65.020B

01DB37

37/T

4168—2020全生物降解農(nóng)用地面覆蓋薄膜土壤環(huán)境安全監(jiān)測技術(shù)規(guī)程Technical

specification

soil

of

biodegradableagricultural

film

10

山東省市場監(jiān)督管理局 發(fā)

布DB37/T

4168—2020 本標準按照GB/T

1.1—給出的規(guī)則起草。本標準由山東省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并組織實施。本標準由山東省農(nóng)業(yè)標準化技術(shù)委員會種植業(yè)標準化分技術(shù)委員會歸口。村能源總站、山東省農(nóng)業(yè)科學研究院花生研究所。正鋒。DB37/T

4168—20201 范圍本標準規(guī)定了應用全生物降解農(nóng)用薄膜覆蓋土壤環(huán)境安全試驗、監(jiān)測指標與方法等技術(shù)內(nèi)容。本標準適用于應用全生物降解農(nóng)用薄膜的農(nóng)田土壤環(huán)境安全試驗與監(jiān)測。2 規(guī)范性引用文件件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。HJ

615—2011 土壤 有機碳的測定 重鉻酸鉀氧化-分光光度法NY/T

土壤檢測 第2部分：土壤的測定NY/T

土壤檢測第4部分：土壤容重的測定NY/T

土壤檢測 第16部分：土壤水溶性鹽總量的測定NY/T

土壤檢測第19部分：土壤水穩(wěn)性大團聚體組成的測定3 術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1全生物降解農(nóng)用地面覆蓋薄膜 biodegradable

mulching

film

for

agricultural

uses3.2原狀土樣farmland

soil

相對保持田間原狀結(jié)構(gòu)和狀態(tài)的土壤樣品。3.3混合土樣 farmland

soil

sample在采樣點采集若干點的土壤，經(jīng)均勻混合后的土壤樣品。3.4土壤微生物活性

activity

of

farmland

soil土壤微生物代謝能力表現(xiàn)，以土壤酶活性來表征。3.5膜片（樣）殘留率 residual

rate

mulch

film

sample范區(qū)面積不小于1

m范區(qū)面積不小于1

m

m

667

m

50

m

。生物降解薄膜試驗膜片（樣）在一定深度填埋一定時間后，膜片（樣）殘留重量占原始膜片（樣）重量的百分比。4 試驗設(shè)計4.1 資料收集4.1.1 自然條件等；農(nóng)作物種類、布局、面積、產(chǎn)量、耕作制度等。4.1.2 土壤環(huán)境條件面積、侵蝕模數(shù)等。4.2 試驗設(shè)計與選點4.2.1 農(nóng)田覆膜試驗選擇交通便利、土地使用權(quán)持久明晰、集中連片、代表當?shù)厣a(chǎn)實際的主要覆膜栽培作物生產(chǎn)區(qū)，作為長期定位試驗示范區(qū)。覆膜處理應包括全生物降解農(nóng)用地面覆蓋薄膜、聚乙烯農(nóng)用地面覆蓋薄膜、裸地處理，每個處理三次重復，連續(xù)3年定點使用同種薄膜，邊行設(shè)置保護行。大田作物選擇花生，示2 2 2 24.2.2 薄膜填埋試驗將降解膜樣品剪成10

cm×30

cm大小的條狀并稱重記錄，夾入50目20

cm×40

的兩個尼龍網(wǎng)片中，分別埋入深度為10

cm和20

cm土層中，每個深度分別填埋條膜片，埋土后每隔90

d取出并測定降解膜的膜片（樣）殘留率，持續(xù)觀測64.3 土壤樣品采集與制備4.3.1 農(nóng)田土壤樣品采集4.3.1.1 采樣要求肥整地前開展。土壤采集點應分布均勻，土地平整后隨機取樣。土樣采集深度為0

～10

cm及

～20

cm。4.3.1.2 原狀土樣采集測定土壤容重時，采用環(huán)刀在各土層取樣，帶回室內(nèi)進行相應處理。測定團聚體結(jié)構(gòu)時，采取一整塊保持原狀的土壤，剝?nèi)ネ寥辣砻嬷苯优c土鍬接觸而已變形的部分，均勻地取內(nèi)部未變形的土樣（約2

kg），置于封閉的木盒或塑料盒內(nèi)，運回室內(nèi)。4.3.1.3 混合土樣采集DB37/T

4168—2020采用土鉆取土。根據(jù)小區(qū)具體形狀確定采樣方法，矩形地塊采用雙對角線五點法（如圖1）。將同分法將土壤樣品保留600

g裝入蚯蚓培養(yǎng)箱，另一份過2

篩，并采用四分法將土壤樣品保留

g，分4

風干。圖1土壤混合樣雙對角線采集法圖示4.3.2 填埋試驗土壤制備可選擇人造土壤或自然土壤作為填埋試驗土壤：a)

自然土壤：收集農(nóng)田或森林表層自然土壤，以

5

篩網(wǎng)進行篩分，去除明顯的植物材料、石頭及其它惰性材料。記錄采樣時間、地點、經(jīng)緯度、生長或栽培作物品種；b)

1:2:7

40

%～60

%出現(xiàn)小水滴，且手中無積水），攪拌均勻，測量

pH

并用碳酸鈣調(diào)節(jié)

pH

至

～8.0，室溫下前再次測量并記錄土壤含水量和

pH

%～60

%，pH6.0～8.0，

比至

～40:1。4.4監(jiān)測指標及方法4.4.1 土壤容重按照NY/T

4.4.2 農(nóng)田土壤水穩(wěn)性團聚體測定按照NY/T

規(guī)定進行。4.4.3 土壤

按照NY/T

4.4.4 土壤鹽分按照NY/T

規(guī)定進行。DB37/T

4168—20204.4.5 土壤有機碳按照HJ

615規(guī)定進行。4.4.6 微生物量碳取5

g鮮土于280

mL5

mL葡萄糖溶液和0.025

g0.495

g葡萄糖放入

mL容量瓶，搖勻，倒入燒杯中，再將1.250

g滑石粉打入燒杯中，每次加溶液時攪拌）于22

℃培養(yǎng)2

h，測2呼吸量，根據(jù)CO2釋放速率與微生物量碳間的線性關(guān)系得出土壤中微生物量碳含量。按下式進行計算：

a280m

1061002hM

................................

(1)細菌為10細菌為10

～10

，真菌為

～10

，放線菌為

～

。每種稀釋度重復三次。y

——CO2呼吸量，

2/h/（

g土）]；a

——測出的M

——測量土的克數(shù)（gx

40

y0.37

.....................................

(2)式中：x

——生物量碳含量，（100

g土]。除上述方法外，也可采用氯仿薰蒸浸提法測定。4.4.7 微生物計數(shù)4.4.7.1 微生物測定種類采用平板計數(shù)法，測定土壤中細菌、真菌、放線菌總數(shù)。4.4.7.2 培養(yǎng)基的選擇

%0.5

%

%，pH7.0～7.2；

（121

℃），滅菌20

min。真菌采用馬丁氏培養(yǎng)基：2PO4

%，MgSO4?7H2O

0.05

%0.5

%1.0

%1.8

%，每1

培養(yǎng)基加1

%的孟加拉紅水溶液3.3

，臨用時每

培養(yǎng)基中加1

%硫酸鏈霉素0.3

mL（由于鏈霉素受熱易分解，所以必須待融化后的培養(yǎng)基溫度降至45

℃左右時加入），0.1

（121

℃），滅菌20

min。K放線菌采用改良高氏1號培養(yǎng)基：KNO3

0.1

%；FeSO4?7H2O，0.001

%，

24

0.05

%，MgSO4?7H2O

0.05

%，KNaCl

0.05

%，淀粉2.0

%，瓊脂

%；臨用時每300

培養(yǎng)基中加3

%的重鉻酸鉀1

mL以抑制細菌和霉菌的生長，

（

℃），滅菌20

min。4.4.7.3 樣品稀釋液的準備精確稱取相當于

g烘干土重的新鮮樣品，迅速倒入盛有～40粒玻璃球的

mL無菌水的三角瓶30

min1030

s-4 -6-1 -3 -54.4.7.4 接種庫七七

標準下載

M

.......................................

M

.......................................

(3)使用無菌吸管吸取土壤稀釋液，于相應編號的培養(yǎng)基平板上滴加

mL，然后涂布法涂勻。4.4.7.5 菌種培養(yǎng)28

30

3

d～5

d5

d～7

d，放線菌10

d～14

d。4.4.7.6 微生物數(shù)量計算計數(shù)并根據(jù)稀釋度計算每克土中相應種類微生物的數(shù)量。DW式中：M

——土壤微生物數(shù)量（cfu/gN

——菌落平均數(shù)，（皿）；D

——稀釋倍數(shù)；W

——土壤烘干質(zhì)量（g4.4.8 土壤酶活性土壤脲酶活性的測定方法采用苯酚鈉—次氯酸鈉比色法；土壤纖維素酶活性測定采用3，水楊酸比色法；土壤蔗糖酶活性測定采用3，5-二硝基水楊酸比色法；土壤磷酸酶活性測定采用磷酸苯二鈉比色法；土壤過氧化氫酶活性測定采用紫外吸收法。4.4.9蚯蚓安全性試驗4.4.9.1種類選擇實驗選擇赤子愛勝蚯蚓（Eisenia

fetida），體重范圍（0.45±0.05）g，體長90

mm～150

，體寬3

mm～5

，成年蚯蚓具有環(huán)帶。4.4.9.2 試驗操作在每個測試容器中填滿500

g的樣品，將個隨機選擇的蚯蚓放入每個測試容器中。用塑料薄膜封住測試容器口，加水至土壤最大持水量的40

%～60

%。根據(jù)需要，在整個測試期間定期供應蒸發(fā)的水。然后用解剖針把塑料薄膜扎孔后置于（20±1）

℃，濕度為80

%～85

%的恒溫箱中連續(xù)光照培養(yǎng)（光照強度為400

lx～800

于第7

d、

d、28

d28

d56

d損傷和蚓