免疫球蛋白E測定試劑盒（免疫比濁法）穩(wěn)定性研究方案穩(wěn)定性是體外診斷試劑、校準品、質(zhì)控品必須具有的基本屬性、是確保產(chǎn)品在使用過程中安全有效的重要指標。本方案是根據(jù)產(chǎn)品的性質(zhì)，監(jiān)測原裝以及首次開封后的試劑、校準品、質(zhì)控品主要質(zhì)量指標隨時間的變化情況，以說明效期內(nèi)本公司試劑、校準品、質(zhì)控品穩(wěn)定性符合要求。1研究目的考察原裝以及首次開封后免疫球蛋白E測試劑、校準品、質(zhì)控品保存到有效期后的主要質(zhì)量指標隨時間的變化情況，以說明效期內(nèi)本公司免疫球蛋白E檢測試劑、校準品、質(zhì)控品穩(wěn)定性符合《免疫球蛋白E測定試劑盒（免疫比濁法）技術(shù)要求》的規(guī)定。2穩(wěn)定性研究方法的確定依據(jù)2.1試劑實時穩(wěn)定性：依據(jù)《免疫球蛋白E測定試劑盒（免疫比濁法）》產(chǎn)品技術(shù)要求的規(guī)定：原裝試劑2℃-8℃密閉保存，有效期12個月。有效期屆滿后一個月內(nèi)，產(chǎn)品的性能應(yīng)符合產(chǎn)品技術(shù)要求中2.1.1、2.1.3、2.1.4、2.1.5、2.1.6.、2.1.8的要求。確定試劑穩(wěn)定性的研究方法為：抽取原裝試劑品3批，2℃-8℃保存，分別在0、3、6、9、12、13個月時各取原裝未開封試劑2盒，按下列條款4中的相應(yīng)試驗方法對穩(wěn)定性研究項目進行檢測，所得值均應(yīng)符合產(chǎn)品技術(shù)要求。2.2試劑開瓶穩(wěn)定性：本試劑開啟后2℃-8℃保存穩(wěn)定14天。確定開瓶后穩(wěn)定性的研究方法為：抽取原裝試劑3批，每個批次抽取2盒，開瓶后在試劑倉內(nèi)持續(xù)開蓋保存14天以上（中途不得拿出放冰箱保存），分別在0、7、14、21天時取樣，按下列條款4中相應(yīng)試驗方法對穩(wěn)定性研究項目進行檢測，所得值均應(yīng)符合要求。2.3校準品/質(zhì)控品效期穩(wěn)定性：依據(jù)《免疫球蛋白E測定試劑盒（免疫比濁法）》產(chǎn)品技術(shù)要求的規(guī)定：本校準品/質(zhì)控品在2~8℃密閉保存穩(wěn)定12個月。確定效期穩(wěn)定性的研究方法為：抽取原裝校準品/質(zhì)控品3批，2℃-8℃保存，分別在0、3、6、9、12、13個月時各取原裝未開封校準品、質(zhì)控品各10瓶，按下列條款4中相應(yīng)試驗方法對穩(wěn)定性研究項目進行檢測，所得值均應(yīng)符合要求。2.4校準品/質(zhì)控品首次開封后穩(wěn)定性：開啟后在2~8℃保存穩(wěn)定14天。確定首次開封后穩(wěn)定性的研究方法為：抽取原裝校準品/質(zhì)控品1批，每個批次抽取10瓶，2℃-8℃保存，分別在0、7、14、21天時取樣，每次取樣后擰緊瓶蓋并放回2℃-8℃保存，按下列條款4中試驗方法對穩(wěn)定性研究項目進行檢測，所得值均應(yīng)符合產(chǎn)品技術(shù)要求。試驗條件：本產(chǎn)品的穩(wěn)定性研究充分考慮了產(chǎn)品在儲存和使用過程中的不利條件，嚴格控制以下條件將不會對產(chǎn)品穩(wěn)定性產(chǎn)生影響。3.1儲存：本檢測試劑、校準品、質(zhì)控品在2～8℃密閉保存穩(wěn)定12個月；3.2使用：使用過程中，嚴格按照說明書操作，取樣后放回2℃～8℃保存，試劑不會受到外界環(huán)境影響發(fā)生性能改變。4試驗方法4.1試劑的試驗方法4.1.1空白吸光度以蒸餾水作為樣本，在有溫度控制的生化分析儀上，在測試主波長570nm、37℃條件下，記錄測試啟動時的吸光度（A1）和約5min(t)后的吸光度（A2），A2測試結(jié)果即為試劑空白吸光度測定值，應(yīng)符合《免疫球蛋白E測定試劑盒（免疫比濁法）》產(chǎn)品技術(shù)要求：吸光度值A(chǔ)≤2.0000。4.1.2分析靈敏度用已知濃度的樣品測試試劑（盒），記錄在試劑（盒）規(guī)定參數(shù)下產(chǎn)生的吸光度改變。換算為300.0IU/mL的吸光度差值（△A），應(yīng)符合產(chǎn)品技術(shù)要求：吸光度之差（?A）應(yīng)≥0.010。4.1.3線性范圍試驗4.1.3.1用接近線性范圍上限的高濃度樣品和接近線性范圍下限的低濃度樣品，混合成至少5個稀釋濃度（xi）。分別測試試劑（盒），每個稀釋濃度測試3次，分別求出檢測結(jié)果的均值（yi）。以稀釋濃度（xi）為自變量，以檢測結(jié)果均值（yi）為因變量求出線性回歸方程。計算線性回歸的相關(guān)系數(shù)（試劑），應(yīng)符合試劑（盒）測血清樣本時的線性范圍為【50~1000】IU/mL，在此線性范圍內(nèi)線性相關(guān)系數(shù)r≥0.990。4.1.3.2用4.1.3.1方法中稀釋濃度（xi）代入線性回歸方程，計算yi的估計值及yi與估計值的相對偏差或絕對偏差，應(yīng)符合《免疫球蛋白E測定試劑盒（免疫比濁法）》產(chǎn)品技術(shù)要求：在【50,200】IU/mL區(qū)間內(nèi)，線性絕對偏差應(yīng)不超過±30IU/mL；(200,1000】IU/mL區(qū)間內(nèi)，線性相對偏差應(yīng)不超過±15%。4.1.4重復(fù)性試驗在重復(fù)性條件下，用質(zhì)控品測試試劑（盒），重復(fù)測試至少10次，分別計算測量值的平均值（）和標準差（s）。按下公式計算變異系數(shù)（CV），應(yīng)符合產(chǎn)品技術(shù)要求：試劑批內(nèi)重復(fù)性CV≤6%。……（2）式中：S---為標準差；---為均數(shù)。4.1.5準確度測定取IgE工作校準品1份，用本試劑重復(fù)測定3次，取測試結(jié)果均值（M），按公式（3）計算相對偏差（B），測定結(jié)果應(yīng)符合《免疫球蛋白E測定試劑盒（免疫比濁法）》產(chǎn)品技術(shù)要求：相對偏差應(yīng)在±15%范圍內(nèi)………………(3)式中：M為測試結(jié)果均值；T為有證參考物質(zhì)標示值，或各濃度人血清定值。4.1.6外觀倒入量筒目測，應(yīng)滿足R1為無色或淡黃色液體。R2為乳白色渾濁液體。4.2校準品的試驗方法4.2.1正確度用工作校準品配合經(jīng)檢驗合格的本公司檢測試劑校準檢測系統(tǒng)，測定產(chǎn)品校準品3次，取測試結(jié)果均值，按公式（4）計算Εn絕對值，Εn絕對值≤1Εn=式中：Xlab---Xref----Ulab----Uref----4.2.2外觀目測檢查，應(yīng)為無色或淡黃色液體。4.2.3均一性取同批次待檢校準品10瓶，用工作校準品配合本公司經(jīng)檢驗合格的檢測試劑校準檢測系統(tǒng)后，每瓶待檢校準品測試1次，計算10個測量值的平均值（）和標準差（S1）；取上述待檢校準品中的1瓶連續(xù)測試10次，計算測試結(jié)果的平均值（）和標準差（S2）；按下列各公式計算變異系數(shù)CV%,結(jié)果應(yīng)符合產(chǎn)品技術(shù)要求：變異系數(shù)應(yīng)≤6%。。=……………(4)S=…(5)S=…………(6)CV瓶間(%)=S瓶間/×100…(7)當S1＜S2時，令CV瓶間=0式中： ----平均值；S----標準差；n----測量次數(shù)；Xi----指定參數(shù)第i次測量值。4.3質(zhì)控品試驗方法4.3.1準確度取質(zhì)控品1套，用產(chǎn)品校準品配合本公司經(jīng)檢驗合格的檢測試劑校準檢測系統(tǒng)后，測試3次，結(jié)果均應(yīng)符合產(chǎn)品技術(shù)要求：相對偏差應(yīng)±15%。4.3.2外觀目測，應(yīng)為無色或淡黃色液體。4.3.3均一性取同批次待檢質(zhì)控品10瓶，用產(chǎn)品校準品配合本公司經(jīng)檢驗合格的檢測試劑校準檢測系統(tǒng)后，每瓶待檢