(jié)構(gòu)——莢膜、鞭毛、菌毛、芽胞（具有種的鑒定意義）

4.1莢膜

4.1.1定義

莢膜：有些細菌在其生活的過程中，向細胞壁表面分泌一層較厚的粘液性物質(zhì)，

包裹著整個菌體。厚度0.2um以上，經(jīng)鎂藍染色法（莢膜呈淡紅色，菌體

呈藍色）或瑞特氏染色法（莢膜呈淡紫色，菌體呈藍色）光學(xué)顯微鏡即可

見。

菌膠團：當多個細菌的莢膜物質(zhì)融合而成一團膠狀物，內(nèi)含多個菌體細胞時，稱

為——

微莢膜：有些細菌在細胞壁有一層類似莢膜但很菲薄的物質(zhì)圍繞，成為微莢膜。

（厚度在20nm以下，電鏡下可見。）

4.1.2莢膜的形成條件

莢膜的形成與細菌所處的環(huán)境有關(guān)系：一般在人工培養(yǎng)基中細菌不形成莢膜；只

有在動物組織中病源菌才能形成莢膜；一些腐生性產(chǎn)莢膜的細菌，在含有血清、牛奶

及一定種類的糖類培養(yǎng)基中才能產(chǎn)生莢膜。

4.1.3莢膜的功能：莢膜不是細菌的主要構(gòu)造，對細菌的生長代謝物較大的影響：

1）保護細菌的細胞壁，使細菌細胞壁免受各種抗菌因素（溶菌酶、大腸菌素、

補體、噬菌體、溶解酶）的破壞。

2）保護細菌免受宿主吞噬細胞的吞噬和消除抗體的作用，有利于細菌在宿主內(nèi)

繁殖擴散，發(fā)揮致病性，增加了細菌對機體的侵襲力。

3）保護細菌免受干燥的影響。

4）提供營養(yǎng)，在營養(yǎng)缺乏時，作為碳源及能源供細菌利用。

4.2鞭毛

421定義：鞭毛是從細胞漿外層中的基礎(chǔ)顆粒生長出來，穿過胞漿膜和細胞壁，向

菌體外伸出的細長呈波狀彎曲的絲狀物。［一般直徑在20nm左右，長

度大于菌體的若干倍，經(jīng)過萊弗遜氏鞭毛染色法（鞭毛呈紅色，菌體呈

藍色）等可在光學(xué)顯微鏡下觀察到］

422鞭毛的數(shù)目、位置及排列方式：

1）一端單毛菌：只有一根鞭毛，位于菌體的頂端。

2）兩端單毛菌：菌體的兩端各有一根鞭毛。

3）從毛菌：位于菌體的一端或兩端有一束或兩束鞭毛。

4）周毛菌：菌體的周身有數(shù)量不等的鞭毛。

4.2.3鞭毛的功能

1）鞭毛是細菌的運動器官，細菌的運動方式與鞭毛的數(shù)目、位置和排列有關(guān)，

單毛菌和從毛菌一般呈直線快速運動；周毛菌呈無規(guī)律的緩慢運動或滾動。

2）細菌的動力加速細菌從環(huán)境中攝取營養(yǎng)物質(zhì)，使細菌趨向有利于生長的部位。

3）細菌的動力與致病性有關(guān)：細菌的動力有利于致病菌穿過粘稠度的分泌物及

上皮細胞的屏障，進入體液或組織中。

4.3菌毛（只有在電鏡下可觀察到，與菌體的運動無關(guān)）

431根據(jù)菌毛的特征和作用特點，分類：1）普通菌毛：某些革蘭氏陰性菌和極少數(shù)

革蘭氏陽性菌，在菌體周圍生長著一種數(shù)量比鞭毛多，直徑較細，長度較短的毛發(fā)樣

絲狀物。

2）性菌毛：某些革蘭氏陰性菌的菌體上生

長的比普通菌毛長，而數(shù)量僅有1-4根的絲狀物。

4.4芽抱

4.4.1定義：某些革蘭氏陽性菌生長到一定階段后，當其處于特定的環(huán)境條件時，由

于細胞漿核質(zhì)逐漸脫水濃縮，在菌體內(nèi)形成一個折光力強，通透性低的圓形或橢圓形

的堅實小體。（用復(fù)紅美藍染色在光鏡下見芽胞呈紅色，菌體呈藍色，不經(jīng)特殊染色

時呈現(xiàn)無色的空洞狀）；帶有芽泡的菌體為芽抱型；未形成芽抱的菌體成為繁殖型。

游離芽胞：芽抱在菌體成熟后，隨菌體崩解而脫出，稱此為——

4.4.2芽抱的形狀：中央芽抱：位于菌體的中央，呈卵圓形，比菌體小。

頂端芽抱：位于菌體的頂端，呈圓形，比菌體大。菌體呈鼓槌形

偏端芽抱：位于菌體的近端。菌體呈網(wǎng)球拍狀。

*4.4.3芽抱的特性

1）化學(xué)藥品酸堿不敏感;：芽抱具有多層結(jié)構(gòu)，其通透性低

2）耐熱耐高溫：芽抱含水分較少，（不到40%）,其中所含酶類及蛋白質(zhì)遇熱不

易凝固。

3）耐干燥：芽抱內(nèi)新陳代謝及酶的活力低。

第三講：細菌的生理

細菌具有獨立的生命活動能力，一方面能從外界環(huán)境中直接攝取營養(yǎng)，用以合成

菌體本身的物質(zhì)和作為能源，另一方面從自身物質(zhì)分解獲得能量，排除廢物，這兩方

面綜合作用完成整個新陳代謝過程，使得菌體生長繁殖。

1細菌的營養(yǎng)

*1.1細菌的營養(yǎng)需要及作用

1.1.1水：作為溶劑，任何營養(yǎng)物質(zhì)的吸收、滲透、分泌、排泄都以水為媒介；

細菌新陳代謝過程中的一切生化反應(yīng)都必須有水才能進行。

1.1.2碳源：病原菌主要從糖類、有機酸、蛋白質(zhì)獲得碳源和能量。（病原菌對碳源的

利用能力是對細菌進行生化鑒定的依據(jù)，eg：大腸桿菌可分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，沙門

氏菌不能利用乳糖。

1.1.3氮源：病原菌須無機氮源（硝酸鹽、錢鹽）和有機氮（蛋白月東、牛肉膏、酵母

浸膏、氨基酸）來合成菌體成分和結(jié)構(gòu)成分，氮源并不是能量的主要來源。

1.1.4礦物質(zhì)：細菌所需的礦物質(zhì)有K、Na、Ca、Mg、P、S、Fe、CL、Mn、Zn,參

與菌體結(jié)構(gòu)物質(zhì)的組成；參與能量的轉(zhuǎn)移；作為酶的輔基組成或酶的活化劑。

LL5生長因子：定義：有些細菌在培養(yǎng)時，還必須加入一些其他物質(zhì)才能良好生長,

這些能促進細菌生長的物質(zhì)稱為——。生長因子是一種不被分解的有機物，如VB、

喋吟、嗑嗟、某些氨基酸等，主要其輔酶或輔基的作用。

1.2細菌的營養(yǎng)類型

由于各種細菌所含的酶系組成不同，合成和分解物質(zhì)的能力也不同，因而對營養(yǎng)

物質(zhì)的需求不同，根據(jù)碳素來源分：

1）自養(yǎng)菌,：利用無機碳（C、C02、H2c。3）合成菌體需要的有機碳，這類細菌

稱自養(yǎng)菌。

光能自養(yǎng)菌：有些細菌含有特殊色素，可以進行光和作用，從光源中獲得能量。

化能自養(yǎng)菌.：有些細菌能利用氧化某些無機化合物（NH3、H2S）所產(chǎn)生的能

量，將無機碳合成所需要的有機碳。

2）異養(yǎng)菌：必須利用有機碳（如：葡萄糖）合成菌體內(nèi)所需要的有機碳化合物

的一類細菌稱為一（一般獸醫(yī)、人醫(yī)上的病原菌都屬于化能異養(yǎng)菌）

L3細菌攝取營養(yǎng)的方式：單純擴散、促進擴散、主動輸送、基團轉(zhuǎn)移

單純擴散亦稱被動擴散，是一種最簡單的物質(zhì)交換方式。細胞膜兩側(cè)的物質(zhì)靠

濃度差（濃度梯度）進行分子擴散（必需在胞外濃度高于胞內(nèi)濃度時，從高濃度向低濃

度擴散，當胞內(nèi)外濃度達到平衡時，擴散便停止），不需要能量。此種方式無特異性

或選擇性，不是物質(zhì)運輸?shù)闹饕绞?。如NaCL、水、乙醇等。

促進擴散細菌通過細胞膜上的特異性載體蛋白與基質(zhì)（如糖或氨基酸）相結(jié)合,

結(jié)合后將其轉(zhuǎn)運至細胞內(nèi)，在解離開，不使基質(zhì)發(fā)生任何變化，也不需要能量。具有

特異性和選擇性，具有可逆性，總是從高濃度向低濃度擴散。

主動輸送是細菌吸收營養(yǎng)物質(zhì)的一種主要方式，與促進擴散一樣，也需要特異

性載體蛋白與基質(zhì)相結(jié)合，結(jié)合后將其轉(zhuǎn)運至細胞內(nèi)外，也具有特異性，但主動運輸

需要能量可以將胞外低濃度的基質(zhì)運輸?shù)礁邼舛鹊募毎麅?nèi)，并且時不可逆的。如乳

糖等。

基團轉(zhuǎn)位物質(zhì)在運輸?shù)耐瑫r受到化學(xué)修飾（磷酸化），發(fā)生結(jié)構(gòu)性的變化，（在

細菌的細胞膜上存在磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)，能使糖份在進入細胞膜的同時發(fā)生磷酸化，經(jīng)

磷酸化的糖可以立即進入細菌細胞內(nèi)參與細菌細胞合成和分解代謝）。需要能量。該

種方式僅用于糖及糖的衍生物的轉(zhuǎn)移。

表1:細菌攝取營養(yǎng)的四種機制比較表

攝取機制特異性細胞內(nèi)外的基質(zhì)濃度交換后的基質(zhì)變化載體蛋白能量

單純擴散無外大于內(nèi)無無不需要

促進擴散有外大于內(nèi)無有不需要

主動輸送有內(nèi)大于外無有需要

基團轉(zhuǎn)位有內(nèi)大于外磷酸化有需要

2細菌的代謝

細菌在生長繁殖過程中，一方面分解其吸收的營養(yǎng)物質(zhì)，產(chǎn)生所需要的能量，即

為分解代謝；同時利用分解產(chǎn)生的低分子物質(zhì)和能量，合成菌體成分，即合成代謝。

分解代謝與合成代謝同時發(fā)生。

△2.1細菌代謝所需要的酶

細菌代謝進行的系列生化反應(yīng)都必須有酶參加，不同種屬的細菌，其進行代謝的

生化反應(yīng)過程存在差異，所以酶系統(tǒng)也不同，根據(jù)酶在細菌細胞上的存在位置和產(chǎn)生

條件不同，可將酶分為以下兒種類型：

1）胞內(nèi)酶和胞外酶：細菌產(chǎn)生的，存在于細菌細胞內(nèi)的酶為胞內(nèi)酶，主要參與

細菌呼吸過程的酶類；細菌產(chǎn)生的，存在于細菌細胞外的酶為胞外酶，使大分子物質(zhì)

分解為小分子物質(zhì)，便于細菌呼吸

2）固有酶和適應(yīng)酶：細菌不因環(huán)境條件是否改變而固有的酶；在誘導(dǎo)物的存在

下，因適應(yīng)環(huán)境才產(chǎn)生的酶，如大腸桿菌的半乳糖酶，只有在乳糖存在時才產(chǎn)生。

3）限制酶和修飾酶：存在于細菌細胞內(nèi)，對異種DNA進行識別，并在其堿基

一定部位進行切割，使異種DNA斷裂的酶稱限制酶，又稱限制性核酸內(nèi)切酶；對自

身DNA進行修飾，使DNA特定部位的堿基甲基化，從而保護自身DNA不被限制

酶分解的酶稱修飾酶。

*2.2分解代謝：書25-27

1）碳水化合物的分解：書25-26

2）蛋白質(zhì)的分解：書26

3）脂肪的分解：書26

2.3細菌的合成代謝：書26-27

*3細菌的呼吸

3.1定義：細菌通過呼吸酶的作用，以氧化還原的方式，使營養(yǎng)物質(zhì)還原而獲得能量,

并形成中間產(chǎn)物的過程稱為細菌的呼吸。（細菌的呼吸無氣體交換）

3.2呼吸類型：書25圖示講解

3.3.1厭氧呼吸：細菌在呼吸過程中只有脫氫酶參加，使基質(zhì)中的氫活化，經(jīng)輔酶傳

遞給氧以外的物質(zhì)，使其活化并獲得能量的過程，稱為厭氧呼吸或發(fā)酵

（Fementation）。

厭氧菌：對厭氧環(huán)境的要求不是很嚴格，震蕩培養(yǎng)時，于培養(yǎng)基的中部也有不

同程度的生長。如：破傷風(fēng)桿菌

專性厭氧菌：呼吸時不宜有游離氧存在，震蕩培養(yǎng)時，生長于試管底部或接近底

部。如：肉毒桿菌

3.3.2需氧呼吸;：細菌在呼吸過程中，脫氫酶使基質(zhì)中的氫活化并游離出來，通過細

胞色素傳遞給氧化酶活化的分子氧，形成水而獲得能量的過程。

專性需氧菌：呼吸時需要較充足的氧，震蕩培養(yǎng)時，生長表面。如：結(jié)核桿菌

微需氧菌：呼吸時宜有低濃度的氧，震蕩培養(yǎng)時;生長于離試管培養(yǎng)基表面稍下

處。如：牛布氏桿菌

3.3.3兼性厭氧呼吸：細菌既有脫氫酶系統(tǒng)，又有氧化酶系統(tǒng)，在有氧的環(huán)境中進行

需氧呼吸，在無氧的環(huán)境中又能進行厭氧呼吸。

*4細菌的生長繁殖

4.1細菌生長繁殖的條件

1）營養(yǎng)條件：細菌的營養(yǎng)需要：水、碳源、氮源、礦物質(zhì)、生長因子。但不同種屬

的細菌對營養(yǎng)的要求存在差異，應(yīng)根據(jù)所培養(yǎng)的細菌供給其充足的營養(yǎng)。

2）溫度：細菌在生長過程中，都有不同的生長溫度范圍和最適溫度，再最適溫度下，

細菌生長最快，超過最高或最低生長溫度（在最適范圍以外，耐受限度以內(nèi)），細菌

的活動和生長停止，但仍維持生命（保存菌種）。若在耐受限度以外，即溫度過高則

死亡，（一般病原菌的最適溫度都在37c左右）

根據(jù)細菌生長所需溫度的高低，可將細菌分低溫菌（嗜冷菌）、中溫菌（嗜溫菌）、高

溫菌（嗜熱菌）

表：細菌生長的溫度范圍

生長溫度范圍℃

類型存在處所

最低最適最高

（嗜冷菌）-5-1010?2025?30水和冷庫中

10?1218?2840?45腐生菌

（嗜溫菌）

10?203740?45病原菌

（嗜熱菌）25?4550?6070?85溫泉及肥堆中

3）氫離子濃度（pH）：pH對細菌生命活動有很大影響，一方面氫離子濃度影響細胞

膜的電荷-----＞物質(zhì)的吸收；另一方面，氫離子濃度可影響代謝過程中酶的活性。

大多數(shù)細菌對pH的要求在pH6-8,（病原菌的最適pH7.2-7.6；霉菌pH3.0-6.0）

但有的細菌分解糖產(chǎn)酸，使pH下降，--------------------------；----------

有的營養(yǎng)物質(zhì)溶解過程中偏酸性二二在培養(yǎng)基中加入緩沖溶液調(diào)節(jié)pH

4）滲透壓：細菌細胞需在等滲溶液中才能生長發(fā)育，在高滲溶液中細菌不能生長繁

殖，如：（鹽腌和糖漬食品）。G+：2.03xl06—2.53X106

G-：5.07X105—6.08x105

△名詞：胞漿分離：（plasmolysis）:細菌處于高滲溶液，菌體內(nèi)水分滲出，系胞漿

中膠體分子間距減小，呈顆粒狀，系胞漿濃縮，與細胞膜分離。稱為一

胞漿壓出（plasmoptysis）：細菌處于低滲鹽水或蒸儲水中，菌體則因水分滲入

而膨脹，甚至破裂，胞漿從細胞內(nèi)排出，稱為——

5）氣體：氣體對細菌的生長有明顯的影響，主要是。2、CO2o

4.2細菌的繁殖方式：細菌均以二等分分裂法進行繁殖，

如：球菌從不同平面分裂，分裂后根據(jù)排列呈單球菌、雙球菌、鏈球菌。。。。。。。。。。。

桿菌的橫向分裂：

G+分裂時，細胞膜開始形成橫膜，最后形成細胞壁。

G-分裂時，整個細胞壁內(nèi)陷。

4.3細菌的繁殖速度

多數(shù)細菌在20-30min就繁殖一代，如：大腸桿菌的繁殖在20-30min,l個大腸桿

菌培養(yǎng)24h,就可獲得248-272個菌體，j營養(yǎng)物質(zhì)的消耗

細菌產(chǎn)生的有害代謝產(chǎn)物的積聚

|環(huán)境溫度、pH的改變

、細菌之間的拮抗

4.4細菌的生長曲線

將細菌培養(yǎng)于適宜的液體培養(yǎng)基中，定時取樣測定其細菌總數(shù)和活菌數(shù)，以活菌

數(shù)的對數(shù)為縱坐標，培養(yǎng)時間為橫坐標繪制生長曲線。

廠遲緩期：

對數(shù)期：

個穩(wěn)定期：

衰退期：

第四講（實驗課）微生物學(xué)中常用儀器的使用方法

實驗須知（見獸醫(yī)微生物學(xué)實驗指導(dǎo)）

實驗報告的寫法

實驗題目：微生物實驗室常用儀器的使用方法

實驗?zāi)康模赫莆瘴⑸飳嶒炇抑饕獌x器的使用和保養(yǎng)方法。

實驗原理：

實驗材料：

實驗方法與步驟：

實驗結(jié)果：

結(jié)果分析：

1微生物實驗室常用儀器的使用方法

1.1普通光學(xué)顯微鏡技術(shù)

普通光學(xué)顯微鏡是?種精密的光學(xué)儀器。早期的顯微物鏡僅由少數(shù)兒塊透鏡組

成，難于消除物像的像差和色差。近代的顯微物鏡已由一套精密磨制的透鏡組成，B

能較好地消除像差相色差，并能將物體放大1500—2000倍。

1.1.1顯微鏡的構(gòu)造

普通光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造可分為兩大部分：一為機械裝置，一為光學(xué)系統(tǒng)，兩部分

很好地配合.才能發(fā)揮顯微鏡的作用。

1.1.1.1顯微鏡的機械裝置

顯微鏡的機械裝置包括鏡座、鏡筒、物鏡轉(zhuǎn)換器、載物臺、推動器、粗螺旋、微

動螺旋等部件

1）鏡座：是顯微鏡的基本文架，由底座和鏡臂兩部分組成。在其上部連接有載

物臺和鏡簡，是用于安裝光學(xué)放大系統(tǒng)部件的基礎(chǔ)。

2）鏡簡鏡筒上接接目鏡，下接轉(zhuǎn)換器，形成接目鏡與接物鏡（裝在轉(zhuǎn)換器下）

間的暗室：

從鏡筒的上緣到物鏡轉(zhuǎn)換器螺旋口之間的距離稱為機械簡長，因為物鏡的放大率

是對一定的鏡簡長度而言的，隨著鏡筒長度變化，不僅放大倍率隨之變化，而且成像

質(zhì)量也受到影響。因此，使用顯微鏡時，不能任意改變鏡筒長度。國際上將顯微鏡

的標準筒長定為160mm，此數(shù)字標在物鏡的外殼上。

3）物鏡轉(zhuǎn)換器物鏡轉(zhuǎn)換器上可安裝3-4個物鏡.一般是3個物鏡（低倍、高倍、

油鏡），Nikon顯微鏡裝有4個物鏡。轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器可以按需要將其中的任何一個接物鏡

和鏡簡接通，與鏡筒上面的目鏡構(gòu)成一個放大系統(tǒng)。

4）載物臺載物臺中央有一孔，為光線通路。在載物臺上裝有彈簧標本夾和推動

器。

5）推動器是移動標本的機械裝資，由一橫一縱兩個推進齒軸和齒條構(gòu)成。

6）粗調(diào)螺旋粗調(diào)螺旋用于粗放調(diào)節(jié)物鏡和標本的距離.老式顯微鏡粗調(diào)螺旋向

前扭，鏡頭下降接近標本。新近出產(chǎn)的顯微鏡（如Nikon顯微鏡）鏡檢時，右手向前扭

載物臺上升，讓標本接近物鏡，反之則下降.標本遠離物鏡。

7）微調(diào)螺旋用粗調(diào)螺旋只能粗放地調(diào)節(jié)焦距，難于觀察到清晰的物像.

因而需要用微調(diào)螺旋做進一步調(diào)節(jié)。微調(diào)螺旋每轉(zhuǎn)一圈鏡筒移動0.1mm。新近出產(chǎn)的

顯微鏡的粗調(diào)螺旋和微調(diào)螺旋是共軸的。

2顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)

顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)由反光鏡，聚光器，物鏡，目鏡等組成，光學(xué)系統(tǒng)使標本物像

放大，形成倒立的放大物像。

1）反光鏡早期的普通光學(xué)顯微鏡常用自然光檢視標本，在鏡座上裝有反光鏡。

反光鏡是由一平面和另一凹面的鏡子組成，可以將投射在它上面的光線反射到聚光器

透鏡的中央，照明標本。不用聚光器時用凹面鏡也能起匯聚光線的作用。用聚光器時,

一般都用平面鏡。新近出產(chǎn)的研究顯微鏡鏡座上裝有光源，并有電流調(diào)節(jié)螺旋，可通

過調(diào)節(jié)電流大小來調(diào)節(jié)光照強度。

2）聚光器聚光器在載物臺下面，一般由聚光透鏡、虹彩光圈和升降螺旋組成。

聚光器可分為明視場聚光器和暗視場聚光器。普通光學(xué)顯微鏡配置的都是明視場聚光

器。聚光器安裝在載物臺下，其作用是將光源經(jīng)反光鏡反射來的光線聚焦于樣品上，

以得到最強的照明，使物像獲得明亮清晰的效果。聚光器在光學(xué)系統(tǒng)中的位置可以通

過其上的兩個調(diào)節(jié)螺桿將光圈調(diào)小后進行聚中調(diào)節(jié)。其高低也可以調(diào)節(jié)，使焦點落在

被檢物體上，以得到最大亮度。?般聚光器的焦點在其上方1.25mm處，而其上升限

度為載物臺平面下方0.1mm。因此，要求使用的載玻片厚度應(yīng)在0.8—1.2mm之間，

否則被檢樣品不在焦點上，影響鏡儉效果。聚光器前透鏡組前面還裝有虹彩光圈，它

可以開大和縮小，影響成像的分辨力和反差，若將虹彩光因開放過大，超過物鏡的數(shù)

值孔徑時，便產(chǎn)生光班；若收縮虹彩光圈過小，雖反差增大，但分辨力下降。因此，

在觀察時一般應(yīng)將虹彩光圈調(diào)節(jié)開啟到視場周緣的外切處.使不在視場內(nèi)的物體得不

到任何光線的照明，以避免散射光的干擾。

3）物鏡安裝在鏡筒前端轉(zhuǎn)換器上的物鏡利用入射光線使被檢物進行第二次成

像，物鏡成像的質(zhì)量對分辨率有著決定性的影響。物鏡的性能取決于物鏡的數(shù)值孔徑

（mumerical叩eature簡寫為NA）,每個物鏡的數(shù)值孔徑都標在物鏡的外殼上，數(shù)值孔

徑越大，物鏡的性能越好。

1.1.2顯微鏡的使用方法及注意事項：

顯微鏡結(jié)構(gòu)精密，使用時必須小心仔細，應(yīng)按照以下操作步驟進行：

1.1.2.1觀察前的準備

1）顯微鏡從顯微鏡柜或鏡箱內(nèi)拿出時，要用右手緊握鏡臂，左手托住鏡座，平穩(wěn)

地將顯微鏡搬運到實驗桌上。

2）將顯微鏡放在自己身體的左前方，離桌子邊緣約10cm左右，右側(cè)可放記錄本

或繪圖紙。

3）調(diào)節(jié)光照。對于不帶光源的顯微鏡、可利用燈光或自然光通過反光鏡來調(diào)節(jié)光

照，但不能用直射陽光，直射陽光會影響物像的清晰并刺激眼睛。將10x物鏡轉(zhuǎn)入通

光口，將聚光器上的虹彩光圈打開到最大位置，用左眼觀察目鏡中視野的亮度，轉(zhuǎn)動

反光鏡，使視野的光照達到最明殼最均勻為止。光線較強時，用平面反光鏡，光線較

弱時，用凹面反光鏡。對于自帶光源的顯微鏡，可通過調(diào)節(jié)電阻旋鈕來調(diào)節(jié)光照強弱。

4）光軸中心調(diào)節(jié)：顯微鏡在觀察時，其光學(xué)系統(tǒng)卡的光源、聚光器、物鏡和目鏡

的光軸及光闌的中心必須跟顯微鏡的光軸在同一直線上

5）低倍鏡觀察：鏡檢任何標本都要養(yǎng)成必須先用低倍鏡觀察的習(xí)慣。因為低倍

鏡視野較大，易于發(fā)現(xiàn)目標和確定檢查的位置。將標本片放置在載物臺上，用標本夾

夾住，移動推動器，使被觀察的標本處在物鏡正下方、轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)旋紐，使物鏡調(diào)至

接近標本處、用目鏡觀察并同時用粗調(diào)節(jié)旋鈕慢慢升起載物臺（或下降鏡筒），直至物

像出現(xiàn).再用細調(diào)節(jié)旋鈕使物像清晰為止。用推動器移動標本片，找到合適的標本物

像并將它移到視野中央進行觀察。

6）高倍鏡觀察：在低倍物鏡觀察的基礎(chǔ)上轉(zhuǎn)換高倍物鏡。較好的顯微鏡，低倍、

高倍物鏡是同焦的，在正常情況下，高信物鏡的轉(zhuǎn)換不應(yīng)碰到載玻片或其上的蓋破片屋

若使用不同型號的物鏡，在轉(zhuǎn)換物鏡時要從側(cè)面觀察，避免鏡頭與玻片相撞。然后從

目鏡觀察，調(diào)節(jié)光照，使亮度適中，緩慢調(diào)節(jié)粗調(diào)節(jié)旋鈕，使載物臺上升（或鏡

筒下降），直至物像出現(xiàn)，再用細調(diào)節(jié)旋紐調(diào)至物像清晰為止，找到需觀察的部

位，并移到視野中央進行觀察。

1.1.3油鏡的觀察

1.1.3.1油浸系的原理：因香柏油具有與玻璃相似的折射率（1.515,玻璃：1.52）,鏡

檢時，滴加香柏油的作用是使光源近可能多的進入物鏡中，避免光線通過折光率低的

空氣（1.0）而散失光線，因而提高物鏡的分辨率，使物象明亮清晰。油浸物鏡的工

作距離（指物鏡前透鏡的表面到被撿物體之間的距離）很短，--般在0.2mm以內(nèi)，再加

上一些光學(xué)顯微鏡的油浸物鏡沒有“彈簧裝置“，因此使用油侵物鏡時要特別小心，避

免由于“調(diào)焦”不慎而壓碎標本片并使物鏡受損。

1.1.3.2使用油鏡按以下步驟操作：

1）先用粗調(diào)節(jié)旋紐將載物臺下降（或?qū)㈢R筒提升）約2cm,并將高倍鏡轉(zhuǎn)出。

2）在玻片標本的鏡檢部位滴上--滴香柏油。

3）從側(cè)面注視，用粗調(diào)節(jié)旋鈕將載物臺緩援地上升（或?qū)㈢R筒提升），將浸物鏡浸

入香柏油中、使鏡頭兒乎氣標本接觸。

4）從接目鏡內(nèi)觀察，放大視場光闌及聚光器上的虹彩光圈（帶視場光闌油鏡開大

視場光闌），上調(diào)聚光器至頂位，使光線充分照明。用粗調(diào)節(jié)旋鈕將載物臺徐徐下降（或

鏡筒上升），當出現(xiàn)物像一閃后改用細調(diào)節(jié)旋鈕調(diào)至圖像清晰為止。如油鏡已離開油

面而仍術(shù)見到物像.必須再從側(cè)面觀察，重復(fù)上述操作。

5）觀察完畢，下降載物臺.將油鏡頭轉(zhuǎn)出，先用擦鏡紙擦去鏡頭上的油，再用擦

鏡紙蘸少許乙酸乙醇混合液（乙醛2份，無水乙醇3份）或二甲苯，擦去鏡頭上殘留油

跡，最后再用擦鏡紙擦拭2—3下即可（注意要向一個方向擦拭）。

6）將各部分還原，轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換器，使低倍物鏡與載物臺通光孔相對，再將載物

臺下降至最低，降下聚光器.反光鏡與聚光器垂直，用一個干凈手帕將接目鏡蓋好，

以免目鏡頭沾污灰塵。最后用柔軟紗布清潔載物臺等機械部分，然后將顯微鏡放回柜

內(nèi)或鏡箱中。

L2恒溫（振蕩）培養(yǎng)箱的使用

1.3離心機的使用

1.4高壓滅菌器的使用

1.5細菌濾器的使用

第五講：細菌基本形態(tài)及構(gòu)造的觀察

試驗?zāi)康模?認識細菌的基本形態(tài)和一些構(gòu)造

2通過細菌標本片的觀察，進一步熟悉光學(xué)顯微鏡的使用

試驗材料：顯微鏡、香柏油、二甲苯、擦鏡紙。

細菌染色標本片：葡萄球菌、大腸桿菌、巴氏桿菌、炭疽桿菌等。

試驗方法：1）準備：安置顯微鏡0調(diào)節(jié)視野亮度。調(diào)節(jié)雙筒目鏡間距。標本片的放

置。鏡檢。

2）觀察：于標本片的欲檢部位，滴加香柏油一滴，將標本片用片夾固定

于載物臺正中，用推進器將觀察區(qū)置于物鏡正下方，依次用高倍鏡。油鏡觀察。包括

葡萄球菌、大腸桿菌、巴氏桿菌及炭疽桿菌的形態(tài)和結(jié)構(gòu)

3）顯微鏡的保養(yǎng)：油鏡用畢，應(yīng)以擦鏡紙拭去鏡頭上的香柏油，如油已

干或物鏡模糊不清，可滴加少量二甲苯于擦鏡紙上，拭凈油鏡頭，并隨即用擦鏡紙拭

去二甲苯，然后，把低倍鏡轉(zhuǎn)至中央，高倍鏡和油鏡轉(zhuǎn)成“八”字形，調(diào)節(jié)粗調(diào)螺旋，

使載物臺和聚光器下降，關(guān)上電源,用綢布包好，裝入鏡箱，存放于陰晾干燥處，避

免受潮生銹。

試驗報告：用油鏡觀察標本，并作繪圖。

第六講：細菌的致病性

定義：病原菌：

條件性致病菌：

非病原性細菌：有些細菌在任何條件下均不引起疾病，稱為——（病原菌

與非病原菌的概念并非絕對的，而是相對的）

*細菌的致病性：（Pathogenicity）某種細菌在一定的條件下，能引起某種

動物患某種特定的疾病，以及引起這種疾病能力的大小，這兩方面的涵義統(tǒng)稱——o

如豬丹毒

衡量病原菌致病性強弱的因素：毒力：病原性細菌致病性的強弱稱為毒力。（同

一種病原菌的不同菌株之間，其毒力和致病性是不同的，由強毒、弱毒、無毒之分）

*1構(gòu)成病原菌毒力的要素侵襲力、毒素

1.1侵襲力：

定義：病原菌突破機體的防御機構(gòu)，在體內(nèi)生長、繁殖、擴散、蔓延的能力。（對

機體無直接的毒害作用，只是幫助侵入體內(nèi)的細菌抵抗機體的防御功能，便于細菌在

體內(nèi)擴大繁殖，引起傳染）

作用：1）附著上皮細胞：是靠菌毛和M蛋白質(zhì)等細菌表面結(jié)構(gòu)的作用完成的,

如果細菌缺乏附著能力，就會被氣管的纖毛運動和腸蠕動排出體外。如大腸桿菌靠菌

毛附著與腸粘膜上，產(chǎn)生腸毒素一?起腹瀉。

2）抗吞噬作用：吞噬細胞的吞噬作用是構(gòu)成機體的防御功能，病原菌產(chǎn)

生的侵襲力能夠抵抗吞噬細胞的吞噬作用；有莢膜的細菌（肺炎球菌）不易被吞

噬細胞吞噬。

3）促進擴散能力：病原菌能否在體內(nèi)繁殖，還與破壞組織結(jié)構(gòu)，擴散轉(zhuǎn)

移能力有關(guān)，如化膿性葡萄球菌能產(chǎn)生透明質(zhì)酸酶（擴散因子），溶解結(jié)締組織

中的透明質(zhì)酸，增加通透性。

1.2毒素

定義：許多病原菌在其代謝過程中可以合成一些對機體呈現(xiàn)毒害作用的物質(zhì)，稱

為毒素。

「外毒素：某些G+及少數(shù)G和霉菌在代謝過程中合成并分泌到細菌細胞之外

分吊的周圍環(huán)境中的毒素。外毒素一般是蛋白質(zhì)，毒性強，不耐熱,

〔60-80℃30min破壞，毒性減弱，能被蛋白酶分解、遇見酸

發(fā)生變形，能被氧化及和紫外線破壞。在0.3-0.5%的甲醛作

用下可以脫毒成為類毒素，但仍保持抗原性。

內(nèi)毒素：某些G繁殖中所合成并存在于細菌細胞壁最外層的脂多糖部分，

其本質(zhì)就是細胞壁結(jié)構(gòu)的一部分，他不分泌到細胞之外，只有在

細菌細胞死亡、自溶或人為破壞細菌細胞完整性之后方能釋放出

來。耐熱160℃2-4h破壞，毒性較弱，抗原性低，經(jīng)甲醛處理不

能變成類毒素

表：內(nèi)毒素與外茬?素比較表

外毒素內(nèi)毒素

來源G+及少數(shù)GG-

存在部位從細菌釋放出來細胞壁成分

化學(xué)性質(zhì)蛋白質(zhì)類脂多糖

穩(wěn)定性60-80℃30min破壞160r2-4h破壞

毒性較強，對組織具有選擇性較弱，無選擇性

抗原性能產(chǎn)生抗毒素，可脫毒為類毒素能產(chǎn)生抗內(nèi)毒素抗體，不能成類毒素

1.3病原菌毒力的測定

毒力的測定是試驗室常用技術(shù)，測定病原菌的毒力是采用遞減劑量的試驗材料

（活的細菌或毒素），感染易感動物（包括雞胚和培養(yǎng)細胞）進行的，每次試驗時必

須注意試驗動物的性別、年齡、體重、試驗材料的劑量、感染途徑等其他因素。

1.3.1表示病原菌毒力的單位

「最小致死量（MLD））：能使特定的試驗動物于感染后的一定時間內(nèi)發(fā)生死亡

的最小活菌數(shù)量或毒素量

半數(shù)致死量（LD）：在一定時間內(nèi)能使參與試驗的半數(shù)試驗動物發(fā)生死亡所

（50用的活菌數(shù)量或毒素量

最小感染量（MID）：能使試驗動物發(fā)生感染的最小活菌數(shù)量或毒素量

半數(shù)感染量（ID50）：能使半數(shù)試驗動物發(fā)生感染的最小活菌數(shù)量或毒素量

2傳染

2.1定義：當病原微生物侵入機體，并在其體內(nèi)生存繁殖，在一定條件下打破了正常

生理平衡，對機體造成一定的病理損害過程即為——

*2.2致動物傳染的必要條件

傳染過程的發(fā)生與發(fā)展，首先必須有病原微生物的存在，沒有病原微生物就不會

發(fā)生任何傳染；其次，沒有易感動物，病源微生物也不會發(fā)生發(fā)揮其致病作用；另外

病原微生物進入易感動物的途徑是否合適也也決定了傳染的發(fā)生。因此,病源微生物、

易感動物、傳染途徑是引起傳染的必不可少的三個條件。止匕外，外界環(huán)境條件即可直

接影響病原微生物，也對動物機體的抵抗力有一定影響，因此外界環(huán)境對傳染的發(fā)生

和發(fā)展也有重要作用。

1）病原細菌的毒力數(shù)量：病原菌必須有強大的毒力和數(shù)量才能突破動物機體的

防御機構(gòu)，進入動物機體擴散、繁殖。

2）動物機體的易感性：不同種類的動物對不同的病原菌有不同的易感性。如：馬

鼻疽桿菌。

3）傳染途徑（入侵門戶）：病原菌必須有適當?shù)娜肭珠T戶，才能引起傳染，如破

傷風(fēng)只有通過創(chuàng)傷化膿組織深層，厭氧條件下才能生長繁殖；炭疽桿菌通過破損的皮

膚、呼吸道、消化道侵入機體。

4）外界環(huán)境條件的影響：使動物機體的抵抗力降低。

2.3傳染的類型：（傳染的發(fā)生、發(fā)展和結(jié)局）

2.3.1明顯傳染：（臨床感染或傳染?。呵秩霗C體的病源菌毒力足夠強，數(shù)量多，而

機體的免疫力薄弱時，病原菌在機體內(nèi)生長繁殖產(chǎn)生毒性物質(zhì)，并取得優(yōu)勢地位，致

使機體不能維護其內(nèi)部環(huán)境的相對穩(wěn)定性，便表現(xiàn)出明顯的臨床癥狀，叫明顯傳染。

根據(jù)明顯傳染的發(fā)生范圍：1）局部傳染：病原菌侵入機體后，在一定部位定居

下來，生長繁殖，產(chǎn)生毒性物質(zhì)，引起局部病害的過程。（由于病原菌的毒力不大，

數(shù)量不多，而機體的免疫力強，將入侵的病源菌限制于局部，阻止擴散蔓延，并將其

清除消滅。）

2）全身傳染：病原菌毒力大，機體的免疫功能薄弱,

不能將病源菌限制于局部，以致向周圍擴散，經(jīng)淋巴道或者直接侵入血流，散布到適

合病源菌生長繁殖的靶器官（肝、脾、肺、腸、腦、皮膚等），引起全身傳染。

（1）菌血癥（Bacteremia）：病原菌自局部病灶不斷的侵入血流中，由于受到體

內(nèi)細胞和體液的免疫作用，病原菌不能在血流中大量生長繁殖，只能短暫的經(jīng)過,

但也能傳染到體內(nèi)其他部位。如：傷寒的初期

（2）敗血癥（Septicemia）：感染的局部防御反應(yīng)比較弱，不能使病源菌局限化,

大量侵入血流，并在血流中生長繁殖，引起白細胞總數(shù)增高。如：炭疽病。

（3）毒血癥（Toxemia）：病原菌在入侵局部生長繁殖的過程中，將其產(chǎn)生的毒

性物質(zhì)大量侵入血液和淋巴液中，引起獨特的中毒癥狀，細菌并不侵入血流。如：破

傷風(fēng)。

（4）膿毒敗血癥（Pyosepticemia）：感染化膿菌發(fā)生敗血癥的同時，化膿菌還沿

血流進入其他臟器，引起化膿性病變的全省感染。如：葡萄球菌感染

2.3.2隱性傳染（無癥狀傳染）：侵入機體的病源菌毒力不強，數(shù)量不多，而機體的免

疫力強時，病原菌可迅速被消滅，如果不能完全被消滅，則可在機體的一定部位生長

繁殖，造成輕度的病理損害，但由于機體的免疫力強，能維持內(nèi)部環(huán)境的相對穩(wěn)定性,

在臨床上不出現(xiàn)或僅出現(xiàn)不明顯的臨床癥狀（機體往往通過隱性傳染獲得特異性免疫

力，防止同種病原菌的再次傳染）

2.3.3帶菌現(xiàn)象：病原菌侵入動物機體，并不引起傳染，只呈現(xiàn)無害寄生狀態(tài)；或者

動物發(fā)病痊愈及臨床康復(fù)后的一定期間內(nèi)，機體內(nèi)仍有病源菌存在，并不斷排菌。（健

康帶菌者；恢復(fù)期帶菌者）。臨床意義

2.3.4不傳染：動物對該種病原菌不易感，又很強的免疫力，后病源菌的毒力低，數(shù)

量不足，侵入途徑不當，在這些情況下，病原菌即使侵入機體，不發(fā)生生長繁殖，被

迅速消滅。

3細菌的變異性

細菌和其他生物?樣也具有變異性和遺傳性。

3.1遺傳性：是親代性狀與子代的相似性，也就是細菌在相對穩(wěn)定的生活條件下，其

形態(tài)，結(jié)構(gòu)、生長繁殖代謝、毒力、抗原性、以及對藥物的敏感形狀等都可保持相對

穩(wěn)定，并通過遺傳基因的復(fù)制將親代的特性傳給下一代。

*3.2細菌的變異：微生物物種親代與子代之間，子代個體之間，存在著某種程度的

差異，這種現(xiàn)象通稱為變異。變異是微生物產(chǎn)生變異和新種，促進自身進化的依據(jù)。

微生物表現(xiàn)的變異現(xiàn)象一方面是由于環(huán)境條件引起的，這種改變一般不遺傳給后代，

當環(huán)境條件恢復(fù)正常時，菌種就可恢復(fù)原來的形狀，這種變異為非遺傳性變異；另一

方面菌體遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變,這種形狀改變可遺傳給后代