REF_Ref71567503\r\h[32]。在0~0.045mg/mL范圍內(nèi)，其顏色的深淺與多糖含量成正比。按照2.3.2方法繪制標準曲線，以葡萄糖濃度C（mg/mL）對吸光度值A進行線性回歸，得標準曲線回歸方程y=13.884x+0.0745，相關系數(shù)R2=0.9991。標準曲線如圖1。結果表明，葡萄糖濃度在0-0.045g/mL范圍內(nèi)，線性關系良好。 圖SEQ圖\*ARABIC1葡萄糖標準曲線Fig.1Standardcurveofglucose3.2單因素試驗3.2.1料液比對枇杷葉多糖得率影響圖SEQ圖\*ARABIC2料液比對枇杷葉多糖得率影響Fig.2Effectofsolid-liquidratioontheyieldofloquatleafpolysaccharide料液比對枇杷葉多糖得率影響如圖2所示，在超聲功率為400W、浸提時間120min、浸提溫度為60℃條件下，分別采用料液比為1:10g/mL、1:15g/mL、1:20g/mL、1:25g/mL、1:30g/mL做單因素實驗。隨著料液比的增大，多糖得率逐漸增大；當料液比增大到1:20g/ml多糖得率達到最大值4.46mg/g；當料液比繼續(xù)增大，枇杷葉多糖得率逐漸降低。由此可得，最佳料液比為1:20g/mL。故選取1:15g/mL、1:20g/mL、1:25g/mL的料液比做正交實驗。3.2.2浸提時間對枇杷葉多糖得率影響圖SEQ圖\*ARABIC3浸提時間對枇杷葉多糖得率的影響Fig.3theeffectofextractiontimeontheyieldofloquatleafpolysaccharide浸提時間對枇杷葉多糖得率影響如圖3所示，在超聲功率為400W、料液比為1:20g/mL、浸提溫度為60℃條件下，分別采用90min、120min、150min、180min、210min的浸提時間做因素實驗。隨著浸提時間的延長，枇杷葉多糖得率逐漸增大；當浸提時間增大到120min時枇杷葉多糖得率最大值6.89mg/g：浸提時間繼續(xù)延長，枇杷葉多糖得率逐漸降低。由此可知，最佳浸提時間為120min。故選取90min、120min、150min的浸提時間做正交實驗。3.2.3超聲功率對多糖得率的影響的結果分析圖SEQ圖\*ARABIC4超聲功率對枇杷葉多糖得率影響Fig.4Influenceofultrasonicpowerontheyieldofloquatleafpolysaccharide超聲功率對枇杷葉多糖得率影響如圖4所示，在料液比1:20g/mL、浸提溫度60℃、浸提時間為120min條件下，分別采用300W、350W、400W、450W、500W的超聲功率做單因素實驗。隨著超聲功率的增大，枇杷葉多糖得率逐漸增大；當超聲功率增大到400W時枇杷葉多糖得率最大值5.43mg/g；超聲功率繼續(xù)增大，枇杷葉多糖得率逐漸減小。由此可知，最佳超聲功率為400W。故選取350W、400W、450W的超聲功率做正交實驗。3.2.4浸提溫度對枇杷葉多糖得率影響的結果分析圖SEQ圖\*ARABIC5浸提溫度對枇杷葉多糖得率的影響 Fig.5Effectofextractiontemperatureontheyieldofloquatleafpolysaccharide浸提溫度對枇杷葉多糖得率的影響如圖五所示，在超聲功率400W、浸提時間120min、料液比1:20g/mL條件下，分別采用20℃、30℃、40℃、50℃、60℃的溫度做單因素實驗。隨著浸提溫度的增大，枇杷葉多糖得率逐漸增大；當溫度升高到50℃時枇杷葉多糖得率最大值4.69mg/g；浸提溫度繼續(xù)增大，枇杷葉多糖得率逐漸減小。由此可知，最佳浸提溫度為50℃。選取40℃、50℃、60℃的溫度做單因素實驗。3.3正交試驗在單因素試驗的基礎上，選取超聲功率、浸提時間、料液比、浸提溫度四個影響枇杷葉多糖得率的因素為自變量，選取40℃、50℃、60℃為提取溫度水平，90min、120min、150min為浸提時間水平，350W、400W、450W為超聲功率水平，1:15g/mL、1:20g/mL、1:25g/mL為料液比水平，根據(jù)正交試驗設計原理，進行4因素3水平L9(34)的正交分析試驗，所選因素及其水平見表1。水平因素A浸提溫度（℃）B浸提時間（min）C超聲功率（W）D料液比（g/mL）水平140903501:15水平2501204001:20水平3601504501:25表一正交試驗因素及水平Table1orthogonalexperimentalfactorsandlevels對實驗結果進行極差分析可知，料液比、浸提溫度、浸提時間、超聲功率對枇杷葉多糖得率影響作用大小，其順序為：A>D>B>C，即浸提溫度對枇杷葉多糖得率影響最大，料液比和浸提時間次之，超聲功率對枇杷葉多糖得率影響最小。由正交實驗結果可知提取枇把葉多糖得率最佳工藝組合：A3B3C3D2，即在料水比為1：20g/mL、浸提溫度為60℃、浸提時間為150min、超聲功率為450W時，枇杷葉中的水溶性多糖得率最大為7.06mg/g，但該正交試驗中無此組合，故以此組合做驗證實驗以驗證實驗的正確性。結果顯示，枇杷葉多糖得率較高，實驗結果正確。正交試驗設計及結果如表二所示。因素A浸提溫度（℃）B浸提時間（min）C超聲功率（W）D料液比（g/mL）實驗結果（mg/g）試驗111112.23實驗212223.32試驗313333.72實驗421232.77試驗522312.44實驗623123.66試驗731323.99實驗832134.16試驗933213.53均值13.0902.9973.3502.733均值22.9573.3073.2073.657均值33.8933.6373.3833.550極差0.9360.6400.1760.942表二正交試驗設計及結果Table

2

orthogonal

experimental

design

and

results4結論枇杷葉在我國分布廣泛，原料容易獲取，其中含有黃酮、熊果酸、多糖化合物等多種生物活性物質(zhì)，可以作為許多休閑小食品、保健類產(chǎn)品、飲品等。多糖化合物具有抗輻射、抗氧化、抗腫瘤、免疫作用等，可以作為治療此類病癥藥物的天然原料，此類藥物的研發(fā)是人類的一大福音，同時亦是對原料的有效利用，減少浪費。本實驗通過查相關文獻，獲悉影響枇杷葉中多糖得率相關因素，并選取其中影響較大因素：超聲功率、浸提溫度、浸提時間、料液比等四個因素。依次進行單因素實驗，優(yōu)化出最佳提取溫度50℃，最佳浸提時間120min，最佳超聲功率400W，最佳料液比1:20g/mL。并據(jù)此，選提取溫度40℃、50℃、60℃；浸提時間90min、120min、150min；超聲功率350W、400W、450W；料液比1:15g/mL、1:20g/mL、1:25g/mL，做正交試驗，由正交試驗得最佳提取工藝條件為：A3B3C3D2，即料水比為1：20g/mL、浸提溫度為60℃、浸提時間為150min、超聲功率為450W。由于正交試驗中并無此組合，故以此組合做驗證試驗，根據(jù)驗證試驗結果顯示，該