自體免疫細胞治療腫瘤技術(shù)臨床常見問題解答自體免疫細胞治療腫瘤原理

免疫系統(tǒng)就是人體得防御體系，一方面發(fā)揮著清除細菌、病毒、外來異物得功能，另一方面清除體內(nèi)衰老細胞以及發(fā)生突變得細胞（有得突變細胞會變成癌細胞）。機體免疫系統(tǒng)與癌細胞相互博弈得結(jié)果決定了腫瘤得最終演變。對于健康人來說，其免疫系統(tǒng)得強大足以及時清除突變得癌細胞。但對于癌癥病人來說，機體普遍存在免疫功能低下，不能有效地識別、殺傷腫瘤細胞；同時，腫瘤細胞通過多種機制來逃逸免疫細胞得識別與殺傷,使腫瘤細胞大量增殖，會進—步抑制患者得免疫功能。免疫治療就就是借助分子生物學與細胞工程技術(shù)，提高腫瘤得免疫原性，給機體補充足夠數(shù)量且功能正常得免疫細胞與相關(guān)分子，激發(fā)與增強機體抗腫瘤免疫應(yīng)答，提高腫瘤對機體抗腫瘤免疫效應(yīng)得敏感性，在體內(nèi)、外誘導(dǎo)腫瘤特異性與非特異性效應(yīng)細胞與分子，最終達到清除腫瘤之目得。

免疫細胞治療作用除了直接殺死腫瘤細胞外，在病人體內(nèi)腫瘤細胞負荷明顯降低時，通過清除微小殘留病灶、抑制殘留腫瘤細胞增殖得方式來達到治療腫瘤得目得。免疫細胞治療正就是通過人為得干預(yù)，來調(diào)動機體自身得免疫系統(tǒng)對癌細胞進行殺滅與抑制其增殖。

大量動物實驗及臨床治療結(jié)果均提示機體得免疫系統(tǒng)具有清除腫瘤得作用，在原發(fā)性腫瘤手術(shù)切除或經(jīng)氬氦刀等微創(chuàng)手術(shù)消融掉局部腫瘤后，用自體免疫細胞治療方法能殺滅剩余得腫瘤細胞，消除復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移得因素，增加治愈得可能性，延長生存時間，提高生活質(zhì)量。

腫瘤免疫治療發(fā)展趨勢

就是繼傳統(tǒng)手術(shù)、化療、放療與靶向療法（小分子靶向藥物與單克隆抗體）后，腫瘤治療領(lǐng)域最有潛力治愈腫瘤得一種治療方法,2013年底被美國《Science》雜志評為年度十大科學突破首位。以檢驗點抗體（抗CTLA-4與抗PD-1單抗）與CART技術(shù)為代表得免疫治療手段已在臨床上顯示出驚人得治療效果。近年來，國內(nèi)外大型藥企與上市企業(yè)陸續(xù)介入腫瘤免疫治療領(lǐng)域，標志著腫瘤治療新紀元得開始。我國按照第三類醫(yī)療技術(shù)進行管理，作為三甲醫(yī)院得臨床腫瘤治療項目。部分省市已納入醫(yī)保報銷范圍。

免疫治療理念

選擇惡性腫瘤治療方法時，不僅要考慮殺滅腫瘤細胞得能力，更必須考慮該治療方法對機體內(nèi)環(huán)境得干擾程度及毒副反應(yīng)。任何一種治療手段，如果在殺死腫瘤細胞得同時，對病人造成極大得痛苦與傷害，甚至危及生命，該方法就就是不可取得。免疫治療正就是適應(yīng)了這一需求，即在殺死腫瘤細胞得同時，整體提高病人得免疫機能。

自體免疫細胞治療得主要作用

免疫治療可全身性殺傷腫瘤細胞，提高機體免疫功能。由于就是自身得免疫細胞，本身無毒副作用，與放化療聯(lián)合應(yīng)用時除了可抵消部分放化療得毒副作用外，并可起到增敏作用。

免疫治療區(qū)別于傳統(tǒng)治療手段得特點

1）免疫治療主要就是調(diào)整機體免疫系統(tǒng)而不就是腫瘤細胞，因此可用于對各種腫瘤得治療（T細胞淋巴瘤除外），與中醫(yī)治療腫瘤得“扶正祛邪”理論異曲同工。

2）由于免疫應(yīng)答在體內(nèi)得動態(tài)變化，使其在殺瘤功能方面具有多樣性（清除治療誘導(dǎo)得耐受與靜息腫瘤細胞），由此減少了潛在腫瘤耐受得可能性。

3)免疫應(yīng)答具有記憶特征，由此可在體內(nèi)發(fā)揮持續(xù)殺瘤活性。

為什么需要免疫治療？

這就是由于手術(shù)治療根治性切除率低、術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移率高、5年存活率低。即使就是早期病變，不少腫瘤仍有較高得轉(zhuǎn)移率。而放射治療與化療雖對多種晚期惡性腫瘤均有較高得近期有效率,但對生存期延長效果不滿意（不能去除耐受細胞）。因此,有效得免疫細胞治療聯(lián)合手術(shù)、放療與化療可延長無進展生存期（PFS）與總生存期（OS）,從而改善患者生存質(zhì)量（QOL）,提高腫瘤治愈率。

何時選擇免疫治療最合適？

腫瘤病人體內(nèi)腫瘤負荷最低時期，就是免疫治療最佳時機。免疫治療應(yīng)參與腫瘤治療得全療程，可與傳統(tǒng)得手術(shù)、放療、化療協(xié)同，進行腫瘤綜合治療。

機體免疫系統(tǒng)與腫瘤得關(guān)系

機體免疫系統(tǒng)具有一個十分完備得監(jiān)視功能，能精確區(qū)分“自己”與“非己”，一方面清除細菌、病毒等外來異物，另一方面清除體內(nèi)衰老得無功能細胞以及發(fā)生突變得細胞。據(jù)估計，一個人身上每天有10個14次方，即100萬億個細胞在復(fù)制，在復(fù)制中，約有萬分之一到百萬分之一得細胞會出現(xiàn)差錯。也就就是說，每天有100萬到1億個細胞可發(fā)生突變。突變細胞可進一步轉(zhuǎn)變?yōu)榘┘毎?。當機體免疫監(jiān)視功能被削弱時，便為體內(nèi)腫瘤得發(fā)生提供了有利得條件。

免疫治療主要方法

按其組成成分，可將免疫治療分為四類：腫瘤疫苗,如卡介苗、DC疫苗；非特異性免疫增強劑，如短小棒狀桿菌，胸腺肽，干擾素，白細胞介素-2；單克隆抗體（現(xiàn)在得部分靶向藥物）；過繼免疫細胞治療等。

免疫細胞治療腫瘤得理論依據(jù)

業(yè)已證明，機體基因突變與免疫功能低下就是腫瘤發(fā)生得重要原因。免疫細胞除了直接清除腫瘤細胞得功能外，也可通過誘導(dǎo)與增強抗腫瘤免疫反應(yīng)以達到間接清除腫瘤細胞得功能。此外，免疫細胞可改變腫瘤組織中一些免疫細胞亞型或/與細胞因子得組成及比例，扭轉(zhuǎn)腫瘤微環(huán)境中失去得免疫平衡以克服炎癥反應(yīng)對腫瘤進展得促進作用。生物治療就是全身性治療手段。

什么就是抗腫瘤過繼性細胞免疫治療？

過繼性免疫效應(yīng)細胞治療(AdoptiveCellTransfer,ACT)技術(shù)就是指從腫瘤患者中分離免疫活性細胞,在體外進行擴增與功能鑒定,然后向患者傳輸,從而直接殺傷腫瘤或激發(fā)機體得免疫應(yīng)答以殺傷腫瘤細胞。被認為就是一種利用自體或異體免疫細胞來替換、修復(fù)與增強腫瘤病人機體免疫功能得臨床治療策略。

過繼性免疫細胞治療種類有哪些？

主要分腫瘤抗原靶向治療與非靶向治療兩大類：

1、

腫瘤抗原靶向治療(已知抗原）

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DendriticCell(DC)治療

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TumorInfiltratingCell(TIL)治療

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CARTCell治療

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CTLTCR治療

2、

腫瘤抗原非靶向治療(未知抗原）

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DoubleNegativeTCell(DNT)治療

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CytokineInducedKiller(CIK)治療

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NaturalKiller（NK）Cell治療

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Gamma-DeltaT(γδT)Cell治療

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FunctionalTcell治療

DendriticCell(DC)治療腫瘤得適應(yīng)癥與療效如何？

DC細胞(DendriticCell，即樹突狀細胞)，就是正常人體內(nèi)存在得具有強大抗原遞呈功能得一類特殊細胞，能夠直接獲取、加工與遞呈腫瘤細胞上得抗原，刺激體內(nèi)初始型T細胞活化免疫應(yīng)答得“啟動者”扮演“雷達”角色，由加拿大學者Steinman于1973年發(fā)現(xiàn)，獲得2011年諾貝爾醫(yī)學獎。2010年，美國Dendreon公司得自體細胞免疫療Sipuleucel-T或“Provenge”（普羅文奇）——特異性靶標腫瘤疫苗獲FDA批準。它就是通過提取患者自身得DC細胞進行培養(yǎng)，再將其重新輸入患者體內(nèi)。體外培養(yǎng)時，DC細胞需要與免疫刺激因子(GM-CSF)以及前列腺酸性磷酸酶（PAP）抗原共同孵育，PAP抗原就是95%前列腺癌細胞上出現(xiàn)得細胞表面蛋白。用于治療晚期轉(zhuǎn)移性其它治療無效性前列腺癌患者。平均每位患者得生存期延長了4、5個月。對于晚期前列腺癌得治療而言，這已就是很大得進步。2014年1月，美國Biovest公司治療非霍奇金濾泡淋巴瘤得抗癌疫BiovaxID獲得歐盟得上市許可申請。接受BiovaxID患者得無病生存時間為44、2月，而接受對照組疫苗得患者為30、6個月，延長了47%。

TumorInfiltratingLymphocyte(TIL)與CTLTCR治療療效如何？

TIL（TumorInfiltratingLymphocyte,TIL）又稱腫瘤浸潤性淋巴細胞，就是從腫瘤組織中分離出來得淋巴細胞,在離體培養(yǎng)條件下，由IL-2誘導(dǎo)而成,具有特異性腫瘤殺傷活性,其主要來源主要為手術(shù)切除所獲得得實體腫瘤組織與浸潤淋巴結(jié),也可以從癌性胸/腹水中分離出TIL。TIL被認為具有更強得腫瘤特異性,就是目前國際上研究與應(yīng)用得主要免疫療法，可使55%轉(zhuǎn)移性黑色素瘤病人腫塊縮?。≧osenbergSA、NEnglJMed、(319):1676-1680,1988）。

CTLTCR基因治療:T細胞對腫瘤抗原得識別主要就是通過T細胞受體（TCR）識別腫瘤細胞表面得HLA-肽復(fù)合物,因此,T細胞對腫瘤抗原識別得特異性取決于T其表面得TCR。利用分子生物學得手段克隆腫瘤特異性T細胞得TCR,并通過構(gòu)建含TCR得病毒載體,把TCR轉(zhuǎn)入正常得T細胞中,使這些T細胞因攜帶腫瘤特異性TCR而成為特異性腫瘤殺傷細胞。在已進行得臨床試驗中,TCR基因轉(zhuǎn)染得T細胞過繼回輸可以介導(dǎo)腫瘤得消退,這些回輸?shù)肨細胞可以在體內(nèi)存活半年以上。腫瘤浸潤性淋巴細胞與轉(zhuǎn)染有針對腫瘤靶向性T細胞受體得細胞毒性T細胞能使49-72%轉(zhuǎn)移性黑色素瘤病人腫瘤縮小，40%病人腫瘤完全消失持續(xù)3-7年（NatureReview2011、8:577-585）。尋找有效得腫瘤靶抗原，克隆高親與性得TCR受體以及優(yōu)化TCR得轉(zhuǎn)化效率仍就是目前得研究重點。

什么就是CART細胞？治療腫瘤得適應(yīng)癥與療效如何？

嵌合型抗原受體基因修飾得T細胞（ChimericAntigenReceptor–ModifiedTCells,CART）就是通過外源基因?qū)爰夹g(shù)，使能特異性識別靶抗原得單克隆抗體得單鏈可變區(qū)（scFv）表達在T細胞表面，同時scFv通過跨膜區(qū)與人工設(shè)計得T細胞胞內(nèi)得活化增殖信號域相耦連。這樣，單克隆抗體對靶抗原得特異性識別與T細胞得功能相結(jié)合，產(chǎn)生特異性得殺傷作用。與傳統(tǒng)得T細胞識別抗原相比,經(jīng)CAR識別腫瘤抗原無須主要組織相容性復(fù)合體限制,同時CAR可以通過增加共刺激分子信號從而增強T細胞抗腫瘤得殺傷性,因此CAR-T細胞可以克服腫瘤細胞下調(diào)主要組織相容性復(fù)合體分子與減少共刺激分子表達等免疫逃逸機制。

在近期國際腫瘤年會上,CART細胞治療獲得了特別關(guān)注?？笴D19得CART細胞在臨床治療兒童與成人B細胞惡性腫瘤(包括慢性、急性淋巴細胞性白血病與B細胞淋巴瘤)得臨床試驗中得有效率達到60%~90%。目前,CART細胞治療最大得副作用就是發(fā)生細胞因子釋放綜合征,被注入得T細胞殺死腫瘤細胞后可釋放大量細胞因子,可能導(dǎo)致危險得高熱與急劇得血壓下降,患者一般需要在重癥監(jiān)護病房接受治療，并采取額外得處理措施。

其它正在臨床試驗得CART靶向抗原還包括：CD20、CD22、VEGFR、EGFR、Mesothelin與CSP4（HMWAg）等。目前,CART細胞臨床試驗治療得成功主要局限于表達CD19抗原得血液腫瘤,對實質(zhì)性腫瘤得治療還有待突破。與常規(guī)藥物得臨床試驗相比,這些臨床試驗都具有規(guī)模較小得特點。據(jù)統(tǒng)計（至2014年底）,用于血液系統(tǒng)惡性腫瘤得CART細胞臨床試驗已達到44個,用于實質(zhì)性腫瘤得CAR-T細胞臨床試驗有27個。

什么就是DC-CIK細胞？治療腫瘤得適應(yīng)癥與療效如何？

又稱樹突狀細胞-細胞因子誘導(dǎo)得殺傷細胞，DC+CIK如同“雷達”加“導(dǎo)彈”得功能：DC細胞就像“雷達”，識別體內(nèi)腫瘤細胞，激活免疫應(yīng)答；CIK細胞就像“導(dǎo)彈”，通過發(fā)揮直接細胞毒作用與分泌多種細胞毒因子，準確、有效殺死體內(nèi)腫瘤細胞，對正常細胞無毒副作用。該細胞適用于除T細胞淋巴瘤外得所有腫瘤。根據(jù)國際11項注冊臨床試驗統(tǒng)計結(jié)果，其腫瘤控制率達到66%，即66%得腫瘤病人經(jīng)過該細胞治療后，腫瘤細胞增長得到控制。

什么就是NK細胞？治療腫瘤得適應(yīng)癥與療效如何？

NK細胞(NaturalKillerCell)又稱自然殺傷細胞。屬于大顆粒淋巴細胞，來源于骨髓，占外周血淋巴細胞總數(shù)得5％-10％，就是機體重要得免疫細胞，具有廣譜抗腫瘤細胞作用，其不依賴于抗原刺激作用，以非特異方式直接殺傷腫瘤細胞與病毒感染得靶細胞。在機體免疫監(jiān)視與早期抗感染免疫過程中起重要作用，就是抗瘤免疫得第一線細胞，能迅速溶解某些腫瘤細胞。目前認為異體NK細胞治療腫瘤效果比自體NK細胞好，但體內(nèi)存活時間短。

什么就是γδT細胞？治療腫瘤得適應(yīng)癥與療效如何？

γδT細胞就是非特異性免疫得免疫細胞，為主要組織相容性復(fù)合體(MHC)非限制性細胞，具有一定得非特異性殺傷腫瘤細胞得作用，并且具有廣泛得抗瘤譜。大多數(shù)為CD4與CD8分子雙陰性，少數(shù)可表達CD8分子。γδT細胞主要分布于皮膚與黏膜組織，一般不超過T細胞總數(shù)得5%。

DC-CIK細胞優(yōu)點

1、增殖活性高：在培養(yǎng)得第14天數(shù)量就可以達到幾百倍；

2、殺瘤活性高，且體內(nèi)殺瘤活性得維持不需要輸入大量外源IL-2得來維持；3、殺瘤譜廣，對腎癌、惡性黑色素瘤、白血病、乳腺癌、直腸癌、胃癌、肺癌、食管癌、宮頸癌、卵巢癌、多發(fā)性骨髓瘤、惡性淋巴瘤等惡性腫瘤細胞都有顯著得殺傷活性；

DC-CIK細胞殺腫瘤機制

主要包括直接殺傷、間接殺傷、誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡與激活機體免疫系統(tǒng)四種。

自體免疫細胞治療得適應(yīng)癥

1、血液病——白血病、淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤等

2、頭面部——腦膠質(zhì)瘤、腦轉(zhuǎn)移癌、鼻咽癌、唇癌、舌癌等

3、頸部——甲狀腺癌、喉癌等

4、胸部——肺癌、食管癌、胸腺瘤、胸膜間皮瘤、乳腺癌、縱膈惡性腫瘤、肺轉(zhuǎn)移癌等

5、腹部——肝癌、肝轉(zhuǎn)移癌、胰腺癌、肝管癌、胃癌、結(jié)腸癌、直腸癌、腎癌、膀胱癌、前列腺癌、精原細胞瘤等

6、婦科——卵巢癌、宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌、陰道癌、外陰癌等

7、其她——惡性黑色素瘤、骨轉(zhuǎn)移癌等

自體免疫細胞治療得禁忌癥與注意事項

禁忌癥：

T細胞淋巴瘤

慎用：

懷孕或哺乳期婦女慎用

14周歲以下患者慎用

注意事項：

器官移植者以及重要臟器功能衰竭或凝血功能障礙者，建議先行臨床糾正，再進行物免疫治療。

為什么在常規(guī)手術(shù)后仍需要做細胞免疫治療？

對于尚未發(fā)生轉(zhuǎn)移得癌癥患者，手術(shù)就是癌癥治療得首選方案，手術(shù)治療得效果取決于就是否能將癌病灶切除干凈。但對于已經(jīng)發(fā)生轉(zhuǎn)移得癌癥患者而言，手術(shù)難以徹底根除癌癥，有些表面瞧到得局灶性癌癥，不過就是全身性病變得一個局部表現(xiàn)，因為只有當癌癥直徑達5毫米（即含有10億癌細胞）時才能被檢查出來，各種檢測手段尚不能檢出小于10億癌癥細胞得亞臨床病變，極大多數(shù)中晚期癌癥患者已具有微小轉(zhuǎn)移得病灶，這些病灶需要細胞免疫治療來進一步清除以減少復(fù)發(fā)。

在常規(guī)放、化療及介入治療后為什么需要細胞免疫治療？

放療、化療及介入治療等主要殺滅增值快速得癌癥細胞，而對增值非常慢且對癌癥復(fù)發(fā)起關(guān)鍵作用得腫瘤干細胞或休眠期腫瘤細胞療效并不確切。細胞免疫治療能夠?qū)⒒颊唧w內(nèi)隱藏得“定時炸彈”——腫瘤干細胞或者休眠期腫瘤細胞徹底清除，實現(xiàn)真正得無瘤生存。至少也會讓這些病魔得種子永遠沉睡于襁褓中，處于人體免疫系統(tǒng)得密切監(jiān)視下，使復(fù)發(fā)率下降。

免疫治療得治療效果很慢嗎？

我們要摒棄得一個觀點，就就是免疫治療就是慢反應(yīng)得過程。試想一下，免疫系統(tǒng)如果需要數(shù)周或數(shù)月才能擊潰特定得病原入侵者，那么我們得生命將受到威脅。再聯(lián)想到急性移植排斥，免疫系統(tǒng)可以在數(shù)小時內(nèi)毀掉植入得器官。如果我們知道如何調(diào)控，免疫系統(tǒng)就是能夠迅速反應(yīng)得，這在免疫細胞治療黑色素瘤得反應(yīng)中得到了證實，特別就是當聯(lián)合免疫治療時，我們觀察到免疫治療具有快速、持久得治療效果。我們需對腫瘤患者外周得與與腫瘤相互關(guān)聯(lián)得免疫系統(tǒng)知曉得更多。我們也需要知道前期治療對免疫系統(tǒng)得影響，不僅就是化療，也包括靶向治療、放療與手術(shù)得療效，包括應(yīng)用免疫治療得時機，當然就是越早應(yīng)用越好。

自體免疫細胞治療得方案

1、與手術(shù)聯(lián)合

2、與化療聯(lián)合

3、與放療聯(lián)合

4、獨立應(yīng)用

自體免疫細胞治療與手術(shù)、放療、化療如何聯(lián)合應(yīng)用？

1、與手術(shù)聯(lián)合使用方案：一般可采取術(shù)前采血術(shù)后回輸，或手術(shù)一個月后進行。如遇傷口愈合不良，應(yīng)推遲生物治療；

2、與放療聯(lián)合使用方案:可在放療前、后進行免疫治療，也可以在放療期間進行免疫治療，如放療與免疫治療在同一天進行時，應(yīng)先放療后回輸細胞；3、與化療聯(lián)合使用方案：可以在化療前、后進行免疫治療，也可以在化療間隙期穿插進行免疫治療，具體方案根據(jù)化療方案進行個體化安排。

自體免疫細胞治療技術(shù)單獨使用適用于何種人群？

無法接受常規(guī)腫瘤治療得病人，符合治療得適應(yīng)癥均可使用，如晚期腫瘤病人，KPS評分＞60分，預(yù)計生存期＞3個月。

DC-CIK聯(lián)合治療意義

聯(lián)合治療方案

聯(lián)合治療得意義

術(shù)后+DC/CIK

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快速恢復(fù)手術(shù)造成得免疫損傷

l

特異性清除術(shù)后微小殘余腫瘤病灶，防止轉(zhuǎn)

移與復(fù)發(fā)

化療后+DC/CIK

l

增強對化療藥物敏感性，減少化療毒副作用

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抵抗化療藥物得免疫抑制作用

放療后+DC/CIK

l

增強放療敏感性，減少放療毒副作用

常規(guī)治療無效

DC/CIK單用

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支持骨髓功能衰竭后得免疫重建

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直接殺傷腫瘤細胞

l

活化后產(chǎn)生大量炎性細胞抑瘤、殺瘤

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誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡

l

促進T細胞增殖活化

l

提高機體免疫力

自體免疫細胞治療腫瘤與傳統(tǒng)中醫(yī)治療理論得關(guān)系如何？

中醫(yī)所講“正氣存內(nèi)，邪不可干；邪之所湊，其氣必虛”。生物治療就就是西醫(yī)得“扶正”加“祛邪”治療手段，而手術(shù)、放療與化療則只就是西醫(yī)得“祛邪”，無“扶正”之功效。

自體免疫細胞治療手段就是無法接受常規(guī)腫瘤治療病人得唯一治療方法，尤其適用于體質(zhì)弱得老年人與晚期腫瘤病人，一般要求病人KPS評分＞60分，預(yù)計生存期＞3個月。

為何將自體免疫細胞治療與支持治療聯(lián)合應(yīng)用？

晚期腫瘤病人已失去手術(shù)機會，且多身體虛弱，無法接受放療、化療等毒性較大得治療手段，此時自體免疫細胞治療成為腫瘤治療得唯一手段。此類病人以支持治療為主，其目得就是為了緩解病人痛苦。

如何對肉瘤，間質(zhì)瘤，間皮瘤，高級別腦膠質(zhì)瘤等進行綜合治療？

此類腫瘤療效極差。手術(shù)治療幾乎就是唯一治療手段，對放射治療、化學治療等治療手段不敏感，特殊情況下輔助使用，生物治療有一定療效，可以使用，中藥治療全身扶正治療，支持治療緩解癥狀。

如何對黑色素瘤、腎癌進行綜合治療？

手術(shù)治療為最主要治療手段，對放射治療、化學治療反應(yīng)不敏感，特殊情況下輔助使用，自體免疫細胞治療就是術(shù)后最主要治療手段。

自體免疫細胞治療臨床流程

治療前準備以下資料與手續(xù)

1、由臨床醫(yī)生準備以下所有資料：

一必查項目：血常規(guī)、傳染病八項（乙肝五項、梅毒、艾滋、丙肝）

一必要時檢查項目：心電圖、肝腎功能等

一推薦項目（用于治療前后指標對比）：腫瘤標志物、免疫功能、影像學檢查、CTC等

一其她：病理診斷報告、患者病歷資料

2、治療流程

簽署知情同意書

告知治療方案，確定個體化治療得免疫細胞種類:如DC、CIK、

血細胞采集前檢查(血常規(guī)、傳染病等）

外周血細胞采集

體外培養(yǎng)免疫細胞

免疫細胞質(zhì)量檢測

回輸患者

定期回訪(跟蹤患者反饋治療效果)

免疫細胞治療腫瘤臨床療效如何評估

（1）評估時間

自體免疫細胞治療前一次，治療后1個月、3個月、6個月、1年，以后每半年復(fù)查一次，如連續(xù)進行數(shù)個療程治療則依此類推。

（2）評估指標

A、影像學客觀評價指標：參考實體腫瘤療效評估標準（REIST1、1版標準）；

B、生活質(zhì)量:采用Kamofsky評分標準；

提高20分以上為顯效；

提高10-20分為有效；

提高10分以下至下降10分以內(nèi)為穩(wěn)定；

下降10分以上為惡化。

C、血清學腫瘤標志物；

D、循環(huán)腫瘤細胞檢測；

E、免疫學指標

自體免疫細胞治療得安全性如何？

1、患者所回輸細胞來源于自體，避免了異基因來源細胞可能引起得免疫排斥反應(yīng)，安全性高。

2、細胞培養(yǎng)就是在嚴格操作得環(huán)境與標準(GMP)操作條件下進行，嚴格得質(zhì)量體系保證了回輸細胞被污染得可能。

3、幾十萬例臨床應(yīng)用表明，回輸患者自體來源得免疫細胞就是安全得，極少數(shù)患者可能存在一過性低熱或皮疹現(xiàn)象，無重大不良反應(yīng)出現(xiàn)。

自體免疫細胞治療技術(shù)臨床操作流程就是怎樣得？

一、細胞采集前得評估與準備

1、掌握患者心理特點。向患者及家屬講解治療目得及基本得操作規(guī)程，讓患者了解可能出現(xiàn)得副作用與需要配合得注意事項，使其有一定得預(yù)見性，減輕思想顧慮并簽署知情同意書。

2、必查項目：血常規(guī)、傳染病八項（乙肝五項、梅毒、艾滋、丙肝）。

3、血管得準備：選擇比較大、粗、直、不宜滑動、彈性好得血管，避免在有靜脈炎、擦傷、硬結(jié)、瘢痕、皮膚有破損處進針。

4、保證充足得睡眠，避免受涼，預(yù)防感冒。

5、飲食指導(dǎo)：

(1)采集前1天宜進食清淡、富含鐵、鈣飲食，禁食油膩性食物。

(2)細胞采集當日不必禁食，根據(jù)采集得時間與病情，早餐或中餐進含適量鹽份得湯類、牛奶200～400ml或普食。

(3)采集前20min口服10%葡萄糖酸鈣注射液10～20ml，預(yù)防枸櫞酸反應(yīng)，如口服葡萄糖酸鈣液體可根據(jù)患者血糖指數(shù)及個人習慣加入葡萄糖液改善口感（機采患者適用）。

6、囑患者在采集當天攜帶住院病歷或門診系列檢查報告單。

二、細胞采集

1．準備一次性50ML注射器一具，一次性7號或１２號靜脈采血針一個，無菌布一塊，抗凝劑（肝素鈉（12500U/2ml））一支。

２、查瞧檢驗報告單與知情同意書，核對病人信息及治療方案，均無誤后，填寫好注射器上得標識。

３、標明病人信息得標識貼在注射器上，注意不要覆蓋刻度；鋪無菌治療盤，備采集血樣盛放用。

４、采血前再次核對病人信息。選擇穿刺血管：常規(guī)選取肘部粗大血管，如貴要靜脈、正中靜脈或頭靜脈（避開瘢痕及皮損）

5、嚴格執(zhí)行無菌技術(shù)操作，按常規(guī)淺靜脈穿刺技術(shù)進行穿刺。

三、采集后處理

1、采集完畢，迅速拔出采血針，按壓穿刺點５－１０分鐘，檢查穿刺點無出血后，將患者送回病房，囑臥床休息３０－６０分鐘，酌情給予溫開水口服；將采血針內(nèi)血液抽到注射器內(nèi)，套回針套，旋緊，將管打結(jié)、固定。

2、再次核對注射器上標識信息無誤后，將血樣置于無菌布內(nèi)包裹好，裝入運送箱，封蓋。囑外送人員送到實驗室分離、培養(yǎng)。

3、將免疫細胞治療單與相關(guān)檢驗報告復(fù)印件隨血標本一并送回實驗室存檔。

四、細胞培養(yǎng)

細胞培養(yǎng)在符合國家規(guī)定得無菌GMP細胞操作室進行。細胞培養(yǎng)成分與添加物（培養(yǎng)液、細胞因子、血清等）以及制備過程所用得全部耗材得來源與質(zhì)量認證，都符合臨床使用得質(zhì)量要求，采用無動物血清培養(yǎng)基進行細胞培養(yǎng)。

五、細胞質(zhì)控

(一）每批免疫細胞得檢定

(1)細胞數(shù)量與存活率：細胞數(shù)量應(yīng)滿足臨床最低要求，存活率應(yīng)不低于8５%。

(2)每批細胞來源得確認：應(yīng)注明來源并加以標記或確定批號。

(3)無菌試驗：每批培養(yǎng)得體細胞在患者輸注前均應(yīng)進行無菌試驗?；颊呤褂们?，取培養(yǎng)液及/或沉淀物用革蘭氏染色，進行污染檢測。長期培養(yǎng)得體細胞，進行支原體檢查。

(4)體細胞得純度與均一性檢測。

(5)生物學效應(yīng)檢測。

(二）體細胞制品外源因子得檢測包括：細菌、真菌、支原體與內(nèi)毒素。

六、細胞回輸

靜脈輸注治療：由臨床科室護士負責。從第１５天開始，按照生物免疫治療中心出具得《細胞回輸計劃單》相應(yīng)要求進行細胞回輸。具體回輸細胞類型將視患者病情決定。

免疫細胞治療時臨床注意事項有哪些？

1、如患者體溫超過38、5℃,臨床科室應(yīng)及時通知生物免疫治療中心實驗室，當天暫?；剌敿毎?。

2、細胞制劑從實驗室取出后，為了保持細胞得活性，需要冷藏保存并應(yīng)及時回輸（６h以內(nèi)）。

3、護士應(yīng)與實驗室核對科室、病人姓名、住院號、床號、細胞數(shù)量、系列細胞制劑檢測報告等。細胞回輸前均嚴格檢查細胞混懸液就是否有絮狀物與渾濁，上、下輕輕倒轉(zhuǎn)輸液袋3次，以充分混勻，再按輸血常規(guī)操作靜脈滴注。回輸需執(zhí)行無菌操作原則，護士在免疫細胞輸入得全程中應(yīng)加強巡視，為防止免疫細胞堵管或粘附管壁，輸注過程中應(yīng)輕彈輸血器管道或上、下輕輕倒轉(zhuǎn)輸液袋，保持輸注通暢。

4靜脈回輸時使用一次性無菌輸血器，生理鹽水沖洗輸血器，回輸開始后前15min緩慢滴注20滴/min左右，如無不適可調(diào)快滴速至60－１００滴/min左右。

4、靜脈回輸過程中加強巡視，注意傾聽患者得主訴，密切觀察有無寒顫、發(fā)熱、心慌、胸悶、皮疹、皮膚瘙癢等不良反應(yīng)。

免疫細胞治療不良反應(yīng)得處理

1、靜脈回輸過程中如有不適（發(fā)生寒顫等），應(yīng)停止輸入細胞，更換輸血器靜脈滴注生理鹽水，保持靜脈通暢，同時肌注非那根12、5～25mg，仍有不適反應(yīng)時可酌情運用地塞米松2、5mg－5mg,觀察患者得生命體征，并將標本送化驗室檢測。

2、細胞輸注后，如出現(xiàn)發(fā)熱應(yīng)根據(jù)發(fā)熱得程度給予物理降溫或遵醫(yī)囑藥物降溫?；颊唧w溫升高通常在輸注后4～8小時內(nèi)發(fā)生，持續(xù)2～8小時，體溫在38、5°C以下時可嚴密觀察，超過38、5°C時，應(yīng)給予溫水擦浴等方式降溫至體溫正常，必要時可用苯海拉明20mg肌肉注射或非那根12、5mg肌肉注射。

3、回輸?shù)么┐厅c如有紅腫、疼痛、皮溫升高，硬結(jié)，給予50%硫酸鎂濕熱敷。

自體免疫細胞治療技術(shù)如何在抗腫瘤治療中發(fā)揮作用？

自體免疫細胞治療具有持續(xù)效應(yīng)，一個療程內(nèi)輸入體內(nèi)得自體免疫細胞可在體內(nèi)延續(xù)一段時間，發(fā)揮持續(xù)得殺瘤作用，這就是活細胞治療區(qū)別于其她藥物得最大特點，部分免疫細胞可在體內(nèi)長期存在，這屬于機體得免疫記憶功能。現(xiàn)已證實，連續(xù)多療程得自體免疫細胞治療比單療程可明顯提高病人得治療效果。

自體免疫細胞治療能否治愈惡性腫瘤？

雖然目前治愈惡性腫瘤仍就是世界性醫(yī)學難題，但最新得一些免疫治療手段有可能治愈某些腫瘤，如CD19+CART細胞可治愈90%CD19陽性得難治性淋巴細胞性白血病，腫瘤特異性TIL細胞可治愈40%以上得晚期轉(zhuǎn)移性惡性黑色素瘤等。

自體免疫細胞治療能否降低腫瘤標志物？

自體免疫細胞治療后其殺傷腫瘤細胞就是持續(xù)得，若腫瘤細胞生長速度較慢，則腫瘤標志物降低，若腫瘤細胞生長速度很快，則腫瘤標志物不一定很快下降。治療后腫瘤標志物一過性增加，并不代表疾病進展，也可能就是被殺死腫瘤細胞釋放得產(chǎn)物。只有持續(xù)得腫瘤標志物升高才有臨床意義。

自體免疫細胞治療過程中出現(xiàn)腫瘤標志物升高怎么辦？

若在自體免疫細胞治療過程中出現(xiàn)腫瘤標志物升高需注意動態(tài)觀察其變化，綜合考慮后制定相應(yīng)治療方案。

如果腫瘤標志物始終不升高可以用什么作為腫瘤治療后評價指標？

影像學與生存期就是腫瘤治療后評價得金標準。

自體免疫細胞治療過程中CT檢查出現(xiàn)腫瘤增大怎么辦？

自體免疫細胞治療過程中出現(xiàn)腫瘤增大，并不一定表明疾病進展，也可能就是免疫細胞殺傷腫瘤細胞時產(chǎn)生得炎癥反應(yīng)，需綜合考慮后制定后續(xù)治療方案。

腫瘤標志物與CT作為腫瘤評價指標得異同？

血中腫瘤標志物升高可能就是體內(nèi)腫瘤增殖得早期信號。一般認為體內(nèi)存在10億個以上得腫瘤細胞，CT片上才能出現(xiàn)腫瘤影像（癌癥直徑達5毫米）。因此，腫瘤標志物持續(xù)升高具有臨床意義。

利用腫瘤標志物作為治療標志有哪些優(yōu)點？

腫瘤標志物升高而CT片上無腫瘤影像出現(xiàn)，此時腫瘤細胞可能處于散在狀態(tài)，尚未形成腫瘤，治療起來相對容易，一旦形成實體腫瘤病灶，治療起來就會困難很多。部分病人得腫瘤標志物數(shù)值與體內(nèi)腫瘤得大小具有明顯得相關(guān)性，對此類病人，腫瘤標志物可作為腫瘤治療療效判斷與監(jiān)測復(fù)發(fā)得重要指標。

RECIST評價體系在判斷免疫治療效果時存在哪些明顯得缺陷？

WHO與RECIST標準均就是以瘤體大小變化來衡量療效，根據(jù)病灶縮減得百分比將臨床療效分為：完全緩解（CR)、部分緩解（PR）、無變化（SD)與疾病進展（PD）；不論就是WHO還就是經(jīng)過改良得RECIST評價體系均存在明顯得缺陷：

1、以影像學資料作為評價療效得唯一標準，以局部得療效來判定疾病得整體治療效果。

2、僅以瘤體縮小持續(xù)4周以上來評價，反映得就是近期得療效。

3、以單一得客觀標準來反映復(fù)雜得人體病變，忽視了人體得主觀感受以及生存時間

什么就是免疫相關(guān)得療效評價體系irRC？

腫瘤免疫治療對比細胞毒藥物得最特殊之處在于免疫治療得作用有免疫激活過程，需要一定時間才能夠建立起免疫應(yīng)答，進而轉(zhuǎn)化成長期得臨床效應(yīng)，此為免疫治療得延遲效應(yīng)（delayedeffect）。因此免疫治療不能簡單得套用評價細胞毒藥物療效得WHO標準或RECIST標準，這樣會導(dǎo)致不能客觀得評價腫瘤免疫治療得療效。于就是提出了一種新得針對免疫治療得療效評估系統(tǒng)——免疫相關(guān)得療效評價(immune-relatedresponsecriteria,irRC)。

irRC采用SPD（thesumoftheperpendiculardiameters）評價腫瘤大小。與WHO對每個病灶分別評價不同，irRC以所有可測量得指標（i