第2課時(shí)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體學(xué)習(xí)目標(biāo)：1.闡明動(dòng)物細(xì)胞融合是指通過物理、化學(xué)或生物|學(xué)等手段.使兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。2.概述細(xì)胞融合技術(shù)是單克隆抗體制備的重要技術(shù)。3.收集單克隆抗體在臨床上實(shí)際應(yīng)用的資料,并進(jìn)行交流分享。學(xué)習(xí)內(nèi)容：一、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)1．定義：使個(gè)或個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成個(gè)細(xì)胞的技術(shù)。2．結(jié)果：融合后形成的雜交細(xì)胞具有原來個(gè)或個(gè)細(xì)胞的遺傳信息。3．原理：。4．誘導(dǎo)融合常用的方法：、、。(1)法是指用物理或化學(xué)手段使病毒或細(xì)菌失去感染能力，但并不破壞它們的抗原結(jié)構(gòu)。(2)不滅活的病毒會(huì)細(xì)胞，因而不能用于誘導(dǎo)細(xì)胞融合。(3)與植物原生質(zhì)體融合方法對(duì)比，誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的特有方法是。5．特點(diǎn)：突破了的局限，使成為可能。6．動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)涉及的變異類型是。7．應(yīng)用(1)間、屬間、科間，甚至動(dòng)物與植物之間的細(xì)胞融合都已獲得了成功。(2)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)已成為研究細(xì)胞、細(xì)胞、腫瘤和培育生物新品種等的重要手段。(3)利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)發(fā)展起來的技術(shù)，為制造單克隆抗體開辟了新途徑。二、單克隆抗體及其應(yīng)用1.常規(guī)抗體與單克隆抗體(1)常規(guī)抗體①產(chǎn)生:抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法是向動(dòng)物體內(nèi)反復(fù)注射,使動(dòng)物產(chǎn)生抗體,然后從動(dòng)物中分離所需抗體。②缺點(diǎn):產(chǎn)量、純度,制備的抗體特異性。(2)單克隆抗體①產(chǎn)生：由單一細(xì)胞增殖產(chǎn)生的單一。②優(yōu)點(diǎn):能準(zhǔn)確地識(shí)別的細(xì)微差異，與發(fā)生特異性結(jié)合,并且可以。2.單克隆抗體的制備(1)技術(shù)手段：和。(2)原理：和。(3)用B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的原因①每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌抗體，但一個(gè)B淋巴細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下無限增殖。②骨髓瘤細(xì)胞能在體外，但。③將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，得到的融合細(xì)胞能，并產(chǎn)生足夠。(4)制備過程①免疫處理提供B淋巴細(xì)胞的動(dòng)物必須預(yù)先注射進(jìn)行免疫處理，獲得能產(chǎn)生的B淋巴細(xì)胞。②誘導(dǎo)融合將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞用、、。其中法是動(dòng)物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)方式。③通過篩選獲得雜交瘤細(xì)胞用特定的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選：在該培養(yǎng)基上，未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有的細(xì)胞才能生長(zhǎng)。④通過篩選獲得能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞對(duì)上述經(jīng)選擇培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行和檢測(cè)，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需的細(xì)胞(抗體檢測(cè)呈性的雜交瘤細(xì)胞)。⑤獲取單克隆抗體的場(chǎng)所若在細(xì)胞培養(yǎng)液中進(jìn)行雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)，則從中提??；若在小鼠或其他動(dòng)物腹腔中培養(yǎng)，則從中提取。(5)單克隆抗體的應(yīng)用①被廣泛用作，在多種疾病的診斷和病原體鑒定中發(fā)揮重要作用。如：用抗人絨毛膜促性腺激素單克隆抗體做成的“早早孕診斷試劑盒”.在妊娠第8天就可以做出診斷,且準(zhǔn)確率高達(dá)90%以上。又如：利用或的單克隆抗體在特定組織中成像的技術(shù)，可定位診斷腫瘤、心血管畸形等疾病。②可以運(yùn)載抗體——藥物偶聯(lián)物(ADC)通過將與能特異性識(shí)別腫瘤抗原的結(jié)合，實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷。③自身也可用于治療疾病。答案一、1．兩多一2．兩多3．細(xì)胞膜的流動(dòng)性。4．PEG融合法、電融合法、滅活病毒誘導(dǎo)法(1)滅活病毒誘導(dǎo)(2)感染(3)滅活病毒誘導(dǎo)法5．有性雜交使遠(yuǎn)緣雜交6．染色體數(shù)目變異7．(1)種(2)遺傳免疫(3)雜交瘤二、1.(1)①某種抗原血清②低低差(2)①雜交瘤細(xì)胞特異性抗體②抗原特定抗原大量制備2.(1)動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(2)細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞增殖(3)①一種特異性不能②大量增殖產(chǎn)生抗體③大量增殖數(shù)量的特定抗體(4)①特定的抗原特定抗體