山西省古縣、高縣、離石縣八校新高考壓軸卷生物試卷注意事項:1．答題前，考生先將自己的姓名、準考證號碼填寫清楚，將條形碼準確粘貼在條形碼區(qū)域內。2．答題時請按要求用筆。3．請按照題號順序在答題卡各題目的答題區(qū)域內作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試卷上答題無效。4．作圖可先使用鉛筆畫出，確定后必須用黑色字跡的簽字筆描黑。5．保持卡面清潔，不要折暴、不要弄破、弄皺，不準使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．中國賽罕壩林場建設者榮獲2017年聯(lián)合國環(huán)保最高榮譽—“地球衛(wèi)士獎”。塞罕壩曾被稱作“千里松林”，但由于過度采伐，成為荒原。經林場建設者們的設計和努力創(chuàng)造了荒原變林海的奇跡。2019年，中國“螞蟻森林”項目再獲此殊榮。下列說法錯誤的是（）A．生態(tài)系統(tǒng)的自我調節(jié)能力是有一定限度的B．對森林采用科學合理的間伐，可提高其恢復力穩(wěn)定性C．生態(tài)環(huán)境問題具有全球性，需要全人類的關注和合作D．人類活動往往會使群落演替按照不同于自然演替的速度和方向進行2．基因I和基因Ⅱ在某動物染色體DNA上的相對位置如圖所示，下列說法錯誤的是A．基因I和基因Ⅱ可能決定動物的同一性狀B．基因I的表達產物可能影響基因II的表達C．基因I和基因Ⅱ可能在多種細胞中都表達D．基因I和基因Ⅱ在轉錄時不存在A和T配對3．“母性效應”是指子代某一性狀的表現(xiàn)型由母體的核基因型決定，而不受本身基因型的支配。椎實螺是一種雌雄同體的軟體動物，一般通過異體受精繁殖，但若單獨飼養(yǎng)，也可以進行自體受精，其螺殼的旋轉方向有左旋和右旋的區(qū)分。旋轉方向符合“母性效應”，遺傳過程如圖所示。下列敘述錯誤的是（）A．與螺殼旋轉方向有關的基因的遺傳遵循基因的分離定律B．螺殼表現(xiàn)為左旋個體和表現(xiàn)為右旋個體的基因型均各有3種C．讓圖示中F2個體進行自交，其后代螺殼右旋∶左旋=3∶1D．欲判斷某左旋椎實螺的基因型，可用任意的右旋椎實螺作為父本進行交配4．線粒體是一種存在于大多數(shù)細胞中的由兩層膜包被的細胞器，是細胞中進行能量轉換的結構，是細胞進行有氧呼吸的主要場所，被稱為“powerhouse”。下圖為線粒體中相關物質的生物合成示意圖，下列分析錯誤的是（）A．線粒體中有核糖體以及RNA聚合酶、解旋酶等物質B．僅靠線粒體內基因的表達產物，線粒體不能完成全部的代謝C．圖中遺傳信息的流動過程中堿基互補配對方式完全相同D．與核DNA表達相比，線粒體DNA的表達沒有空間上的障礙5．下列有關科學史的敘述正確的是（）A．歐文頓提出：生物膜是由脂質和蛋白質組成的B．斯他林和貝利斯通過實驗證明小腸黏膜產生促胰液素并進入血液，隨血液到達胰腺，引起胰液的分泌C．卡爾文等用藍藻做實驗，探明了CO2中碳在光合作用中轉換成有機物中碳的途徑D．孟德爾用豌豆做實驗發(fā)現(xiàn)了兩大遺傳定律，提出性狀是由基因控制的6．某些效應T細胞在癌組織環(huán)境中會合成兩種細胞膜蛋白（CTLA-4、PD-1），這兩種膜蛋白對效應T細胞的殺傷功能具有抑制作用。2018年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎授予了兩位科學家，是因為他們發(fā)現(xiàn)了以上兩種膜蛋白的特殊抗體，并成功將其用于癌癥的治療。下列敘述正確的是（）A．人體內癌變的細胞會成為抗原，被效應T細胞攻擊B．提高CTLA-4、PD-1的活性，細胞免疫功能將增強C．通過使用兩種膜蛋白的特殊抗體可直接殺滅癌細胞D．癌細胞一定是誘導效應T細胞發(fā)生基因突變后合成了CTLA-4、PD-1二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）玉米籽粒的有色和無色是一對相對性狀，受三對等位基因控制?；蛐虴_F_G_的玉米籽粒有色，其余均無色?；卮鹣铝袉栴}。（1）上述材料表明基因與性狀的關系是___________。（2）玉米群體中，無色籽粒純合子最多有___________種基因型。（3）現(xiàn)提供甲（eeFFGG）、乙（EEffGG）、丙（EEFFgg）三個玉米品系，兩兩雜交。F1的表現(xiàn)型都是___________。（4）為確定這三對等位基因之間的位置關系，利用甲、乙、丙設計以下實驗：（不考慮基因突變和交叉互換的情況），讓每兩個品系之間雜交得到三組F1，再讓三組F1自交得到F2，分別統(tǒng)計三組F2籽粒顏色。預期的實驗結果及結論：若三組F2籽粒有色與無色的比例均為9：7，則三對等位基因的位置關系是___________；若一組F2籽粒有色與無色的比例為1：1，其他兩組籽粒有色與無色的比例均為9：7，則三對等位基因的位置關系是___________；若三組F2籽粒有色與無色的比例均為1：1，則三對等位基因的位置關系是___________。8．（10分）豌豆種子細胞呼吸時，底物經脫氫酶催化所釋放的氫，能將無色的三苯基氯化四唑（TTC）還原為紅色的三苯甲腙。在種子萌發(fā)過程中，其CO2釋放速率和O2吸收速率的變化如下圖所示，請回答：（1）種子萌發(fā)的12～14h，CO2釋放速率遠大于O2吸收速率，說明該階段豌豆種子的主要呼吸方式為______________。豌豆種子細胞呼吸產氫的場所是___________。（2）胚根長出前，完整的種皮限制了種子對_____________的吸收，從而影響了種子的呼吸速率。36h后，O2吸收速率大于CO2釋放速率，說明碗豆種子細胞的呼吸底物不全是_____________。（3）從細胞呼吸角度分析，碗豆種子比小麥種子更適宜淺播的原因是______________________。（4）實驗室除用TTC鑒定種子胚細胞的“死活”外，還可用染料染色法來鑒定種子胚細胞的“死活”，后者的鑒定原理是___________________________。9．（10分）為了應對“垃圾圍城”的困局，很多大型城市啟動了近城區(qū)垃圾填埋場生態(tài)修復工程。目前推廣的做法是將填埋場改造成生態(tài)公園。請回答下列問題：（l）垃圾填埋場內發(fā)生的群落演替屬于____演替。（2）生態(tài)修復工程啟動后，雜草叢生的垃圾填埋場可以在2年時間內變身生態(tài)公園，這說明人類活動對群落演替有什么影響？_______________________________（3）為了更好地做好生態(tài)修復工作，前期的調查研究必不可少。①若要調查填埋場土壤中小動物類群的豐富度，常用____的方法進行采集、調查。有些小動物用肉眼難以識別，可用鑷子或吸管取出，放在載玻片上，借助______進行觀察。②某時期有一批田鼠遷入該填埋場，該田鼠以草根為食，田鼠的種群數(shù)量可以通過________法測得。預計該田鼠種群增長速率的變化情況是____。10．（10分）紅細胞含有大量血紅蛋白，我們可以選用豬、牛、羊的血液進行實驗，來提取和分離血紅蛋白。根據(jù)材料回答下列問題：（1）以哺乳動物的紅細胞為實驗材料的原因：________________。（2）提取血細胞時，首先進行紅細胞的洗滌，洗滌次數(shù)、離心速度與離心時間十分重要。洗滌次數(shù)過少，________；離心速度________和時間________會使血細胞等一同沉淀。（3）蛋白質分離方法中常用凝膠色譜法，該方法是根據(jù)________分離蛋白質。（4）同學甲利用瓊脂糖凝膠電泳技術，將得到的蛋白質進行分離，在電泳過程中，影響蛋白質遷移速度的因素包括蛋白質分子的________、________以及分子本身的大小等。11．（15分）蘿卜的蛋白A具有廣泛的抗植物病菌作用，而且對人體沒有影響。我國科學家欲獲得高效表達蛋白A的轉基因大腸桿菌作為微生物農藥，做了相關研究。（1）研究者用相同的_________酶處理蛋白A基因和pET質粒，得到重組質粒，再將重組質粒置于經_________處理的大腸桿菌細胞懸液中，獲得轉基因大腸桿菌。（2）檢測發(fā)現(xiàn)，轉入的蛋白A基因在大腸桿菌細胞中表達效率很低，研究者推測不同生物對密碼子具有不同的偏好，因而設計了與蛋白A基因結合的兩對引物（引物B和C中都替換了一個堿基），并按圖2方式依次進行4次PCR擴增，以得到新的蛋白A基因。①這是一種定點的_________技術。②圖2所示的4次PCR應該分別如何選擇圖1中所示的引物？請?zhí)顚懸韵卤砀瘢ㄈ暨x用該引物劃“√”，若不選用該引物則劃“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者進一步將含有新蛋白A基因的重組質粒和_________分別導入大腸桿菌，提取培養(yǎng)液中的蛋白質，用_________方法檢測并比較三組受體菌蛋白A的表達產物，判斷新蛋白A基因表達效率是否提高。為檢測表達產物的生物活性，研究者將上述各組表達產物加入到長滿了植物病菌的培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時間后，比較_________的大小，以確定表達產物的生物活性大小。（4）作為微生物農藥，使用時常噴灑蛋白A基因的發(fā)酵產物而不是轉蛋白A基因的大腸桿菌，其優(yōu)點是_________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、B【解析】

生態(tài)環(huán)境面臨的問題有：1.全球變曖與海平面上升，大氣中的二氧化碳等氣體增加，將出現(xiàn)更嚴重的溫室效應，旱澇災害可能增加；2.土地流失失與人均耕地面積不斷減少；3.森林資源日益減少，世界森林每年幾乎減少1%；4.淡水供給不足將構成經濟發(fā)展和糧食生產的制約因素；5.臭氧層的損耗將大影響水生生態(tài)系統(tǒng)；6、生物物種加速滅絕，動植物資源急劇減少?！驹斀狻緼、罕壩曾被稱作“千里松林”，但由于過度采伐，成為荒原，這一事實說明生態(tài)系統(tǒng)的自我調節(jié)能力是有一定限度的，A正確；B、對森林采用科學合理的間伐，可提高其自我調節(jié)能力，B錯誤；C、生態(tài)環(huán)境是人類賴以生存的物質基礎，故生態(tài)環(huán)境問題具有全球性，需要全人類的關注和合作，C正確；D、人類活動能夠改變群落演替的方向和速度，因此可知人類活動往往會使群落演替按照不同于自然演替的速度和方向進行，D正確。故選B。2、D【解析】

1、等位基因是指位于同一對同源染色體的相同位置，控制相對性狀的基因。2、細胞中表達的基因形象地分為“管家基因”和“奢侈基因”?！肮芗一颉痹谒屑毎斜磉_，是維持細胞基本生命活動所必需的；而“奢侈基因”只在特定組織細胞中表達?！驹斀狻炕騃和基因Ⅱ位于同一條染色體上，所以不是等位基因。但生物的一個性狀可能由多個基因決定，因此基因I和基因Ⅱ可能決定動物的同一性狀，A正確；基因和基因、基因和基因產物、基因和環(huán)境之間存在著復雜的相互作用，因此基因I的表達產物可能影響基因II的表達，B正確；若基因I和基因Ⅱ是管家基因，在所有細胞中都表達，C正確；轉錄時，堿基互補配對為A-U、T-A、C-G、G-C，因此基因I和基因Ⅱ在轉錄時存在A和T配對，D錯誤。故選D。【點睛】理解等位基因的概念，明確基因、染色體和性狀之間的關系是解答本題的關鍵。3、B【解析】

據(jù)圖分析，左螺旋dd作為母本，與右螺旋DD作為父本雜交，后代基因型為Dd，表現(xiàn)型為左螺旋（與母本相同），子一代為Dd，Dd自交，子二代全部為右螺旋，且后代DD：DD：dd=1：2：1，說明Dd的遺傳遵循基因的分離定律，即“母性效應”現(xiàn)象是符合孟德爾分離定律的?！驹斀狻緼、根據(jù)以上分析已知，與螺殼旋轉方向有關的基因的遺傳遵循基因的分離定律，A正確；B、根據(jù)題意和圖形分析，螺殼表現(xiàn)為左旋，說明母本的基因型為dd，,故表現(xiàn)為螺殼左旋的子代基因型為dd或Dd2種；螺殼表現(xiàn)為右旋，說明母本的基因型為DD或Dd，則表現(xiàn)為螺殼右旋的子代基因型為DD、Dd或dd3種，B錯誤；C、讓圖示中F2個體進行自交，DD和Dd自交的后代都是右螺旋，dd自交的后代是左螺旋，因此后代螺殼右旋∶左旋=3∶1，C正確；D、左螺旋的基因型為dd或Dd，鑒定期基因型可以讓其與任意的右旋椎實螺作為父本進行交配，若后代都是左螺旋，則基因型為dd，若后代但是右螺旋，則基因型為Dd，D正確。故選B。4、C【解析】

DNA復制、轉錄、翻譯的比較

復制轉錄翻譯時間

細胞分裂間期（有絲分裂和減數(shù)第一次分裂）

個體生長發(fā)育的整個過程場所主要在細胞核主要在細胞核細胞質的核糖體模板DNA的兩條鏈DNA的一條鏈mRNA原料4種游離的脫氧核苷酸4種游離的核糖核苷酸20種游離的氨基酸條件酶（解旋酶，DNA聚合酶等）、ATP酶（RNA聚合酶等）、ATP酶、ATP、tRNA產物2個雙鏈DNA一個單鏈RNA多肽鏈特點半保留，邊解旋邊復制邊解旋邊轉錄一個mRNA上結合多個核糖體，順次合成多條肽鏈堿基配對A-T

T-A

C-G

G-CA-U

T-A

C-G

G-CA-U

U-A

C-G

G-C遺傳信息傳遞DNA----DNADNA------mRNAmRNA-------蛋白質意義

使遺傳信息從親代傳遞給子代表達遺傳信息，使生物表現(xiàn)出各種性狀【詳解】A、線粒體中能進行DNA的復制，說明有解旋酶，能進行遺傳信息的轉錄說明有RNA聚合酶，能進行翻譯說明有核糖體，A正確；B、線粒體內基因的表達產物和核基因的表達產物共同使線粒體完成全部的代謝，B正確；C、圖中遺傳信息的流動過程中堿基互補配對方式不完全相同，DNA復制過程中有A與T的配對，而遺傳信息的轉錄過程中A只能與U配對，C錯誤；D、核DNA的轉錄發(fā)生在細胞核，翻譯發(fā)生在核糖體，線粒體DNA的表達都在線粒體中進行，D正確。故選C。5、B【解析】

19世紀末，歐文頓對細胞膜結構的研究結論是：膜是由脂質構成的。1925年，兩位荷蘭科學家用丙酮從人的紅細胞中提取脂質，在空氣-水界面上鋪成單分子層，測得單分子層的面積恰為紅細胞表面積的2倍，由此得出結論：細胞膜中的脂質分子必然排列為連續(xù)的兩層。1959年，羅伯特森利用電鏡觀察細胞膜的結構提出：所有的生物膜都是由蛋白質-脂質-蛋白質三層結構構成，他把生物膜描述為靜態(tài)的統(tǒng)一結構。1972年桑格和尼克森提出了膜的流動鑲嵌模型。【詳解】A、歐文頓提出：生物膜是由脂質組成的，A錯誤；B、斯他林和貝利斯的實驗證明了胰液的分泌不受神經調節(jié)控制，而是在鹽酸的作用下，小腸黏膜產生了一種化學物質（促胰液素）進入血液后，隨血流到達胰腺，引起胰液分泌的化學調節(jié)，B正確；C、卡爾文等用小球藻做實驗，探明了CO2中碳在光合作用中轉換成有機物中碳的途徑，C錯誤；D、孟德爾用豌豆做實驗發(fā)現(xiàn)了兩大遺傳定律，提出性狀是由遺傳因子控制的，D錯誤。故選B。6、A【解析】

免疫是指身體對抗病原體引起的疾病的能力，特異性免疫包含細胞免疫和體液免疫。細胞免疫對抗被病原體感染的細胞和癌細胞，此外也對抗移植器官的異體細胞。體液免疫為效應B細胞產生和分泌大量的抗體分子分布到血液和體液中，體液免疫的主要目標是細胞外的病原體和毒素。這些病原體和毒素在組織和體液中自由的循環(huán)流動時，抗體與這類細胞外的病原體和毒素結合，致使病毒一類的抗原失去進入寄主細胞的能力，使一些細菌產生的毒素被中和而失效，還可使一些抗原（如可溶的蛋白質）凝聚而被巨噬細胞吞噬?！驹斀狻緼、人體內癌變的細胞會成為靶細胞，被效應T細胞攻擊，A正確；B、CTLA-4、PD-1這兩種膜蛋白對效應T細胞的殺傷功能具有抑制作用，提高CTLA-4、PD-1的活性，細胞免疫功能將減弱，B錯誤；C、抗體不能直接殺滅癌細胞，C錯誤；D、從題干中無法看出癌細胞一定是誘導效應T細胞發(fā)生基因突變，也有可能是影響了基因選擇性表達，使其合成了CTLA-4、PD-1，D錯誤。故選A。二、綜合題：本大題共4小題7、基因通過控制酶的合成來控制代謝過程，進而控制生物體的性狀7有色三對等位基因分別位于三對同源染色體上其中任意兩對等位基因位于一對同源染色體上，另一對等位基因位于非同源染色體上三對等位基因位于一對同源染色體上【解析】

1、基因對性狀的控制途徑有兩種，一是基因通過控制酶的合成來控制代謝過程，進而控制生物體的性狀，另一種是基因控制蛋白質的結構直接控制生物體的性狀。2、題干分析，每對等位基因至少含有一個顯性基因才表現(xiàn)為有色，其余均為無色。【詳解】（1）基因通過轉錄和翻譯過程控制蛋白質的合成，而有色和無色是非蛋白類物質，因此基因對性狀的控制方式是基因通過控制酶的合成來控制細胞代謝進而控制生物體的性狀。（2）玉米群體中，純合子一共有8中基因型，其中只有EEFFGG表現(xiàn)有色，因此無色籽粒純合子最多有7種基因型。（3）三個玉米品系兩兩雜交，F(xiàn)1的基因型均為E_F_G_，表現(xiàn)型都是有色。（4）甲和乙雜交得到的F1為EeFfGG，甲和丙雜交得到的F1為EeFFGg，乙和丙雜交得到的F1為EEFfGg，三組得到的F1分別自交，若每組自交后代的性狀分離比均為有色9：7，則這三對等位基因分別位于三對同源染色體上。若其中一組F2籽粒有色與無色的比例為1：1，其他兩組籽粒有色與無色的比例均為9：7，則有兩對等位基因位于一對同源染色體上，另一對等位基因位于非同源染色體上；若三組F2籽粒有色與無色的比例均為1：1，則三對等位基因位于一對同源染色體上。【點睛】本題重點考查考生理解能力、實驗結果進行分析能力，對考生的能力要求比較高，屬于較難的題目。8、無氧呼吸細胞質基質和線粒體基質O2（或O2和水）葡萄糖（糖類）豌豆種子脂肪含量更高，脂肪氧化分解需要消耗更多的O2，淺播利于種子吸收氧氣活細胞的細胞膜具有選擇透過性，不易被染料染色（或者死細胞的細胞膜不具有選擇透過性，易被染料染色）【解析】

種子萌發(fā)的外界條件有充足的水分、適宜的溫度和足夠的氧氣，種子萌發(fā)的初期主要進行無氧呼吸，胚根突破種皮后主要進行有氧呼吸。脂肪中氧的含量低于糖類，脂肪氧化分解時消耗的氧的體積大于產生二氧化碳的體積?！驹斀狻浚?）無氧呼吸不吸收氧氣，產生二氧化碳，有氧呼吸消耗葡萄糖時，產生的二氧化碳體積與消耗氧的體積相同。據(jù)圖可知，在12～24h期間，氧氣吸收量很少，而二氧化碳釋放量很多，表明此時的呼吸方式主要是無氧呼吸，產物是二氧化碳和酒精。有氧呼吸的第一、二階段和無氧呼吸的第一階段可產生還原氫，有氧呼吸第一階段和無氧呼吸第一階段場所相同，都是細胞質基質，有氧呼吸第二階段場所是線粒體基質。（2）胚根長出前，完整的種皮限制了種子對氧氣的吸收，從而影響了種子的呼吸速率。36h后，O2吸收速率大于CO2釋放速率，說明碗豆種子細胞的呼吸底物不全是葡萄糖，還存在脂肪等其他物質。（3）豌豆種子中脂肪含量高于小麥種子，脂肪氧化分解時需要的氧比單位質量的糖類氧化分解時需要的氧更多，淺播利于種子吸收氧氣，有利于種子萌發(fā)。（4）活細胞的細胞膜具有選擇透過性，染料分子不能通過活細胞的細胞膜，所以活細胞的胚細胞不易被染料分子染上顏色。【點睛】本題結合曲線圖，考查細胞呼吸的過程及影響呼吸作用的環(huán)境因素等，要求考生識記植物細胞有氧呼吸和無氧呼吸的總反應式，能根據(jù)曲線圖中信息準確判斷各選項，屬于考綱識記和理解層次的考查。9、次生人類活動會使群落替按照不同于自然演替的速度和方向進行取樣器取樣放大鏡、實體鏡標志重捕先增大后減小【解析】

1、初生演替指在一個從來沒有被植物覆蓋的地面，或者是原來存在過植被、但被徹底消滅了的地方發(fā)生的演替；次生演替指原有植被雖已不存在，但原有土壤條件基本保留，甚至還保留了植物的種子或其他繁殖體的地方發(fā)生的演替。人類活動往往會使群落演替按照不同于自然演替的速度和方向進行。2、種群數(shù)量“S”型增長實現(xiàn)的條件是：環(huán)境條件是有限的，資源和空間有限、存在敵害等，各階段的增長速率不同，隨著時間的增加，種群增長速率先增大后減小，種群增長速率在K/2達到最大?！驹斀狻浚?）垃圾填埋場原有的土壤條件基本保留，甚至還保留了植物的種子或者其他繁殖體，故在垃圾填埋場內發(fā)生的群落演替屬于次生演替。（2）人類活動往往會使群落演替按照不同于自然演替的速度和方向進行。（3）①土壤中小動物類群豐富度的研究，常用取樣器取樣法進行采集、調查；有些小動物用肉眼難以識別可用鑷子或吸管取出，放在載玻片上，借助放大鏡、實體鏡進行觀察。②田鼠活動能力強，活動范圍大，常用標志重捕法調查其種群數(shù)量；田鼠遷入垃圾填埋場后，種群增長一般接近于“S”型增長，其種群增長速率的變化情況應是先增大后減小?！军c睛】本題考查種群數(shù)量變化的S型增長曲線、群落的演替、群落中豐富度的調查，意在考查考生對所學知識要點的理解，把握知識間內在聯(lián)系，運用所學知識，準確判斷問題的能力，屬于考綱識記和理解層次的考查。10、成熟的哺乳動物紅細胞沒有細胞核和細胞器無法除去血漿蛋白過高過長相對分子質量的大小分子帶電性質的差異分子的形狀【解析】

1、凝膠色譜法：

凝膠色譜法也稱做分配色譜法，是根據(jù)相對分子質量的大小分離蛋白質的有效方法。2、電泳是指帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程。許多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解離的基團，在一定的pH下，這些基團會帶上正電或負電。在電場的作用下，這些帶電分子會向著與其所帶電荷相反的電極移動。

電泳利用了待分離樣品中各種分子帶電性質的差異以及分子本身的大小、形狀的不同，使帶電分子產生不同的遷移速度，從而實現(xiàn)樣品中各種分子的分離。

3、紅細胞的洗滌要點：

洗滌次數(shù)、離心速度與離心時間十分重要。洗滌次數(shù)過少，無法除去血漿蛋白；離心速度過高和時間過長會使白細胞等一同沉淀，達不到分離的效果?！驹斀狻浚?）因為成熟的哺乳動物紅細胞沒有細胞核和細胞器，為了獲得純度較高的血紅蛋白，經常選用哺乳動物的紅細胞為實驗材料來提取血紅蛋白。（2）提取血細胞時，首先進行紅細胞的洗滌，洗滌次數(shù)、離心速度與離心時間十分重要。洗滌次數(shù)過少，獲得的血紅蛋白質中會有較多的血漿蛋白；離心速度過高和時間過長會使血細胞等一同沉淀，達不到分離的效果。（3）由分析可知蛋白質分離方法中常用凝膠色譜法，該方法的原理是根據(jù)相對分子質量的大小來分離蛋白質的。（4）同學甲利用瓊脂糖凝膠電泳技術，將得到的蛋白質進行分離，在電泳過程中，蛋白質分子的分子因為帶電性質的差異、分子的形狀以及分子本身的大小等不同而產生不同的遷移速度，從而實現(xiàn)了蛋白質的分離?！军c睛】熟知蛋白質分離和提純的原理以及相關的技術要點是解答本題的關鍵！11、限制酶和DNA連接CaCl2基因突變引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重組質粒、空質粒（pET質粒）抗原-抗體雜交抑菌圈對人、畜、農作物和自然環(huán)境安全；不會造成基因污染；有效成分純度較高【解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手術刀”——限制性核酸內切酶（限制酶）（1）來源：主要是從原核生物中分離純化出來的。（2）功能：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性。（3）結果：經限制酶切割產生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。2、“分子縫合針”——DNA連接酶（1）兩種DNA連接酶（E?coliDNA連接酶和T4DNA連接酶）的比較：①相同點：都縫合磷酸二酯鍵。②區(qū)別：E?coliDNA連接酶來源于大腸桿菌，只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來；而T4DNA連接酶來源于T4噬菌體，可用于連接粘性末端和平末端，但連接效率較低。（2）與DNA聚合酶作用的異同：DNA聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵．DNA連接酶是連接兩個DNA片段的末端，形成磷酸二酯鍵。3、“分子運輸車”——載體（1）載體具備的條件：①能在受體細胞中復制并穩(wěn)定保存。②具有一至多個限制酶切點，供外源DNA片段插入。③具有標記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。（2）最常用的載體是質粒，它是一種裸露的、結構簡單的、獨立于細菌擬核DNA之外，并具有自我復制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。（3）其它載體：噬菌體的衍生物、動植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的獲取1、目的基因是指：編碼蛋白質的結構基因。2、原核基因采取直接分離獲得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反轉錄法和化學合成法。3、PCR技術擴增目的基因（1）原理：DNA雙鏈復制（2）過程：第一步：加熱至90～95℃DNA解鏈；第二步：冷卻到55～60℃，引物結合到互補DNA鏈；第三步：加熱至70～75℃，熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補鏈的合成。第二步：基因表達載體的構建1、目的：使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳至下一代，使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。2、組成：目的基因+啟動子+終止子+標記基因（1）啟動子：是一段有特殊結構的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結合的部位，能驅動基因轉錄出mRNA，最終獲得所需的蛋白質。（2）終止子：也是一段有特殊結構的DNA片段，位于基因的尾端。（3）標記基因的作用：是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來．常用的標記基因是抗生素抗性基因。第三步：將目的基因導入受體細胞1、轉化的概念：是目的基因進入受體細胞內，并且在受體細胞內維持穩(wěn)定和表達的過程。2、常用的轉化方法：將目的基因導入植