全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程

全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第

3版）

精液檢查

一.標(biāo)本收集

，二次之間間隔應(yīng)＞7天，但

不超過3周。

,但不超過7天。

O

,不宜采用避孕套內(nèi)的精

液。某些塑料容器具有殺精

子作用，但是否合適應(yīng)事先

做實(shí)驗(yàn)。

~40℃。

（或）識(shí)別號（標(biāo)本號或條

碼），標(biāo)本采集日期和時(shí)間。

,精液也必須按照潛在生物

危害物質(zhì)處理，因?yàn)榫簝?nèi)

可能含有肝炎病毒、人類免

疫缺陷（病毒）和皰疹病毒

等。

二.一般性狀檢查

一般性狀檢查包括記錄精

液量、顏色、透明度、粘稠

度和是否液化。

正常精液呈灰白色

或乳白色，不透明。棕色或

紅色提示出血。黃色可能服

用某種藥物。精子濃度低時(shí)

精液略顯透明。

正常精液是一種均勻黏

稠的液體，射精后立即凝

固，30min后開始液化。若

液化時(shí)間超過60min考慮

為異常，應(yīng)記錄這種情況。

正常精液可含有不液化的

膠凍狀顆粒。

用刻度量筒或移液管

測定。正常一次全部射精精

液量約2~5ml。精液量過多

或過少是不育的原因之一。

在精液全部液化后，用

Pasteur滴管吸入精液，然

后讓精液依靠重力滴落，并

觀察拉絲長度。正常精液呈

水樣，形成不連續(xù)小滴。黏

稠度異常時(shí)，形成絲狀或線

狀液滴(長度大于2cm)o

也可使用玻璃棒或注射器

測定黏稠度。

用精密試帶檢查。

三.精子存活率

精子存活率(motility)用

活精子比例來反映。

【試劑】

5g/L伊紅Y染色液:伊紅

Yg,加生理鹽水至100

mlo

【操作】

(1)在載玻片上加新

鮮精液和伊紅溶液各

1滴，混勻后，加上

蓋玻片，30s后在高

倍鏡下觀察，活精子

不著色。死精子染成

紅色。

(2)計(jì)數(shù)200個(gè)精子,

計(jì)算未著色(活精子)

的百分率。

【試劑】

(1)10g/L伊紅Y染色

液:伊紅1g,加蒸譙水至

100mlo

(2)100g/L苯胺黑染色

液:苯胺黑10g,加蒸饋水

至100mlo

【操作】

(1)取小試管，加新鮮

精液和伊紅溶液各1

滴，混勻。

(2)30s后，加苯胺黑

溶液3滴，混勻。

(3)30s后，在載玻片

上，加精液-伊紅?苯

胺黑混合液1滴，制

成涂片，待干。

(4)油鏡下觀察，活精

子為白色，死精子染

成紅色，背景呈黑色,

計(jì)數(shù)200個(gè)精子，計(jì)

算未著色活精子的百

分率。

(HOS)

【試劑】

膨脹液：g,g,加蒸饋水

至100mlo分裝，-20℃

冷凍保存，使用前解凍，

并充分混勻。

【操作】

(1)取小試管，加1ml

膨脹液，37℃預(yù)溫5

min。

(2)ml液化精液，輕

輕攪勻，在37℃孵育

至少30min。

(3)在相差顯微鏡下

觀察精子，膨脹精子

為尾部形狀發(fā)生變化

的精子，即活精子。

計(jì)數(shù)200個(gè)精子，計(jì)

算膨脹精子的百分

率。

【參考區(qū)間】

在排精30?60min內(nèi),約

有70%以上精子應(yīng)為活

動(dòng)精子。精子低滲膨脹試

驗(yàn)應(yīng)有60%以上精子出

現(xiàn)尾部膨脹。

【附注】

(1)如室溫低于10℃

時(shí)，應(yīng)將標(biāo)本先放入

37℃溫育5~10min

后鏡檢。

(2)某些標(biāo)本試驗(yàn)前

就有尾部卷曲的精

子，在HOS試驗(yàn)前,

計(jì)算未處理標(biāo)本中尾

部卷曲精子的百分

數(shù)，實(shí)際HOS試驗(yàn)

結(jié)果百分率就等于測

定值減去未處理標(biāo)本

中尾部卷曲精子百分

率。

(3)HOS也是精子尾

部膜功能試驗(yàn)。

四.精子活力

WHO推薦一種無需復(fù)雜

設(shè)備而能進(jìn)行簡單精子

活力（activity）分級的方

法。

【操作】

取10U1標(biāo)本涂片，連續(xù)

觀察至少5個(gè)視野，對

200個(gè)精子進(jìn)行分級，首

先計(jì)數(shù)a級和b級精子，

隨后在同一視野內(nèi)計(jì)數(shù)c

級和d級精子。

【結(jié)果判斷】

根據(jù)下述標(biāo)準(zhǔn)把精子活

力分為a、b>c>d四級。

a級:快速前向運(yùn)動(dòng):37℃

時(shí)速度225um/s,或

20℃時(shí)速度220um/s

（25um大約相當(dāng)于精

子5個(gè)頭部的長度，或半

個(gè)尾部的長度）。

b級:慢速或者呆滯的前

向運(yùn)動(dòng)。

c級:非前向運(yùn)動(dòng)（V5U

m/s）o

d級:不動(dòng)。

【參考區(qū)間】

正常精液采集后60min

內(nèi),a級+b級精子達(dá)50%

以上。

五.精子計(jì)數(shù)

【試劑】

精子稀釋液:碳酸氫鈉5

g,40%甲醛溶液1ml,

蒸饋水100ml,待完全溶

解過濾后使用。

【操作】

1.ml,吸液化精液20P

1,加入稀釋液內(nèi)搖勻。

2.充分搖勻后，滴入改良

Neubauer血細(xì)胞計(jì)數(shù)

池內(nèi),靜置1~2min,

待精子下沉后，以精子

頭部作為基準(zhǔn)進(jìn)行計(jì)

數(shù)。

3.如每個(gè)中央方格內(nèi)精

子少于10個(gè)，應(yīng)計(jì)數(shù)

所有25個(gè)中方格內(nèi)的

精子數(shù)。

4.如每個(gè)中央方格內(nèi)精

子在10?40個(gè)，應(yīng)計(jì)數(shù)

10個(gè)中方格內(nèi)的精子

數(shù)。

5.如每個(gè)中央方格內(nèi)精

子多于40個(gè)，應(yīng)計(jì)數(shù)5

個(gè)中方格內(nèi)的精子數(shù)。

【結(jié)果判斷】

精子數(shù)二計(jì)數(shù)結(jié)果*25*1

*20*103/ml

計(jì)數(shù)中方格數(shù)

計(jì)數(shù)池高度

:計(jì)數(shù)結(jié)果*.

*5*105/ml

計(jì)數(shù)中方格數(shù)計(jì)數(shù)

池高度

【參考區(qū)間】

正常男性220*

106/ml

【附注】

1.收集精液前避免性生

活3~7天。收集精液標(biāo)

本后應(yīng)在1h內(nèi)檢驗(yàn)，

冬季應(yīng)注意保溫。

2.出現(xiàn)一次異常結(jié)果，應(yīng)

隔1周后復(fù)查，反復(fù)查

2~3次方能得出比較正

確的結(jié)果。

3.如低倍鏡、高倍鏡檢查

均無精子，應(yīng)將精液離

心沉淀后再涂片檢查，

如兩次均無精子，報(bào)告

“無精子”。

六.精子形態(tài)觀察

【試劑】

改良巴氏染色液、Shorr

染色液、Diff-Quik快速

染色液:商品化染色液一

般質(zhì)量均佳，但實(shí)驗(yàn)室也

可自行配制。

【操作】

1.在載玻片上滴1滴精

液，約5-20U1,采用

壓拉涂片法或推片法

制片。

2.待干后，巴氏染色法用

等量95%乙醇和乙醛

混合液固定5~15min；

Shorr染色法用75%乙

醇固定1min；

Diff-Quik快速染色法

用甲醇固定15So

3.作改良巴氏、Shorr或

Diff-Quik染色，然后

在油鏡下觀察。

4.精子頭部頂體染成淡

藍(lán)色，頂體后區(qū)域染成

深藍(lán)色，中段染成淡紅

色，尾部染成藍(lán)色或淡

紅色，細(xì)胞質(zhì)小滴位于

頭部后面或中段周圍，

巴氏染色染成綠色。

【結(jié)果判斷】

評估精子正常形

態(tài)時(shí)應(yīng)采用嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)，

只有頭、頸、中段和尾

部都正常的精子才正

常。精子頭的形狀必須

是橢圓形，~~

頂體的界限清晰，約占

頭部的40%~70%。中

段細(xì)，寬度vlum,,

且在軸線上緊貼頭部，

細(xì)胞質(zhì)小滴應(yīng)小于正

常頭部大小的一半。尾

部應(yīng)是直的、均一的，

比中段細(xì)，非卷曲，其

長約為45um。

所有形態(tài)學(xué)處于臨界

狀態(tài)的精子均列為異常。

異常精子可有:①頭部缺

陷:大頭、小頭、錐形頭、

梨形頭、圓頭、無定形頭、

有空泡頭、頂體過小頭、

雙頭等；②頸段和中段缺

陷:頸部彎曲、中段非對

稱地接在頭部、粗的或不

規(guī)則中段、異常細(xì)的中段

等；③尾部缺陷:短尾、

多尾、發(fā)卡形尾、尾部斷

裂、尾部彎曲、尾部寬度

不規(guī)則、尾部卷曲等。

【參考區(qū)間】

正常人精液中正常

形態(tài)者230%（異常精子

應(yīng)少于20%,如超過20%

為不正常）。

七.精子凝集

精子凝集是活動(dòng)

精子以各種方式，如頭

對頭，尾對尾或頭對尾

等彼此粘在一起。以分

級方式報(bào)告，從“」（沒

有凝集）~“3+”（所有

可動(dòng)的精子凝集到一

起）。凝集的存在，提

示可能為免疫因素引

起不育。

A.非精子細(xì)胞

精液含有的非精子

細(xì)胞成分，成為“圓細(xì)

胞”，這些細(xì)胞包括泌

尿生殖道上皮細(xì)胞、前

列腺細(xì)胞、生精細(xì)胞和

白細(xì)胞。正常人精液中:

圓細(xì)胞

正常精液中白細(xì)胞，

主要是中性粒細(xì)胞，數(shù)

量不應(yīng)超過

過多提示感染，為白細(xì)

胞精子癥。

九.其它成分

精液中能夠有結(jié)

晶體、卵磷脂小體、淀

粉樣體、脂滴、脫落上

皮細(xì)胞等。

十.臨床意義

1.正常精液呈灰白色,

久未排精者可呈淡黃

色；離體30min后，完

全液化。根據(jù)精液檢查

結(jié)果，臨床上常用于診

斷男子不育癥及觀察

輸精管結(jié)扎術(shù)后的效

果。

2.正常精子活力一般

在a級225%。如活力

a級<25%；a級+b級

<50%可成為男性不育

的原因。

3.精索靜脈曲張癥患

者精液中常出現(xiàn)形態(tài)

不正常的精子。

4.血液中有毒性代謝

產(chǎn)物、接觸鉛等污染

物、應(yīng)用大劑量放射線

及細(xì)胞毒藥物等可使

精子形態(tài)異常。

前列腺液檢查

一.標(biāo)本收集

臨床醫(yī)師作前列腺按

摩術(shù)后，采集標(biāo)本于清潔玻

片上，立即送檢。

二.檢查內(nèi)容

記錄液體顏色、是否混有

血液、有無膿塊等。濕片

鏡檢，高倍鏡下觀察白細(xì)

胞、紅細(xì)胞、卵磷脂小體,

其次為上皮細(xì)胞、精子、

淀粉樣體等。革蘭染色后

檢查細(xì)菌。

三.報(bào)