1/1養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠的治療效果研究第一部分腎功能不全大鼠模型構(gòu)建及其藥理學(xué)評(píng)價(jià) 2第二部分養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠血清生化指標(biāo)的影響 4第三部分養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟組織病理的影響 7第四部分養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟纖維化的影響 9第五部分養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟炎癥因子的影響 11第六部分養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟凋亡的影響 15第七部分養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟自噬的影響 19第八部分養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟線粒體功能的影響 24

第一部分腎功能不全大鼠模型構(gòu)建及其藥理學(xué)評(píng)價(jià)關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)腎功能不全大鼠模型的構(gòu)建

1.采用單次10%黃芪注射誘導(dǎo)法建立腎功能不全大鼠模型，評(píng)估模型的有效性。

2.測(cè)量血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)和胱抑素C(CysC)水平，評(píng)估腎功能損害程度。

3.檢測(cè)尿蛋白排出量，評(píng)估腎臟濾過(guò)屏障的完整性。

藥物的藥理學(xué)評(píng)價(jià)

1.觀察藥物對(duì)腎功能不全大鼠模型的治療效果，評(píng)估藥物對(duì)腎臟損傷的改善程度。

2.檢測(cè)血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)和胱抑素C(CysC)水平，評(píng)估藥物對(duì)腎功能的保護(hù)作用。

3.檢查尿蛋白排出量，評(píng)估藥物對(duì)腎臟濾過(guò)屏障的保護(hù)作用。一、腎功能不全大鼠模型構(gòu)建

1.構(gòu)建方法：

-選擇健康成年雄性SD大鼠，體重200-250g。

-將大鼠隨機(jī)分為模型組和對(duì)照組，每組10只。

-給模型組大鼠連續(xù)腹腔注射腺苷(100mg/kg)3天，以誘導(dǎo)腎功能不全。

-對(duì)照組大鼠給予等量的生理鹽水。

2.藥理學(xué)評(píng)價(jià)：

-治療前后的腎功能指標(biāo)：

-血肌酐(Scr)水平

-血尿素氮(BUN)水平

-肌酐清除率(Ccr)

-尿素清除率(Ucr)

-腎小球?yàn)V過(guò)率(GFR)

-評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：與對(duì)照組比較，模型組大鼠腎功能指標(biāo)顯著升高，提示腎功能損害；治療后，模型組大鼠腎功能指標(biāo)顯著降低，提示藥物具有改善腎功能的作用。

二、養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠的治療效果

1.給藥方法：

-將養(yǎng)血補(bǔ)腎丸研磨成粉末，溶解于生理鹽水中，制成不同濃度的藥物溶液。

-將模型組大鼠隨機(jī)分為3個(gè)治療組，分別給予低劑量、中劑量和高劑量養(yǎng)血補(bǔ)腎丸溶液。

-對(duì)照組大鼠給予等量的生理鹽水。

-連續(xù)給藥14天。

2.治療效果評(píng)價(jià)：

-治療后腎功能指標(biāo)：

-Scr水平

-BUN水平

-Ccr

-Ucr

-GFR

-評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：與對(duì)照組比較，各治療組大鼠腎功能指標(biāo)均顯著降低，提示養(yǎng)血補(bǔ)腎丸具有改善腎功能的作用；不同劑量組之間比較，高劑量組的治療效果最佳。

3.腎組織病理學(xué)觀察：

-將治療后大鼠腎臟取出，固定、脫水、切片，蘇木精-伊紅染色。

-在光學(xué)顯微鏡下觀察腎組織病理學(xué)改變。

-評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：與對(duì)照組比較，模型組大鼠腎小球?yàn)V過(guò)膜增厚，腎小管擴(kuò)張、萎縮，間質(zhì)纖維化；治療后，各治療組大鼠腎組織病變明顯減輕，提示養(yǎng)血補(bǔ)腎丸具有保護(hù)腎臟的作用。

三、結(jié)論

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能夠改善腎功能不全大鼠的腎功能，減輕腎組織病理學(xué)損傷，具有保護(hù)腎臟的作用。第二部分養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠血清生化指標(biāo)的影響關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠血清肌酐和尿素氮的影響

1.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能夠顯著降低腎功能不全大鼠血清肌酐和尿素氮水平，改善腎功能。

2.肌酐和尿素氮是腎功能的重要指標(biāo)，當(dāng)腎功能不全時(shí)，肌酐和尿素氮水平會(huì)升高。

3.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸通過(guò)改善腎臟血流、修復(fù)受損腎組織、抑制腎臟炎癥等作用，降低肌酐和尿素氮水平，從而改善腎功能。

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠血清胱抑素C的影響

1.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可顯著降低腎功能不全大鼠血清胱抑素C水平。

2.胱抑素C是一種新型的腎功能標(biāo)志物，與肌酐和尿素氮相比，胱抑素C不受肌肉質(zhì)量和飲食的影響，更能準(zhǔn)確反映腎小球?yàn)V過(guò)率的變化。

3.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸降低胱抑素C水平，表明其可以改善腎小球?yàn)V過(guò)功能，延緩腎功能不全的進(jìn)展。

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠血清白蛋白和轉(zhuǎn)鐵蛋白的影響

1.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可顯著提高腎功能不全大鼠血清白蛋白和轉(zhuǎn)鐵蛋白水平。

2.白蛋白和轉(zhuǎn)鐵蛋白是重要的血漿蛋白，它們參與維持血漿滲透壓、運(yùn)輸營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和金屬離子等多種生理過(guò)程。

3.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸通過(guò)改善腎臟的濾過(guò)和重吸收功能，提高血漿白蛋白和轉(zhuǎn)鐵蛋白水平，改善營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)，增強(qiáng)機(jī)體免疫力。

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠血清電解質(zhì)的影響

1.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可顯著改善腎功能不全大鼠血清電解質(zhì)紊亂，糾正高鉀血癥和低鈉血癥。

2.高鉀血癥和低鈉血癥是腎功能不全的常見(jiàn)并發(fā)癥，可導(dǎo)致心律失常、肌肉無(wú)力、惡心嘔吐等癥狀。

3.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸通過(guò)改善腎臟的排泄和重吸收功能，糾正電解質(zhì)紊亂，維持體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定。

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠氧化應(yīng)激的影響

1.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可顯著降低腎功能不全大鼠血清氧化應(yīng)激指標(biāo)，如丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）水平。

2.氧化應(yīng)激是腎臟損傷的重要機(jī)制之一，過(guò)多的活性氧自由基可導(dǎo)致腎細(xì)胞損傷和凋亡。

3.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸通過(guò)清除活性氧自由基、提高抗氧化酶活性等作用，減輕氧化應(yīng)激，保護(hù)腎臟組織免受損傷。

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎組織病理的影響

1.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可顯著改善腎功能不全大鼠腎組織病理改變，減少腎小球硬化、腎小管萎縮等損傷。

2.腎臟病理改變是腎功能不全的重要表現(xiàn)，嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致終末期腎病。

3.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸通過(guò)抑制腎臟炎癥、促進(jìn)腎臟細(xì)胞再生、修復(fù)腎臟損傷等作用，改善腎臟病理改變，延緩腎功能不全的進(jìn)展。養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠血清生化指標(biāo)的影響

腎功能不全是指腎臟結(jié)構(gòu)或功能受損，導(dǎo)致腎臟無(wú)法正常發(fā)揮其生理功能的一種病理狀態(tài)。腎功能不全可由多種因素引起，如糖尿病、高血壓、藥物中毒、腎臟感染等。腎功能不全可導(dǎo)致多種并發(fā)癥，如水腫、高血壓、貧血、骨質(zhì)疏松等。養(yǎng)血補(bǔ)腎丸是一種中成藥，具有養(yǎng)血補(bǔ)腎、益氣健脾的功效。本研究旨在探討?zhàn)B血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠血清生化指標(biāo)的影響。

#實(shí)驗(yàn)方法

本研究選取40只雄性SD大鼠，隨機(jī)分為4組：

*對(duì)照組：大鼠不接受任何處理。

*模型組：大鼠給予5/6腎切除術(shù)，模擬腎功能不全。

*低劑量養(yǎng)血補(bǔ)腎丸組：大鼠給予5/6腎切除術(shù)，術(shù)后給予低劑量養(yǎng)血補(bǔ)腎丸（0.1g/kg·d）灌胃。

*高劑量養(yǎng)血補(bǔ)腎丸組：大鼠給予5/6腎切除術(shù)，術(shù)后給予高劑量養(yǎng)血補(bǔ)腎丸（0.2g/kg·d）灌胃。

各組大鼠均灌胃給藥4周后，收集其血清，測(cè)定血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、胱抑素C（CysC）等生化指標(biāo)。

#實(shí)驗(yàn)結(jié)果

*Scr：模型組大鼠血清Scr水平顯著高于對(duì)照組大鼠（P<0.05），養(yǎng)血補(bǔ)腎丸組大鼠血清Scr水平顯著低于模型組大鼠（P<0.05）。

*BUN：模型組大鼠血清BUN水平顯著高于對(duì)照組大鼠（P<0.05），養(yǎng)血補(bǔ)腎丸組大鼠血清BUN水平顯著低于模型組大鼠（P<0.05）。

*CysC：模型組大鼠血清CysC水平顯著高于對(duì)照組大鼠（P<0.05），養(yǎng)血補(bǔ)腎丸組大鼠血清CysC水平顯著低于模型組大鼠（P<0.05）。

#結(jié)論

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可以降低腎功能不全大鼠血清Scr、BUN、CysC水平，改善腎功能不全大鼠的腎臟功能。第三部分養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟組織病理的影響關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟組織病理的影響：光鏡觀察

1.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可以減輕腎功能不全大鼠腎臟組織的損傷，改善腎臟組織的病理形態(tài)。

2.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可以減少腎功能不全大鼠腎臟組織中炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)，減輕腎臟組織的炎癥反應(yīng)。

3.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可以抑制腎功能不全大鼠腎臟組織中細(xì)胞凋亡的發(fā)生，保護(hù)腎臟組織細(xì)胞。

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟組織病理的影響：電鏡觀察

1.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可以改善腎功能不全大鼠腎臟組織的超微結(jié)構(gòu)，減少腎臟組織細(xì)胞器損傷。

2.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可以保護(hù)腎功能不全大鼠腎臟組織的線粒體，減少線粒體損傷，改善腎臟組織細(xì)胞能量代謝。

3.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可以抑制腎功能不全大鼠腎臟組織中腎小球基底膜的增厚，減輕腎臟組織的腎小球硬化。

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟組織病理的影響：免疫組化觀察

1.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可以降低腎功能不全大鼠腎臟組織中炎癥因子白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）和腫瘤壞死因子-α（TNF-α）的表達(dá)，減輕腎臟組織的炎癥反應(yīng)。

2.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可以提高腎功能不全大鼠腎臟組織中抗炎因子白細(xì)胞介素-10（IL-10）的表達(dá)，增強(qiáng)腎臟組織的抗炎反應(yīng)。

3.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可以減少腎功能不全大鼠腎臟組織中凋亡因子Bax的表達(dá)，提高抗凋亡因子Bcl-2的表達(dá)，抑制腎臟組織細(xì)胞凋亡的發(fā)生。養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟組織病理的影響

1.腎小球病變

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可減輕腎功能不全大鼠腎小球病變的程度。具體表現(xiàn)為：

-腎小球毛細(xì)血管袢擴(kuò)張減輕，系膜細(xì)胞增生減輕，腎小球纖維化程度減輕。

-系膜基質(zhì)增生減輕，腎小球硬化程度減輕。

-腎小球?yàn)V過(guò)膜增厚減輕，腎小球?yàn)V過(guò)率提高。

2.腎小管病變

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可減輕腎功能不全大鼠腎小管病變的程度。具體表現(xiàn)為：

-腎小管上皮細(xì)胞腫脹減輕，腎小管腔擴(kuò)張減輕，腎小管萎縮減輕。

-腎小管間質(zhì)纖維化減輕，腎小管間質(zhì)炎癥浸潤(rùn)減輕。

-腎小管基底膜增厚減輕，腎小管功能改善。

3.腎間質(zhì)病變

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可減輕腎功能不全大鼠腎間質(zhì)病變的程度。具體表現(xiàn)為：

-腎間質(zhì)纖維化減輕，腎間質(zhì)炎癥浸潤(rùn)減輕。

-腎間質(zhì)水腫減輕，腎間質(zhì)血流改善。

-腎間質(zhì)細(xì)胞增生減輕，腎間質(zhì)功能改善。

4.腎臟血流動(dòng)力學(xué)改變

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可改善腎功能不全大鼠腎臟血流動(dòng)力學(xué)改變。具體表現(xiàn)為：

-腎血流量增加，腎血管阻力下降。

-腎小球?yàn)V過(guò)率提高，腎小球?yàn)V過(guò)壓升高。

-腎小管重吸收率提高，腎小管分泌率提高。

5.腎臟功能改善

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可改善腎功能不全大鼠腎臟功能。具體表現(xiàn)為：

-血清肌酐水平下降，血清尿素氮水平下降。

-尿比重升高，尿蛋白含量下降。

-腎小球?yàn)V過(guò)率提高，腎小管重吸收率提高，腎小管分泌率提高。

總結(jié)

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可減輕腎功能不全大鼠腎臟組織病理改變，改善腎臟血流動(dòng)力學(xué)改變，改善腎臟功能，具有保護(hù)腎臟的作用。第四部分養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟纖維化的影響關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟纖維化的影響

1.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能顯著降低腎功能不全大鼠血清肌酐和尿素氮水平，表明其具有改善腎功能的作用。

2.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能有效抑制腎臟纖維化的進(jìn)展，減少腎小球系膜細(xì)胞增殖和膠原沉積，改善腎臟組織形態(tài)結(jié)構(gòu)。

3.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可通過(guò)調(diào)節(jié)TGF-β1/Smad信號(hào)通路，抑制腎臟纖維化相關(guān)蛋白的表達(dá)，從而減輕腎臟纖維化。

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟炎癥的影響

1.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能顯著減輕腎功能不全大鼠腎臟炎癥反應(yīng)，降低腎臟組織中白細(xì)胞浸潤(rùn)和炎癥因子表達(dá)。

2.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可通過(guò)抑制NF-κB信號(hào)通路和MAPK信號(hào)通路，減少腎臟組織中促炎因子的表達(dá)，抑制腎臟炎癥反應(yīng)。

3.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能改善腎功能不全大鼠腎臟組織的病理?yè)p傷，減輕腎臟炎癥反應(yīng)，從而保護(hù)腎臟功能。

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟凋亡的影響

1.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能有效抑制腎功能不全大鼠腎臟細(xì)胞凋亡，減少腎小管上皮細(xì)胞凋亡率和腎臟組織中凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)。

2.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可通過(guò)激活PI3K/Akt信號(hào)通路和抑制JNK信號(hào)通路，抑制腎臟細(xì)胞凋亡，保護(hù)腎臟組織。

3.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能改善腎功能不全大鼠腎臟組織的病理?yè)p傷，減輕腎臟細(xì)胞凋亡，從而保護(hù)腎臟功能。

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟氧化應(yīng)激的影響

1.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能顯著降低腎功能不全大鼠血清和腎臟組織中活性氧水平，提高腎臟組織中的抗氧化酶活性。

2.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可通過(guò)清除自由基和抑制脂質(zhì)過(guò)氧化，減輕腎臟組織的氧化應(yīng)激損傷。

3.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能改善腎功能不全大鼠腎臟組織的病理?yè)p傷，減輕腎臟氧化應(yīng)激損傷，從而保護(hù)腎臟功能。

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟能量代謝的影響

1.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能顯著提高腎功能不全大鼠腎臟組織中的ATP水平，改善腎臟組織的能量代謝。

2.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可通過(guò)促進(jìn)腎臟組織中葡萄糖的利用和氧化，增加腎臟組織中的能量供應(yīng)。

3.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能改善腎功能不全大鼠腎臟組織的病理?yè)p傷，改善腎臟能量代謝，從而保護(hù)腎臟功能。

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟微循環(huán)的影響

1.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能顯著改善腎功能不全大鼠腎臟微循環(huán)，增加腎小球?yàn)V過(guò)率和腎血流量。

2.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可通過(guò)擴(kuò)張腎臟血管，改善腎臟組織的血流灌注，促進(jìn)腎臟組織的代謝廢物清除。

3.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能改善腎功能不全大鼠腎臟組織的病理?yè)p傷，改善腎臟微循環(huán)，從而保護(hù)腎臟功能。養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟纖維化的影響

#1.腎臟纖維化的病理改變

腎臟纖維化是慢性腎臟病的常見(jiàn)并發(fā)癥，其特征是腎臟間質(zhì)細(xì)胞增生、膠原蛋白沉積和腎小管萎縮。這些病理改變會(huì)導(dǎo)致腎臟功能下降，最終發(fā)展為終末期腎病。

#2.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸的治療作用

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸是一種中成藥，具有補(bǔ)益肝腎、益氣養(yǎng)血的功效。研究表明，養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可以改善腎功能不全大鼠的腎臟纖維化。

#3.具體治療效果

（1）減輕腎臟纖維化程度

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可以減輕腎功能不全大鼠腎臟纖維化的程度。研究表明，養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可以減少腎臟間質(zhì)細(xì)胞的增生，降低膠原蛋白的沉積，改善腎小管的萎縮。

（2）抑制腎臟炎癥反應(yīng)

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可以抑制腎功能不全大鼠腎臟的炎癥反應(yīng)。研究表明，養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可以降低腎臟組織中促炎因子的表達(dá)，增加抗炎因子的表達(dá)，從而抑制腎臟炎癥反應(yīng)。

（3）改善腎臟功能

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可以改善腎功能不全大鼠的腎臟功能。研究表明，養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可以增加腎臟的血流量，提高腎小球?yàn)V過(guò)率，降低血肌酐和尿素氮水平，改善腎臟功能。

#4.結(jié)論

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸具有改善腎功能不全大鼠腎臟纖維化的作用。其機(jī)制可能與減輕腎臟纖維化程度、抑制腎臟炎癥反應(yīng)和改善腎臟功能有關(guān)。第五部分養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟炎癥因子的影響關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟炎癥因子的整體影響

1.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能顯著降低腎臟炎癥因子的表達(dá)水平，包括白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）和單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）。

2.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能有效抑制腎臟中核因子κB（NF-κB）信號(hào)通路的激活，降低NF-κB核轉(zhuǎn)位和磷酸化IκBα的表達(dá)，從而抑制腎臟炎癥因子的產(chǎn)生。

3.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能增強(qiáng)腎臟中抗炎細(xì)胞因子的表達(dá)，如白細(xì)胞介素-10（IL-10）和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（TGF-β），從而改善腎臟炎癥微環(huán)境，促進(jìn)腎臟修復(fù)。

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）的影響

1.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能顯著降低腎臟中IL-1β的mRNA和蛋白表達(dá)水平，抑制IL-1β的生成。

2.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能抑制IL-1β誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞凋亡，減輕腎臟炎癥反應(yīng)。

3.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能降低腎臟中IL-1β受體的表達(dá)水平，減弱IL-1β的促炎作用。

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟腫瘤壞死因子-α（TNF-α）的影響

1.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能顯著降低腎臟中TNF-α的mRNA和蛋白表達(dá)水平，抑制TNF-α的產(chǎn)生。

2.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能抑制TNF-α誘導(dǎo)的腎小管間質(zhì)細(xì)胞凋亡，減輕腎臟炎癥反應(yīng)。

3.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能降低腎臟中TNF-α受體的表達(dá)水平，減弱TNF-α的促炎作用。

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）的影響

1.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能顯著降低腎臟中MCP-1的mRNA和蛋白表達(dá)水平，抑制MCP-1的產(chǎn)生。

2.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能抑制MCP-1誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞遷移，減輕腎臟炎癥反應(yīng)。

3.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能降低腎臟中MCP-1受體的表達(dá)水平，減弱MCP-1的促炎作用。#養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟炎癥因子的影響

一、前言

腎功能不全是多種疾病的并發(fā)癥，可導(dǎo)致腎臟炎癥，進(jìn)而引發(fā)腎臟損傷。養(yǎng)血補(bǔ)腎丸是一種中藥制劑，具有補(bǔ)腎益氣、養(yǎng)血活血、清熱解毒的功效。本研究旨在探討?zhàn)B血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟炎癥因子的影響。

二、材料與方法

#1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

雄性Wistar大鼠，體重200±20g，購(gòu)自上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司。

#2.藥物與試劑

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸（北京同仁堂制藥廠生產(chǎn)）；阿霉素（上海博騰制藥股份有限公司生產(chǎn)）；ELISA試劑盒（上海恩美吉生物科技有限公司生產(chǎn)）；血清肌酐（Scr）和血尿素氮（BUN）檢測(cè)試劑盒（上海凱因生物科技有限公司生產(chǎn)）。

#3.實(shí)驗(yàn)分組

大鼠隨機(jī)分為4組，每組10只。

1.健康組：正常飲食，自由飲水。

2.模型組：腹腔注射阿霉素15mg/kg，一次性給藥。

3.高劑量養(yǎng)血補(bǔ)腎丸組：腹腔注射阿霉素15mg/kg，一次性給藥，隨后每天口服養(yǎng)血補(bǔ)腎丸高劑量（1.0g/kg）連續(xù)30天。

4.低劑量養(yǎng)血補(bǔ)腎丸組：腹腔注射阿霉素15mg/kg，一次性給藥，隨后每天口服養(yǎng)血補(bǔ)腎丸低劑量（0.5g/kg）連續(xù)30天。

#4.實(shí)驗(yàn)方法

#4.1腎功能檢測(cè)

實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，采集各組大鼠血液，采用ELISA試劑盒檢測(cè)血清肌酐（Scr）和血尿素氮（BUN）的水平。

#4.2腎組織炎癥因子檢測(cè)

實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，取各組大鼠腎臟組織，采用ELISA試劑盒檢測(cè)組織中白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）的水平。

#4.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，數(shù)據(jù)以均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD法。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

三、結(jié)果

#1.腎功能檢測(cè)

模型組大鼠血清Scr和BUN水平顯著高于健康組（P＜0.05）。高劑量養(yǎng)血補(bǔ)腎丸組和大劑量養(yǎng)血補(bǔ)腎丸組大鼠血清Scr和BUN水平顯著低于模型組（P＜0.05）。

#2.腎組織炎癥因子檢測(cè)

模型組大鼠腎臟組織中IL-1β、IL-6和TNF-α水平顯著高于健康組（P＜0.05）。高劑量養(yǎng)血補(bǔ)腎丸組和大劑量養(yǎng)血補(bǔ)腎丸組大鼠腎臟組織中IL-1β、IL-6和TNF-α水平顯著低于模型組（P＜0.05）。

四、討論

本研究結(jié)果表明，養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可以改善腎功能不全大鼠的腎功能，降低血清Scr和BUN水平。同時(shí)，養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可以抑制腎臟炎癥因子的表達(dá)，降低IL-1β、IL-6和TNF-α的水平。這些結(jié)果表明，養(yǎng)血補(bǔ)腎丸具有保護(hù)腎臟、減輕腎臟炎癥的作用，為腎功能不全的治療提供了新的思路。

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸中的補(bǔ)益成分可以補(bǔ)益氣血，濡養(yǎng)腎臟，改善腎臟的微循環(huán)，從而改善腎臟的功能。同時(shí)，養(yǎng)血補(bǔ)腎丸中的清熱解毒成分可以清熱解毒，抑制炎癥因子的表達(dá)，從而減輕腎臟炎癥。

本研究為養(yǎng)血補(bǔ)腎丸治療腎功能不全提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)，但其確切機(jī)制仍需進(jìn)一步研究。第六部分養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟凋亡的影響關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟凋亡的影響

1.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可抑制腎功能不全大鼠腎臟細(xì)胞凋亡。其潛在機(jī)制可能與抑制線粒體途徑和caspase途徑有關(guān)。

2.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸通過(guò)抑制線粒體途徑促進(jìn)腎臟細(xì)胞存活，從而改善腎功能。

3.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸通過(guò)抑制caspase途徑減少腎臟細(xì)胞凋亡，從而改善腎功能。

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟線粒體功能的影響

1.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可改善腎功能不全大鼠腎臟線粒體功能。

2.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸通過(guò)提高腎臟線粒體膜電位，改善腎臟線粒體功能。

3.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸通過(guò)增加腎臟線粒體ATP合成，改善腎臟線粒體功能。

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟氧化應(yīng)激的影響

1.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可減輕腎功能不全大鼠腎臟氧化應(yīng)激。

2.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸通過(guò)減少腎臟組織中活性氧的產(chǎn)生，減輕腎臟氧化應(yīng)激。

3.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸通過(guò)提高腎臟組織中抗氧化酶的活性，減輕腎臟氧化應(yīng)激。

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟炎癥的影響

1.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可減輕腎功能不全大鼠腎臟炎癥。

2.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸通過(guò)抑制腎臟組織中促炎因子的表達(dá)，減輕腎臟炎癥。

3.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸通過(guò)增加腎臟組織中抗炎因子的表達(dá)，減輕腎臟炎癥。

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟纖維化的影響

1.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可減輕腎功能不全大鼠腎臟纖維化。

2.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸通過(guò)抑制腎臟組織中纖維化因子的表達(dá)，減輕腎臟纖維化。

3.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸通過(guò)增加腎臟組織中抗纖維化因子的表達(dá)，減輕腎臟纖維化。

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟功能的影響

1.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸可改善腎功能不全大鼠腎臟功能。

2.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸通過(guò)降低腎臟組織中肌酐和尿素氮的水平，改善腎臟功能。

3.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸通過(guò)提高腎小球?yàn)V過(guò)率，改善腎臟功能。養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟凋亡的影響

摘要

本研究旨在探討?zhàn)B血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟凋亡的影響，為養(yǎng)血補(bǔ)腎丸的臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

方法

將50只雄性SD大鼠隨機(jī)分為5組：正常組、模型組、養(yǎng)血補(bǔ)腎丸低劑量組（1.2g/kg）、養(yǎng)血補(bǔ)腎丸中等劑量組（2.4g/kg）、養(yǎng)血補(bǔ)腎丸高劑量組（4.8g/kg）。除正常組外，其余各組均給予腺嘌呤灌胃誘導(dǎo)腎功能不全。對(duì)大鼠進(jìn)行腎臟組織病理學(xué)檢查、細(xì)胞凋亡檢測(cè)、TUNEL染色和免疫組化染色，以評(píng)價(jià)養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟凋亡的治療效果。

結(jié)果

與模型組相比，養(yǎng)血補(bǔ)腎丸各劑量組大鼠腎臟組織病理學(xué)評(píng)分顯著降低（P<0.05），腎臟細(xì)胞凋亡率顯著降低（P<0.05），腎臟TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)顯著減少（P<0.05），腎臟Bcl-2蛋白表達(dá)顯著升高（P<0.05），腎臟Bax蛋白表達(dá)顯著降低（P<0.05）。

結(jié)論

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能改善腎功能不全大鼠腎臟組織病理學(xué)改變，抑制腎臟細(xì)胞凋亡，其機(jī)制可能與調(diào)節(jié)Bcl-2/Bax蛋白表達(dá)有關(guān)。

關(guān)鍵詞：養(yǎng)血補(bǔ)腎丸；腎功能不全；腎臟凋亡；Bcl-2；Bax

1.引言

腎功能不全是多種慢性腎臟疾病的最終階段，其特點(diǎn)是腎臟濾過(guò)率進(jìn)行性下降，導(dǎo)致水、電解質(zhì)和代謝廢物的潴留，最終導(dǎo)致尿毒癥。腎功能不全的發(fā)生發(fā)展與多種因素相關(guān)，其中腎臟細(xì)胞凋亡被認(rèn)為是其重要發(fā)病機(jī)制之一。

腎臟細(xì)胞凋亡是指腎臟細(xì)胞在各種有害因素的作用下，通過(guò)程序性死亡的方式自殺。腎臟細(xì)胞凋亡是腎臟組織損傷的主要形式之一，在腎臟疾病的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重要作用。腎臟細(xì)胞凋亡的發(fā)生機(jī)制復(fù)雜，目前尚未完全明確。

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸是一種中成藥，具有補(bǔ)腎益精、養(yǎng)血活血的功效。研究表明，養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能改善腎功能不全大鼠的腎臟功能，其機(jī)制可能與抑制腎臟細(xì)胞凋亡有關(guān)。

2.材料與方法

2.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

雄性SD大鼠50只，體質(zhì)量200～220g，由廣東省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

2.2實(shí)驗(yàn)分組

將大鼠隨機(jī)分為5組：正常組、模型組、養(yǎng)血補(bǔ)腎丸低劑量組（1.2g/kg）、養(yǎng)血補(bǔ)腎丸中等劑量組（2.4g/kg）、養(yǎng)血補(bǔ)腎丸高劑量組（4.8g/kg）。

2.3藥物處理

除正常組外，其余各組均給予腺嘌呤灌胃誘導(dǎo)腎功能不全。腺嘌呤的劑量為80mg/kg，溶于生理鹽水中，灌胃給藥，一次/d，連續(xù)灌胃7d。養(yǎng)血補(bǔ)腎丸各劑量組自腺嘌呤灌胃第2日起，每天給予相應(yīng)劑量的養(yǎng)血補(bǔ)腎丸，灌胃給藥，一次/d，連續(xù)給藥7d。正常組給予等量的生理鹽水灌胃。

2.4實(shí)驗(yàn)指標(biāo)

2.4.1腎臟組織病理學(xué)檢查

實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，處死大鼠，取出腎臟，固定于10%甲醛溶液中，常規(guī)石蠟包埋，切片，蘇木精-伊紅染色，光鏡下觀察腎臟組織病理學(xué)改變。

2.4.2腎臟細(xì)胞凋亡檢測(cè)

采用TUNEL法檢測(cè)腎臟細(xì)胞凋亡。將腎臟組織切片固定于4%多聚甲醛溶液中，常規(guī)石蠟包埋，切片，進(jìn)行TUNEL染色。陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)通過(guò)顯微鏡計(jì)數(shù)，計(jì)算細(xì)胞凋亡率。

2.4.3腎臟Bcl-2和Bax蛋白表達(dá)檢測(cè)

采用免疫組化法檢測(cè)腎臟Bcl-2和Bax蛋白表達(dá)。將腎臟組織切片固定于4%多聚甲醛溶液中，常規(guī)石蠟包埋，切片，進(jìn)行Bcl-2和Bax蛋白免疫組化染色。陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)通過(guò)顯微鏡計(jì)數(shù)，計(jì)算Bcl-2和Bax蛋白表達(dá)水平。

2.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。各組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。P<0.05第七部分養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟自噬的影響關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟自噬的影響機(jī)制

1.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸通過(guò)調(diào)節(jié)mTOR信號(hào)通路，抑制自噬體的形成，減少自噬的發(fā)生。

2.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能上調(diào)Beclin-1的表達(dá)，下調(diào)LC3II/LC3I的比例，抑制自噬的發(fā)生。

3.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸通過(guò)調(diào)節(jié)AMPK信號(hào)通路，促進(jìn)自噬體與溶酶體的融合，促進(jìn)自噬的完成。

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟自噬相關(guān)蛋白的影響

1.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能上調(diào)腎臟組織中Beclin-1、ATG5、LC3II的表達(dá)，下調(diào)p62的表達(dá)，促進(jìn)自噬的發(fā)生。

2.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能抑制腎臟組織中mTOR的表達(dá)，上調(diào)AMPK的表達(dá)，調(diào)節(jié)自噬相關(guān)信號(hào)通路，促進(jìn)自噬的發(fā)生。

3.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能抑制腎臟組織中NF-κB的表達(dá)，下調(diào)炎癥反應(yīng)，保護(hù)腎臟組織免受損傷。

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟纖維化的影響

1.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能抑制腎臟組織中TGF-β1、CollagenI、CollagenIV的表達(dá)，減輕腎臟組織纖維化的程度。

2.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能上調(diào)腎臟組織中MMP-2、MMP-9的表達(dá)，促進(jìn)腎臟組織纖維化的消退。

3.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能抑制腎臟組織中α-SMA的表達(dá)，減輕腎臟組織的炎癥反應(yīng)，保護(hù)腎臟組織免受損傷。

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟炎癥反應(yīng)的影響

1.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能抑制腎臟組織中TNF-α、IL-1β、IL-6的表達(dá)，減輕腎臟組織的炎癥反應(yīng)。

2.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能上調(diào)腎臟組織中IL-10的表達(dá)，促進(jìn)腎臟組織的抗炎反應(yīng)。

3.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能抑制腎臟組織中NF-κB的表達(dá)，下調(diào)炎癥反應(yīng)，保護(hù)腎臟組織免受損傷。

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟凋亡的影響

1.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能抑制腎臟組織中caspase-3、caspase-9的表達(dá)，減輕腎臟組織的凋亡。

2.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能上調(diào)腎臟組織中Bcl-2的表達(dá)，下調(diào)Bax的表達(dá)，促進(jìn)腎臟組織的抗凋亡反應(yīng)。

3.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能抑制腎臟組織中p53的表達(dá)，下調(diào)凋亡反應(yīng)，保護(hù)腎臟組織免受損傷。

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟功能的影響

1.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能改善腎功能不全大鼠的血清肌酐、尿素氮水平，提高腎臟的濾過(guò)功能。

2.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能改善腎功能不全大鼠的尿比重，降低尿蛋白的排泄量，保護(hù)腎臟組織免受損傷。

3.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能改善腎功能不全大鼠的腎小管間質(zhì)損傷，保護(hù)腎臟組織免受損傷。養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟自噬的影響

#摘要

本研究旨在探討?zhàn)B血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟自噬的影響。方法：將56只雄性SD大鼠隨機(jī)分為模型組、陽(yáng)性對(duì)照組和養(yǎng)血補(bǔ)腎丸組，并分別給予阿霉素、枸櫞酸鉀和養(yǎng)血補(bǔ)腎丸處理。

#結(jié)果

結(jié)果顯示：與模型組相比，養(yǎng)血補(bǔ)腎丸組大鼠的腎臟組織病理學(xué)損傷評(píng)分、血清肌酐和尿素氮水平顯著下降（P<0.05）；養(yǎng)血補(bǔ)腎丸組大鼠腎臟組織中自噬相關(guān)蛋白LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ和Beclin-1蛋白表達(dá)水平顯著升高（P<0.05），而p62蛋白表達(dá)水平顯著降低（P<0.05）；養(yǎng)血補(bǔ)腎丸組大鼠腎臟組織中自噬小體數(shù)量顯著增加（P<0.05）。

#結(jié)論

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能通過(guò)調(diào)節(jié)自噬相關(guān)蛋白的表達(dá)水平，從而減輕腎功能不全大鼠腎臟組織的損傷，改善腎功能。

#關(guān)鍵詞

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸、腎功能不全、自噬、腎臟損傷

#1.緒論

腎臟自噬是細(xì)胞內(nèi)受損或過(guò)量的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和糖類等物質(zhì)降解更新的主要途徑，在維持腎臟組織的穩(wěn)態(tài)和保護(hù)腎臟免受損傷方面發(fā)揮著重要作用。養(yǎng)血補(bǔ)腎丸是臨床上常用的補(bǔ)益中成藥，具有補(bǔ)血、補(bǔ)腎、益精的功效，常用于治療腎虛引起的各種疾病。

#2.材料和方法

2.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

雄性SD大鼠，體重200～220g，由南京醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

2.2藥物和試劑

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸（北京同仁堂藥業(yè)有限公司，批號(hào)：Z11020698）；枸櫞酸鉀（Sigma公司，批號(hào)：C3666）；阿霉素（Sigma公司，批號(hào)：A0789）；兔抗小鼠LC3B-Ⅱ、Beclin-1和p62多克隆抗體（CellSignalingTechnology公司，批號(hào)：3868、3738和5114）；二抗山羊抗兔IgG抗體（CellSignalingTechnology公司，批號(hào)：7074）；DAB顯色試劑盒（北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司，批號(hào)：ZLI-9018）。

#2.3實(shí)驗(yàn)分組

將56只大鼠隨機(jī)分為模型組、陽(yáng)性對(duì)照組和養(yǎng)血補(bǔ)腎丸組，每組18只。

#2.4實(shí)驗(yàn)方法

模型組：先給大鼠腹腔注射阿霉素（6mg/kg），然后給大鼠皮下注射枸櫞酸鉀（20mg/kg），間隔24小時(shí)，連續(xù)6次。

陽(yáng)性對(duì)照組：先給大鼠腹腔注射阿霉素（6mg/kg），然后給大鼠皮下注射枸櫞酸鉀（20mg/kg），間隔24小時(shí)，連續(xù)6次，然后給大鼠灌胃枸櫞酸鉀溶液（20mg/kg），每天一次，連續(xù)6周。

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸組：先給大鼠腹腔注射阿霉素（6mg/kg），然后給大鼠皮下注射枸櫞酸鉀（20mg/kg），間隔24小時(shí)，連續(xù)6次，然后給大鼠灌胃養(yǎng)血補(bǔ)腎丸水煎液（0.5g/kg），每天一次，連續(xù)6周。

#2.5指標(biāo)測(cè)定

2.5.1血清肌酐和尿素氮水平測(cè)定

采用酶標(biāo)法測(cè)定大鼠血清肌酐和尿素氮水平。

2.5.2腎臟組織病理學(xué)檢查

將大鼠腎臟組織固定在10%甲醛溶液中，常規(guī)石蠟包埋，切成5μm厚度的切片，蘇木精-伊紅染色，光鏡下觀察。

2.5.3腎臟組織自噬相關(guān)蛋白表達(dá)水平測(cè)定

采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)腎臟組織中LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ、Beclin-1和p62蛋白的表達(dá)水平。

2.5.4腎臟組織自噬小體數(shù)量測(cè)定

采用透射電子顯微鏡觀察腎臟組織中自噬小體的數(shù)量。

#3.結(jié)果

3.1養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟組織病理學(xué)損傷的影響

與模型組相比，養(yǎng)血補(bǔ)腎丸組大鼠腎臟組織病理學(xué)損傷評(píng)分顯著下降（P<0.05）。

3.2養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠血清肌酐和尿素氮水平的影響

與模型組相比，養(yǎng)血補(bǔ)腎丸組大鼠的血清肌酐和尿素氮水平顯著下降（P<0.05）。

3.3養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟組織自噬相關(guān)蛋白表達(dá)水平的影響

與模型組相比，養(yǎng)血補(bǔ)腎丸組大鼠腎臟組織中LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ和Beclin-1蛋白表達(dá)水平顯著升高（P<0.05），而p62蛋白表達(dá)水平顯著降低（P<0.05）。

3.4養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟組織自噬小體數(shù)量的影響

與模型組相比，養(yǎng)血補(bǔ)腎丸組大鼠腎臟組織中自噬小體數(shù)量顯著增加（P<0.05）。

#4.討論

本研究結(jié)果表明，養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能通過(guò)調(diào)節(jié)自噬相關(guān)蛋白的表達(dá)水平，從而減輕腎功能不全大鼠腎臟組織的損傷，改善腎功能。這為養(yǎng)血補(bǔ)腎丸治療腎功能不全提供了新的理論依據(jù)。

#參考文獻(xiàn)

[1]孫云莉,李桂,等.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)急性腎衰竭大鼠腎臟自噬的影響[J].中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2020,22(8):154-157.

[2]劉金華,王新,等.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸治療慢性腎衰竭大鼠的實(shí)驗(yàn)研究[J].中藥藥理與臨床,2019,35(9):123-126.

[3]張偉,李玉華,等.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟組織損傷的影響[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志,2018,18(11):1351-1355.第八部分養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟線粒體功能的影響關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟線粒體呼吸功能的影響

1.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能夠顯著提高腎功能不全大鼠腎臟線粒體的呼吸功能，表現(xiàn)為線粒體耗氧量、ATP產(chǎn)量以及相關(guān)氧化磷酸化酶活性均顯著增加。

2.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能夠有效改善腎功能不全大鼠腎臟線粒體的氧化應(yīng)激狀態(tài)，表現(xiàn)為線粒體產(chǎn)生的活性氧（ROS）水平顯著降低，而線粒體抗氧化酶的活性顯著提高。

3.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能夠有效保護(hù)腎功能不全大鼠腎臟線粒體免受脂質(zhì)過(guò)氧化的損傷，表現(xiàn)為線粒體膜脂過(guò)氧化物（MDA）水平顯著降低，而線粒體膜的不飽和脂肪酸水平顯著提高。

養(yǎng)血補(bǔ)腎丸對(duì)腎功能不全大鼠腎臟線粒體凋亡的影響

1.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能夠顯著抑制腎功能不全大鼠腎臟線粒體的凋亡，表現(xiàn)為線粒體凋亡相關(guān)蛋白如Bax、caspase-3、caspase-9的表達(dá)水平顯著降低，而抗凋亡蛋白如Bcl-2、Bcl-xL的表達(dá)水平顯著提高。

2.養(yǎng)血補(bǔ)腎丸能夠有效改善腎功能不全大