（6）酵母菌的純培養(yǎng)

高考一輪復(fù)習(xí)生物學(xué)培養(yǎng)反應(yīng)類實驗專練

1.做“酵母菌的純培養(yǎng)”實驗時，下列敘述不正確的是（）

A.等高壓蒸汽滅菌鍋的溫度自然下降后才能打開排氣閥

B.倒平板時，拔出錐形瓶棉塞后，應(yīng)將瓶口迅速通過火焰

C.倒平板時要在酒精燈火焰旁進(jìn)行，以防雜菌污染

D.為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速蘸取菌液

2.下列關(guān)于“酵母菌的純培養(yǎng)”實驗的敘述，錯誤的是（）

A.馬鈴薯搗爛后的濾液中含有酵母菌生長所需的多種營養(yǎng)成分

B.接種環(huán)滅菌時，頂端的環(huán)和環(huán)后的部分柄均需通過火焰灼燒

C平板劃線時，接種環(huán)應(yīng)在固體培養(yǎng)基表面輕輕地連續(xù)劃線

D.完成平板劃線后，應(yīng)將平板立刻倒置培養(yǎng)以免污染培養(yǎng)基

3.下列關(guān)于酵母菌的純培養(yǎng)實驗的有關(guān)敘述，正確的是（）

A.將接種環(huán)灼燒后，立即從上次劃線的末端開始劃線

B.已滅菌的接種環(huán)、涂布器，在操作過程中不需要再滅菌

C.完成平板劃線后不需要將平板倒置，放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)即可

D.使用后的培養(yǎng)基在丟棄前一定要進(jìn)行滅菌處理，以免污染環(huán)境

4.關(guān)于制備牛肉膏蛋白腺固體培養(yǎng)基并進(jìn)行酵母菌的純培養(yǎng)過程，下列說法錯誤的是（）

A.培養(yǎng)基配制好并調(diào)節(jié)pH后用濕熱滅菌法滅菌

B.在酒精燈火焰旁進(jìn)行倒平板及接種操作

C.將一個未接種的平板作為對照一起放至恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)

D.實驗結(jié)束后使用過的培養(yǎng)基直接丟棄掉

5.酵母菌的培養(yǎng)與分離實驗中，下列相關(guān)操作正確的是（）

A.用于制備斜面培養(yǎng)基后剩余的部分可用于制備液體培養(yǎng)基

B.使用醫(yī)用的脫脂棉制作棉塞可以很好地防止雜菌污染

C.給液體培養(yǎng)基接種、用劃線法給平板和斜面培養(yǎng)基接種都要用到接種環(huán)

D.該培養(yǎng)基也可以用來培養(yǎng)和分離大腸桿菌

6.在馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基上進(jìn)行酵母菌純培養(yǎng)的實驗中，描述不正確的是（）

A.完成平板劃線后立即將接種后的平板和一個未接種的平板倒置培養(yǎng)

B.接種后的平板一般做三組目的是平行重復(fù)原則使實驗結(jié)果準(zhǔn)確可靠

C.使用后的培養(yǎng)基在丟棄前一定要進(jìn)行滅菌處理，以免污染環(huán)境

D.離開實驗室時一定要洗手，以防止被微生物感染

7.下列有關(guān)微生物的培養(yǎng)或純化的敘述，錯誤的是（）

A.獲得純凈的培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵

B.培養(yǎng)液中溶氧量的變化會影響酵母菌的繁殖和代謝途徑

C.在培養(yǎng)微生物前要先對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌處理再接種

D.菌種可接種在斜面培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后放在4℃冰箱中永久保藏

8.滅菌和無菌操作是獲得微生物純培養(yǎng)物的基礎(chǔ)，在接種、培養(yǎng)、分離酵母菌時，下列操作

正確的是（）

A.用浸泡在75%酒精中的涂布器直接涂布

B.將接種后的培養(yǎng)皿倒置在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)

C.為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)酒精燈火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落

D.倒平板時，應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上

9.某種酵母菌可以分解淀粉，常用碘液鑒別該種酵母菌。如表是該種酵母菌的鑒別培養(yǎng)基配

方，將表中物質(zhì)溶解后，用蒸儲水定容到lOOOmLo以下分析錯誤的是（）

蛋白陳酵母浸膏NaCl瓊脂土豆汁

10g5g10g15g100mL

注：土豆汁中含有淀粉。

A.根據(jù)物理性質(zhì)來分，該培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基

B.該種酵母菌能利用淀粉作為碳源，不能利用其他有機物作為碳源

C.用該培養(yǎng)基先培養(yǎng)微生物再染色，碘液可以不滅菌直接加入

D.若用該培養(yǎng)基探究酵母菌適宜生存的pH范圍，至少應(yīng)配制三種pH的培養(yǎng)基

10.下列有關(guān)微生物的培養(yǎng)或純化的敘述，錯誤的是（）

A.若要對發(fā)酵液中的酵母菌進(jìn)行取樣計數(shù)，接種方法只能是稀釋涂布平板法

B.培養(yǎng)液中溶氧量的變化會影響酵母菌的繁殖和代謝途徑

C.同一稀釋度在平板上接種的重復(fù)組，形成的菌落數(shù)差異很大

D.采用活菌計數(shù)法得到的值可能偏小，采用顯微鏡直接計數(shù)法得到的值較為準(zhǔn)確

11.通常酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人將地衣芽抱桿菌的a-淀粉酶基因轉(zhuǎn)入酵母菌

中，經(jīng)篩選得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種（過程如圖甲所示）。

圖甲圖乙

（1）圖甲中為達(dá)到篩選目的，固體培養(yǎng)基應(yīng)以作為唯一碳源。②、③過程重復(fù)

幾次后，可用斜面培養(yǎng)基保存得到的菌種，基本操作是挑選___________接種在斜面培養(yǎng)基

上，按規(guī)定的培養(yǎng)，待充分生長后放入冰箱中保藏。

（2）在實驗室進(jìn)行酵母菌培養(yǎng)時，為檢驗使用的培養(yǎng)基滅菌是否合格，最簡單的操作方法是

（3）某同學(xué)嘗試過程③的操作，經(jīng)培養(yǎng)后其中一個平板上的菌落分布如圖乙所示。從接種后

酵母菌生長情況推測該同學(xué)接種時錯誤的操作可能是

12.隨著石油危機的出現(xiàn)，乙醇作為可再生資源中比較理想的液態(tài)燃料受到了人們越來越多地

關(guān)注。自然界中可再生的木質(zhì)纖維素資源極為豐富，其主要成分之一是半纖維素。半纖維素

容易被酸或者酶水解，其水解產(chǎn)物中的85%?90%為木糖。因此利用木糖發(fā)酵生產(chǎn)乙醇具有

重要的應(yīng)用價值。酵母菌是傳統(tǒng)的乙醇生產(chǎn)菌種，因其缺乏轉(zhuǎn)化木糖的酶系而不能很好地利

用木糖。自然界中某些釀酒酵母能利用木糖進(jìn)行酒精發(fā)酵，某研究小組欲從土壤中分離這種

酵母菌并對其產(chǎn)酶活性進(jìn)行測定，實驗基本流程為取土樣一制備土壤懸液一擴(kuò)大培養(yǎng)一選擇

培養(yǎng)一菌種分離一酶活性鑒定。請回答下列問題：

（1）擴(kuò)大培養(yǎng)又稱富集培養(yǎng)，可增加,以確保能夠從樣品中分離得到所

需要的微生物。

（2）分離純化微生物的目的是。該研究小組將擴(kuò)大培養(yǎng)后的

混合菌液適當(dāng)稀釋后接種于的選擇培養(yǎng)基上，然后將培養(yǎng)皿倒置放入培

養(yǎng)箱培養(yǎng)。常用的接種方法有兩種。若劃線的某個平板培養(yǎng)后，第一劃

線區(qū)域的劃線上都長滿了菌落，第二劃線區(qū)域的第一條線上無菌落，其他劃線上有菌落。第

二劃線區(qū)域的第一條線上無菌落的原因是。

（3）為進(jìn)一步確定目的菌株的最佳產(chǎn)酶條件，該研究小組選取培養(yǎng)基初始pH、培養(yǎng)溫度、

搖床轉(zhuǎn)速以及裝液量4個因素進(jìn)行實驗。其中，培養(yǎng)基初始pH、培養(yǎng)溫度會影響菌株產(chǎn)酶主

要是因為;搖床轉(zhuǎn)速影響

__________________________________________,進(jìn)而影響菌株產(chǎn)酶。

答案以及解析

1.答案：D

解析：高壓蒸汽滅菌時，到滅菌時間后，切斷電源，讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降，當(dāng)壓力表的

壓力降到零時，打開排氣閥，擰松螺栓，打開蓋子，取出滅菌物品，A正確；在倒平板時，

拔出錐形瓶棉塞后，應(yīng)將瓶口迅速通過火焰，防止瓶口雜菌污染培養(yǎng)基，B正確；倒平板時

要在酒精燈火焰旁進(jìn)行，以防雜菌污染，C正確；接種環(huán)經(jīng)灼燒滅菌后應(yīng)在火焰旁冷卻后再

蘸取菌液，以免接種環(huán)的溫度太高，殺死菌種，D錯誤。

2.答案：D

解析：A、馬鈴薯搗爛后的濾液中含有酵母菌生長所需的多種營養(yǎng)成分，A正確；

B.接種環(huán)滅菌時，頂端的環(huán)和環(huán)后的部分柄均需通過火焰灼燒，防止雜菌的污染，B正確；

C.平板劃線時，接種環(huán)應(yīng)在固體培養(yǎng)基表面輕輕地連續(xù)劃線，用力劃得話會是培養(yǎng)基表面破

損，影響實驗結(jié)果的觀察，C正確；

D.完成平板劃線后，待菌液被培養(yǎng)基吸收，再將平板倒置培養(yǎng)，D錯誤。

故選D。

3.答案：D

解析：A、將接種環(huán)灼燒后，要待接種環(huán)冷卻后再從上次劃線的末端開始劃線，A錯誤；

B.已滅菌的接種環(huán)、涂布器，在操作過程中實施接種前均需要再滅菌，B錯誤；

C.完成平板劃線后需要將平板倒置，再放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，C錯誤；

D.使用后的培養(yǎng)基在丟棄前一定要進(jìn)行滅菌處理，以免污染環(huán)境和感染操作者，D正確；

故選D。

4.答案：D

解析：培養(yǎng)基配制好后需調(diào)pH,然后用濕熱滅菌法滅菌，A正確；培養(yǎng)基滅菌后，待冷卻到

50℃左右時，在酒精燈火焰附近倒平板，B正確；將一個未接種的培養(yǎng)基和接種的培養(yǎng)基一

起培養(yǎng)，可以檢驗培養(yǎng)基滅菌是否合格，C正確；實驗使用過的培養(yǎng)基徹底滅菌后才能丟

棄，防止污染環(huán)境和感染操作者，D錯誤。

5.答案：C

解析：A、斜面培養(yǎng)基中含有凝固劑，不能用于制備液體培養(yǎng)基，A錯誤；

B.脫脂棉易吸水，容易引起雜菌污染，B錯誤；

C.給液體培養(yǎng)基接種、用劃線法給平板和斜面培養(yǎng)基接種都要用到接種環(huán)，C正確；

D.該培養(yǎng)基不能用來培養(yǎng)和分離大腸桿菌，培養(yǎng)大腸桿菌用LB培養(yǎng)基，D錯誤。

故選C。

6.答案：A

解析：A、完成平板劃線后，不能直接倒置培養(yǎng)，而是待菌液被培養(yǎng)基吸收，再將接種后的

平板和一個未接種的平板倒置，放入相同溫度的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，這樣可以檢測培養(yǎng)基滅

菌是否合格，檢驗實驗的合理性，A錯誤；

B.接種后的平板一般做三組目的是平行重復(fù)原則，減小實驗誤差，使實驗結(jié)果準(zhǔn)確可靠，更

具有說服力，B正確；

C.使用后的培養(yǎng)基在丟棄前一定要進(jìn)行滅菌處理，殺死培養(yǎng)基上的微生物，以免污染環(huán)境或

感染操作者，C正確；

D.離開實驗室時一定要徹底將手洗干凈、消毒，以防止被微生物感染，D正確。

故選A。

7.答案：D

解析：微生物培養(yǎng)過程中要進(jìn)行無菌操作，防止外來雜菌的入侵是獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵，

A正確；酵母菌是兼性厭氧型菌，所以培養(yǎng)液中溶氧量的變化會影響酵母菌的繁殖和代謝途

徑，B正確；在培養(yǎng)微生物前要先對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌處理再接種，防止雜菌污染，C正確；

菌種可接種在斜面培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后放在4℃冰箱中臨時保藏，而非永久保藏，D錯誤。

8.答案：B

解析：將浸泡在75%酒精中的涂布器拿出后還需要經(jīng)過灼燒滅菌及冷卻才能涂布，A錯誤；接

種環(huán)經(jīng)酒精燈火焰滅菌之后還需要冷卻才能挑取菌落，C錯誤；倒平板時，將培養(yǎng)皿打開一

條稍大于瓶口的縫隙，然后將錐形瓶中的培養(yǎng)基（10?20mL）倒入培養(yǎng)皿，立即蓋上皿蓋，

D錯誤。

9答案:B

解析：培養(yǎng)基中加入了瓊脂，則從物理性質(zhì)來分，該培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，A正確；

由題意可知，該種酵母菌能利用淀粉作為碳源，而培養(yǎng)基中含有酵母浸膏、蛋白膝，故無法

判斷其不能利用其他有機物作為碳源，B錯誤；

先培養(yǎng)微生物再染色，碘液可以不用進(jìn)行滅菌處理，這是因為此時雜菌來不及生長繁殖，對

培養(yǎng)基上形成的透明圈沒有影響，C正確；

探究酵母菌適宜生存的pH范圍，至少需要設(shè)置三種不同pH的培養(yǎng)基，D正確。

10.答案：C

解析：A、對微生物進(jìn)行計數(shù)時的接種方法只能是稀釋涂布平板法，A正確；

B.酵母菌是兼性厭氧菌，所以培養(yǎng)液中溶氧量的變化會影響酵母菌的繁殖和代謝途徑，B正

確；

C.同一稀釋度在平板上接種的重復(fù)組，形成的菌落數(shù)差異不大，C錯誤；

D.由于待測樣品往往不能完全分散成單個細(xì)胞，所以長成的一個單菌落也可能來自樣品中的

2?3個或更多個細(xì)胞，因此稀釋涂布平板法計數(shù)的結(jié)果往往偏小，采用顯微鏡直接計數(shù)法得

到的值較為準(zhǔn)確，D正確。

故選C。

H.答案：（1）淀粉；典型菌落；溫度和時間；4℃

（2）將未接種的培養(yǎng)基放在適宜溫度的恒溫箱中（倒置）培養(yǎng)一段時間，觀察是否有菌落生

成

（3）涂布不均勻

解析：（1）為篩選得到高效利用淀粉的工程酵母菌菌種，固體培養(yǎng)基應(yīng)以淀粉作為