《醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌生物指示物選擇、使用和結果判斷指南GB/T19972-2018》詳細解讀contents目錄1范圍2規(guī)范性引用文件3術語和定義4總則5生物指示物特性6供方的選擇7過程開發(fā)中的生物指示物8滅菌確認的生物指示物contents目錄9常規(guī)監(jiān)測中的生物指示物10結果11生物指示物標準的應用12培養(yǎng)條件13對第三方的要求14人員培訓15貯存和管理16生物指示物的處理附錄A(資料性附錄)微生物滅活動力學和計數(shù)方法contents目錄附錄B(資料性附錄)過程挑戰(zhàn)裝置附錄C(資料性附錄)部分陰性法測定D值附錄D(資料性附錄)用戶準備的生物指示物的文字記錄示例附錄E(資料性附錄)≈值的計算附錄F(資料性附錄)存活曲線方法測量D值附錄G(資料性附錄)存活-殺滅反應特性參考文獻011范圍應用領域：本標準提供了應用于滅菌過程的開發(fā)、確認和常規(guī)監(jiān)測時，對生物指示物的選擇、使用和結果判斷的指南。它適用于醫(yī)療保健產(chǎn)品的滅菌過程中生物指示物的應用。標準引用：在使用本標準時，可能還需要參考其他相關的國家和國際標準，如GB/T24628-2009以及ISO11138系列標準等，這些標準提供了關于生物指示物試驗設備和具體類型生物指示物的詳細規(guī)定。非適用范圍：需要注意的是，本標準不適用于僅靠物理方式去除微生物的過程，如過濾法，也不適用于各種組合過程的使用，或是液體滅菌過程。適用對象：該標準適用于已有現(xiàn)行國家標準的生物指示物。這些生物指示物通常用于評估滅菌過程的有效性，如環(huán)氧乙烷滅菌、濕熱滅菌、干熱滅菌等不同的滅菌方法。1范圍022規(guī)范性引用文件2.規(guī)范性引用文件國際標準引用：本指南在制定過程中，引用了國際標準ISO11138-7:2019作為重要參考，確保我國標準與國際接軌，提高標準的國際通用性和認可度。國家法規(guī)與標準：除了國際標準，本指南還嚴格遵循了國家相關的法規(guī)和標準，包括但不限于《中華人民共和國標準化法》以及相關的醫(yī)療器械管理條例，確保標準的合法性和適用性。其他相關標準引用：在制定過程中，還參考并引用了其他與醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌相關的國家標準和行業(yè)標準，如GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》等，以保證標準的系統(tǒng)性和協(xié)調性。通過這些規(guī)范性引用文件，本指南構建了一個完整且嚴謹?shù)臉藴驶w系，旨在為醫(yī)療保健產(chǎn)品的滅菌過程提供科學、準確的生物指示物選擇、使用和結果判斷方法。這不僅有助于提升我國醫(yī)療保健產(chǎn)品的安全性和質量，也進一步推動了我國在該領域的標準化進程。033術語和定義用于殺滅傳播媒介上病原微生物，使其達到無害化要求的制劑。消毒劑用于消毒的器械，包括生物指示物、化學指示物和滅菌物品包裝物。消毒器械用于人們日常生活衛(wèi)生和醫(yī)療保健衛(wèi)生的產(chǎn)品，如濕巾、衛(wèi)生濕巾、抗（抑）菌制劑等。衛(wèi)生用品3.1消毒產(chǎn)品010203選用原則應選擇對滅菌因子抵抗力強、穩(wěn)定性好、無毒性、易于培養(yǎng)和觀察的生物作為指示物。定義能通過典型癥狀或可衡量的反應揭示污染物存在與否的生物體或生物反應。作用用于監(jiān)測滅菌過程的效果，評價滅菌設備的性能，以及確定滅菌工藝的參數(shù)等。3.2生物指示物定義殺滅或去除傳播媒介上一切微生物的處理過程，包括致病微生物和非致病微生物，也包括細菌芽孢和真菌孢子。3.3滅菌方法包括物理方法（如熱力、紫外線、電離輻射等）和化學方法（如使用消毒劑）等。應用在醫(yī)療保健領域，滅菌是預防和控制醫(yī)院感染的重要措施之一。通過對醫(yī)療器械、敷料、用品等進行滅菌處理，可以有效地減少或消除病原微生物的傳播風險。044總則目的本指南旨在為醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌過程中生物指示物的選擇、使用和結果判斷提供指導，確保滅菌過程的有效性和產(chǎn)品的安全性。范圍本指南適用于所有采用生物指示物進行滅菌效果監(jiān)測的醫(yī)療保健產(chǎn)品，包括但不限于醫(yī)療器械、藥品、生物制品等。4.1指南目的和范圍生物指示物是一種含有已知數(shù)量活微生物的測試系統(tǒng)，用于評估滅菌過程的效果。定義生物指示物是滅菌過程中最為敏感和可靠的監(jiān)測工具，能夠直接反映滅菌因素對微生物的殺滅能力，從而確保產(chǎn)品的無菌狀態(tài)。重要性4.2生物指示物定義與重要性4.3指南編制原則與依據(jù)編制依據(jù)本指南主要依據(jù)《中華人民共和國標準化法》、《醫(yī)療器械監(jiān)督管理條例》等法律法規(guī)，以及GB/T1.1-2020等國家標準制定。同時，參考了國際標準化組織（ISO）和其他先進國家的相關標準和技術文獻。編制原則本指南遵循科學性、實用性、可操作性和前瞻性的原則，結合國內外相關法規(guī)和標準，確保指南內容的準確性和適用性。VS本指南與其他相關標準（如GB/T32310-2015等）共同構成了醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌效果監(jiān)測的標準體系。各標準之間相互補充、協(xié)調一致，共同確保滅菌過程的有效性和產(chǎn)品的安全性。協(xié)調在編制過程中，充分考慮了與其他標準的協(xié)調性和一致性，避免了重復和矛盾。同時，根據(jù)實際需要，對部分內容進行了細化和補充，以提高指南的實用性和可操作性。關系4.4與其他標準的關系與協(xié)調055生物指示物特性敏感性高的生物指示物可以在較短時間內給出明確的滅菌效果指示。選擇高敏感性的生物指示物有助于提高滅菌質量監(jiān)控的準確性和效率。生物指示物應對滅菌過程具有高度的敏感性，能夠準確地反映出滅菌效果。5.1敏感性010203生物指示物應能代表被滅菌物品中可能存在的最難殺滅的微生物。通常選擇抵抗力較強的微生物作為生物指示物，如枯草桿菌黑色變種芽孢等。代表性的生物指示物能夠更全面地評估滅菌過程的有效性。5.2代表性生物指示物應具有良好的穩(wěn)定性，能夠在不同的環(huán)境條件下保持一致的生物活性。5.3穩(wěn)定性穩(wěn)定性好的生物指示物可以提供更可靠的滅菌效果評估結果。在選擇生物指示物時，需要考慮其儲存和運輸過程中的穩(wěn)定性表現(xiàn)。5.4安全性安全性是選擇和使用生物指示物時必須考慮的重要因素之一。在使用過程中，需要嚴格遵守相關的生物安全規(guī)定和操作規(guī)程，確保人員和環(huán)境的安全。生物指示物應無致病性，對人體和環(huán)境安全無害。010203066供方的選擇確保生物指示物的質量和可靠性合格的供方能夠提供符合標準、質量穩(wěn)定的生物指示物，這是滅菌過程驗證和日常監(jiān)測的基石。降低風險選擇有良好信譽和資質的供方，可以降低因生物指示物質量問題而帶來的滅菌失敗風險。選擇合格供方的重要性選擇供方的考慮因素服務質量供方應能提供及時的技術支持和售后服務，以確保在使用過程中遇到問題能夠得到及時解決。生物指示物的性能供方提供的生物指示物應符合相關標準，具有良好的穩(wěn)定性和敏感性。供方的資質和信譽應查看供方的相關資質證書，了解其生產(chǎn)經(jīng)驗、技術實力和市場口碑。5.簽訂合同在確認供方符合要求后，簽訂正式的采購合同。2.初步篩選根據(jù)市場調研結果，篩選出幾家具有潛力的供方。4.試用與驗證對供方提供的生物指示物進行試用和驗證，確保其性能符合要求。3.詳細評估對篩選出的供方進行實地考察，了解其生產(chǎn)環(huán)境、設備、技術實力和管理水平。1.市場調研了解市場上主要的生物指示物供方，收集相關信息。選擇供方的步驟077過程開發(fā)中的生物指示物符合法規(guī)要求所選生物指示物應符合國家相關法規(guī)和標準的要求，確保其質量和安全性?？紤]滅菌過程特性在選擇生物指示物時，應首先考慮滅菌過程的特性，包括溫度、壓力、濕度等參數(shù)，以確保所選生物指示物能夠準確反映滅菌效果。選擇適當?shù)木N生物指示物應包含對滅菌過程具有挑戰(zhàn)性的菌種，如枯草桿菌黑色變種芽孢等，以測試滅菌過程的效能。7.1生物指示物的選擇在使用生物指示物時，應遵循產(chǎn)品說明書和操作規(guī)程，確保正確使用并獲得準確的測試結果。正確使用生物指示物應放置在滅菌過程中最難滅菌的部位，以充分測試滅菌效果。放置位置應根據(jù)滅菌物品的大小、形狀和數(shù)量等因素，合理確定生物指示物的數(shù)量和分布。數(shù)量與分布7.2生物指示物的使用觀察結果根據(jù)國家標準和操作規(guī)程，正確解讀生物指示物的結果，確保滅菌過程的有效性。解讀標準記錄與報告應將觀察結果進行詳細記錄，并向上級或相關部門報告，以便及時發(fā)現(xiàn)問題并采取改進措施。在滅菌過程完成后，應及時觀察生物指示物的結果，判斷滅菌效果是否達到預期。7.3結果判斷與解讀088滅菌確認的生物指示物8滅菌確認的生物指示物生物指示物的定義與重要性生物指示物是用于評價滅菌過程有效性的含有活微生物的測試系統(tǒng)。在醫(yī)療保健產(chǎn)品的滅菌過程中，生物指示物的選擇、使用和結果判斷至關重要，因為它們能夠提供關于滅菌過程是否達到預定效果的關鍵信息。選擇適當?shù)纳镏甘疚锔鶕?jù)GB/T19972-2018指南，選擇生物指示物時應考慮滅菌方法、滅菌條件以及被滅菌物品的性質。此外，所選生物指示物的抗力應與被滅菌物品中污染微生物的抗力相近或更高，以確保滅菌過程的有效性。生物指示物的使用在使用生物指示物時，應遵循制造商的說明和建議。通常，生物指示物應放置在滅菌過程中最難滅菌的部位，即所謂的“最不利位置”。這樣，如果生物指示物中的微生物被殺滅，則可以推斷整個滅菌過程中的微生物也已被有效殺滅。滅菌完成后，需要對生物指示物進行檢測，以確定其中的微生物是否已被殺滅。這通常涉及將生物指示物接種到適當?shù)呐囵B(yǎng)基中，并觀察微生物的生長情況。如果生物指示物中的微生物沒有生長，則可以認為滅菌過程是有效的。反之，則需要重新評估和調整滅菌過程。結果判斷使用生物指示物進行滅菌確認時，必須嚴格遵守相關的安全規(guī)定和操作規(guī)程，以確保操作人員的安全和滅菌過程的有效性。同時，所選用的生物指示物應符合國家相關標準和法規(guī)的要求，以確保其質量和可靠性。安全性與合規(guī)性8滅菌確認的生物指示物099常規(guī)監(jiān)測中的生物指示物生物指示物是指能通過典型癥狀或可衡量的反應揭示污染物存在與否的生物體或生物反應，在醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌過程中，它們被用來監(jiān)測和驗證滅菌效果。定義生物指示物在滅菌過程中起著至關重要的作用，因為它們能夠提供關于滅菌過程是否有效的直接證據(jù)，從而確保醫(yī)療保健產(chǎn)品的安全性和無菌狀態(tài)。重要性9.1生物指示物的定義與重要性9.2生物指示物的選擇常用類型常用的生物指示物包括細菌孢子、病毒等微生物。這些微生物因其對滅菌過程的抵抗力較強，因此常被用作監(jiān)測滅菌效果的指示物。選擇原則在選擇生物指示物時，應考慮其敏感性、穩(wěn)定性和代表性。理想的生物指示物應能準確反映滅菌過程的效果，且在不同條件下均能保持穩(wěn)定的反應。使用方法在滅菌過程中，生物指示物通常被放置在待滅菌物品的內部或表面。經(jīng)過滅菌處理后，通過觀察生物指示物的存活情況來評估滅菌效果。注意事項在使用生物指示物時，應確保其不受外界污染，且應在規(guī)定的時間內進行觀察和記錄。此外，不同類型的生物指示物可能需要不同的培養(yǎng)條件和觀察方法。9.3生物指示物的使用結果判斷通過觀察生物指示物的生長情況來判斷滅菌效果。如果生物指示物未生長或生長受到明顯抑制，則說明滅菌過程有效。反之，則說明滅菌過程可能存在問題。結果解讀9.4結果判斷與解讀當生物指示物顯示滅菌過程有效時，可以認為醫(yī)療保健產(chǎn)品已達到無菌狀態(tài)，可以安全使用。如果生物指示物顯示滅菌效果不佳，則需要進一步調查原因并采取相應的改進措施。01021010結果10.1指示物選擇結果根據(jù)滅菌過程特性選擇合適的生物指示物。確保所選生物指示物與滅菌工藝相匹配，提供準確的滅菌效果評估。正確使用生物指示物，遵循指南中的操作步驟。在滅菌過程中合理放置生物指示物，確保能夠充分接觸滅菌因子。10.2使用結果10.3結果判斷根據(jù)生物指示物的反應結果判斷滅菌效果。對照指南中的標準，解讀生物指示物的變化，確定是否達到預期的滅菌效果。詳細記錄每次使用生物指示物的實驗結果。通過遵循《醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌生物指示物選擇、使用和結果判斷指南GB/T19972-2018》中的指導原則，可以確保醫(yī)療保健產(chǎn)品在滅菌過程中得到有效的監(jiān)控和評估，從而提高產(chǎn)品的安全性和可靠性。同時，正確的結果判斷和記錄也有助于及時發(fā)現(xiàn)潛在問題，并采取相應措施進行改進和優(yōu)化。編寫實驗報告，總結實驗數(shù)據(jù)，為后續(xù)滅菌工作提供參考依據(jù)。10.4結果記錄與報告1111生物指示物標準的應用規(guī)范滅菌過程驗證生物指示物在醫(yī)療保健產(chǎn)品的滅菌過程中起著至關重要的作用。通過使用生物指示物，可以驗證滅菌過程的有效性，確保產(chǎn)品達到無菌狀態(tài)。GB/T19972-2018提供了生物指示物的選擇、使用和結果判斷的指南，從而幫助規(guī)范這一驗證過程。確保產(chǎn)品質量與安全正確的使用生物指示物可以確保滅菌后的醫(yī)療保健產(chǎn)品質量和安全。該標準指導制造商和使用者如何根據(jù)具體的滅菌方法和產(chǎn)品特性選擇合適的生物指示物，以及如何正確解讀滅菌結果，從而保障產(chǎn)品的無菌質量。11生物指示物標準的應用推動行業(yè)標準化GB/T19972-2018的實施有助于推動醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌行業(yè)的標準化。通過遵循這一國家標準，企業(yè)可以確保自身的滅菌過程符合行業(yè)要求，提高產(chǎn)品的市場競爭力。促進技術交流與合作有了統(tǒng)一的生物指示物選擇和使用標準，不同企業(yè)和研究機構之間在進行技術交流與合作時，可以更加順暢。這有助于推動整個醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌技術的進步和發(fā)展。11生物指示物標準的應用“1212培養(yǎng)條件12培養(yǎng)條件溫度與濕度01生物指示物的培養(yǎng)應在適宜的溫度和濕度條件下進行，以確保微生物的正常生長和繁殖。一般來說，培養(yǎng)溫度應控制在一定范圍內，以保持微生物的活性。培養(yǎng)基選擇02選擇合適的培養(yǎng)基對于生物指示物的培養(yǎng)至關重要。培養(yǎng)基應能提供微生物生長所需的營養(yǎng)物質，并且其pH值、滲透壓等參數(shù)也需適宜。培養(yǎng)時間03生物指示物的培養(yǎng)時間應根據(jù)具體微生物的生長速度和特性來確定。培養(yǎng)時間過短可能導致微生物未完全生長，而時間過長則可能引起污染或微生物的變異。無菌操作04在培養(yǎng)過程中，應嚴格遵守無菌操作規(guī)范，以避免外部微生物的污染。這包括在無菌環(huán)境下進行接種、轉移和培養(yǎng)等操作。1313對第三方的要求第三方機構應具備相應的專業(yè)資質和認證，確保在生物指示物選擇、使用和結果判斷方面提供準確、可靠的服務。13.1第三方機構的資質與責任第三方機構應嚴格遵守相關法律法規(guī)和標準要求，確保其提供的服務和產(chǎn)品符合國家規(guī)定的質量和安全標準。第三方機構應對其提供的服務和產(chǎn)品負責，并承擔相應的法律責任。13.2第三方機構的服務內容第三方機構應提供結果判斷服務，對生物指示物的結果進行準確、及時的解讀和分析，為用戶提供科學、可靠的依據(jù)。第三方機構應提供生物指示物使用培訓，確保用戶能夠正確、規(guī)范地使用生物指示物，并避免誤用或濫用。第三方機構應提供全面的生物指示物選擇指導，根據(jù)醫(yī)療保健產(chǎn)品的特性和滅菌過程的需求，推薦合適的生物指示物。010203第三方機構應積極配合監(jiān)管部門的工作，接受監(jiān)管部門的監(jiān)督和檢查，確保其服務和產(chǎn)品的合規(guī)性。第三方機構應與監(jiān)管部門建立良好的溝通和協(xié)作機制，共同推動醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌生物指示物領域的規(guī)范和發(fā)展。第三方機構應及時向監(jiān)管部門報告發(fā)現(xiàn)的任何問題和異常情況，以便監(jiān)管部門及時采取措施進行處理。13.3第三方機構與監(jiān)管部門的配合1414人員培訓010203確保相關人員充分理解和掌握生物指示物的選擇、使用和結果判斷方法。提高人員在滅菌過程中的操作技能和無菌意識。強化人員對醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌重要性的認識。14.1培訓目標生物指示物的使用方法，包括接種、培養(yǎng)、結果觀察和記錄等步驟。生物指示物的基本概念、種類和特性。滅菌過程中的安全防護和無菌操作規(guī)范。生物指示物的選擇原則和方法，包括針對不同滅菌方法和產(chǎn)品的選擇策略。生物指示物結果判斷的標準和流程，包括陽性、陰性和可疑結果的判定及處理。14.2培訓內容14.3培訓方式理論授課通過專業(yè)講師的講解，使學員掌握生物指示物的相關知識和理論。實踐操作組織學員進行生物指示物的實際操作，培養(yǎng)其動手能力和操作技能。案例分析結合典型案例，分析生物指示物在滅菌過程中的作用和問題，提高學員的應變能力和解決問題的能力。考核評估通過考核評估，檢驗學員對培訓內容的掌握情況，確保其具備相應的能力和素質。醫(yī)療保健機構從事滅菌工作的人員。相關監(jiān)管機構和行業(yè)協(xié)會的工作人員。消毒產(chǎn)品生產(chǎn)企業(yè)從事生物指示物研發(fā)、生產(chǎn)和銷售的人員。其他對醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌感興趣的人員。14.4培訓對象1515貯存和管理溫度控制生物指示物應在制造商規(guī)定的溫度范圍內貯存，以確保其穩(wěn)定性和有效性。通常，這涉及將產(chǎn)品存放在冷藏或冷凍環(huán)境中，具體取決于生物指示物的類型和要求。貯存條件濕度控制適當?shù)臐穸人綄τ诒３稚镏甘疚锏耐暾灾陵P重要。過高或過低的濕度都可能影響生物指示物的性能，因此應密切監(jiān)測并控制貯存環(huán)境的濕度。光照控制某些生物指示物可能對光敏感，因此在貯存過程中應避免直接陽光照射或強光照射。應使用遮光容器或包裝材料來保護這些產(chǎn)品免受光的影響。庫存記錄應建立詳細的庫存記錄系統(tǒng)，以跟蹤生物指示物的接收、貯存、使用和處置情況。這有助于確保產(chǎn)品的可追溯性，并在必要時提供有關產(chǎn)品歷史和狀態(tài)的信息。安全防護貯存生物指示物的區(qū)域應受到適當?shù)谋Ｗo，以防止未經(jīng)授權的人員訪問和潛在的安全風險。這可能包括使用鎖定的存儲柜、安全門禁系統(tǒng)以及定期的安全檢查。有效期監(jiān)測生物指示物通常具有有限的有效期，因此應定期檢查庫存中的產(chǎn)品是否過期。過期的生物指示物應按照制造商的建議進行適當處理，以避免誤用。應急準備應制定應急計劃以應對可能的貯存故障或事故，例如設備故障、自然災害或人為錯誤。這可以確保在緊急情況下能夠迅速采取措施，以保護生物指示物的安全性和完整性。管理要求1616生物指示物的處理檢查生物指示物的包裝是否完好，如有破損應更換。了解生物指示物的抗力特性、使用方法和安全注意事項。確認生物指示物的類型和數(shù)量，確保其符合實驗或監(jiān)測需求。處理前的準備工作嚴格按照產(chǎn)品說明書或相關標準操作，避免誤操作導致實驗結果不準確。處理過程中的注意事項在處理過程中，應保持環(huán)境清潔，避免污染。對于需要復蘇的生物指示物，應確保其復蘇條件和時間符合規(guī)定。處理后的工作對于一次性使用的生物指示物，使用后應及時處理并更換新的指示物，以確保后續(xù)實驗的準確性。如有需要，可對處理后的生物指示物進行進一步的檢測和分析，以確保其質量和安全性。對處理后的生物指示物進行觀察和記錄，確保其滅菌效果符合預期。010203處理后的工作010203此外，在處理生物指示物時，還需要注意以下幾點：1.選擇適當?shù)纳镏甘疚铮焊鶕?jù)具體的滅菌方法和條件，選擇適當?shù)纳镏甘疚锓N類和型號。不同的滅菌方法和條件可能對生物指示物的選擇和效果產(chǎn)生影響。2.遵循正確的使用方法：嚴格按照產(chǎn)品說明書或相關標準操作生物指示物，確保其能夠準確地反映滅菌效果。不正確的使用方法可能導致實驗結果不準確或無效。處理后的工作3.注意安全問題：在處理生物指示物時，應注意個人防護和實驗室安全。避免直接接觸有害物質或進行危險操作。如有需要，應佩戴適當?shù)姆雷o用具并確保實驗室通風良好。綜上所述，正確處理生物指示物是確保醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌效果的關鍵環(huán)節(jié)之一。通過選擇適當?shù)纳镏甘疚?、遵循正確的使用方法和注意安全問題等措施，可以有效地提高實驗的準確性和安全性。17附錄A(資料性附錄)微生物滅活動力學和計數(shù)方法描述微生物在滅菌過程中存活數(shù)量隨時間變化的規(guī)律，反映微生物對滅菌因子的敏感性。滅活動力學原理采用指數(shù)滅活模型、對數(shù)滅活模型等，對微生物滅活過程進行數(shù)學模擬和預測。滅活動力學模型包括滅菌溫度、時間、壓力、濕度等物理因素，以及微生物種類、數(shù)量、生理狀態(tài)等生物因素。影響因素微生物滅活動力學平板計數(shù)法將待測微生物樣品均勻涂布在含有適宜營養(yǎng)物質的固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后形成單個菌落，通過計數(shù)菌落數(shù)來推算微生物數(shù)量。濾膜計數(shù)法將待測微生物樣品通過特定孔徑的濾膜，使微生物細胞被截留在濾膜上，然后對濾膜上的微生物進行計數(shù)。該方法適用于顆粒狀樣品或高濃度微生物樣品的測定。其他計數(shù)方法包括電化學計數(shù)法、流式細胞儀計數(shù)法等，這些方法具有操作簡便、快速、自動化程度高等優(yōu)點，適用于特定場合的微生物數(shù)量測定。顯微鏡計數(shù)法利用顯微鏡觀察微生物細胞，通過計數(shù)一定體積內的細胞數(shù)來推算微生物濃度。該方法適用于液體樣品中微生物數(shù)量的測定。微生物計數(shù)方法18附錄B(資料性附錄)過程挑戰(zhàn)裝置010203過程挑戰(zhàn)裝置(PCD)是一種模擬滅菌過程中最難滅菌部位的設備或系統(tǒng)。PCD用于評估滅菌過程的有效性，確保滅菌過程能夠殺滅最難滅菌部位的微生物。PCD的選擇應基于滅菌過程的特點和產(chǎn)品的特性。B.1概述B.2PCD的構成和要求010203PCD通常由模擬產(chǎn)品、生物指示物和溫度或壓力傳感器等組成。模擬產(chǎn)品應與實際產(chǎn)品具有相似的物理特性和熱傳導性能。生物指示物應放置在模擬產(chǎn)品中最難滅菌的部位，以評估滅菌過程對該部位的殺滅效果。123在滅菌過程驗證中，應使用PCD來模擬實際產(chǎn)品的滅菌過程。通過對PCD中生物指示物的培養(yǎng)結果來判斷滅菌過程是否有效。若PCD中的生物指示物全部被殺滅，則認為該滅菌過程對實際產(chǎn)品也是有效的。B.3PCD的使用B.4注意事項在使用PCD進行滅菌過程驗證時，應確保PCD的構造和性能與實際產(chǎn)品相匹配。應定期對PCD進行校準和維護，以確保其準確性和可靠性。在使用PCD時，應嚴格按照操作規(guī)程進行，以避免誤操作導致驗證結果失真。通過附錄B的詳細解讀，我們可以了解到過程挑戰(zhàn)裝置在醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌過程中的重要作用和使用方法。正確使用PCD可以確保滅菌過程的有效性，從而保障醫(yī)療保健產(chǎn)品的安全性和有效性。19附錄C(資料性附錄)部分陰性法測定D值附錄C提供了部分陰性法測定D值的詳細步驟和注意事項，D值是衡量微生物耐熱性的重要參數(shù)，對于確保滅菌過程的有效性至關重要。附錄C(資料性附錄)部分陰性法測定D值“1.**測定原理**：部分陰性法是通過檢測滅菌過程中生物指示物的存活情況，來推算出微生物的D值。該方法基于微生物的滅活曲線，通過在不同時間點取樣并檢測存活微生物的數(shù)量，從而確定D值。附錄C(資料性附錄)部分陰性法測定D值附錄C(資料性附錄)部分陰性法測定D值2.**測定步驟**：01準備足夠數(shù)量的生物指示物，并確保其質量符合標準要求。02將生物指示物暴露在滅菌過程中，并在不同時間點取樣。03附錄C(資料性附錄)部分陰性法測定D值對每個取樣點的生物指示物進行檢測，記錄存活微生物的數(shù)量。根據(jù)檢測結果繪制滅活曲線，并通過曲線擬合方法計算出D值。““3.**注意事項**：在進行測定前，應對生物指示物進行充分的驗證和確認，確保其質量和穩(wěn)定性。取樣點的選擇應合理，以充分反映滅菌過程中的微生物存活情況。附錄C(資料性附錄)部分陰性法測定D值010203在進行檢測時，應嚴格遵守無菌操作規(guī)范，避免外部污染對測定結果的影響。D值的計算應基于可靠的實驗數(shù)據(jù)和科學的計算方法，以確保結果的準確性。通過對附錄C的詳細解讀，我們可以更好地理解和應用GB/T19972-2018標準中關于部分陰性法測定D值的方法和要求。這對于確保醫(yī)療保健產(chǎn)品的滅菌效果和安全性具有重要意義。此外，該標準還提供了其他關于生物指示物的選擇、使用和結果判斷的指導內容，如生物指示物的種類和選擇原則、使用方法和注意事項等。這些內容對于規(guī)范醫(yī)療保健產(chǎn)品的滅菌過程、提高滅菌效果和質量具有重要意義。因此，在實際應用中，我們應嚴格按照該標準的要求進行操作和執(zhí)行。附錄C(資料性附錄)部分陰性法測定D值“20附錄D(資料性附錄)用戶準備的生物指示物的文字記錄示例生物指示物名稱與型號生產(chǎn)廠商及聯(lián)系方式滅菌前生物指示物的數(shù)量與狀態(tài)滅菌過程中生物指示物的放置位置與方式文字記錄內容滅菌設備型號與編號滅菌參數(shù)記錄01滅菌程序名稱及編號02滅菌溫度、壓力與時間等關鍵參數(shù)03滅菌過程中出現(xiàn)的任何異常情況04生物指示物培養(yǎng)后的結果記錄滅菌效果驗證滅菌效果判斷標準與依據(jù)若滅菌失敗，應記錄失敗原因及改進措施文字記錄的保存方式及期限記錄查閱與追溯的流程與權限設置記錄保存與管理記錄銷毀的程序與要求21附錄E(資料性附錄)≈值的計算≈值定義在特定條件下，生物指示物滅菌后存活概率與滅菌前存活概率之比的對數(shù)值?！种狄饬x反映生物指示物對滅菌過程的抵抗力，是衡量滅菌效果的重要指標?！种刀x與意義存活概率法通過測定生物指示物在滅菌前后的存活數(shù)量，計算存活概率并求對數(shù)值。滅菌時間曲線法≈值計算方法在不同滅菌時間下測定生物指示物的存活數(shù)量，繪制滅菌時間曲線，通過曲線斜率計算≈值。0102為確?！种档臏蚀_性和可靠性，應使用足夠數(shù)量的生物指示物樣本進行計算。樣本數(shù)量≈值的計算應在特定的滅菌條件下進行，如溫度、壓力、濕度等，以確保結果的可比性。滅菌條件在計算≈值時，應對數(shù)據(jù)進行合理的處理和分析，如剔除異常值、進行統(tǒng)計檢驗等。數(shù)據(jù)處理≈值計算注意事項010203產(chǎn)品質量控制在醫(yī)療保健產(chǎn)品生產(chǎn)過程中，≈值可以用于監(jiān)控產(chǎn)品的滅菌質量，確保產(chǎn)品的安全性和有效性。滅菌效果判斷通過比較滅菌前后生物指示物的≈值變化，可以判斷滅菌效果是否達到預期要求。滅菌工藝優(yōu)化≈值可以作為優(yōu)化滅菌工藝的重要參考指標，通過調整滅菌參數(shù)來提高滅菌效果?！种翟跍缇Чu估中的應用22附錄F(資料性附錄)存活曲線方法測量D值存活曲線法是通過直接計數(shù)菌落數(shù)CFU檢測活菌數(shù)量，并利用回歸分析確定最佳線性曲線的方法。定義該方法基于微生物在特定暴露條件下的存活規(guī)律，通過測量不同時間點的活菌數(shù)量，繪制存活曲線，并計算D值。原理存活曲線法的定義與原理準備生物指示物暴露處理利用最小二乘法進行回歸分析，確定最佳線性曲線，并計算其斜率。D值即為斜率的負倒數(shù)值。計算D值以時間為橫坐標，存活菌落數(shù)的對數(shù)值為縱坐標，繪制存活曲線。繪制存活曲線在暴露處理后，對生物指示物進行培養(yǎng)，并計數(shù)存活的菌落數(shù)。菌落計數(shù)選擇符合要求的生物指示物，并確保其數(shù)量和質量滿足實驗需求。將生物指示物暴露于特定的滅菌條件下，記錄暴露時間和溫度等參數(shù)。存活曲線法的操作步驟生物指示物的選擇應選擇與待滅菌產(chǎn)品相似的生物指示物，以確保實驗結果的準確性和可靠性。存活曲線法的注意事項01暴露條件的控制應嚴格控制暴露條件，包括溫度、濕度、壓力等參數(shù)，以確保實驗的一致性和可重復性。02菌落計數(shù)的準確性應采用合適的培養(yǎng)方法和計數(shù)技術，以確保菌落計數(shù)的準確性和可靠性。03數(shù)據(jù)處理與分析應采用科學的數(shù)據(jù)處理和分析方法，以確保實驗結果的準確性和可信度。同時，應注意避免數(shù)據(jù)誤差和異常值的干擾。0423附錄G(資料性附錄)存活-殺滅反應特性存活反應指生物指示物在滅菌過程中，全部或者部分微生物存活下來并表現(xiàn)出特定的反應，如顏色變化、熒光反應等。殺滅反應指生物指示物中的微生物在滅菌過程中被全部殺滅，從而失去反應能力，表現(xiàn)為無反應或者反應消失。存活-殺滅反